全 文 ：［成分分析］
卷柏抗肿瘤转移的活性成分
齐 妍
(天津医科大学第二医院，天津 300211)
收稿日期:2013-09-23
作者简介:齐 妍 (1986—) ，女，药师，从事药房工作。Tel:13612026114，E-mail:ylyy408@ 163． com
摘要:目的 研究卷柏抗肿瘤转移的活性成分。方法 卷柏全草采用 70%乙醇提取、系统溶剂萃取，综合运用硅胶
柱色谱、凝胶柱色谱、制备 HPLC色谱等分离色谱法分离纯化卷柏中的化学成分;采用 NMＲ 和质谱等有机波谱学方
法鉴定化合物的结构;通过伤口愈合实验来评价卷柏化学成分抗肿瘤转移的活性。结果 从卷柏中分离鉴定了 7 个化
合物，分别为阿罗托双黄酮 (1) ，扁柏双黄酮 (2) ，罗波斯塔黄酮 (3) ，异柳杉双黄酮 (4) ，卷柏酸 (5) ，麦芽碱-
O-α-L 吡喃鼠李糖苷 (6) ，麦芽碱-O-［(6″-O-反式肉桂酰基)-4-O-β-D-吡喃葡萄糖基-α-L-吡喃鼠李糖苷］(7)。此
外抗肿瘤转移活性筛选结果表明，化合物 6 和 7 均能剂量依赖性提高抗肿瘤转移活性。结论 化合物 5 ～ 7 为首次从
该植物中分离得到，化合物 6 和 7 与阳性对照药 LY294002 相比能够更强地抑制乳腺癌 MDA-MB-231 细胞的迁移的抗
肿瘤转移活性。
关键词:卷柏;麦芽碱-O-α-L 吡喃鼠李糖苷;麦芽碱-O-［(6″-O-反式肉桂酰基)-4-O-β-D-吡喃葡萄糖基-α-L-吡喃鼠
李糖苷］;抗肿瘤转移活性
中图分类号:Ｒ284. 1 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2014)08-1682-06
doi:10. 3969 / j． issn． 1001-1528. 2014. 08. 026
Anti-tumor metastatic constituents from Selaginella tamariscina (Beauv．)
Spring
QI Yan
(The Second Hospital of Tianjin Medical University，Tianjin 300211，China)
ABSTＲACT:AIM To study the chemical constituents and their anti-tumor metastatic activity from the whole
plant of Selaginella tamariscina (Beauv．)Spring． METHODS Extracted with 75% ethyl alcohol，the constit-
uents were isolated through chromatography of silica gel，Toyopearl HW-40 and p-HPLC． Their structures were i-
dentified on the basis of the physical properties and spectral analysis by UV、1H-NMＲ、13 C-NMＲ、ESI-MS．
Wound healing assays were used to assay the anti-tumor metastatic activity of constituents from S． tamariscina．
ＲESULTS Seven compounds were isolated from S． tamariscina and identified as amentoflavone (1) ，hinokifla-
vone (2) ，robustaflavone (3) ，isocryptomerin (4) ，selaginellic acid (5) ，horde-nine-O-α-L-rhamnopyranoside
(6) ，and hordenine-O- ［(6″-O-trans-cinnamoyl)-4-O-β-D-glucopyranosyl-α-L-rhamnopyranosi-de］(7)． In
