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生物技术通报
BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2013年第10期
自 1981 年美国发现首例由 HIV-1 型引发的艾滋
病病例以来，至 2010 年为止，全球有近 6 500 万人
感染了艾滋病［1］。艾滋病已成为危害全球的一种严
重传染性疾病［2］，但是目前尚无有效的治疗方法。
HIV-1 的包膜蛋白 gp41 包含大量特异性的抗
原表位，是一种良好的早期诊断 HIV 感染的抗原
标志物［3］。中和性抗体 2F5 和 4E10 识别的表位均
位于约 30 个氨基酸残基的 gp41 的胞外近膜区域
（membrane proximal external region，MPER），此区域
在病毒和宿主细胞膜的融合中起到决定性作用［4］。
收稿日期 ： 2013-02-04
基金项目 ：教育部新世纪优秀人才计划（NCET-09-0625）
作者简介 ：刘秀侠，女，硕士研究生，研究方向 ：分子病毒学 ；E-mail ：liuxiuxia0208@126.com
通讯作者 ：陈红英，教授，研究方向 ：分子病毒学 ；E-mail ：chenhy@nwsuaf.edu.cn
单链抗体 2F5 和 4E10 的原核表达、纯化和鉴定
刘秀侠  杨雄  陈红英
（西北农林科技大学生命科学学院，杨陵 712100）
摘 要 ： 为深入研究 2F5 和 4E10 抗体，构建了特异性识别 HIV-1 病毒 MPER 区域的 2F5 和 4E10 单链抗体的重组质粒，进
行了融合蛋白的表达、纯化及鉴定。利用重叠 PCR 扩增及基因重组技术，获得 2F5-scFv 和 4E10-scFv 基因，将其插入原核表达载
体 pET-28a（+）上，获得表达质粒。转入大肠杆菌 BL21（DE3）及 Rosetta-gami2（DE3）pLysS 中，IPTG 诱导表达，SDS-PAGE 检
测发现，2F5-scFv 和 4E10-scFv 在两种表达菌中均以包涵体形式存在，重组蛋白分子量分别约为 27 kD、29 kD。变性条件下，利
用镍离子螯合层析方法对包涵体蛋白进行纯化，经复性后获得可溶性单链抗体。ELISA 检测表明，制备的单链抗体与原核和真核
表达的 MPER 抗原都有特异性结合活性。
关键词 ： HIV-1 gp41 MPER 2F5 4E10 单链抗体
The Prokaryotic Expression，Purification and Identification of Single
Chain Antibodies 2F5 and 4E10
Liu Xiuxia Yang Xiong Chen Hongying
（College of Life Sciences，Northwest A&F University，Yangling 712100）
Abstract:  For further study of 2F5 and 4E10 antibody, 2F5-scFv and 4E10-scFv were expressed and purified from E.coli cells. The 2F5-
scFv and 4E10-scFv genes were amplified by overlapping PCR. Recombinant vectors pET28a/2F5-scFv and pET28a/4E1-scFv were constructed
and transformed into E. coli BL21（DE3）and Rosetta-gami2（DE3）pLysS, and protein expression was induced with IPTG. 2F5-scFv and
4E10-scFv were expressed, with the molecular weight of 27 kD and 29 kD, respectively. The formed inclusion bodies in E. coli. Denatured single
chain antibody proteins, which were purified by nickel chelating chromatography and refolded by dialysis, showed specific reactivates to both
MPER antigens prepared from prokaryotic and eukaryotic expression systems.
