全 文 ：＊华西医科大学药学院 1995级学生
作者简介:张丹 ,女 ,四川成都 ,副教授 ,从事药物分析的教学和科研
工作。
HPLC测定高原雪灵芝中阿魏酸的含量
张　丹 ,王化远 ,张承志＊
四川大学华西药学院 ,四川 成都 610041
　　摘要　目的:建立测定高原雪灵芝中阿魏酸含量的高效液相色谱法。方法:采用碱液浸取 、加酸沉淀后再用乙
醚提取雪灵芝中的阿魏酸;色谱柱为μBondapak ODS 柱 , 流动相为甲醇-水-冰醋酸(40∶60∶3), 检测波长 305 nm。结
果:雪灵芝中的阿魏酸与样品中其它成分分离良好;阿魏酸在 90～ 800 μg·ml-1范围内 ,峰面积与浓度的线性关系良
好(r=0.9997);平均回收率为 99.59%;日内精密度 RSD=0.79%(n=5),日间精密度 RSD =0.86%(n=5)。结论:
该法操作简便 ,结果准确 , 可供生药材质量控制。
关键词　雪灵芝;阿魏酸;高效液相色谱法;卵瓣蚤缀
中图分类号:927.2　　　　　　文献标识码:A　　　　　　文章编号:1006-0103(2001)04-0271-02
　　雪灵芝系石竹科蚤缀属植物 ,学名为卵瓣蚤缀
(Arenaria Kansuensis Var Ovatipeatala Tsui),长于海拔
4 500米以上高原的石灰石 、山地草原或石隙间 ,甘
肃 、青海 、四川西部及西藏均有分布 。全草性甘 、寒 ,
滋阴养血 ,益肾壮骨 ,用于肺燥咳嗽 、咳血 、血虚风
痹 、疼痛及肾虚眩晕等症[ 1] 。其抗炎 、抗免疫作用与
可的松相似[ 2] 。作者首次从雪灵芝中分离出生物活
性成份阿魏酸(ferulic acid),同时参考有关阿魏酸测
定方法[ 3 , 4]并加以改进 ,建立了测定雪灵芝中阿魏
酸含量的高效液相色谱法。该方法简便 、快速 、准
确 ,有助于雪灵芝产品的开发及质量评定。
1　实验部分
1.1　仪器与试药
日本岛津 LC-3A 液相色谱仪 ,SPD-1型紫外检
测器 ,C-R1A型色谱数据处理机;美国 Rheodyne 7725
型液相色谱进样器;薄膜浓缩蒸发器(上海玻璃仪器
厂)。阿魏酸对照品(中国药品生物制品检定所);雪
灵芝(华西医科大学药学院唐心曜教授采自四川阿
坝州 ,并鉴定);水为重蒸馏水 , 其余试剂均为分析
纯。
1.2　试验方法与结果
1.2.1　色谱条件 　色谱柱用 μBondapak ODS 柱
(250 mm ×4.6 mm ,10 μm);流动相为甲醇-水-冰醋
酸(40∶60∶3);流速 0.8 ml·min-1;检测波长 305 nm;
柱温为室温。
1.2.2　线性及灵敏度　精密称取阿魏酸对照品适
量 ,用甲醇溶解并稀释成含阿魏酸 1.6 mg·ml-1的贮
备液 ,冰箱内 4℃保存;精密量取该贮备液适量 ,用
甲醇配成含阿魏酸分别为 0.09 、0.18 、0.3 、0.4 、0.6 、
0.8 mg·ml-1的标准溶液 ,分别进样 10μl ,按色谱条
件测定。以阿魏酸峰面积积分值(Y)对标准溶液浓
度(X)进行线性回归 ,阿魏酸在 90 ～ 800 μg·ml-1范
围内线性良好。将溶液进行一系列的倍比稀释后进
行测定 , 测出信噪比 S/N =3 时的最低检测限为
0.07 μg 。回归方程为:
Y=6.69×103+4.25×106X , r=0.9997(n=5)。
1.2.3　精密度试验 　将药材样品预处理后的乙醚
提取物 ,稀释成高 、中 、低三种浓度的溶液 ,同法测定
后代入当日标准曲线 ,并求其含量 ,进行日内和日间
精密度考察(表 1)。
表 1　精密度试验结果(n=5)
Table 1　Results of precision test(n=5)
Concentrat ion/
μg·ml-1
RSD in a day/
%
RSD between days/
%
182.23 0.72 0.73
400.17 0.88 0.55
600.68 0.76 1.3
1.2.4　回收率试验 　精密称取已知阿魏酸含量的
雪灵芝样品适量 ,加入不同量的阿魏酸对照品 ,按
“1.2.5”方法处理并同法测定 。五次测定结果平均
回收率为99.59%, RSD =1.77%(表2)。
表 2　回收率试验结果(n=5)
Table 2　 Results of recovery test(n=5)
Contained/
μg
Added/
μg
Determined/
μg
Recovery/
%
RSD/
%
1014.2 600 1625.5 101.9 1.8
1025.6 1040 2080.1 101.4 1.5
1019.4 1500 2451.4 95.47 2.0
1.2.5　样品的测定　取样品干燥 4 ～ 5 h(70℃),振
华西药学杂志
W C J · P S 　2001 , 16(4):271～ 272　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
DOI :10.13375/j.cnki.wcjps.2001.04.011
荡除去泥沙并切成碎块。精密称取样品约 10 g ,加
1.2%氢氧化钠水溶液 300 ml煮沸 1 h ,其间不断加