addition，the screening results of anti-tumor metastatic activity exhibited that compound 6 and 7 could inhibit
tumor metastasis in dose-dependent manner． CONCLUSION Compounds 5 － 7 are isolated from this plant for
the first time and compound 6 and 7 exhibit the excellent anti-tumor metastatic activity on mammary cancer MDA-
MB-231 cell motility．
KEY WOＲDS:Selaginella tamariscina (Beauv．) Spring;horde-nine-O-α-L-rhamnopyranoside;hordenine-O-
［(6″-O-trans-cinnamoyl)-4-O-β-D-glucopyranosyl-α-L-rhamnopyranoside;anti-tumor metastatic activity
卷柏为蕨类卷柏科 Selaginellaceae 卷柏属 Sela-
ginella多年生草本植物卷柏 Selaginella tamariscina
(Beauv．)Spring 的全草，又名长生不死草、九死
还魂草、石莲花等，多分布于我国江南地区［1］。
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现代药理学研究证明，卷柏属植物中的成分具有抗
肿瘤［2-3］、抗病毒［4-5］、抗菌、增强免疫功能、舒
张血管［6-7］等作用。本实验运用硅胶柱色谱、凝胶
柱色谱、制备 HPLC色谱等方法从卷柏浸膏中分离
鉴定了 7 个化合物，包括双黄酮类化合物和生物碱
类化合物，其中化合物 5 ～ 7 为首次从该植物中分
离得到。此外，本实验对分离得到的生物碱类化合
物进行了抗肿瘤转移活性的筛选，结果显示化合物
6 和 7 具有较强的抗肿瘤转移活性。
1 仪器与材料
Bruker AV 400 核磁共振仪 (TMS 内标) ;
Bruker esquire 3000 00142 质谱仪;JASCO 半制备
高效液相色谱仪 (PU-2089，ＲI-2031，UV-2075，
日本分光公司) ;YMC-Pack ODS-A SH-343-5 色谱
柱 (20 mm × 250 mm，5 μm) ;A sahipak GS-20G
H200142，H200143 色谱柱 (20 mm × 500 mm，
5 μm) ;UV-3310 型紫外-可见分光光度计 (日本
Hitachi公司) ;柱色谱和薄层色谱用硅胶 (青岛海
洋化工厂) ;DFZ-3 型真空干燥器 (上海医用恒温
设备厂) ;37 ℃，5% CO2 细胞培养箱 (Heal Force
公司) ;超净工作台 (苏州净化设备有限公司) ;
全自动酶标板分析仪 (BIO-ＲAD公司) ;倒置显微
镜 (Olympus 公司) ;96 孔酶标板、6 孔酶标板
(Nest) ;所用试剂均为分析纯;氘代试剂 (Aldrich
公司) ;含酚红或不含酚红 ＲPMI1640 培养液 (北
京四环科技公司) ;胎牛血清 (FBS) ，PBS (Hy-
Clone) ;LY294002 (上海荣盛生物药业有限公
司) ;四甲基偶氮唑盐 (MTT) (Sigma 公司) ;25%
(含 EDTA)胰蛋白酶 (Bioind公司) ;二甲基亚砜
(Sigma公司) ;乳腺癌 MDA-MB-231 细胞购自中科
院上海细胞库。
卷柏 Selaginella tamariscina (Beauv．)Spring于
2006 年 7 月采自河南，由中南民族大学生命科学
院万定荣教授鉴定，标本 (D20060715)存放于天
津医科大学第二医院药剂科中药房。
2 实验方法
2. 1 提取分离 取自然干燥的卷柏全草 9. 5 kg，
粉碎后用 75%的乙醇加热回流提取 3 次，每次6 h，
提取液减压浓缩，得浸膏 500 g，将浸膏以水混悬，
