全 文 :植物生理学报 , 19 59 , 15 ( 3 ) ` 32 1we 3 27
A c t碑 尸妙 t oP 妙痴几公苗“ ~ 丁初 ,’cd
3 2 1
靓瓜幼苗的乙烯释放与 ACC、 乙烯利的吸收和运转
谢学民
杨祥发
(浙江农业大学 , 杭州 3 10 0 2 9 )
美`国加里福尼亚大学 , 戴维斯 )
提 要
以“ C 一 A C C饲喂瓢瓜幼苗基部叶片 , 其放
射性在植株各部位呈不均匀分布 , 大部分集中于
生长在盛的生长点与正在形成的花 芽 。 饲 喂 后
4 h内 , A C C主要以游离形式存在 , 24 h后 , 出
现 A C C的结合物 M A C C 。
关幼词 : 瓤瓜 , 乙烯 , 1一氨基环丙烷叛 一 1一 叛酸 ,
乙烯利 , 性别控制
靓瓜 (乙拾`刀口尸血 eIU can ht a R u s b y ) 是
单性花 , 用激素可 以控制瓤瓜的性别 (李曙
轩和傅炳通 1 9 79 , 李曙轩 1 9 8 1 , 应振土和
李曙轩 一9 5 7 , Hum e和 L o v e l l 1 9 5 2 , 19 5 3 ) 。
以赤霉素 ( G A s) 处理 , 能促使多开雄花 多
尽烯 、 乙烯利与CA C能促使多开雌花 , 从而
提高早期产量和总产量 , 在生产上 已获得
经济效益 (李曙轩 1 98 1 ) 。 对于外源 乙烯 、
乙烯利与 A C C的使用 , 已有较多报道 ;但对
控制抓瓜性别的机理 , 至今尚未阐述清楚 。
为此 , 探讨植株对外源 乙烯 (包括 乙烯利与
A C )C 的吸收 、 运转 、 分布 、 代谢 ,植株 内
源 乙烯的释放规律 , 以及乙烯的生理功能
等 ,可能有助于阐明性别控制的机理 ,但此
类论述甚少 。 关于 14C 一 A CC在瓤瓜内的运
转 、 分配与代谢至今也未见报道 。本文对抓
瓜幼苗 ( 乙烯诱导雌花的敏感期 ) 乙烯释放
和 A C C与M A CC的含量 , 以及对 A CC和 乙
烯利的吸收 、 运转与分布等进行了研究 。
材 料 与 方 法
试验在美国戴维斯加州大学 ( U c D )M an n实
验室进行。 供试品种为 “杭州长葫芦 ” (L . le “ -
c a n t人。 v a r . h i s p i d a H a r a ) 种子在湿润 的滤纸
上 ( 25 0 )发芽 , 长出真叶后移至装满 蛙 石 的 有
孔塑料杯 ( 1 1 x l z x l l c m )内 , 杯子浸入完全培
养液 (华东师范大学植物生理教研组 1 98 0) 中 ,
浓面保持杯高的 13/ , 置室内白炽灯光下 ( 20 kl x)
全天照明 ,恒温 25 0 , 湿度 65 % 。 除发芽试验外 ,
所有试验材料均为7~ 10 片真叶的植株 (培 育约
6 o d )
。 种子发芽过程中浸水 吸 胀 2 4 h ( I ) ,
露出白点 2 m m ( I ) , 种子根长 1 e m ( I ) , 根
长 2 e m , 幼茎长 1 云m ( F ) , 根 长3 e m茎 长 3
c
m ( V )五个时期进行处理 , 气干种子为对照 。
按幼苗不同节位 (基部第 1片真叶开始 )取叶片 ,
称重 , 分别置于 25 m l三角瓶中 , 用橡皮塞密封
Z h
, 测定乙烯释放量 。
乙姗测定 以注射器抽取密封瓶 内 气体 1 m l ,
用乙烯检测仪 ( s p 4 27习 E t h y l e n e M e a s u r e -
m e nt
, 氢火焰离子化检测器 , 氧化 铝 柱 , 氮 气
为载休 )测定 。
A C C与 M比 C C含皿测定 参照 L i z a d a 和 Y a n g
( 197 9 )
、 董建国和李振国 ( 1 98 3 )的方法 。
A C C 与乙烯利吸收 、 运转与分布 于 第 1 片真
叶叶面上先涂 0 . 1% T r it o n X 一 10 , 干后 分别
徐 10 0 m m o l A C C 溶液 20 0 科 1或 3 00 p p m 乙爆
利溶液 10 0 川 , 间隔 0 . 5 , 乒. 0 , 1 . 5 , 6 . 0 , 24 ,
7 2 h与 1 4 4 h取样 , 沿不同节位叶片主脉纵切 ,一
半称重 , 置于 25 m l 三角 瓶 中 , 密 封 Zh , 测定
乙烯释放量 。 试验均重复 2 次。
飞` C 一 A C C 示 踪试验 飞` C 一 A C C ( R e s e a r C h
p
r o d u 。 t : I n t e r n a t i o n a l 公司产品 )的饲喂量 为
9
.
