全 文 ：棒锤瓜化学成分研究
苏东敏1，唐文照1，2，庾石山1* ，刘云宝1，屈晶1，于德泉1
(1. 天然药物活性物质与功能国家重点实验室，中国医学科学院 药物研究所，北京 100050;
2. 山东省医学科学院 药物研究所，山东 济南 250062)
［摘要］ 目的:研究棒锤瓜 Neoalsomitra integrifoliola 叶乙醇提取物正丁醇部位的化学成分。方法:应用各种色谱技术进
行分离纯化，用 MS和 NMR分析鉴定化合物结构。结果:从 95%乙醇提取物的正丁醇部位分离得到 8 个化合物，包括 4 个芸
香糖苷类化合物:2-苯基乙醇芸香糖苷(1) ，芦丁(2) ，山柰酚-3-O-(6-O-α-L-鼠李吡喃糖基)-β-D-葡萄吡喃糖苷(3) ，异鼠李
素-3-O-(6-O-α-L-鼠李吡喃糖基)-β-D-葡萄吡喃糖苷(4) ;和 4 个其他类化合物:绿原酸甲酯(5) ，鸟苷(6) ，腺苷(7) ，肌-肌醇
(8)。结论:8 个化合物均为首次从该属植物中发现。
［关键词］ 葫芦科;棒锤瓜;芸香糖苷
［稿件编号］ 20110923011
［基金项目］ 国家自然科学基金杰出青年基金项目(30625040) ;国
家“重大新药创制”科技重大专项(2009ZX09311-004)
［通信作者］ * 庾石山，Tel: (010)63165326，Fax: (010)63017757，
E-mail:yushishan@ imm. ac. cn
棒 锤 瓜 Neoalsomitra integrifoliola (Cogn. )
Hutch. ，又名苦藤，是葫芦科 Cucurbitaceae翅子瓜亚
族 subtrib. Zanoninae棒槌瓜属 Neoalsomitra 有毒植
物，该属植物多为攀援灌木或草质藤本，全世界共约
12 种，我国有 2 种，分别为棒槌瓜(苦藤)和藏棒槌
瓜，产于华南，西南和台湾［1］。《中国有毒植物》记
载苦藤的茎、叶和果实有毒，能引起剧烈腹泻，严重
时手足抽搐［2］。日本和我国学者从其茎皮的乙醇
及甲醇提取物中分离得到 2 个新的达玛烷型四环三
萜，23 个皂苷，以及 7 个已知的葫芦烷型四环三萜
及其苷［3-6］。为进一步寻找其中的生物活性成分，开
展对其化学成分的研究。前期已从中分离得到了一
系列新的木脂素苷类化合物［7-8］。本研究从棒锤瓜
95%乙醇提取物的正丁醇部位分离鉴定了 8 个化合
物，分别为 2-苯基乙醇芸香糖苷(2-phenylethyl ruti-
noside，1) ，芦丁(rutin，2) ，山柰酚-3-O-(6-O-α-L-鼠
李吡喃糖基)-β-D-葡萄吡喃糖苷［kaempferol-3-O-α-
L-rhamnopyranosyl-(1→6)-α-D-glucopyranoside，3］，
异鼠李素-3-O-(6-O-α-L-鼠李吡喃糖基)-β-D-葡萄
吡 喃 糖 苷 ［isorhamnetin-3-O-α-L-rhamnopyranosyl-
(1→6)-α-D-glucopyranoside，4］，绿原酸甲酯(methyl
chlorogenate，5) ，鸟苷(guanosine，6) ，腺苷(adeno-
sine，7) ，肌-肌醇(myo-inositol，8)。并对所得化合物
进行了抗氧化、抗炎和细胞毒活性筛选。
1 仪器与材料
XT4-100x显微熔点测定仪(温度未校正) ;Per-
kin-Elmer 241 微量旋光仪和 PE Model 343 微量旋
光仪;Agilent 1100 系列 LC /MSD Trap-SL型质谱仪;
Varian Inova-500 NMR 波谱仪，Varian Mercury-400
NMR波谱仪测定，TMS为内标。
Shimadazu LC-6AD高效液相色谱仪，YMC-Pack
ODS-A 色谱柱(20 mm × 250 mm，5 μm) ;薄层色谱
硅胶 GF254 及柱色谱用硅胶(100 ～ 200，160 ～ 200
目，青岛海洋化工厂) ;反相薄层 RP-18 F254 及反相
柱色谱硅胶 RP-18(20 ～ 45，45 ～ 70 μm，Merck 公
司) ;Sephadex LH-20(Pharmacia 公司) ;D-101 型大
孔吸附树脂(天津海光化工有限公司)。
