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珍珠梅提取物对肝脏癌前病变大鼠体内自由基的清除作用



全 文 :[ 收稿日期]  2002-12-10
[ 作者简介]  张学武(1973-), 男 , 助教 , 医学硕士 , 研究方
向为肝胆生物化学.
珍珠梅提取物对肝脏癌前病变大鼠体内自由基的清除作用
张学武 ,柳明洙 ,孙权 ,全吉淑 ,金海玲
(延边大学医学院 生物化学与分子生物学教研室 ,吉林 , 延吉 133000)
[ 摘要]  [ 目的] 探讨珍珠梅乙酸乙酯提取物对二乙基亚硝胺致肝脏癌前病变大鼠体内自由基的影响.
[ 方法] 给动物灌胃给药 ,用二乙基亚硝胺制备大鼠肝脏癌前病变模型.用比色分析法测定大鼠血清及
肝匀浆中的超氧化物歧化酶 、谷胱甘肽过氧化物酶的活性和丙二醛 、谷胱甘肽的含量.[ 结果] 珍珠梅乙
酸乙酯提取物能显著提高肝脏癌前病变大鼠血清及肝匀浆中的超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶
的活性 , 增高谷胱甘肽含量 , 降低丙二醛的含量.[ 结论] 珍珠梅乙酸乙酯提取物对肝脏癌前病变大鼠体
内的自由基有清除作用.
[ 关键词]  癌;自由基类;植物 ,药用
[ 中图分类号]  R285.5   [ 文献标识码]  A   [ 文章编号]  1000-1824(2003)01-0015-03
Effect of Sorbaria Sorbifolia extract on free radical metalism during
precarcinogenesis induced by diethylnitrosamine in rats
ZHANG Xue-wu ,LIU Ming-zhu , SUN Quan , QUAN Ji-shu ,JIN Hai-l ing
(Department of Biochemistry and Molecular Biology , Yanbian University College of Medicine , Yanji 133000 , Jilin , China)
ABSTRACT: OBJECTIVE To study the effect of Sorbaria Sorbi fol ia ex tract on f ree radical in
precarcinogenesis induced by diethylnit rosamine in rats.METHODS Sorbaria Sorbifolia was perfused into
stomach of rats w ith DEN-induced precarcinogenesis , and it w as detected by colorimetric method that the
activi ties of superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GSH-PX), and the concentrations of
malondialdehyde (MDA), glutathione (GSH).RESULTS Sorbaria Sorbi folia ext ract increased the SOD ,
GSH-PX and decreased MDA ,GSH levels in serum and liver homogenate.CONCLUSION Sorbaria Sorbi fol ia
ex tract has the ef fect of clearing the f ree radical during precarcinogenesis induced by diethy lnitrosamine in rats.
Key words:carcinoma;f ree radicals;plants , medicinal
  珍珠梅(Sorbaria Sorbifolia)属蔷薇科植
物 ,又称山高粱或八木条 ,广泛分布于云南 、
贵州 、四川 、湖北 、甘肃 、宁夏及东北三省 ,具
有活血化瘀 、消肿止痛之功效 ,用于治疗骨折
及跌打损伤等[ 1] .20世纪 80 年代初期 ,国内
学者研究发现珍珠梅水提物有抗缺氧作
用[ 2] ,我们在研究过程中也发现珍珠梅乙酸
乙酯提取物对亚硝酸钠和四氯化碳所致急性
肝损伤具有保护作用[ 3 , 4] ,对四氯化碳致肝损
伤大鼠自由基具有清除作用[ 5] ,对小鼠 S180
肉瘤有抑制作用[ 6] .本实验研究了珍珠梅乙
酸乙酯提取物对肝肝癌前病变大鼠体内自由
基的影响 ,旨在阐明珍珠梅抗癌作用的可能
机理 ,为珍珠梅的开发提供理论依据.
·15·延边大学医学学报 2003 年 3 月 第 26卷 第 1期
DOI :10.16068/j.1000-1824.2003.01.006
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 珍珠梅生物活性成分的制备 珍珠
梅茎 、叶及花采集于吉林省延吉市市郊.用乙
酸乙酯分 3 次浸泡珍珠梅 ,温度为 40 ℃,每
次 12 h ,合并 3 次滤液 ,用旋转蒸发器减压浓
缩 ,获珍珠梅乙酸乙酯提取物浸膏(1 g 珍珠
梅有效成分相当于 33.3 g 生药).