0 x 1 0 . B 。 (比活度 1 . 8 x 1 0 4 B a /川 ) , 涂于 第
3 片叶面 , 24 h 后取不同节位的叶 片 、 叶 柄 与
茎段 , 称重 , 剪碎 ,加 SQ% 乙醇在 80 0水浴中浸提
Z h
, 浸提液于40 0 下蒸干浓缩 ,勿口氯仿去色素 ,
1 9 8 8年 6月 4日收到 , 1 9 8 9年 l月 9日接受 -
植 物 生 理 学 报 15卷
放射性强度用液闪仪 (B e ck m an L s一 0 10 )测定 。
纸谱分析 取0 1叶期靓瓜幼苗 , 留基部 1 叶与顶
部 1叶及顶端幼芽 。 在基部叶片饲喂 1 . 8 x 10 纽 q
的 l . C 一 A C C , 分别于 4 h与 2 4 h取顶部叶片 , 提
取 A C C 和 M A C C 。 浸提液浓缩成50 川 , 点样
于W h at m a n 滤纸 (厚 3 m m )上 , 展开剂为正丁
醇 : 醋酸 : 水 = 4 : 1 , 1。 滤纸在 放 射性 扫 描 仪
( P a c k a
r d M
o d e l 7 2 0 1 )上扫描 , 并分别以荀三
酮显色人C C , 澳甲酚绿显色M A C C 。
表 1 妞瓜种子萌发过程 中 的 A c C 与 M A C C
含 , (~ 0 1 /g )
T a lb
e 1 C o n t e n t s 吐 AC C a o d M A C C
扣 m o l g/ ) 10 g e r m石tz a t盆。 9 . g r ur d s e e d s
A C C M A C C山 ty l-e山 n
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扭瓜幼苗中乙 烯 、 A C C 与 M A C C 的含 t
10 叶期的瓤瓜幼苗中 ,基部叶片 乙 烯
释放量较低 , 随着节位上升 , 释放量渐增 ,
顶端的叶片释放量达高峰 。 此外 , . 植株间
的差异较大 , 高的可达一个数量级 (表 2 ) 。
表 2 恤瓜幼苗各叶片的乙烧释放母
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靓瓜种子萌发过程中乙烯 、 A C C 与M A C C
的含 t
瓤瓜种子内源乙烯的释放量随着种子
吸水萌动的生理活性增强而增加 。 休眠状
态的干种子不释放 乙烯 , 浸种 2 4 h的吸胀
种子 、 释放量为 0 . 07 n l / g h ,后逐渐增加 ,种
露 白达释放高峰 , 其释放量为0 . 93 n l / g h
子 , 为吸胀状态种子的 13 倍 。 以后随着胚
根与幼茎的伸长 , 其释放量逐渐下降 , 胚
根长 3 cm 、幼茎长 3 cm 时为 0 . 20 n l/ g ho
瓤瓜种子萌发过程中 , 不同部位 A CC
的含量有明显差异 (表 1 ) 。 子叶中的含量
极低 , 露白 、 胚根长 1 c m 、 2 c m 与 3 c m
时的含量几乎在一个水平上 ,平均为 0 . 0 43
~ of / g
。 胚轴的含量 , 随着种 子 的 发芽
与幼胚的生长而迅速增加 , 胚 轴 中露 白
至胚根 3 c m 间 A C C的含量 , 依次为 子 叶
平均含量的 6 2 . 8 , 6 0 . 1 , 7 0 . 9 与 。 5 . 5 倍 。
M A CC的含量变化与 A CC相似 , 子叶中含
量变化不大 , 而胚轴中露 白期比吸胀期高
出 ? 4 0倍 , 在以后各个时期中 , 一直保持
着较高水平 。
综观上述 , 生命活动旺盛的部位 , 乙
烯 、 A C C与M A CC的含量均高 ;反之就低 。
人C C与M A CC的含量 , 在露白前子叶与胚