Key words:  HIV-1 gp41 MPER 2F5 4E10 Single-chain antibody
其中 2F5 识别的 gp41 C 末端 662 到 667 位含色氨酸
区域（ELDKWA）［5］，4E10 识别 gp41 N 末端 671 到
676 位 的 螺 旋 肽 结 构（NWFDIT）［6］。2F5 和 4E10
这两个抗体是具有广谱中和能力的中和性抗体［7，8］，
对不同假病毒、重组病毒的中和试验表明，4E10 和
2F5 可以中和大多数病毒［9-11］。2F5 和 4E10 单链抗
体（single-chain variable fragment of an antibody，sc-
Fv）有较强的 HIV 中和活性，4E10 Fab 比单链抗体
及 IgG 的中和活性弱，后两者的中和活性相当［12］。
本研究拟用原核细胞表达 2F5 和 4E10 的单链
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2013年第10期178
抗体，用 ELISA 方法检测 2F5 和 4E10 单链抗体与
包含 MPER 表位的重组蛋白的结合活性，从而为深
入研究 2F5 和 4E10 抗体及其结合表位打下基础。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 菌 株 和 质 粒 原 核 表 达 载 体 pET28a（+）、
pGEX-2T、大肠杆菌菌株 BL21（DE3）、Top10、OD
（2F5）-Fc 蛋白均由西北农林科技大学生命科学学
院 分 子 病 毒 学 实 验 室 保 存 ；Rosetta-gami2（DE3）
pLysS 菌株购自 Novagen 公司。
1.1.2 主 要 试 剂 Pfu 高 保 真 DNA 聚 合 酶 购 自
Fermentas 公司 ；限制性内切酶 Nco I、Xho I、 BamH
I、Esp3 I、和 Taq DNA Polymerase 购自 Promga 公司；
dNTPs、T4 DNA 连接酶为 TaKaRa 公司产品 ；DNA
Marker 购自 Biomed 公司 ；凝胶回收试剂盒、PCR 产
物纯化试剂盒和质粒 DNA 小量抽提试剂盒为生工生
物工程（上海）有限公司 ；HRP 标记的山羊抗小鼠
IgG、抗 His 标签鼠单克隆抗体、HRP 标记的山羊抗
人 IgG 为康为世纪公司产品。
1.2 方法
1.2.1 质粒的构建 公司合成的 78 bp 的 MPER-R
与 MPER-F 按照 1∶1 体积比混合，置于 50-60℃变
性 5 min，缓慢退火至室温 ；载体 pGEX-2T 用 BamH
I 单酶切，80℃热灭活处理 20 min。两端含 BamH I
酶切位点的外源片段 MPER 与用 BamH I 单酶切得
到的载体 pGEX-2T（图 1）在 16℃过夜连接。
抗体 2F5 和 4E10 重链和轻链的可变区基因由
本实验室保存。以保存的基因为模板，以 2F5-L（R）、
Esp3I 2F5-L（F） 和 G4S2F5-L（R） 为 引 物，PCR
扩 增 2F5-L 的 可 变 区 基 因 ；以 G4S2F5-H（F） 和
XhoI2F5- H（R）为引物，PCR 扩增 2F5-H 的可变区
基因 ；以扩增出的 2F5-L、2F5-H 为模板，以 Esp3 I
2F5-L（F）和 Xho I 2F5-H（R）为引物，重叠 PCR
扩增编码单链抗体 2F5 的基因序列。
以 G4S4E10L-F 和 XhoI4E10L-R 为 引 物，PCR
扩 增 4E10-L 的 可 变 区 基 因 ；以 Esp3I4E10H-F 和
G4SvrcH-R 为 引 物，PCR 扩 增 4E10-H 的 可 变 区 基
因 ；以 扩 增 出 的 4E10-H、4E10-L 为 模 板，Esp3I
4E10H-F 和 XhoI4E10L-R 为引物，重叠 PCR 扩增编
码单链抗体 4E10 的基因序列。
用 Xho I 和 Esp3 I 双酶切纯化的重叠 PCR 的产
物，酶切后 2F5 两端有 Xho I 和 Nco I 酶切位点，而
4E10 只有 Xho I 酶切位点 ；用 Nco I 和 Xho I 酶切载
体 pET28a（+）；电泳，切胶回收 ；酶切载体 pET-
28a（+）与 2F5 和 4E10 的外源片段 16℃过夜连接。
连接产物转化大肠杆菌 TOP10 感受态细胞，菌
落 PCR 筛选阳性克隆，摇菌，提取质粒，酶切鉴定，
测序（上海生工），测序验证正确的质粒分别命名