棒锤瓜 N. integrifoliola 叶于 2004 年 7 月采自
云南省，由中国医学科学院药物研究所马林研究员
鉴定，标本(20040361)存于中国医学科学院药物研
究所标本室。
2 提取与分离
棒锤瓜叶粉末(4. 7 kg)用 95%乙醇回流提取 3
次，滤液合并浓缩后，加水溶解，依次用石油醚，乙酸
乙酯，正丁醇萃取。正丁醇部分减压浓缩得浸膏
120 g，溶于水，上 D-101 型大孔吸附树脂柱，经水，
20%，40%，60%，80%，95%乙醇梯度洗脱分为 6 个
组分。40%乙醇洗脱部位(Fr. 3，27. 8 g)经 Sepha-
dex LH-20 柱色谱，60% ～80%甲醇梯度洗脱得 9 个
·3951·
第 37 卷第 11 期
2012 年 6 月
Vol. 37，Issue 11
June，2012
组分(Fr. 3. 1 ～ 3. 9)。Fr. 3. 4(4 g)经 ODS(45 ～
70 μm)柱色谱，30% ～60%甲醇梯度洗脱得 9 个组
分;Fr. 3. 4. 5(370 mg)经反复 ODS(20 ～ 45 μm)柱
色谱，30%甲醇洗脱后再经制备 HPLC 纯化得化合
物 1(20 mg)。Fr. 3. 7(1. 6 g)经 ODS(45 ～ 70 μm)
柱色谱，30% ～ 60% 甲醇梯度洗脱得 10 个组分;
Fr. 3. 7. 3(170 mg)经制备 HPLC 及 Sephadex LH-
20 柱色谱，80% ～ 100%甲醇梯度洗脱，纯化得化合
物 5 (20 mg)。 Fr. 3. 8 (243 mg) 经 ODS
(20 ～ 45 μm)柱色谱，45% 甲醇洗脱及 Sephadex
LH-20 柱色谱，甲醇洗脱得化合物 3(10 mg) ，4(5
mg)。Fr. 3. 9(5 g)重结晶得化合物 2(3 g)。Fr. 2
(15 g)经 Sephadex LH-20 柱色谱，甲醇洗脱得 7 个
组分，Fr. 2. 7 经重结晶得化合物 7(20 mg) ;Fr. 2. 7
母液再经 ODS(20 ～ 45 μm)柱色谱，20% ～ 35%甲
醇梯度洗脱得化合物 6(3 mg)。Fr. 1 用正丁醇反
复萃取，萃取物(4. 5 g)经 Sephadex LH-20 柱色谱，
80% ～100%甲醇梯度洗脱及 ODS(20 ～ 45 μm)柱
色谱，20% ～35%甲醇梯度洗脱得化合物 8(7 mg)。
化合物 1 ～ 4 各 0. 5 mg溶于 0. 5 mL甲醇，点样
于高效硅胶薄层板上，80 ℃水浴，浓盐酸蒸汽水解
40 min，挥去硅胶板上所吸附的 HCl，与葡萄糖和鼠
李糖对照品共薄层，展开剂为 CHCl3-MeOH-AcOH-
H2O(25∶ 12∶ 2 ∶ 2) ，显色剂为邻苯二甲酸苯胺，2 种
糖的 Rf分别为 0. 25，0. 55。
3 结构鉴定
化合物 1 白色无定型粉末，10% H2 SO4显黄
色;［α］20D － 101. 2(c 0. 09，CH3OH) ;ESI-MS m/z 453
［M + Na］+，429［M － H］－;1 H-NMR(CD3 OD，500
MHz)δ:7. 19 ～ 7. 21(4H，m，H-2，3，5，6) ，7. 11
(1H，m，H-4) ，4. 69(1H，d，J = 1. 2 Hz，H-1) ，4. 23
(1H，d，J = 7. 6 Hz，H-1″) ，3. 97(1H，dt，J = 12. 5，
7. 6 Hz，H-1a) ，3. 92(1H，dd，J = 11. 2，2. 0 Hz，H-
6″a) ，3. 77(1H，dd，J = 3. 6，1. 6 Hz，H-5) ，3. 70
(1H，dt，J = 12. 5，7. 6 Hz，H-1b) ，3. 59 ～ 3. 63(2H，
m，H-2，3) ，3. 55(1H，dd，J = 11. 2，6. 0 Hz，H-
6″b) ，3. 33 ～ 3. 36(2H，m，H-3″，4″) ，3. 28(1 H，m，
H-4) ，3. 21(1 H，m，H-5″) ，3. 12(1H，m，H-2″) ，
2. 90(2H，td，J = 7. 6，2. 0 Hz，H-2) ，1. 19(3H，d，J =
6. 0 Hz，H-6) ;13 C-NMR(CD3 OD，125 MHz) δ:
