全 文 ：分析测试
化工科技，２０１６，２４（３）：６６～６９
ＳＣＩＥＮＣＥ　＆ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ　ＩＮ　ＣＨＥＭＩＣＡＬ　ＩＮＤＵＳＴＲＹ
＊基金项目：西安医学院青年科研基金项目（２０１５ＱＮ０４）；西安医学院大学生科研训练基金项目（２０１５ＤＸＳ１－２４）；西安医
学院博士科研启动基金项目（２０１５ＤＯＣ１４）。
作者简介：张　韫（１９８７－），女，陕西西安人，西安医学院讲师，硕士，研究方向为药物分析和过程分析。
收稿日期：２０１６－０４－１１
反相高效液相色谱法测定盘龙七中
ｗ（岩白菜素）＊
张　韫，高苏亚，唐一梅
（西安医学院 药学院，陕西 西安７１００２１）
摘　要：建立了测定盘龙七中ｗ（岩白菜素）的反相高效液相色谱法。色谱条件为 Ａｇｉｌｅｎｔ　ＴＣ－Ｃ１８
（４．６ｍｍ×１５０ｍｍ，５μｍ）色谱柱，乙腈－φ（磷酸）＝０．２％溶液（体积比１０∶９０）为流动相，流速１．０ｍＬ／
ｍｉｎ，检测波长２７５ｎｍ；室温测定。结果表明岩白菜素质量浓度在１．０４×１０－２～０．１０４ｍｇ／ｍＬ呈现良好
的线性关系（ｒ＝０．９９９　７）。该方法操作简便、重复性好、结果准确，可作为盘龙七的质量控制方法。
关键词：岩白菜素；盘龙七；反相高效液相色谱法
中图分类号：Ｒ　９１７　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００８－０５１１（２０１６）０３－００６６－０４
　　盘龙七（Ｒｈｉｚｏｍａ　Ｂｅｒｇｅｎｉａｅ　Ｓｃｏｐｕｌｏｓａｅ）为
虎耳草科岩白菜属植物秦岭岩白菜 Ｂｅｒｇｅｎｉａ
Ｓｃｏｐｕｌｏｓａ　Ｔ．Ｐ．Ｗａｎｇ的根茎［１］，在陕西眉县及
秦岭地区称为盘龙七。盘龙七作为“太白七药”之
一［２］，具有滋补强壮、止血、祛痰止咳、补益脾胃、
收涩固肠、利水活血、活血化瘀、祛风除湿、消肿止
痛等功效［３］。通过对盘龙七进行提取、分离、纯化
及结构鉴定，确定岩白菜素（Ｂｅｒｇｅｎｉｎ）为盘龙七
的有效成分之一［４］。岩白菜素属于异香豆素类化
合物，又名矮茶素，佛手配质，鬼灯檠素，Ｂｅｒ－
ｇｅｎｉｔ，Ｖａｋｅｒｉｎｔ，Ａｒｏｌｉｓｉｃａｃｉｄ　Ｂ，Ｃｕｓｃｕｔｉｎ，Ｐｅｌｔａ－
ｐｈｏｒｉｎ［５］，具有止咳祛痰、抗炎、护肝、抗溃疡和提
高免疫力等作用［６］。
采用高效液相色谱法测定岩白菜素已有文献
报道。由于文献所用方法实验操作较为复杂［７－８］，
故作者提出一种操作简便、重复性好、回收率高的
测定盘龙七中岩白菜素含量的反相高效液相色谱
法，为盘龙七这一陕西地方药材的充分利用和质
量控制提供实验参考。
１　实验部分
１．１　试剂与仪器
盘龙七药材：分别购自陕西镇安县、勉县、户
县药材市场，经西安医学院药学院生药教研室汪
兴军老师鉴定为虎耳草科秦岭岩白菜Ｂｅｒｇｅｎｉａ
Ｓｃｏｐｕｌｏｓａ　Ｔ．Ｐ．Ｗａｎｇ；岩白菜素对照品：批号
４７７９０７，质量分数９８％，上海士锋生物科技有限
公司；乙腈、甲醇：色谱纯，天津市科密欧化学试剂
有限公司；其余试剂均为市售分析纯；实验所用水
为超纯水。
高效液相色谱仪：配置为Ｐ６８０四元泵、真空
在线脱气机、ＵＶＤ１７０Ｕ紫外检测器、Ｃｈｒｏｍｅｌｅｏｎ
数据处理软件，美国戴安公司；ＫＬＺ－ＵＶ艾柯超
纯水机：成都唐氏康宁科技发展有限公司；
ＫＱ５２００ＤＥ型数控超声波清洗器：昆山市超声仪
器有限公司；Ｒ２０１Ｌ旋转蒸发仪：上海申生有限
公司；ＦＷ２００Ａ高速万能粉碎机：北京科伟永兴
仪器有限公司。
１．２　实验方法
１．２．１　色谱条件
色谱柱Ａｇｉｌｅｎｔ　ＴＣ－Ｃ１８（４．６ｍｍ×１５０ｍｍ，
５μｍ）；流动相：乙腈－φ（磷酸）＝０．２％溶液（体积
比为１０∶９０）；ＵＶ 检测波长２７５ｎｍ；流速１．０
ｍＬ／ｍｉｎ；柱温为室温；进样量为２０μＬ。在该色