轴中几乎无差异 , 而露白后则胚轴远 高于
子叶 , A C C为 7 4 . 5 倍 , M A CC为 吕6 . 6 倍 。
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2
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3 : D i fe
r e n t P la n t s
·
取 10 叶期的靓瓜幼苗 , 按根 、 茎 、 叶 、
卷须与花芽等不 同器官分类 , 其中叶片还
按叶序分成 10 个节位 , 分别测定 其 人CC
与M A CC 的含量 。 另选叶龄相同 、 生长一
3 期 瓤瓜幼苗的乙烯释放与 A C C 、 乙烯利的吸收和运转 3 2了
致的植株 , 在第 1 片真叶上 涂 1 0 m m ol
的 A C C溶液 1 0 川 , 经 2 4 h取样 , 测定方
法同上 , 结果列于表 3 、 表 4 。
表 3 妞瓜植株不同器官 A C C 与 M A C C 的含
且 ( n m o l / g )
T a b l
e 3 C o o t e n t s o f A C c a o d M A C C (
二
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o l lg )
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不 同节位叶片 , A CO与M A C C含量 波
动均较大 (表 4 ) 。 就单株而言 ,基部第 l ,
2 节位叶片的 A C C与M A CC的含量略高 , 第
3 至第 6 叶位间随着叶位的上升 , 有逐 渐
减少的趋势 , 而后又随着节位的升高, , 含
量又逐渐增加 ,第 10 节位即植株的生长顶
端中 , A CC与M A CC的含量普遍较高 。
P la n t
o r g a础
A C C
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s p r ea d b y 10 0 川 ( 1 0 0 m m o l /功
A C C
. 0嗯e月
一 ~ 自公
「一 . 臼~ ~ ~ . . ~ . 4一六7 2T im e h( )表 3 表明 , 瓤瓜植株的不同器官中 ,
在正常情况下 , A CC与M A CC 含量并不高 ,
除花芽高与根低以外 , 一般波动在 0 . 7~
1
.
4 n m ol g/ 之间 。 其中M A C C含量比 A CC
高 , 含量的波动 , M A C C比 A CC大 ·。 两者
含量又以花芽最高 , 这与植株生长发育状
况相符 , 花芽是生命活动最为 旺 盛 的器
官 。
图 1 抓瓜第 1 叶片涂 A C C 后叶片内乙烯 释放
F王9 . I L盖b e r a t i o n o f e t b y le . e 泣n Ic a v e ` o f
g o ur d P l a n t a ft
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表 4 抓瓜植株不同节位叶片 A C C 与 M A C C的
含盆 (目国。 。 】/ g)
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. . . 曰 . . . 口. . . . . 口. . . . . . . . . . . . . . . . . . , 门 . 门 . . 勺曰 , . . . . . . . . . 曰. . . . . . . , . . . . . . .