140. 0(C-1) ，130. 0(C-3，5) ，129. 4(C-2，6) ，
127. 2(C-4) ，104. 4(C-1″) ，102. 2(C-1) ，78. 0(C-
3″) ，76. 8(C-5″) ，75. 1(C-2″) ，74. 0(C-4) ，72. 4(C-
3) ，72. 2(C-2) ，71. 8(C-1) ，71. 6(C-4″) ，69. 8(C-
5) ，68. 1(C-6″) ，37. 3(C-2) ，18. 0(C-6)。以上数
据与文献［10］报道一致，鉴定为 2-苯基乙醇芸香糖
苷(2-phenylethyl rutinoside)。
化合物 2 黄色结晶(甲醇) ;mp 214 ～ 215 ℃;
薄层喷以 AlCl3试剂紫外灯下显黄色荧光，盐酸-镁
粉反应为阳性，Molish 反应为阳性;1 H，13 C-NMR 数
据见表 1。以上数据与文献［11］报道一致，鉴定为
芦丁(rutin)。
化合物 3 浅黄色结晶(甲醇) ;mp 213 ～ 215
℃;薄层喷以 AlCl3试剂紫外灯下显黄色荧光，盐酸-
镁粉反应为阳性，Molish反应为阳性;薄层酸水解检
出葡萄糖和鼠李糖;ESI-MS m/z 617［M + Na］+，593
［M － H］－;1 H，13 C-NMR 数据见表 1。以上数据与
文献［12］报道一致，鉴定为山柰酚-3-O-(6-O-α-L-
鼠李吡喃糖基)-β-D-葡萄吡喃糖苷［kaempferol-3-O-
α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside］。
化合物 4 浅黄色结晶(甲醇) ;mp 206 ～ 209
℃;薄层喷以 AlCl3试剂紫外灯下显黄色荧光，盐酸-
镁粉反应为阳性，Molish反应为阳性;薄层酸水解检
出葡萄糖和鼠李糖;ESI-MS m/z 647［M + Na］+，623
［M － H］－;1 H，13 C-NMR 数据见表 1。以上数据与
文献［13］报道一致，鉴定为异鼠李素-3-O-(6-O-α-
L-鼠李吡喃糖基)-β-D-葡萄吡喃糖苷(isorhamnetin-
3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1 → 6)-β-D-glucopyrano-
side)。
化合物 5 墨绿色粉末，FeCl3显色呈阳性，10%
H2SO4显粉红色;［α］
20
D － 26. 4(c 0. 09，CH3OH) ;UV
(CH3 OH)λmax 220，242，298，330 nm;ESI-MS m/z
391［M + Na］+，759［2M + Na］+，735［2M － H］－，
367［M － H］－;1 H-NMR(CD3OD，500 MHz)δ:7. 46
(1H，d，J = 16. 0 Hz，H-β) ，6. 98(1H，br s，H-2) ，
6. 89(1H，br d，J = 8. 0 Hz，H-3) ，6. 72(1H，d，J =
8. 0 Hz，H-5) ，6. 16(1H，d，J = 16. 0 Hz，H-α) ，5. 20
(1H，dd，J = 7. 5，4. 5 Hz，H-1) ，4. 08(1H，m，H-
2) ，3. 67(1H，m，H-3) ，3. 64(3H，s，-OMe) ，2. 06 ～
2. 16(3H，m，H-4，6a) ，1. 95(1H，dd，J = 13. 0，7. 5
Hz，H-6 b) ;13 C-NMR(CD3 OD，125 MHz)δ:175. 4
(C-7) ，168. 2(C-γ) ，149. 7(C-4) ，147. 2(C-α) ，
146. 9(C-3) ，127. 6(C-1) ，123. 0(C-6) ，116. 5(C-
5) ，115. 1(C-β) ，115. 0(C-2) ，75. 8(C-5) ，72. 5
·4951·
第 37 卷第 11 期
2012 年 6 月
Vol. 37，Issue 11
June，2012
表 1 化合物 2 ～ 4 的1H-NMR(500 MHz)和13C-NMR(125 MHz)数据
Table 1 1H-NMR(500 MHz)and 13C-NMR(125 MHz)data of compounds 2-4
No.