谱条件下，岩白菜素与盘龙七中其它成分得到较
好的分离，无干扰，专属性强，结果见图１。
DOI:10.16664/j.cnki.issn1008-0511.2016.03.015
ｔ／ｍｉｎ
ａ
ｔ／ｍｉｎ
ｂ
图１　岩白菜素对照品（ａ）和盘龙七供试品（ｂ）色谱图
１．２．２　对照品溶液配制
精密称取岩白菜素对照品５．２ｍｇ于１０ｍＬ
容量瓶，用甲醇溶解并稀释至刻度；经０．４５μｍ微
孔滤膜过滤，即得０．５２ｍｇ／ｍＬ储备液，置于４℃
冰箱备用。精密吸取储备液０．２、０．４、０．６、１．０、
１．２和２．０ｍＬ于１０ｍＬ容量瓶，加甲醇稀释至刻
度，配制成一系列浓度的对照品溶液。
１．２．３　供试品溶液配制
取盘龙七药材，于６０℃下烘干，打成粗粉，过
孔径０．２５ｍｍ的筛网，称取上述粉末约２ｇ置于
具塞锥形瓶，加入１６ｍＬ体积分数５０％乙醇溶
液；采用超声提取法，提取３次，每次３０ｍｉｎ；将提
取液分别抽滤，合并滤液，用旋转蒸发仪浓缩至
１０ｍＬ；精密移取１．０ｍＬ于２５ｍＬ容量瓶，加甲
醇稀释，定容摇匀，经０．４５μｍ微孔滤膜过滤即得
供试品溶液。
２　结果与讨论
２．１　方法学考察
根据《中国药典》２０１５版（四部）药品质量标
准分析方法验证指导原则，考察样品的线性关系、
精密度、重复性、加样回收及含量测定等。
２．１．１　线性关系考察
将上述对照品溶液按１．２．１项下色谱条件进
行测定，以岩白菜素峰面积为纵坐标（Ｙ），岩白菜
素对照品质量浓度为横坐标（Ｘ）绘制标准曲线，
见图２。所得线性回归方程为Ｙ＝２５１．２６　Ｘ－
１．３６８　６，相关系数ｒ＝０．９９９　７。结果表明ρ（岩白
菜素）在１．０４×１０－２～０．１０４ｍｇ／ｍＬ范围内与色
谱峰面积呈良好的线性关系。
ρ（岩白菜素）／（ｍｇ·ｍＬ－１）
图２　ρ（岩白菜素）的标准曲线图
２．１．２　精密度实验
配制ρ（岩白菜素）＝０．０５２ｍｇ／ｍＬ对照品溶
液，按１．２．１项下的色谱条件重复进样６次，测定
色谱峰面积，得 ｗ（岩白菜素），并计算ＲＳＤ＝
１．８％，见表１，结果表明精密度符合要求。
表１　岩白菜素的精密度实验（ｎ＝６）
序号 ｗ（岩白菜素）／％ ＲＳＤ／％
１　 ２．５８　 １．８
２　 ２．６６
３　 ２．６３
４　 ２．５９
５　 ２．６９
６　 ２．６８
２．１．３　重复性实验
精密称取同一批样品粉末６份，每份约２ｇ，
按１．２．３项下的方法制备６份供试品溶液，按１．２．
１项下的色谱条件分别进样，测定色谱峰面积，得
ｗ（岩白菜素），并计算ＲＳＤ＝０．９％，见表２，结果
表明重复性符合要求。
·７６·第３期 张　韫，等．反相高效液相色谱法测定盘龙七中ｗ（岩白菜素） 　　　
表２　岩白菜素的重复性实验（ｎ＝６）
序号 ｗ／％ ＲＳＤ／％
１　 ２．６０　 ０．９
２　 ２．５６
３　 ２．６３
４　 ２．６０
５　 ２．５９
６　 ２．６２
２．１．４　稳定性实验
精密吸取同一供试品溶液，按１．２．１项下色
谱条件分别于０、２、４、６、８和１０ｈ进样，测定色谱
峰面积，并计算得ＲＳＤ为１．３％，见表３。结果表
明供试品溶液１０ｈ内稳定，实验应在岩白菜素稳
定时间内完成。
表３　岩白菜素的稳定性实验（ｎ＝６）
ｔ／ｈ　 ｗ／％ ＲＳＤ／％
０ ２．６２　 １．３
２　 ２．５６
４　 ２．５４
６　 ２．５９
８　 ２．６３
１０　 ２．５９
２．１．５　加样回收实验
取同一批样品９份，约２ｇ，其中ｍ（岩白菜
素）＝０．２０８　０ｇ，按１．２．３项下的方法制备供试品
溶液，分别精密加入质量浓度为０．１０４、０．２６０和
０．３５０ｍｇ／ｍＬ对照品溶液，定容摇匀，按１．２．１
项下的色谱条件分别进样测定，计算得高、中、低
３个浓度的平均回收率依次为１０１．１％、１００．３％、
１０１．０％，ＲＳＤ 为０．６％，见表４。结果表明该方
法具有良好的回收率。
