全 文 ：收稿日期:2005-09-13
基金项目:四川省科技厅资助项目(03JY029-106)
作者简介:罗霞(1974-), 女 ,四川大学生命科学学院在读博士生.E-mail:Lx1443_cn@sina.com
＊通讯作者.E-mail:bioyang@163.com;TEL:(028)85410362
文章编号:　0490-6756(2006)02-0441-04
八珍汤和鸡血藤对环磷酰胺所致小鼠骨髓造血
微环境损伤的影响
罗霞1 , 2 ,陈东辉1 , 2 ,余梦瑶1 , 2 ,张春雷1 , 2 ,李艳华1 , 2 ,陶桓晟1 , 2 ,杨志荣1 , ＊
(1.四川大学生命科学学院 ,成都 610064;2.四川省中医药研究所细胞与分子生物学实验室 ,成都 610041)
摘要:用环磷酰胺(Cy)连续 3d腹腔注射(50mg/kg),造成小鼠的骨髓损伤模型.造模前 3d 开
始给予药物 ,并与生理盐水组对照 ,连续 7d.常规病理切片 ,镜下观察骨髓细胞的形态变化 ,并
计算造血组织容量 、脂肪组织容量 、血窦容量和巨核细胞数;结果显示模型组与空白组有差异 ,
而八珍汤和鸡血藤组的各种骨髓组织与模型组对比有明显恢复 ,从计算的骨髓各组织容量也
可以得到相同的结果.
关键词:八珍汤;鸡血藤;骨髓微环境;骨髓组织切片
中图分类号:R282　　　文献标识码:A
源于明代《正体类要》的八珍汤(Bazhen tang)是四君子汤和四物汤的合方 ,补气益血 ,常用于治疗气血
不足 ,同时能提高机体免疫力和抵抗力[ 1] .鸡血藤(S patholobus Suberectus Dunn.简称SS)系豆科植物密花
豆属(Spatholobus suberectus Dunn),是一味沿用千年的活血化淤中药 ,中医认为其有补血活血 、舒筋活络
的功能 ,用于治疗月经不调 、血虚萎黄 、麻木瘫痪 、风湿痹痛等症[ 2] .八珍汤和鸡血藤作为我国经典的补气
补血药方 ,其药理作用近年来多有报道.我们从病理切片观察的角度 ,探究这两味药对环磷酰胺所致小鼠
骨髓造血微环境损伤的作用 ,现报告如下.
1　材料与方法
1　材料
　　八珍汤(源自《正体类要》)一副:由当归 10g ,川芎 5g ,白芍药 8g ,甘草 5g ,熟地黄 15g ,人参 3g ,白术
10g ,茯苓 8g ,均购自成都中药店.以上方药在水中浸泡 0.5h后 ,加 10倍水煮沸 1h ,滤出药液;再加 5倍体
积水煮沸 0.5h ,滤出药液.合并两次药液 ,水浴浓缩至终浓度为 2g 生药/mL的药液.鸡血藤市售鸡血藤煎
煮(方法和八珍汤相同),水浴浓缩至终浓度为 2g 生药/mL 的药液.环磷酰胺(Cytoxan ,CY),上海华联制
药有限公司产品.其它国产分析纯试剂.
　　动物:健康昆明种小鼠 24只 ,雌雄各半 ,体重 18 ～ 22g ,由四川省中药研究所提供.
1.2　方法
1.2.1　动物分组　将小鼠随机分为 4组 ,分别为正常对照组 、模型对照组 、八珍汤组 、鸡血藤组 ,每组 6只
小鼠.
1.2.2　给药方法　正常组和模型组用生理盐水 0.1mL/10g 体重灌胃 ,八珍汤组用八珍汤 0.1mL/10g 体
重灌胃 ,鸡血藤组用鸡血藤0.1mL/10g 体重灌胃 ,每天 1次 ,连续7d.从试验第4d开始 ,模型组 、八珍汤组
2006年 4月
第 43卷第 2期
四川大学学报(自然科学版)
Journal of Sichuan Universi ty (Natural Science Edition)
Apr.2006
Vol.43　No.2
和鸡血藤组腹腔注射环磷酰胺 50mg/kg ,0.1mL/10g ,连续 3d.
1.2.3　实验过程　第 8d将小鼠断颈处死 ,取其股骨 ,投入秦克氏液中固定 24h ,经脱钙处理 , 30%、50%、
70%、80%、95%和纯酒精各 0.5h梯度脱水 ,透明 ,石蜡包埋切片 ,苏木精-伊红(Heidenhain-eosin , H-E)染
色 ,进行骨髓组织形态观察[ 3] .
于 400倍放大下(40×),在骨髓腔内不同部位 ,随机选择 16个视野 ,观察并记录每个视野内 100个点
所击中目标.如果交接点击中造血组织或脂肪组织或血窦 ,记录为 1 点.如果击中造血组织 、脂肪组织边
界 ,即记录点为 1/2点 ,共观察 1600点.按下式算出造血组织.脂肪组织和血窦的容量百分率(Vol%):造
血组织(Vol%)=造血组织击中数/(造血组织击中数+脂肪组织击中数+血窦击中数)×100%.并以每
10个视野内的巨核细胞数除以 10 ,求出每个视野内巨核细胞数平均值.