2(CD3OD) 3(DMSO-d6) 4(DMSO-d6)
δC δH δC δH δC δH
2 158. 2 156. 8 156. 8
3 135. 6 133. 2 132. 9
4 179. 4 177. 3 177. 3
5 162. 9 161. 2 161. 2
5-OH 12. 6(br s) 12. 6(br s)
6 99. 0 6. 15(d，J = 2. 1 Hz) 98. 7 6. 19(br s) 98. 7 6. 19(br s)
7 166. 0 164. 2 164. 2
8 94. 8 6. 34(d，J = 2. 1 Hz) 93. 7 6. 40(br s) 93. 7 6. 42(br s)
9 159. 3 156. 5 156. 4
10 105. 6 103. 9 103. 9
1 123. 1 120. 9 121. 0
2 116. 0 7. 62(d，J = 2. 1 Hz) 130. 8 7. 97(d，J = 8. 5 Hz) 113. 3 7. 84(d，J = 1. 5 Hz)
3 145. 8 115. 2 6. 90(d，J = 8. 5 Hz) 146. 8
4 149. 8 159. 8 149. 3
5 117. 7 6. 85(d，J = 8. 4 Hz) 115. 2 6. 90(d，J = 8. 5 Hz) 115. 2 6. 90(d，J = 8. 0 Hz)
6 123. 5 7. 58(dd，J = 8. 4，2. 1 Hz) 130. 8 7. 97(d，J = 8. 5 Hz) 122. 2 7. 50(dd，J = 8. 0，1. 5 Hz)
3-OCH3 55. 8 3. 82(s)
1″ 104. 7 5. 06(d，J = 7. 5 Hz) 101. 3 5. 30(d，J = 8. 0 Hz) 101. 2 5. 42(d，J = 8. 0 Hz)
2″ 75. 7 74. 1 74. 2
3″ 78. 1 75. 7 75. 9
4″ 71. 4 69. 9 70. 1
5″ 77. 2 76. 3 76. 5
6″ 68. 5 66. 9 3. 68(m) 66. 9 3. 68(m)
1 102. 4 4. 47(d，J = 1. 5 Hz) 100. 7 5. 33(d，J = 1. 5 Hz) 100. 9 5. 36(br s)
2 72. 2 70. 3 70. 3
3 72. 0 70. 6 70. 6
4 73. 9 71. 8 71. 8
5 69. 7 68. 3 68. 2
6 17. 9 1. 07(d，J = 6. 3 Hz) 17. 7 0. 97(d，J = 6. 3 Hz) 17. 7 0. 98(d，J = 6. 2 Hz)
(C-2) ，72. 1(C-1) ，70. 3(C-3) ，53. 0(C-8) ，38. 0
(C-4，6)。以上数据与文献［14-15］报道一致，鉴
定为绿原酸甲酯(methyl chlorogenate)。
化合物 6 白色无定型固体，mp 271 ～ 273 ℃;
ESI-MS m/z 284［M + H］+，322［M + K］+;1 H-NMR
(D2O，400 MHz)δ:8. 01(1H，br s，H-8) ，5. 93(1H，
d，J = 6. 0 Hz，H-1) ，4. 71，4. 42，4. 25(3H，m，H-
2 ～ 4) ，3. 91(1H，dd，J = 12. 4，2. 8 Hz，H-3 a) ，
3. 83(1H，dd，J = 12. 4，4. 0 Hz，H-3 b) ;13 C-NMR