表４　岩白菜素的加样回收实验（ｎ＝９）
序号
对照品
ｍ（岩白
菜素）／ｇ
测得
ｍ（岩白
菜素）／ｇ
回收率
／％
ＲＳＤ
／％
１　 ０．１０４　０　 ０．３１３　６　 １０１．５　 ０．６
２　 ０．１０４　０　 ０．３１２　８　 １００．８
３　 ０．１０４　０　 ０．３１３　０　 １０１．０
４　 ０．２６０　０　 ０．４６８　４　 １００．２
５　 ０．２６０　０　 ０．４７１　０　 １０１．２
６　 ０．２６０　０　 ０．４６６　８　 ９９．５
７　 ０．３５０　０　 ０．５６０　８　 １００．８
８　 ０．３５０　０　 ０．５６２　０　 １０１．１
９　 ０．３５０　０　 ０．５６１　６　 １０１．０
２．２　ｗ（岩白菜素）测定
取陕西省３个产地的盘龙七药材粉末各３
份，每份约２ｇ，按１．２．３项下的方法制备供试品
溶液，按１．２．１项下的色谱条件测定ｗ（岩白菜
素），结果见表５。
表５　盘龙七中ｗ（岩白菜素）（ｎ＝３）
序号 产地 ｗ（岩白菜素）／％ ＲＳＤ／％
１ 陕西省镇安县 ２．５３　 ０．６
２ 陕西省勉县 ２．６４　 ０．４
３ 陕西省户县 ３．６３　 ０．９
３　结　论
采用反相高效液相色谱法测定了盘龙七中有
效成分ｗ（岩白菜素）。操作简便、专属性强、重复
性好、回收率高、结果可靠，为陕西地方药材盘龙
七建立科学合理的质量控制方法提供了一定依
据，为其进一步开发应用提供实验参考。
参　考　文　献：
［１］　冯永辉，李鹏，汪兴军，等．盘龙七中儿茶素的含量测定［Ｊ］．
安徽农业科学，２０１１，３９（２８）：１７２３５－１７２３６．
［２］　宋小妹，刘海静．太白七药研究与应用［Ｍ］．北京：人民卫生
出版社，２０１１：８２．
［３］　冯永辉，郭耀武，李蔓鹭，等．盘龙七的质量标准研究［Ｊ］．药
物分析杂志，２０１４，３４（４）：７４－７７．
［４］　崔莹．盘龙七化学成分的研究（Ⅰ）［Ｊ］．中草药，２０１２，４３
（９）：１７０４－１７０７．
［５］　国家医药管理局中草药情报中心．植物药有效成分手册
［Ｍ］．北京：人民卫生出版社，１９８６：１２４．
［６］　刘海周，孙海林，李文军，等．岩白菜中岩白菜素的纯化及提
取工艺研究［Ｊ］．云南中医学院学报，２０１１，３４（２）：２２－２５．
［７］　冯永辉，贺利娜，张博，等．ＨＰＬＣ法测定盘龙七中岩白菜素
的含量［Ｊ］．安徽农业科学，２０１１，３９（２６）：１５９７３－１５９７４．
［８］　索建兰，林宏领．ＨＰＬＣ法测定盘龙七中岩白菜素的含量
［Ｊ］．陕西中医，２０１１，３２（３）：３５３－３５５．
·８６· 　　　化　工　科　技　　　　　　　　　　　　　　　　　　　第２４卷
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂｅｒｇｅｎｉｎ　ｉｎ　Ｒｈｉｚｏｍａ　Ｂｅｒｇｅｎｉａｅ　Ｓｃｏｐｕｌｏｓａｅ　ｂｙ　ＲＰ－ＨＰＬＣ
ＺＨＡＮＧ　Ｙｕｎ，ＧＡＯ　Ｓｕｙａ，ＴＡＮＧ　ｙｉｍｅｉ
（Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｘｉ’ａｎ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｉ’ａｎ７１００２１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂｅｒｇｅｎｉｎ　ｉｎ　Ｒｈｉｚｏｍａ　Ｂｅｒｇｅｎｉａｅ　Ｓｃｏｐｕｌｏｓａｅ　ｂｙ　ＲＰ－
ＨＰＬＣ　ｗａｓ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．Ｔｈｅ　ａｓｓａｙ　ｗａｓ　ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ　ｏｎ　ａ　Ａｇｉｌｅｎｔ　ＴＣ－Ｃ１８ｃｏｌｕｍｎ（４．６ｍｍ×１５０ｍｍ，