妞瓜植株对 A C C 的吸收 、 运转与分布
选取 乙烯诱导瓤瓜雌花敏感期 , 即 7
~ 10 真叶期 , 于第 1 片真叶 上 涂 10 0 闪
1 0 0 m m ol / L A CC
, 间隔不同时期 , 取叶
片测定 乙烯释放量 。 图 1 表明 , 处理后 0 . 5
h
, 乙烯释放量约 3 n l / g h , 随着间隔时
期的延长 , 释放量逐渐增加 , 24 h为最高。
以后随着时间的推迟 , 释放量又下降。 植
株吸收 A CC 6 h后 , 第 3 节位以上各叶片
的乙烯释放量显著超过相应未涂叶 。 以植
株而言 , 随着节位的上升 , 乙烯释放量增
大 。 “
基部叶涂 A CC后 2 4 b, 不同器官中的
A CC与 M A CC的含量均比对照高 (表 3 ) 。
其中叶片 , 尤其是第 1 叶 A CC的含量比对
照高出数万倍 (表 4 ) 。 其原因是涂叶本身
滞留有大量的 A CC 。 M A C C的含量亦比对
照高数千倍 (表 4 ) , 表明涂在叶 片 上 的
324 植 物 生 理 学 报 1 5卷
A C C经2 4 h 已有不少转变成 M A CC。 第 2
叶 中 A CC含量比对照高 6 3倍 , M A CC高近
4 倍 。 第3 ~ 10 叶片中两者含量普遍比对
照高 , 其中M A C C的含量 , 第 9 叶比对照
高 1 2倍 , 第 10 叶高 40 倍 。 从试验 看 ,靓
瓜幼苗 , 不论涂叶与 否 (对 照 ) , A CC 与
M A C C 的含量 , 基部与顶端较高 , 中间偏
低 , 分布呈马鞍形 , 顶端又显著高于基部
(涂叶本身除外 ) 。
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表 5 l d C一 A C C 在弧瓜植株不同器 官 的 分布
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图 2 1 4 C 一 A C C 在抓瓜植株不同节位茎叶上 的
分布
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直线上升 (图 2 ) 。 叶柄上 14 C一 A C C含量 亦
相似 , 唯上升趋势稍缓慢 。 茎的 1吧一 A C C
在 10 节位之间的分布 , 自基部向上 逐 步
增加 , 其趋势比较平稳 。 这亦证明 A CC在
不同节位 、 不同器官的分布是不均匀的 。
A CC在叶片分布为多 , 尤其是上部叶片更
为显著 。
用 1魂C一A CC饲喂植株第 3 叶片 , 追 踪
人CC在植株各器官的分布 。 表 5 表明其总
活度 ( B q ) , 叶片含量最高 , 涂后 2 4 h , 大
部分仍累积在处理叶片上 , 其次为茎 , 再
次为叶柄 。 若以每克鲜重的活度计 ( B q / g) ,
仍以叶片含量最高 , 但比 例 减 少 , 其 次
为叶柄 , 再次为卷须。 其中 (6 ~ 10 节 ) 上
部卷须比茎的含量还高 , 看来卷须起攀缘
与附着作用外 , 还具有其他生理功能 。 子
叶的含量最低 , 这与此阶段其生理功能下
降有关 。 花芽的总活度低 , 而按每克鲜重
的 活度计 , 其含量有很大增加 , 花芽是生
长最为活跃的器官 。
示踪试验表明 , 1吧一A C 在不同节 位
的分布不一致 。 . 整株的 10 叶片中 , 除 饲
喂的第 3 叶本身含量较高外 , 由于以向上
运输为主 , 愈是上部其含量愈高 , 尤以每
克鲜重的 B q值更为明显 , 第 7 节位后几乎
二· 2 · 5卜` A、c ’ · 2 · s f” A ; c
芝2 · 。 { 八 2 ·叶 }} 一邑 1 · 5卜 } 1 1 · 5卜 } l公 1 1 1 1 夕 、甚l · 0「 { 1 1 · o r } } M A e e韧 · 5「夕 义. ”汁少口戈 . 一”卜沛爪扩亩 ”一前二扩居了责一命!
图 3
外9 . 3
D i s t a n e e (e m )
抓瓜用 1 4C一 A C C 饲喂后的放射性扫描
R
. d i o a c t五v e s e a n n纽9 a ft e r fe e d i n g
g o ur d P I幼 t w ` I五 1 4 C 一 A C C
14 C一A CC 进入瓤瓜植株不同节位的各
个器官中存在的形态 : l吧一 A CC 引入后 4 h
放射性扫描仅见单峰 , 与标准 14 C一 A CC 点
·样一致 , 其R f值均为 0 . 3 , 表明饲喂后 4 h
仍然以 A C C的形态存在 。 饲喂后 2 4 h则出
现了两个峰 (图 3 ) , 其 R f值分别为 0 . 3 与
0
.
