全 文 ：2 卷 1 期 微生物学杂志
土模皮乙酸抗真菌作用的实验研究
吕乃群 常淑云
(辽宁中医学院)
中药土懂皮是 松 科(尸 ` , a c e ae ) 植物
金钱松 ( P ; e u d o l a r i劣 K a e , P f e r i 肠 r -
d on ) 的千燥树皮及根皮 . 过去对土 懂 皮
原药抗真菌作用已有不少研究 〔 1〕〔 2 〕〔 3 〕 ,
其化学成份也有人 〔 4 〕〔 5 〕进行了分析 , 并
从原药中提取了土模皮乙酸 , 报告了它的
分子式 , 为 C 2 3 H 2 : O : ,展开式为 C : 6 H ; :
O LC = C一 C 0 0 H ) 仁C O O C H 3 ) ( O C O -
C H
3
) (C = O)
, 进一步测定和解析 了土懂
皮乙酸的高分辨质谱 , 提出土懂皮乙酸可
能结构 式 〔 5 〕。
土谨皮抗真菌作用研究虽较多 , 但对
土懂皮乙酸抗真菌作用 尚未见系统报告 。
我们仅就部分真菌对土懂 皮乙酸敏感性 ,
及土懂皮乙酸对实验动物感染白色念珠菌
的保护作用的初步研究结果 , 报告如下 。
材料与方法
(一 ) 土橄皮乙酸 : 我院提制 的土模
皮乙酸钠针剂 (每毫升含土模皮乙酸 50 毫
克 ) 。
(二 ) 供试菌种 : 我院真菌室保存 的
下列菌种 :
白色念珠菌 、 热带念珠菌 , 拟热带念
珠菌 、 克柔氏念珠菌 、 地丝菌 、 毛霉菌 、
根霉菌 、 曲霉菌 、 石膏样小抱子菌 、 趾间
毛癣菌 、 抱子丝菌 、 紧密着色真菌 、 皮 炎
着色瓶霉菌 。
(三 ) 试验方法
l
、 试 验第一部分 : 体 外敏感性测定
( 1 ) 泡沫塑料柱法
①制成直径 8 毫米 , 高 9 毫米以
及吸水量 0 . 3毫升泡沫塑料柱 , 经高 压 灭
菌后备用 。
②将供试菌种分别培养于萄葡糖
蛋白陈琼脂 平板培养基上 , 再取灭菌泡沫
塑料柱吸取 5 肠土模皮乙酸钠 0 . 3 毫 升 ,
直立于已接种供试菌的培养基表面 , (对
照组按同样方法培养 , 以生理盐水 代替药
物吸入泡沫柱内放置于培养基表面 ) , 然
后置于 25 ℃温箱中培养 。根据菌种不同 , 分
别观察 3 一 15 天 (与对照组同时 观察 ) 后
判断结果 。
( 2 ) 试管法
①将供试菌 (主要为非菌丝型真
菌 ) 用萄葡糖蛋白陈琼脂斜面培养 4 8小时
后 , 再以生理盐水制成悬液 , 调整菌液浓
度为 1 x 10 “ /毫升后备用 。
②用系列管 , 以萄葡糖蛋白陈液
体培养基将土模皮乙酸钠制剂稀释成每管
浓度 自20 。微克 /毫升至 6 . 25 微克 /毫升又最
后一 管不加药物为对照 ) , 然后分别加入
经调整浓度的菌液各。 . 1毫升 , 置 37 ℃ 温
箱中培养 7 2小时观察结果 。
2
、 试 验第二部分 : 动 物试验土桂皮
乙酸对白念珠菌感染小 白鼠后 的保护作用
( 1 ) 供试菌 (我院分离所得白色念
珠菌强毒菌珠 ) 经培养后 , 调 整 浓 度 至
0
.