５μｍ）ｗｉｔｈ　ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ－０．２％ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ　ａｃｉｄ（ｖｏｌｕｍｅ　ｒａｔｉｏ　ｉｓ　１０∶９０）ａｓ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｆｌｏｗ
ｒａｔｅ　ｏｆ　１．０ｍＬ／ｍｉｎ．Ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｗａｓ　２７５ｎｍ　ａｔ　ｒｏｏｍ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔ　ｓｈｏｗｅｄ
ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｌｉｎｅａｒ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　ｂｅｒｇｅｎｉｎ　ｗａｓ　１．０４０×１０－２～０．１０４ｍｇ／ｍＬ（ｒ＝０．９９９　７）．Ｔｈｉｓ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｃｏｎ－
ｖｅｎｉｅｎｔ，ｒｅｐｅａｔａｂｌｅ　ａｎｄ　ａｃｃｕｒａｔｅ，ａｎｄ　ｃａｎ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆ　Ｒｈｉｚｏｍａ　Ｂｅｒｇｅｎｉａｅ　Ｓｃｏｐｕ－
ｌｏｓａｅ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｂｅｒｇｅｎｉｎ；Ｒｈｉｚｏｍｅ　Ｂｅｒｇｅｎｉａ　Ｓｃｏｐｕｌｏｓａｅ；
櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂櫂
ＲＰ－ＨＰＬＣ
（上接第６０页）
Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｏｆ　ｂｅｔａ　ｚｅｏｌｉｔｅ
ＣＨＩ　Ｙｉｎ１，ＷＡＮＧ　Ｄｏｎｇ２，ＨＯＵ　Ｐｅｎｇｙｕ２，ＣＡＯ　Ｗｅｎｚｈｏｎｇ１
（１．Ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌ　Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｏｉｌ　＆ Ｇａｓ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　＆
Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｎｏｒｔｈｅａｓｔ　Ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｄａｑｉｎｇ　１６３３１８，Ｃｈｉｎａ；２．Ｒｅｆｉｎｅｒｙ　ｏｆ
ＵｒｕｍｃｈｉＰｅｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏｍｐａｎｙ，ＰｅｔｒｏＣｈｉｎａ，Ｕｒｕｍｃｈｉ　８３００１９，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｔｉｍｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｃｉｄ　ｗａｓｈｉｎｇ　ａｎｄ　ｈｙｄｒｏｔｈｅｒｍａｌ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｎ
Ｂｅｔａ　ｚｅｏｌｉｔｅ　ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ　ｗａｓ　ｅｘａｍｉｎｅｄ　ｉｎ　ｄｅｔａｉｌ，ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｒｅｖｅａｌｅｄ　ｔｈａｔ　ａｃｉｄ　ｗａｓｈｉｎｇ　ａｔ　２ｈａｎｄ　８０℃
ａｎｄ　２ｈｈｙｄｒｏｔｈｅｒｍａｌ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ａｔ　６５０℃ａｒｅ　ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｐｅｒａｔｉｎｇ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ．Ｔｈｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ
ＳｉＯ２／Ａｌ２Ｏ３ｒａｔｉｏ　ｏｆ　Ｂｅｔａ　ｚｅｏｌｉｔｅ　ａｒｅ　ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃａｌｙ　ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｕｓｉｎｇ　ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ　ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｐｅｒａｔｉｎｇ
ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ．Ｂｅｔａ　ｚｅｏｌｉｔｅ　ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｆｒｏｍ　ｈｉｇｈｅｒ　ＳｉＯ２／Ａｌ２Ｏ３ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓｔａｒｔｉｎｇ　Ｂｅｔａ　ａｌｓｏ　ｈａｓ　ｈｉｇｈｅｒ
ＳｉＯ２／Ａｌ２Ｏ３ｒａｔｉｏ．Ｃｒｙｓｔａｌｉｎｉｔｙ　ｏｆ　ｓｔａｒｔｉｎｇ　Ｂｅｔａ　ｚｅｏｌｉｔｅ　ｈａｓ　ｌｅｓｓ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｍｏｄｉｆｉｅｄ　Ｂｅｔａ　ｚｅｏｌｉｔｅ．Ａｓ
ｔｈｅ　ＳｉＯ２／Ａｌ２Ｏ３ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ｓｔａｒｔｉｎｇ　Ｂｅｔａ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ，ｔｏｔａｌ　ａｃｉｄ　ａｍｏｕｎｔ　ｏｆ　ｍｏｄｉｆｉｅｄ　Ｂｅｔａ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ．Ｗｈｅｎ
ｔｈｅ　ＳｉＯ２／Ａｌ２Ｏ３ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ｓｔａｒｔｉｎｇ　Ｂｅｔａ　ｉｓ　ｂｉｇｇｅｒ，ｔｈｅ　ｓｕｒｆａｃｅ　ａｒｅａ　ａｎｄ　ｐｏｒｅ　ｖｏｌｕｍｅ　ｉｓ　ｈｉｇｈｅｒ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｂｅｔａ　ｚｅｏｌｉｔｅ；Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ；Ａｃｉｄ　ｗａｓｈｉｎｇ；Ｈｙｄｒｏｔｈｅｒｍａｌ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
·９６·第３期 张　韫，等．反相高效液相色谱法测定盘龙七中ｗ（岩白菜素）