依次用水饱和的石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，
分别得到石油醚部位 (39. 0 g) ，乙酸乙酯部位
(69 g) ，正丁醇部位 (70. 1 g)。卷柏石油醚提取
物及乙酸乙酯提取物分别以硅胶柱层析 (500 g，
200 ～ 300 目)分离，用石油醚-乙酸乙酯 (9 ∶ 1，
7 ∶ 1，5 ∶ 1，3 ∶ 1，2 ∶ 1，1 ∶ 1，1 ∶ 2，1 ∶ 3) ，
100%乙酸乙酯，乙酸乙酯-甲醇 (95 ∶ 5，90 ∶ 10，
80 ∶ 20)和 100%甲醇梯度洗脱，分离得到 10 个组
分 (A ～ J)。
组分 B 经过凝胶渗透柱层析 Toyopeal HW-40
分离，二氯甲烷-甲醇 (2 ∶ 1)洗脱，得到Fr． B1、
Fr． B2、Fr． B3、Fr． B4 和 Fr． B5。Fr． B4 再经制备高
效液相色谱分离纯化，分别得到化合物 6 (7. 4
mg)和化合物 7 (5. 4 mg) ;组分 E 经过凝胶渗透
柱层析 Toyopeal HW-40 分离，二氯甲烷-甲醇
(2 ∶ 1)洗脱，得到 Fr． E1、 Fr． E2、 Fr． E3、
Fr． E4。Fr． E2 再经制备高效液相色谱及制备薄层
色谱法分离纯化，得到化合物 5 (3. 6 mg)。组分
H经过凝胶渗透柱层析 Toyopeal HW-40 分离，二
氯甲烷-甲醇 (1 ∶ 1)洗脱，得到 Fr． H1、Fr． H2、
Fr． H3。Fr． H2 再反复经制备高效液相色谱法分离
纯化，分别得到化合物 1 (11. 1 mg) ，化合物 2
(4. 8 mg) ，化 合 物 3 (9. 2 mg) ，化 合 物 4
(10. 3 mg)。
2. 2 MTT法筛选化合物低细胞毒剂量 将细胞用
0. 25%的胰酶消化，吸出胰酶后，用含 10% FBS
的培养液终止消化，混匀细胞悬液，计数，调节细
胞密度为 1 104个 /mL。将调好的细胞悬液加于 96
孔板，每孔 180 μL，置于 37 ℃，5% CO2 的孵箱
内培养 24 h，24 h后加药，每个浓度 5 个复孔，继
续置于 37 ℃，5% CO2 的孵箱内培养 48 h。之后
每孔加 5 mg /mL的MTT 15 μL，37 ℃，5% CO2 的
孵箱内培养 4 h，4 h 后取出 96 板，将上清吸出，
每孔加 100 μL的 DMSO，用酶标仪在 490 nm 波长
下测量吸光度。抑制率 (%) = ［1 － (加药组
OD值 / 空白组 OD值) ］100%。
2. 3 伤口愈合实验 收集对数生长期的细胞，均
匀接种于六孔板中;待细胞长至完全融合后，用
10 μL无菌枪头在每孔单层细胞中央轻轻地划一道
伤痕，沿划痕边缘等距离间隔做上标记，以便检
测;PBS冲洗，换液后分别用不同浓度的化合物处
理 24 h;然后用倒置显微镜观察划痕愈合程度并拍
照，利用 IPPWIN60 统计细胞迁移距离，然后进行
统计学分析。
3 结果
3. 1 结构鉴定
化合物 1:淡黄色粉末，易溶于甲醇、丙酮。
硅胶 GF254板显棕黄色暗斑，试剂 FeCl3 － K3 ［Fe
(CN)6］显蓝色，茴香醛-浓硫酸喷雾后加热显黄
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色。1H-NMＲ［400 MHz，(CD3)2CO］δ:6. 63 (1H，
s，H-3) ，6. 19 (1H，d，J = 1. 9 Hz，H-6) ，6. 36
(1H，d，J = 1. 9 Hz，H-8) ，7. 79 (1H，dd，J = 8. 6，
2. 2 Hz，H-2) ，7. 10 (1H，d，J = 8. 6 Hz，H-3) ，
8. 03 (1H，d，J = 2. 2 Hz，H-6) ，6. 56 (1H，s，H-
3″) ，6. 21 (1H，s，H-6″) ，7. 69 (2H，d，J = 8. 8
Hz，H-2，6) ，6. 68 (2H，d，J = 8. 8 Hz，H-3，
5)。13C-NMＲ［75 MHz，(CD3)2CO］δ:166. 3 (C-
2) ，103. 7 (C-3) ，183. 8 (C-4) ，163. 5 (C-5) ，