2　结果
2.1　切片观察结果
镜下形态观察 ,空白组中 ,红系和粒系大量存在 ,巨核细胞和血窦清晰可见 ,即各系分布正常(附图-
A).模型组中 ,红系基本不可见 ,表现为大量的幼稚粒系前体细胞弥漫性增生.巨核细胞数及血窦数显著
减少 ,核分裂及核固缩易见.脂肪组织显著上升 ,几乎充满整个骨髓腔(附图-B).八珍汤组中镜下观察可见
血窦扩张 ,较广泛的充血 ,出血(附图-C1).三个系中 ,红系不明显 ,巨核数少量回升 ,而仍表现为较广泛的
粒系细胞增生 ,但成熟度较模型组好(附图-C2).鸡血藤组红系基本不可见 ,巨核有所回升(附图-D2),但仍
是以较广泛的粒系细胞分布为主 ,成熟度和八珍汤组相似(附图-D1).
2.2　各组骨髓组织容量
从附表可以看出 ,在造血组织容量方面 ,八珍汤组恢复到正常组的 88.59%,鸡血藤组也回复到
83.07%,与模型组的 75%存在显著性差异(P<0.01).八珍汤和鸡血藤对脂肪组织容量的减少也有显著
的作用 ,分别只有模型组的 53.94%和 46.05%.另外 ,八珍汤对骨髓血窦的恢复作用明显 ,与空白组存在
显著性差异 ,鸡血藤作用不十分明显(P<0.05).但是八珍汤对骨髓巨核细胞的恢复有限(P <0.05),没
有鸡血藤的效果显著(P<0.01).总体来说 ,八珍汤和鸡血藤组用药后 ,造血组织 ,血窦数和巨核细胞数有
所回升 ,脂肪组织有所减少 ,但离空白组还有距离.由附表可见 ,八珍汤组及鸡血藤组对模型小鼠骨髓的造
血组织容量 、血窦容量及巨核细胞数的减少有明显的恢复作用 ,对脂肪组织容量的增加也有显著的抑制
作用.
附表　八珍汤和鸡血藤对骨髓造血组织容量的影＊响(Vol%, x)＊
Tab.　I nfluence of Bazhen decoctionand SS on bone marrow tissue(Vol%, x)
Group
Content of
hematopoietic tissue
Content of sinusoid Content of fat tissue Numbers of MK
Normal 87.67±1.53 23.5±2.18 0.53±0.45 21.47±0.96
Model 65.83±1.89 8.97±0.75 23.60±2.25 5.40±0.57
Bazhen decoction 77.67±2.08＊＊＊ 16.53±1.36＊＊＊ 12.73±1.61＊＊＊ 7.83±0.85＊＊
SS 72.83±1.61＊＊＊ 11.37±0.87＊＊ 10.87±0.45＊＊＊ 10.28±0.44＊＊＊
　　　　　＊Compared with model group:＊P >0.05;＊＊P <0.05 ;＊＊＊ P <0.01
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附图　骨髓组织
Fig.　Bone mar row tissues
(A:正常组;B:模型组;C:八珍组;D:鸡血藤组)
3　讨论
骨髓是人和哺乳动物的造血器官和中枢免疫器官 ,骨髓中的造血微环境以及局部和全身生成的体液
因子 ,构成复杂的调节网络 ,对血细胞生成进行多方面和多层次的双相调控 ,以维持机体正常造血和免疫
功能的稳定[ 4 ,5] .造血组织 、脂肪组织 、血窦和巨核细胞承担着机体血细胞的制造 、成熟以及机体的免疫防
御等重要功能 ,所以其数目及功能的正常是机体功能正常的保障.环磷酰胺是临床上常用化疗药物[ 6] ,在
本实验中可以看到 ,模型组小鼠腹腔注入环磷酰胺以后 ,骨髓受损严重 ,红系细胞基本不可见 ,脂肪组织大
量增生 ,几乎充满整个骨髓腔 ,血窦和粒系细胞也大量减少.
造血组织容量是机体维持正常造血机能的组织基础[ 7] .骨髓血窦是进入骨髓的动脉毛细血管继续分
支形成窦状腔隙 ,是造血器官骨髓的供应系统[ 8] .从附图和附表可以看到 ,八珍汤和鸡血藤对造血组织容
量和血窦容量都有显著的恢复 ,验证了经典补血方药八珍汤和鸡血藤的有效性.另外 ,在鸡血藤组 ,明显可
以看到相当数量的成熟粒系细胞 ,八珍汤组也能观察到相当数量的粒系细胞.粒系细胞在机体内主要起免
疫防御作用 ,提示八珍汤和鸡血藤可用于临床上化疗后骨髓 、免疫系统损伤的恢复.
443第 2期 罗霞等:八珍汤和鸡血藤对环磷酰胺所致小鼠骨髓造血微环境损伤的影响
参考文献:
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Influences of Bazhen Decoction and Spatholobus suberectus on the Bone
Marrow Microenvironment Damnified by Cytoxan
LUO Xia
1 ,2 , CHONG Dong-hui 1 , 2 , Y U Meng-yao1 ,2 , ZHANG Chun-lei 1 , 2 ,
TAO Huan-shen1 ,2 , Y ANG Zhi-rong1
(1.College of Life Science , Sichuan University , Chengdu 610064 , China;
2.Molecular and Cellular Lab of Chinese Materia M edica ,Sichuan Institute of
Chinese M ateria M edica , Chengdu 610041 , China)
Abstract:Establish the experimental model of bone microenvironment injured by Cy toxan.Then observe the
variety of bone marrow cell from organic slices and calculate the content of hematopoietic t issue , content of fat
tissue , content of sinusoid and numbers of MK ;It w as show n that a distinct difference can be observed be-
tween the model g roup and normal group.Compared to the model group , Bazhen Decoction and Spatholobus
suberectus accelerated the reversion of each bone marrow tissue , but the effects w ere dif ferent .
Key words:Bazhen decoct ion;S patholobus suberectus;bone marrow microenvi ronment;organic slice
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