2毫升 , 相当于二个 L D 。 。量 。
( 2 ) 取 2 0一 2 5克健康小白鼠 2 0只 ,
随机分为二组 。 一组于动物感染前腹腔注
微生物学杂志 2 卷 1 期
入O 2毫升 5 肠土懂皮 乙酸 , 4 小时 后 于 表 1
鼠尾静脉注入已调整浓度的白色念珠菌菌
液。 . 2毫升 , 经感染后每间隔 1 2小时 再 重
复给药一 次 。
另一组以生理盐水代替药物 , 用同样
数量 、 时间 、 次数 、 途径 注入 鼠体内作为
对照 。
( 3 ) 经感染 4 8小时后 , 将上述各组
动物分别处死解剖 , 取肾 、 肝脏研磨制成
l 肠悬液 , 各取 1 毫升 , 加入加毫升经加
热溶化后冷至 50 ℃左右的葡萄糖蛋白陈琼
脂培养基内 , 混合后 , 倾注于平皿中 , 凝
后送入 37 ℃温箱中 , 经 72 小时后计算菌落
总数 。
部分真菌讨土桂皮乙酸敏感性试验
结果 (泡沫塑料柱法 )
供 试 菌 不生长区直经 (毫米 ) 敏感程度
白色念珠菌
热带念珠菌
拟热带念珠菌
克柔氏念珠菌
2 0
2 0
1 8
1 0
2 0
乡
丈乡夕>V
丝 菌霉地毛根曲
石膏样小抱子菌
趾间毛癣菌
抱 子 丝 菌
紧密着色真菌
皮炎着色瓶霉菌
2 0
2 0
2 0
2 0
1 0
l 8
> 2 0
< 2 0
高度敏感
高度敏感
中度敏感
不 敏 感
高度敏感
高度敏感
高度敏感
高度敏感
高度敏感
不 敏 感
中度敏感
高度敏感
不 敏 感
结果和讨论
1
、 休外试验部分
( 1 ) 泡沫塑杆柱法 。 泡沫塑料
柱法的判断标准为 : 泡沫塑料柱周围真菌
不生长区直径 > 20 毫米 , 为高度敏感 ; 15
一 20 毫米之间 , 为中度 敏 感 , 10 一 14 毫
米 , 为轻度敏感 ; < 10 毫 米为不敏感 。
从本次试验中可以看出 , 经土攫皮 乙
酸作用 的部位酵母样真菌不生长区直径分
别为 > 20 毫米 , 15 ~ 20 毫米之间或小 于 10
毫米 , 表现出不同程度 的敏感性 , 丝状真
菌也有类似结果 (表 1 ) 。
( 2 ) 试 管法 。
对部分供试菌所进行的试管法敏感性
试验结果和泡沫塑料法 , 总的趋势是一致
的 。 对地丝菌 、 热带 念珠菌等作用较强 ,
其最低敏感浓度为 25 微克 /毫升 ; 对 白 色
念珠菌和拟热带念珠菌为50 微 克 /毫升 ;
对克柔 氏念珠菌大于 20 0微克 , 不敏感又表
2 )
。
2
、 动物试脸部分
经感染后 的小白鼠 、 肾 、 肝悬液培养
表 2 部分真菌对 土桂皮 乙酸敏感性试验
结果 (试 管法 )
供 试 菌
}
敏感浓度 (微、 毫升 ,
地 丝 菌 } : 5
白 色 念 珠 菌 } 50
热 带 念 珠 菌 { 25
拟热带念珠菌 } 50
克柔氏念珠菌
}
) 20
所获得的菌落数 , 试验组和对照相 比 , 有
显著差异 , P < 0 . 0 5 (图 1 、 2 、 。
3
、 讨论
从本试验中可以看出 , 土懂皮乙酸除
对有致病作用的抱子丝菌 、 紧 密 着 色 真
菌 、 石膏样小抱子菌 、 白色念珠菌表现出
不同程度的抗菌作用外 , 对条件致病真菌
(如毛霉 、 根霉 、 曲霉 ) 也有 明显作用 ,
但也有的供试菌表现为不敏感 。 可见 , 土
雀皮乙酸抗真菌作 用是有选择性的 , 因此
用土模皮制剂治疗某些皮肤真菌病效果不
佳 , 是完全可能的 。
从动物试验中可 以看出 , 用强毒株白
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色念珠菌感染小白鼠后 , 土谨皮乙酸可以
显示出保护作用 。 据此可 以认为土模皮乙
酸不仅在体外 , 同时在动物体内也有一定
程度的抗菌作用 。
当前抗真菌 的中草药尚在研究和发掘
阶段 , 在普遍筛选 的 基 础 上 已 进 入 提
取 、 精制各种有效成份的阶段 。 目前虽有
这方面研究 , 但为数还不 多。 我们认为进
一步从中药 中提取抗真菌有效成份 , 将为
研究中药抗真菌作用以及用中药防治真菌
性疾病开辟一条道路 。
我们初试所获得的结果 , 可为进一步
深入研究和试用于临床提供一些线索 。 但
就此药物作用原理 , 以及如何应用于临床
治疗深部真菌病中一系列问题 , 尚有待于
进一 步研究 。
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脏以器嘱悬液经培养后所获得的菌落数
织别及脏器别
图 1 土桂皮 乙 酸对实验性动物感染白 色 图 2
念珠菌后 的保护作用 (动 物个体脏
器存活 菌数 )
参 考 文 献
( 1 ) 李运亚 : 中华皮肤科杂志 , 丁: 2 7 5一 1 5 里, 2 9 5 0 .
( 2 ) 吴绍熙 : 中华皮 肤科杂志 , 8 : 12 一肠 , 1 9 了8 。
( 3 ) 白求恩国际和平 医院 : 医学 资 料汇编 , 1 : 57 一 61 ,
( 4 ) 杨松松 : 全国药学学术论文报 告 会资料 , 1 9 78 。
( 5 ) 杨松松 : 科技成果资料选编 (内部资料 ) , 1 9 7 .9
脏器别及组别
土桂皮 乙酸时实验性动物感染白 色
念珠菌后 的保护作用 (试验组或对
照组存活 菌数的平均数 )