100. 3 (C-6) ，163. 5 (C-7) ，95. 1 (C-8) ，158. 6
(C-9) ，107. 1 (C-10) ，122. 8 (C-1) ，128. 5 (C-
2) ，117. 1 (C-3) ，159. 7 (C-4) ，119. 2 (C-5) ，
132. 4 (C-6) ，163. 9 (C-2″) ，103. 4 (C-3″) ，184. 3
(C-4″) ，162. 1 (C-5″) ，98. 3 (C-6″) ，162. 7 (C-
7″) ，104. 6 (C-8″) ，155. 9 (C-9″) ，106. 0 (C-10″) ，
122. 8 (C-1) ，128. 9 (C-2，6) ，116. 5 (C-3，
5) ，161. 8 (C-4)。与文献 ［8］对照，确定化合
物 1 为阿曼托双黄酮 (amentoflavone)。
化合物 2:黄色粉末，难溶于三氯甲烷、甲醇，
易溶于二甲基亚砜;mp ＞ 300 ℃;HCl-Mg 粉反应
为阳性，FeCl3 试液显色为蓝色，氨气熏后黄色荧
光颜色加深。1H-NMＲ［300 MHz:DMSO-d6，TMS］
δ:13. 22 (1H，s，HO-5△) ，13. 09 (1H，s，HO-
5″△) (△表示 2 个归属可以互换) ;在 9 ～ 11 之间
有 3H，应为 3 个活泼氢，即为 3 个羟基取代，由
于溶剂中混有水而被交换掉。1H-NMＲ ［400 MHz:
DMSO-d6，TMS］ δ:6. 87 (1H， s，H-3) ，6. 21
(1H，d，J = 1. 4 Hz，H-6) ，6. 49 (1H，d，J = 1. 4
Hz，H-8) ，8. 03 (2H，d，J = 8. 7 Hz，H-2) ，7. 05
(2H，d，J = 8. 7 Hz，H-3) ，7. 05 (2H，d，J = 8. 7
Hz，H-5) ，8. 03 (2H，d，J = 8. 7 Hz，H-6) ，
13. 22 (5-OH) ，10. 79 (7-OH) ，6. 87 (1H，s，H-
3″) ，6. 73 (1H，s，H-8″) ，7. 96 (2H，d，J = 8. 7
Hz，H-2) ，6. 94 (2H，d，J = 8. 7 Hz，H-3) ，6. 94
(2H，d，J = 8. 7 Hz，H-5) ，7. 96 (2H，d，J = 8. 7
Hz，H-6) ，12. 90 (5-OH) ，10. 80 (7″-OH) ，
10. 38 (4-OH)。13 C-NMＲ［75 MHz，DMSO-d6］ δ:
164. 3 (C-2) ，103. 8 (C-3) ，181. 8 (C-4) ，160. 5
(C-5) ，99. 2 (C-6) ，163. 3 (C-7) ，94. 3 (C-8) ，
157. 5 (C-9) ，104. 1 (C-10) ，124. 4 (C-1) ，128. 7
(C-2) ，115. 4 (C-3) ，160. 8 (C-4) ，115. 4 (C-
5) ，128. 7 (C-6) ，163. 1 (C-2″) ，103. 1 (C-3″) ，
182. 3 (C-4″) ，151. 9 (C-5″) ，124. 8 (C-6″) ，158. 2
(C-7″) ，92. 3 (C-8″) ，154. 4 (C-9″) ，104. 3 (C-
10″) ，121. 1 (C-1) ，128. 7 (C-2) ，116. 3 (C-
3) ，161. 6 (C-4) ，115. 9 (C-5) ，128. 7 (C-
6) ，以上数据与文献 ［9］报道的扁柏双黄酮数
据一致，故鉴定化合物 2 为扁柏双黄酮 (hinokifla-
vone)。
化合物 3:黄色粉末，难溶于甲醇、三氯甲
烷，易溶于二甲基亚砜;mp ＞ 300 ℃;HCl-Mg
粉反应为阳性，FeCl3 试液显色为蓝色，氨气熏
后黄色荧光颜色加深。1H-NMＲ ［400 MHz，DM-
SO-d6］δ:13. 24 (1H，s，HO-5″) ，13. 0 (1H，s，
HO-5) ，7. 89 (2H，d，J = 7. 8 Hz，H-2″，H-6) ，