1.1.2 试剂 二乙基亚硝胺 、乙酰氨基芴系
Sigma 公司产品 ,超氧化物歧化酶 、丙二醛 、
谷胱甘肽及谷胱甘肽过氧化物酶试剂盒为南
京建成生物工程研究所产品 ,其他试剂均为
国产分析纯.
1.1.3 仪器 800 型离心机为上海手术器
械十厂产品 , 722 型分光光度计为中国厦门
分析仪器厂产品 ,旋转蒸发仪为上海荣亚生
化仪器厂产品.
1.1.4 动物 取 Wistar 雄性大鼠 ,体重为
180 ~ 200 g ,由延边大学医学院实验动物科
提供.
1.2 方法
1.2.1 模型制作 、给药方法及检测指标 取
36只 Wistar 雄性大鼠 ,随机分为正常组 、模
型组及给药组.按尹宗柱等报道过的略改良
的 Solt-Farber 方法[ 7]制作大鼠肝脏癌前病变
模型.正常组腹腔注射生理盐水 ,模型组和给
药组腹腔注射二乙基亚硝胺 , 剂量为 200
mg/kg , 2周后 ,在模型组和给药组大鼠饲料
中添加 0.08 mg/L乙酰氨基芴 ,同时 ,给药组
将珍珠梅提取物按 6.6 g/kg 剂量每天连续灌
胃.注射二乙基亚硝胺 3 周后进行肝脏部分
切除术.3 个组的大鼠共饲养 8 周后全部处
死 ,采集血液并分离血清 ,进行生物化学指标
的测定.立即称取 1.0 g 新鲜肝组织放入置有
冰冷的匀浆介质(pH 7.5 , 0.25 mol/L 蔗糖 ,
0.005 mol/L Tris-盐酸 , 0.001 mol/L 乙二胺
四乙酸)的玻璃匀浆器中 ,在冰浴中制成 100
g/L 匀浆 ,在 2 000×g 下离心 10 min ,取上清
液 ,进行生物化学指标的测定.
1.2.2 统计学处理 数据以 x ±SD 表示 ,
应用 SPSS-10.0统计软件进行方差分析.
2 结果
2.1 珍珠梅提取物对肝脏癌前病变大鼠体
内超氧化物歧化酶活性的影响  结果见
Table 1.
Table 1  The effect of Sorbaria Sorbifolia ex tract on SOD
during precarcinogenesis induced by diethylni-
trosamine in rats( x±SD)
group number
serum(NU/ mL) liver homogena te(NU/mL)
model 9 92.6±42.7 49.8±14.0
control 12 131.4±38.9* 72.9±39.8*
trea tment 11 126.7±27.3* 61.3±6.7*
*与模型组比较 , P <0.05
2.2 珍珠梅提取物对肝脏癌前病变大鼠体
内丙二醛的影响 结果见 Table 2.
Table 2  The effect of Sorbaria Sorbi folia extract on M DA
during precarcinogenesis induced by diethylni-
tro samine in rats( x±SD)
group number
serum(nmol/ L) liver homogena te(mmol/kg)
model 9 92.6±42.7 49.8±14.0
control 12 131.4±38.9* 72.9±39.8*
trea tment 11 126.7±27.3* 61.3±6.7*
*与模型组比较 , P <0.05
2.3 珍珠梅提取物对肝脏癌前病变大鼠体
·16· Journal of Medical Science Yanbian University Mar.2003 Vol.26 No.1
内谷胱甘肽过氧化物酶的影响  结果见
Table 3.
Table 3 The effect of Sorbaria Sorbi folia ex tract on GSH-PX
during precarcinogenesis induced by diethylni-
trosamine in rats( x ±SD)
g roup number
serum(mg/ L) liver homogenate(U/ mg)
model 9 16.2±3.69 26.2±5.69
contro l 12 28.6±5.69* 35.7±9.15*
treatment 11 16.8±6.17* 31.4±6.55*
*与模型组比较 , P<0.05
2.4 珍珠梅提取物对肝脏癌前病变大鼠体
内谷胱甘肽的影响 结果见 Table 4.