(DMSO-d6，100 MHz)δ:156. 7(C-6) ，153. 6(C-2) ，
151. 3(C-4) ，135. 5(C-8) ，116. 7(C-5) ，86. 3(C-
1) ，85. 1(C-4) ，73. 6(C-3) ，70. 3(C-2) ，61. 4(C-
5)。与鸟苷(guanosine)对照品共薄层，Rf 一致。
以上数据与文献［16］报道一致，鉴定为鸟苷
(guanosine)。
化合物 7 白色无定型固体，mp 230 ～ 233 ℃;
ESI-MS m/z 268［M + H］+;1H-NMR(D2O，500 MHz)
δ:8. 28(1H，br s，H-8) ，8. 14(1H，br s，H-2) ，6. 03
(1H，d，J = 5. 5 Hz，H-1) ，4. 77，4. 43，4. 30(3 H，m，
H-2 ～ 4) ，3. 93(1H，dd，J = 12. 5，2. 5 Hz，H-5 a) ，
3. 84(1H，dd，J = 12. 5，3. 5 Hz，H-5 b) ;13C-NMR
(D2O，125 MHz)δ:158. 3(C-6) ，155. 3(C-2) ，151. 2
(C-4) ，143. 4(C-8) ，121. 8(C-5) ，91. 2(C-1) ，88. 6
(C-4) ，76. 5(C-3) ，73. 5(C-2) ，64. 3(C-5)。与腺
苷(adenosine)对照品共薄层，Rf 一致。以上数据与
文献［16］报道一致，鉴定为腺苷(adenosine)。
化合物 8 白色无定型固体，mp ＞ 300 ℃;
ESI-MS m/z 203［M + Na］+;1 H-NMR(DMSO-d6 +
D2O，400 MHz)δ:3. 69(1H，t，J = 2. 8 Hz，H-1) ，
3. 33 (2H，t，J = 9. 2 Hz，H-3，5) ，3. 11(1 H，dd，J =
9. 6，2. 4 Hz，H-2，6) ，2. 91(1 H，t，J = 9. 2 Hz，H-
4) ;13C-NMR(DMSO，100 MHz)δ:75. 2(C-1) ，72. 7
·5951·
第 37 卷第 11 期
2012 年 6 月
Vol. 37，Issue 11
June，2012
(C-2，6) ，72. 6(C-4) ，71. 8(C-3，5)。以上数据与文
献［16］报道一致，鉴定为肌-肌醇(myo-inositol)。
4 生物活性
药理活性筛选结果表明化合物 4 和 7 在浓度
1 × 10 －6 mol·L －1时，抑制 Fe2 +半胱氨酸诱导的肝
微粒体脂质过氧化物产生率分别为 0 和 11. 7%，提
示化合物 7 有弱抗氧化活性;化合物 1 和 7 在浓度
1 × 10 －5 mol·L －1时，抑制 PAF 刺激的多形核白细
胞 β-葡萄糖苷酸酶释放率分别为 19. 96%和 4. 2%，
提示化合物 1 有弱抗炎活性;所得化合物对 A549
(人肺腺癌细胞) ，Bel-7402(人肝癌细胞) ，BGC-823
(人胃癌细胞) ，HCT-8(人结肠癌细胞) ，MCF-7(人
乳腺癌细胞)细胞无明显细胞毒活性(IC50 ＞
10 mg·L －1)。
［致谢］ 核磁数据由中国医学科学院 ＆北京协和医学
院药物研究所分析测试中心测试，生物活性由中国医学科学
院 ＆北京协和医学院药物研究所药理室测试。
［参考文献］
［1］ 中国科学院中国植物志编写委员会 . 中国植物志［M］. 北
京:科学出版社，1997:99.
［2］ 陈冀胜，郑硕 . 中国有毒植物［M］. 北京:科学出版社，1987:
205.
