全 文 :收稿 2002-08-08 修定 2003-04-04
资助 农业部“ 948”项目(201033)。
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蓝靛果的组织培养及植株再生
赵 越* 霍俊伟 王立娟(东北农业大学生命科学学院 , 哈尔滨 150030)
Tissue Culture and Plant Regeneration of Blue Honeysuckle(Lonicera caerulea)
ZHAO Yue*, HUO Jun-Wei , WANG Li-Juan (College of L ife Sciences , Northeast Agricultural University , Harbin 150030)
1 植物名称 蓝靛果(Lonicera caerulea)。
2 材料类别 11月份从俄罗斯引进到黑龙江的蓝
靛果植株的冬芽 ,扦插在水里 ,以其萌发的芽尖为实
验材料。
3 培养条件 (1)诱导愈伤组织培养基:MS +NAA
1.0 mg·L-1(单位下同)+6-BA 0.1;(2)诱导芽分化
培养基:MS+NAA 0.01+6-BA 1.0;(3)继代培养
基:MS +6-BA 1.0;(4)生根培养基:1/4 MS +IBA
1.0。培养基均附加 3%蔗糖 、0.7%琼脂 , pH 值为
5.5 ~ 5.8。培养温度为 20 ~ 25℃,每天光照时间 12
h ,光照度 2 000 ~ 3 000 lx 。
4 生长与分化情况
4.1 愈伤组织的诱导 将萌发的冬芽的芽尖(1 ~ 2
cm)在自来水中冲洗 40 min 左右 ,在超净工作台上
用 75%的酒精消毒 1 min ,0.1%的升汞表面消毒 5
min ,最后用无菌水冲洗 5次 。用刀切去叶 、花芽 、叶
原基 ,把 0.5 ~ 1.0 mm 的茎尖接种在培养基(1)上。
培养 10 d后 ,茎尖开始膨大 ,从基部切口处形成浅
绿色愈伤组织;20 d 后 ,愈伤组织开始生长 ,并变得
疏松易碎;再过 20 d ,继代到培养基(1)上 ,愈伤组织
进一步生长 ,长势良好。以后每隔 30 d 继代 1 次 ,
可获得大量愈伤组织 。
4.2 芽的诱导与增殖 生长 50 ~ 60 d左右的愈伤
组织中已含有分化的小腋芽 ,将小腋芽接种在培养
基(2)上。10 d左右腋芽伸长 , 20 d后长出 3 cm 高
小芽(图 1),这些小芽具有 2 ~ 3 个腋芽。用同样的
方法反复进行培养 , 20 d后增殖率达 2 ~ 3倍 。将长
到4 ~ 5 cm 、发育良好的小芽转到培养基(3)上 ,20 d
后 ,小芽长成健壮的无根苗。
4.3 诱导生根及移栽 将较健壮的无根苗分成单
株 ,去除基部的愈伤组织 ,接种在培养基(4)上 。7 d
后苗基部分化出不定根 , 20 d后 ,生根率达 85%。
研究中发现将 MS 培养基作为蓝靛果的培养基 ,无
机盐的浓度过高 ,所以将 MS培养基浓度稀释到1/4
较适宜 。待幼苗的根长至 2 ~ 3 cm 时 ,将试管苗瓶
盖打开 ,室温(25 ~ 30℃)下炼苗 3 d后 ,洗去根部琼
脂 ,移栽到砂和泥炭(1∶1)的基质中 ,保持 75%以上
的相对湿度 ,成活率可达 90%以上。
5 意义与进展 蓝靛果属于忍冬科 、忍冬属多年生
的落叶小灌木植物 ,是我国东北野生食用浆果。蓝
靛果果实不仅营养丰富 ,富含氨基酸 、维生素 、矿质
元素和其他生物活性物质 ,而且果实中含有无毒的
天然色素 ,适于制果酒 、饮料 、果酱和提取色素。另
外 ,蓝靛果还有很高的药用价值 ,临床实验验证蓝靛
果对心脑血管疾病有一定疗效 ,还可防止血管破裂 ,
降低血压 ,并有抗病毒 、抗癌 、改善肝脏解毒作用等
功效 。蓝靛果开发利用潜力很大 ,已引起人们的关
注。采用组织培养技术不仅能快速繁殖果苗 ,而且
能保持种质资源。蓝靛果的组织培养尚未见报道 。
图 1 蓝靛果芽的分化
468 植物生理学通讯 第 39 卷 第 5 期 , 2003年 10 月
DOI :10.13592/j.cnki.ppj.2003.05.019