7. 91 (1H，d，J = 8. 4 Hz，H-6) ，7. 82 (1H，s，
H-2) ，7. 01 (1H，d，J = 8. 4 Hz，H-5) ，6. 95
(2H，d，J = 8. 4 Hz，H-3，H-5) ，6. 83 (1H，
s，H-3) ，6. 78 (1H，s，H-3″) ，6. 62 (1H，s，H-
8″) ，6. 48 (1H， d， J = 3. 0 Hz，H-8) ，6. 19
(1H，d，J = 3. 0 Hz，H-6)。13 C-NMＲ ［75 MHz，
DMSO-d6］ δ: 182. 3 (C-4″) ，182. 0 (C-4) ，
167. 6 (C-2，C-2″) ，165. 3 (C-7) ，164. 8 (C-7″) ，
163. 4 (C-5) ，162. 1 (C-4) ，161. 6 (C-5″) ，
159. 8 (C-4) ，158. 0 (C-9) ，157. 3 (C-9″) ，
131. 9 (C-6) ，129. 3 (C-2，6) ，128. 9 (C-
2) ，123. 5 (C-1) ，122. 2 (C-1) ，119. 4 (C-
3) ，117. 7 (C-5) ，116. 7 (C-3，5) ，104. 3
(C-10， 10″) ，103. 1 (C-6″) ，102. 8 (C-3) ，
102. 4 (C-3″) ，99. 5 (C-6) ，95. 9 (C-8) ，94. 6
(C-8″)。以上数据与文献 ［10］报道的罗波斯塔
黄酮数据一致，故鉴定化合物 3 为罗波斯塔黄酮
(robustaflavone)。
化合物 4:浅黄色粉末，UV365 nm 下呈黄色
荧光，254 nm 下呈暗斑，10%硫酸乙醇溶液显色
呈浅黄色，碘熏显黄色，难溶于三氯甲烷、甲醇，
热溶于丙酮，易溶于 DMSO。1H-NMＲ ［400MHz，
DMSO-d6］δ:6. 95 (1H，s，H-3) ，6. 33 (1H，d，
J = 1. 7 Hz，H-6) ，6. 89 (1H，d，J = 1. 7 Hz，H-8) ，
8. 01 (2H，d，J = 8. 4 Hz，H-2) ，6. 94 (2H，d，
J = 8. 4 Hz，H-3) ，6. 96 (2H，d，J = 8. 4 Hz，H-
5) ，8. 01 (2H，d，J = 8. 4 Hz，H-6) ，13. 14 (5-
OH) ，10. 81 (7-OH) ，7. 13 (1H，s，H-3″) ，6. 45
(1H，s，H-8″) ，8. 05 (2H，d，J = 8. 4 Hz，H-2) ，
7. 03 (2H，d，J = 8. 4 Hz，H-3) ，7. 03 (2H，d，
J = 8. 4 Hz，H-5) ，8. 02 (2H，d，J = 8. 4 Hz，H-
6) ，12. 89 (5″-OH) ，3. 89 (7″-OCH3) ，10. 45 (4-
OH)。13C-NMＲ［75 MHz，(CD3)2SO］δ:164. 6 (C-
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2) ，103. 8 (C-3) ，181. 8 (C-4) ，161. 5 (C-5) ，
99. 2 (C-6) ，164. 3 (C-7) ，94. 3 (C-8) ，157. 5 (C-
9) ，104. 1 (C-10) ，124. 4 (C-1) ，128. 7 (C-2) ，
115. 4 (C-3) ，160. 8 (C-4) ，115. 4 (C-5) ，
128. 7 (C-6) ，163. 1 (C-2″) ，103. 1 (C-3″) ，
182. 3 (C-4″) ，151. 9 (C-5″) ，124. 8 (C-6″) ，
158. 2 (C-7″) ，92. 3 (C-8″) ，154. 4 (C-9″) ，
104. 3 (C-10″) ，121. 1 (C-1) ，128. 7 (C-2) ，
116. 3 (C-3) ，161. 6 (C-4) ，115. 9 (C-5) ，
128. 7 (C-6) ，56. 8 (7″-OCH3) ，以上数据与文献