［3］ Fujita S，Kasai R，Ohtani K，et al. Dammarane glycosides from
aerial parts of Neoalsomitra integrifoliola［J］. Phytochemistry，
1995，38(2) :465.
［4］ Fujita S，Kasai R，Ohtani K，et al. Dammarane glycosides from
aerial part of Neoalsomitra integrifoliola［J］. Phytochemistry，
1995，39(3) :591.
［5］ Chiu M H，Nie R L，Hiromichi N，et al. A dammarane saponin
from Neoalsomitra integrifoliola［J］. Phytochemistry，1992，31
(7) :2451.
［6］ 邱明华，聂瑞麟，李忠荣，等 . 棒槌瓜的达玛烷型新三萜［J］.
云南植物研究，1992，14(4) :442.
［7］ Su D M，Tang W Z，Hu Y C，et al. Lignan glycosides from Neoal-
somitra integrifoliola［J］. J Nat Prod，2008，71(5) :784.
［8］ Su D M，Qu J，Hu Y C，et al. A new glycoside from the leaves of
Neoalsomitra integrifoliola［J］. Chin Chem Lett，2008，19(7) :
845.
［9］ 赵萍萍，李宝明，何丽一 . 苷中结合糖测定方法的研究［J］.
药学学报，1987，22(1) :70.
［10］ Kawahara E，Nishiuchi M，Fujii M，et al. Chemoenzymatic synthe-
sis of naturally occurring phenethyl(1→6)-β-D-glucopyranosides
［J］. Heterocycles，2005，65(6) :1461.
［11］ 蒋受军，魏峰，鲁静，等 . 小野芝麻的化学成分研究［J］. 中国
药科大学学报，2002，33(6) :487.
［12］ 王喆，贾忠建，朱子清，等 . 油茶饼的黄酮成分研究［J］. 云南
植物研究，1986，8(2) :157.
［13］ 唐于平，王颖，楼凤昌，等 . 银杏叶中的黄酮醇苷类成分［J］.
药学学报，2000，35(5) :363.
［14］ Deyama T，Ikawa T，Kitagawa S，et al. The constituents of Eucom-
mia ulmoides Oliv. V. Isolation of dihydroxydehydrodiconiferyl
alcohol isomers and phenolic compounds［J］. Chem Pharm Bull，
1987，35(5) :1785.
［15］ Nishizawa M，Izuhara R，Kaneko K，et al. 5-lipoxygenase inhibi-
tors isolated from Gardeniae Fructus［J］. Chem Pharm Bull，
1988，36(1) :87.
［16］ 龚运淮，丁立生 . 天然产物核磁共振碳谱分析［M］. 昆明:云
南科技出版社，2006:882，945，947.
Chemical constituents of Neoalsomitra integrifoliola
SU Dongmin1，TANG Wenzhao1，2，YU Shishan1* ，LIU Yunbao1，QU Jing1，YU Dequan1
(1. State Key Laboratory of Bioactive Substance and Function of Natural Medicines，Institute of Materia Medica，
Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College，Beijing 100050，China;
2. Institute of Materia Medica，Shandong Academy of Medical Sciences，Jinan 250062，China)
［Abstract］ Objective:To study the chemical constituents of the n-BuOH fraction of 95% ethanolic extract of leaves of Neoal-
somitra integrifoliola. Method:The compounds were isolated with kinds of column chromatography. The structures were determined by
MS and NMR spectroscopic techniques. Result:Eight compounds were isolated from the n-BuOH fraction of 95% ethanolic extract and
their structures were identified as 2-phenylethyl rutinoside(1) ，rutin(2) ，kaempferol-3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyr-
anoside(3) ，isorhamnetin-3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside(4) ，methyl chlorogenate(5) ，guanosine(6) ，a-
denosine(7) ，myo-inositol(8) ，respectively. Conclusion:All compounds were isolated from this genus for the first time.
［Key words］ Cucurbitaceae;Neoalsomitra integrifoliola;glycosides
doi:10． 4268 /cjcmm20121118 ［责任编辑 孔晶晶］
·6951·
第 37 卷第 11 期
2012 年 6 月
Vol. 37，Issue 11
June，2012