水以补足损失的水分 。抽滤 ,除去药渣 ,合并滤液并
浓缩至约 30ml。滴加浓盐酸调节 pH 4.0 ,生成黄褐
色沉淀。离心(3 000 r·min-1)10 min ,取上清液用乙
醚萃取三次 ,每次约 30 ml ,合并乙醚液并挥干 ,用甲
醇溶解并定容成 10 ml ,离心(3 000 r·min-1)5 min ,
吸取上清液 10 μl在上述色谱条件下进行测定 。同
法进行五次测定 ,得出雪灵芝中阿魏酸的平均含量
为0.4057 mg·g-1 。阿魏酸对照品与样品色谱图见
图1 。
图 1阿魏酸对照品(A)与雪灵芝(B)的色谱图
Fig 1 Chromatograms of ferulic acid(A)and Xuelingzhi(B)
2　讨论
2.1　实验中发现 ,溶液酸度对阿魏酸的提取率影
响较大 。若酸度过高 ,可使阿魏酸降解破坏;若酸度
不够 ,阿魏酸则不能完全游离。在 pH 3.0 、4.0 、4.5 、
5.0时测得样品中阿魏酸的含量分别为 0.3822 、
0.4063 、0.3685 、0.2434 mg·g-1(n=3)。结果表明 ,
提取阿魏酸时以调节 pH 4.0为宜 。
2.2　阿魏酸对照品的甲醇贮备液在避光冷藏的条
件下本身较稳定 ,但雪灵芝的甲醇提取液则对光和
热较敏感。可能是样品中其它成分见光遇热产生降
解而促进了阿魏酸的分解。所以样品制备后除了应
严格避光冷藏外 ,最好尽快测定 。
参 考 文 献
1　中国药材公司.中国中药资源志要[ M] .北京:科学出版社 ,
1994.238
2　吴建龙 ,王大元.阿魏酸钠的药理研究进展[ J] .中国药学杂志 ,
1993 , 28(5):267
3　姜华 ,沈敏娟.高效液相色谱法测定当归注射液阿魏酸的含量
[ J] .甘肃中医学院学报 , 1995 ,12(4):45
4　金芳,张蕾.高效液相色谱法测定龙克栓胶囊中阿魏酸含量[ J] .
中国医院药学杂志 , 1996 ,16(10):456
收稿日期:2000-12
DETERMINATION OF FERULIC ACID IN XUELINGZHI
(ARENARIA KANSUENSIS VAR.OVALIPEATALA)ON PLATEAU BY HPLC
ZHANG Dan ,WANG Hua-yuan ,ZHANG Cheng-zhi
West China School of Pharmacy , SichuanUniversity , Chengdu 610041 , China
　　Abstract OBJECTIVE:To establish a reversed-phase high
performance liquid chromatography for determining the content of
ferulic acid in Xuelingzhi (Arenaria Kansuensis Var.ovalipeatala)
on plateau.METHODS:The samples were extracted with 1.2%
NaOH solution , then the extract was acidified to pH 4.0 with HCl
and extracted with ether , ferulic acid was determined on LC-3A
HPLC instrument fitted with aμBondapak C18 column(25 cm×4.6
mm , 10μm)with detector at 305 nm , and the mobile phase consisted
of CH3OH-H2O-CH3COOH(40∶60∶3), the flow rate was 0.8 ml·
ml-1.RESULTS:Ferulic acid and other components in Xuelingzhi
can be separeted.The calibration curves were linear(r=0.9997)
within the range of 90～ 800 μg·ml-1 for ferulic acid.The average
recovery was 99.59%, RSD in a day was 0.79%(n=5)and RSD
between days was 0.86%(n=5)at three levels.CONCLUSION:
This method is simple and accurate and is suitable to the quality
control for Xuelingzhi.
　　Key words　Xuelingzhi;Ferulic acid;HPLC;Arenaria Kansuensis Var.ovalipeatala
CLC number:R927.2　　　　　　Document code:A　　　　　　Article ID:1006-0103(2001)04-0271-02
272　　　 华 西 药 学 杂 志 第 16卷