［11］中异柳杉双黄酮 (isocryptomerin)数据对照
基本一致，故鉴定化合物 4 为异柳杉双黄酮 (iso-
cryptomerin )。
化合物 5:无色粉末，难溶于甲醇、三氯甲
烷。1H-NMＲ ［400 MHz，CD3OD］ δ:3. 57 (1H，
ddd，J = 9. 0，9. 0，4. 0 Hz，H-2) ，3. 41 (1H，ddd，
J = 9. 0，9. 0，9. 0 Hz，H-2) ，2. 41 (1H，ddd，J =
13. 5，9. 0，4. 0 Hz，H-3) ，2. 16 (1H，ddd，J =
13. 5 Hz，J = 9. 0 Hz，J = 9. 0 Hz，H-3) ，7. 56
(1H，m，H-4) ，7. 60 (1H，m，H-5) ，7. 57 (1H，
m，H-6) ，7. 68 (1H，d，J = 7. 5 Hz，H-7) ，5. 75
(1H，s，H-8) ，2. 89 (2H，m，H-9，H-9) ，6. 33
(1H，brt，J = 7. 5 Hz，H-10) ，1. 90 (3H，brs，H-
11，H-12，H-13) ，3. 09 (3H，s，N1-CH3) ，3. 34
(3H，s，N8-CH3) ，2. 99 (3H，s，N8-CH3)。
13 C-
NMＲ［75 MHz，CD3SOCD3］ δ:56. 0 (C-2) ，38. 9
(C-3) ，57. 6 (C-3a) ，126. 4 (C-4) ，140. 2 (C-
4a) ，132. 3 (C-5) ，131. 2 (C-6) ，120. 6 (C-7) ，
146. 3 (C-7a) ，123. 9 (C-8a) ，36. 3 (C-9) ，131. 8
(C-10) ，138. 5 (C-11) ，13. 9 (C-12) ，174. 8 (C-
13) ，39. 3 (N1-CH3) ，53. 1 (N8-CH3) ，以上数据与
文献 ［12］报道的卷柏酸数据一致，故鉴定化合
物 5 为卷柏酸 (selaginellic acid)。
化合物 6:无色粉末，1H-NMＲ ［400 MHz，
CD3SOCD3，TMS］δ:7. 19 (2H，d，J = 9 Hz，H-3，
H-5) ，6. 98 (2H，d，J = 9 Hz，H-2，H-6) ，5. 39
(1H，d，J = l Hz，H-l) ，5. 04 (1H，D2Oexch．，
OH-2) ，4. 88 (1H， D2Oexch．， OH-4) ，4. 75
(1H，D2Oexch．，OH-3) ，3. 74 (1H，dd，J = 1. 5
Hz，J = l Hz，H-2) ，3. 69 (1H，dd，J = 9 Hz，J =
1. 5 Hz，H-3) ，3. 52 (1H，dq，J = 9 Hz，J = 6 Hz，
H-5) ，3. 24 (1H，t，J = 9 Hz，H-4) ，2. 68 (2H，
t，J = 8 Hz，CH2-7) ，2. 45 (2H，t，J = 8 Hz，CH2-
8) ，2. 22 (6H，s，NMe2，) ，1. 14 (3H，d，J = 6 Hz，
CH3-6)。
13C-NMＲ［75 MHz，CD3SOCD3］δ:154. 2
(C-1) ，116. 2 (C-2) ，129. 3 (C-3) ，133. 6 (C-4) ，
129. 3 (C-5) ，116. 2 (C-6) ，32. 2 (C-7) ，60. 7 (C-
8) ，44. 8 (N-CH3)2，98. 7 (C-1) ，69. 8 (C-2) ，
70. 2 (C-3) ，71. 3 (C-4) ，69. 2 (C-5) ，17. 7 (C-
6) ，以上数据与文献 ［13］报道的麦芽碱-O-α-L-
吡喃鼠李糖苷数据一致，故鉴定化合物 6 为麦芽
碱-O-α-L 吡喃鼠李糖苷 (horde-nine-O-α-L-rham-
nopyranoside)。
化合物 7:无色粉末，1H-NMＲ ［400 MHz，
CD3SOCD3，TMS］δ:7. 68 (1H，d，J = 16Hz，H-
7) ，7. 60 (2H，m，H-2，H-6) ，7. 39 (3H，m，