43
。 经荀三酮显色 , 表明R f = 仇 3 的峰
为 A C C , 经澳甲酚绿显色 , R f一 0 . 43 的峰
3期 瓢瓜幼苗的 乙烯释放与 A C C、 乙烯利的吸收和运转
为 M A C C。 这说明经24 h 有部分 1犯一 A C C
已转变成 M A C已
靓瓜植株对乙烯利的吸收 , 运转与分布
植株第 l 片叶面上涂 乙烯利后 , 涂布
叶与其他部位的·乙烯释放量均有增加 。 由
图 4 可见 , 3 0 m in 后涂叶就大量释放 乙
烯 , 为 1 2 0 n l / g h , 6 h 达高峰 , 且较 长
时间保持在 1 6 0 n l / g h左右 , 2盛 h 后 , 乙
烯释放量虽明显下降 , 但 6 d后 , 涂叶 仍
有 1 1 n l / 9 1、 。
趋向减少 。
讨 论
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ǎ.qó杨互勺`尸。.一户工。l会山ù 、群`.
T i m e (h )
图 4
放
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·
抓瓜第 1 叶片涂乙稀利后叶片内乙烯的释
4 L i b e r a t谊o n o f e比 l e o e i n l e a v e s o f g o ur d
p l a n t a ft
e r s即 e a d盆n g 比 e 份 s t Ie a f w i山 。 t h r e l
植株吸收乙烯利后 , 能通过输导组织
分布至不同部位 (刘 愚和焦新 之 1 9 7 8) 。
不同节位叶片的 乙烯释放量表明 , 涂后 1 6
。 i n , 第 2 叶片的 乙烯释放量 已 高 出 相
应未涂叶 。 若以高出未涂叶 1 倍以上为运
转标记 , 涂后 30 m in , 乙烯利已 运 转 至
第 2 叶 , l h运转至第 3 叶 , 1 . 6 h至第 4
叶 , 6 h到第 7 叶 , 2 4 h整个植株各 叶 片
均有分布 , 并且各叶片的乙烯释放量处于
高峰 , 7 2 h以后 , 各叶片的乙烯释放量均
从种子萌发至植株 10 叶期 , 、 对 瓤瓜
的 乙烯 、 A C C与M AC C的含量分别作了测
定 , 发现植株各部位含量有差异 , 基部与
顶端较高 , 中间节位低些 , 而顶端又显著
高于基部 , 其原因尚待探讨 。 植株的生长
点中三者含量均最高 , 这与应振土 (博士
论文 )报道一致 。 ·
A CC
, 1 4C 一 A CC的测定结果表 明 , 主
要是运转到植株生长顶端幼嫩部位 , 即生
长最活跃与旺盛的生长点 。 在试验中植株
花芽中 A C C与 M A CC含量很高 , 也说明了
这一点 。 这些结果表明 A CC完全起到了调
节 乙烯的作用 ( Y al g 和 H o f 山 an 1 98 4) 奋“
这也进一步证实内源合成的 A C O能引起乙
烯的增加 。
乙烯被称为瓜类性别表现的内源调节
剂 ( B ye sr 等 19 7 2) ,凡茎尖 乙烯释放愈 多 ,
雌性表现愈强 , 本试验于基部涂 A CC或乙
烯利 , 能增加茎尖 乙烯释放 。 1 4C 一 A C C 示
踪表明 , 其放射性的分布 , 愈是上部叶片
含量愈高 , 说明应用外源乙烯前体能增加
植株体内乙烯的释放量 , 促进雌性表现 。
植物体内同化产物的运输 , 亦受激素
制约 , 乙烯对同化物的运转起重要作用 ,
A CC处理后能促使同化产物 向花托部位运
转 (应振土博士论文 ) , 而瓜类中果实是由
花托和子房发育而成的 , 这表明 A CC能促
使雌性化是由于其改变同化物 质 输 向 雌
蕊 , 从而向雌性方向分化 。
瓤瓜叶面涂 乙烯利后涂叶本身很快大
量释放 乙烯 , 而植株的其他部位涂后 2 4 h
乙烯释放量达高峰 。 与秃泰 ( 19 7 3) 报道乙
烯利处理黄瓜叶片后释放的 乙烯以 2 4 h最
多的结果一致 。 瓤瓜与黄瓜是同科植物 ,
2 36 植 物 生 理 学 报 1 5卷
对 乙烯利吸收 、 运转是否有共同的特性 ,
值得探讨 。
致谢 : 本校园艺系应振土博士提供种子 , 现在加
州大学工作的董建国与叶永健两位先:生给予协
助 。 ·
参 考 文 献
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