Table 4  The effect o f Sorbaria Sorbifolia ex tract on GSH
during precarcinogenesis induced by diethylni-
trosamine in rats( x±SD)
g roup number
serum(mg/ L) liver homogenate(U/ mg)
model 9 148.9±23.3 19.4±3.2
contro l 12 219.2±40.8* 26.3±4.2*
treatment 11 198.1±12.4* 27.4±5.2*
*与模型组比较 , P<0.05
3 讨论
近年来的研究表明 ,自由基的产生和消
除失衡与肿瘤的发生发展有一定的关系.自
由基的诱癌 、促癌及致癌作用基本上已被肯
定[ 8] .癌变是一个复杂的多步反应过程 ,至少
经历两个阶段 ,即诱发阶段和促发阶段 ,现已
证明 ,在癌变的诱发和促发阶段均有自由基
参与.各种诱癌因素和促癌因素通过各自的
转化途径 ,最终使自由基增加 ,从而参与癌变
过程.在肿瘤和自由基关系的方面认为自由
基既可直接损伤 DNA ,也可通过脂质过氧化
间接地损伤 DNA ,最终引起癌变.超氧化物
歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶是属于体内清
除自由基和脂质过氧化物的酶类 ,与体内其
他酶类及抗氧化剂组成一个对自由基的防御
系统 ,以清除过多的自由基.本实验中观察到
肝脏癌前病变模型组超氧化物歧化酶及谷胱
甘肽过氧化物酶活性均显著低于正常组 ,而
丙二醛含量显著高于正常对照组 ,与文献报
道一致[ 9~ 11] .本实验中所用的珍珠梅乙酸乙
酯提取物显著提高二乙基亚硝胺所致肝脏癌
前病变大鼠血清 、肝匀浆中超氧化物歧化酶 、
谷胱甘肽过氧化物酶的活性 、谷胱甘肽的含
量 ,降低丙二醛的含量 ,这可能是通过清除自
由基 ,改变 DNA 结构与功能而达到的 ,提示
珍珠梅提取物有助于肿瘤的防治.
[参 考 文 献]
[ 1]  江苏医学院 编.中华大辞典[ M] .上海:上海科学技术
出版社 , 1994.8.
[ 2]  李亦秀 ,张永春 , 李文汉.中草药山高粱的抗缺氧作用
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[ 3]  张学武 ,金海玲 , 朴春梅 ,等.珍珠梅对亚硝酸钠和四氯
化碳所致肝损伤的保护作用[ J] .延边大学医学学报 ,
2001 , 24(3):186.
[ 4]  张学武 ,金海玲 , 赵红 ,等.珍珠梅提取物对四氯化碳所
致大鼠急性肝损伤的保护作用[ J] .世界华人消化杂
志 , 2002 , 10(7):783.
[ 5]  张学武 ,金海玲 , 赵红 ,等.珍珠梅对四氯化碳致肝损伤
大鼠自由基影响[ J] .中国中医药科技 , 2001 , 8(6):
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[ 6]  金海玲 , 张学武 ,朴春梅 ,等.珍珠梅对小鼠 S180肉瘤的
抑制作用[ J] .延边大学医学学报 , 2002 , 25(1):14.
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hepatocarcinogensis[ J] .Gann (Jpn J Cancer Rea),
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[ 9]  Iw amo to A , Egashira T , Takayama F , et al..Changes
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ischemia- reperfution in rat liver [ J] .Pathophysiology ,
2002 , 8:167.
[ 10]  Angle MF , Zhang F , Rogers B , et al..Role of free
radicals in necrosis of skin graft compromised with
hematoma[ J] .Ann Plast S urg , 2002 , 48:665.
[ 11]  郭维心 , 刘明堂 , 郑书勤 , 等.胃癌患者 SOD 活性与
LPO 含量观察[ J] .癌症 , 1993 , 12(2):115.
·17·延边大学医学学报 2003 年 3 月 第 26卷 第 1期