H-3″，H-4，H-5″) ，7. 00 (2H，d，J = 9 Hz，H-3，
H-5) ，6. 88 (2H，d，J = 9 Hz，H-2，H-6) ，6. 65
(1H，d，J = 16 Hz，H-8″) ，5. 25 (1H，d，J = 1 Hz，
H-1) ，5. 16，5. 05，4. 87 (3H，D2Oexch．，3OH) ，
4. 54 (1H，d，J = 7 Hz，H-l″) ，4. 45 (1H，dd，J =
12，2 Hz，H-6″a) ，4. 24 (1H，dd，J = 12，7 Hz，H-
6″b) ，4. 02 (1H，dd，J = 1. 5，1 Hz，H-2) ，3. 76
(1H，dd，J = 9，1. 5 Hz，H-3) ，3. 54 (3H，m，H-
4，H-5，H-3″) ，3. 36 (2H，D2Oexch．，2OH) ，
3. 21 (3H，m，H-2，H-4，H-5) ，2. 62 (4H，m，
CH2-7，CH2-8) ，2. 36 (6H， s，N-CH3) ，1. 11
(3H，d，J = 6 Hz，CH3-6)。
13 C-NMＲ ［75 MHz，
(CD3)2CO］δ:154. 3 (C-1) ，116. 2 (C-2) ，129. 3
(C-3) ，133. 6 (C-4) ，129. 3 (C-5) ，116. 2 (C-6) ，
32. 2 (C-7) ，60. 8 (C-8) ，44. 8 (N-CH3)2，98. 7
(C-1) ，69. 8 (C-2) ，70. 2 (C-3) ，71. 4 (C-4) ，
69. 2 (C-5) ，17. 6 (C-6) ，104. 6 (C-1″) ，72. 9
(C-2″) ，76. 1 (C-3″) ，70. 3 (C-4″) ，73. 5 (C-5″) ，
63. 9 (C-6″) ，133. 7 (C-1) ，128. 1 (C-2) ，128. 7
(C-3) ，130. 2 (C-4) ，128. 7 (C-5) ，128. 0 (C-
6) ，144. 3 (C-7) ，117. 8 (C-8) ，165. 8 (C-
9) ，以上数据与文献 ［13］报道数据一致，故鉴
定化合物 7 为麦芽碱-O- ［(6″-O-反式肉桂酰基)-
4-O-β-D-吡喃葡萄糖基-α-L-吡喃鼠李糖苷］ (hor-
denine-O- ［(6″-O-trans-cinnamoyl)-4-O-β-D-gluco-
pyranosyl-α-L-rhamnopyranoside)。
3. 2 MTT实验结果 本实验测定了各个化合物对乳
腺癌细胞 MDA-MB-231 的细胞毒性，结果如表 1 所
示，化合物 1 ～ 4在 25 μmol /L和 50 μmol /L均能抑
制 MDA-MB-231细胞的增殖，显示出一定的细胞毒
性，而化合物 5 ～ 7 在 25 μmol /L 和50 μmol /L的浓
度作用下没有显示出任何细胞毒作用。
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表 1 各个化合物对MDA-MB-231 的细胞毒性
Tab. 1 Cytotoxicity of compounds 1 ～ 7 on MDA-MB-
231 cells
化合物
25 μmol /L
OD值 抑制率 /%
50 μmol /L
OD值 抑制率 /%
1 0. 403 ± 0. 021 52. 1 0. 121 ± 0. 029 80. 4
2 0. 337 ± 0. 066 57. 3 0. 073 ± 0. 147 92. 5
3 0. 495 ± 0. 043 46. 8 0. 116 ± 0. 038 88. 4
4 0. 422 ± 0. 038 49. 3 0. 132 ± 0. 031 79. 8
5 0. 913 ± 0. 063 － 8. 90 0. 787 ± 0. 053 3. 40
6 0. 902 ± 0. 037 － 8. 61 0. 761 ± 0. 040 6. 00
7 0. 923 ± 0. 028 － 9. 19 0. 783 ± 0. 059 3. 77
正常细胞 0. 898 ± 0. 035
3. 3 伤口愈合实验结果 划痕实验 (又称伤口愈
合实验)是检测细胞迁移的一种方法。在没有化
诱因子浓度梯度的情况下，细胞可以感受到 “伤
口”，并通过重组微管组织中心沿垂直于伤口划痕
的方向运动。本实验选用乳腺癌 MDA-MB-231 肿
瘤细胞系，采用以伤口愈合实验为评价手段，测定
生物碱类化合物 6 和 7 在非细胞毒剂量下对乳腺癌
MDA-MB-231 细胞迁移的影响，如图 1 所示，化合
物 6、7 及阳性对照药 LY294002 的 IC50分别为
0. 746 μmol /L、0. 466 μmol /L 和 1. 215 μmol /L，
结果显示化合物 6 和 7 相比阳性对照药 LY294002
能够更强地抑制 MDA-MB-231 细胞的迁移。
注:与空白组比，* P ＜ 0. 05，＊＊P ＜ 0. 01
图 1 化合物 6 和 7 抑制MDA-MB-231 的迁移
Fig. 1 Compounds 6 and 7 inhibit the migration of MDA-MB-231 cells
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4 讨论
本实验从卷柏石油醚和乙酸乙酯极性部位提取
分离得到 7 个化合物，其中化合物 5 ～ 7 为首次从
该植物中分离得到。本实验利用乳腺癌 MDA-MB-
231 细胞为体外模型，测定 7 个化合物对MDA-MB-
231 细胞增殖的影响，结果显示化合物 1 ～ 4 能够
剂量依存性地抑制 MDA-MB-231 细胞的增殖。进
一步采用划痕实验，测定化合物 6 和 7 在非细胞毒
剂量下对乳腺癌 MDA-MB-231 细胞迁移的影响，
结果显示化合物 6 和 7 与阳性对照药 LY294002 相
比能够更强地抑制 MDA-MB-231 细胞的迁移，显
示了明确的体外抗肿瘤转移作用。以上研究为中药
卷柏的现代应用提供了实验依据。
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飞扬草的化学成分研究 (Ⅱ)
王 莉， 李 盈， 杨梦莹， 汤荣磊， 臧 贞， 赵 勇*
(云南师范大学 化学化工学院，云南 昆明 650500)
收稿日期:2013-08-12
基金项目:国家自然科学基金项目 (21162044);云南省自然科学基金项目 (2009CD051) ;云南省后备人才项目 (2010CI040)
作者简介:王 莉 (1990—)，女，硕士生，研究方向:天然药物化学。Tel:18314537193，E-mail:jasminewangli@ 126． com
通信作者:赵 勇 (1967—)，男，教授，硕士生导师，研究方向:天然药物化学。Tel:(0871)65941087，E-mail:zhaooy@ 126． com
摘要:目的 研究飞扬草 Euphorbia hirta地上部分 70%丙酮提取物的化学成分。方法 飞扬草地上部分 70%丙酮提取
物利用正反相硅胶和 Sephadex LH-20 等多种色谱方法交替使用进行分离纯化，利用 MS、NMＲ 等现代光谱技术确定化
合物结构。结果 从飞扬草地上部分的 70%丙酮提取物中共分离得到 12 个化合物，分别鉴定为:β-谷甾醇 (1)、蒲
公英赛酮 (2)、(23E)-25-甲氧基环木菠萝烯-3-醇 (3)、23-环木菠萝烯-3β，25-二醇 (4)、环阿尔廷-25-烯-3β，24ξ-
二醇 (5)、羊毛甾醇 (6)、山柰酚-3-鼠李糖苷 (7)、邻苯二甲酸二丁酯 (8)、邻苯二甲酸二异丁酯 (9)、黑麦草内酯
(10)、3，4-二羟基苯甲酸 (11)、没食子酸 (12)。结论 化合物 3 ～ 5，10 ～ 11 为首次从该植物中分离得到。
关键词:大戟科;飞扬草;化学成分;三萜
中图分类号:Ｒ284. 1 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2014)08-1687-06
doi:10. 3969 / j． issn． 1001-1528. 2014. 08. 027
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