为 pET28a/2F5-scFv、pET28a/4E10-scFv 和 pGEX-2T
（MPER）。
1.2.2 重组蛋白的表达及可溶性检测 将重组质粒
pET28a/2F5-scFv 与 pET28a/4E10-scFv（ 图 2） 分 别
转 化 BL21（DE3） 和 Rosetta-gami2（DE3）pLysS
感受态细胞，及重组质粒 pGEX-2T（MPER）转化
BL21（DE3）感受态细胞，转化成功后挑取一单菌
落接种于 5 mL 含相应抗生素的 LB 液体培养基中，
37℃过夜摇菌 ；次日，以 1∶50 的比例接种到新的
100 mL LB 培养基中 37℃培养，待菌液 OD 值为 0.6
时，加入 IPTG 至终浓度为 0.5 mmol/L，同时设置未
加 IPTG 的对照。诱导 4 h，6 000 r/min 4℃离心 10
min，弃上清，用 10 mL PBS 悬浮沉淀，超声波破碎
菌体 15 min，10 000 r/min 离心 20 min，收集上清和
GST
BamH I
4 958 bp
pGEX-2T
5 036 bp
pGEX-2TMPER
Amp
Amp
lacI
lacI
BamH I
BamH I MPER
BamH I
GST
ӂ㺕䝽ሩ
ཆⓀ⡷⇥MPER78 bp
MPER-R
MPER-F
图 1 pGEX-2T（MPER）重组质粒的构建过程
2013年第10期 179刘秀侠等 ：单链抗体 2F5 和 4E10 的原核表达、纯化和鉴定
沉淀，分别加入等体积的 2× SDS 样品缓冲液，煮
沸裂解 5 min，10% SDS-PAGE 检测目的蛋白的表达
情况。
1.2.3 2F5-scFv 与 4E10-scFv 蛋白的纯化与复性 将
超声波破碎菌体得到的沉淀重悬于包涵体结合缓冲
液中（pH7.9，20 mmol/L Tris-HCl，5 mmol/L 咪唑，0.5
mol/L NaCl，8 mol/L 尿素），冰水浴保持 1 h，使包
涵体溶解 ；离心 10 000 r/min，4℃ 20 min，用孔径
为 0.45 μm 的滤膜过滤蛋白上清液 ；将蛋白溶液负
载上柱，流速为 10 倍柱体积 / 小时，使用 15 倍柱
体积的包涵体结合缓冲液冲洗柱子 ；使用 5 倍体积
的包涵体洗脱缓冲液（pH7.9，20 mmol/L Tris-HCl，0.5
mol/L NaCl，8 mol/L 尿素，咪唑）按 50、100、200、
300、400、500 mmol/L 咪唑洗脱蛋白 ；4℃离心纯化
好的蛋白 10 000 r/min 20 min，上清转入透析袋，外
侧 透 析 液（pH9.0，20 mmol/L Tris-HCl，50 mmol/L
NaCl，尿素）按 6、4、2、0 mol/L 尿素连续缓慢透析，
每个梯度 8-10 h，10 000 r/min 离心 20 min，收集上
清和沉淀，10% SDS-PAGE 检测。
1.2.4 ELISA 检验 2F5-scFv 和 4E10-scFv 的活性
用碳酸盐缓冲液（pH9.6）1/50 稀释 GST-MPER 上清
液，每孔 50 μL，4℃过夜包被。0.05%PBST 洗涤 5
表 1 引物的名称和序列
引物名称 引物序列（5-3）
MPER-F GATCCGAGAAGAACGAGAAGGAACTCCTGGAACTGGACAAGTGGCCAGCCTGTGGAACTGGTTCGAGCATCACCAACG
MPER-R GATCCGTTGGTGATGTCGAACCAGTTCCACAGGCTGGCCCACTTGTCCAGTTCCAGGAGTTCCTTCTCGTTCTTCCTG
Esp3I2F5-L（F） TAATCGTCTCCCATGGCCCTGCAGCTCACACAGAG
2F5-L（R） CCACCAGATGGGCGGCCACGGTCCTCACGTCCAC
G4S2F5-L（R） GGCTCCCGCCACCTCCAGAGCCTCCGCCACCAGATGGTGCGGCCAC
G4S2F5-H（F） GGAGGTGGCGGGAGCGGCGGTGGAGGGTCTAGGATCACCCTGAAGGAG
XhoI2F5-H（R） TTGTCTCGAGCTTGGTGCTTGTGCTAGAG
G4S4E10L-F GGAGGTGGCGGGAGCGGCGGTGGAGGGTCTGAGATCGTGCTGACCCAG
XhoI4E10L-R TTGTCTCGAGGGTCCTCTTCACCTCCAC
Esp3I4E10H-F TTGTCGTCTCCCATGCAGGTGCAGCTGGTGCAG
G4SvrcH-R GCTCCCGCCACCTCCAGAGCCTCCGCCACCAGAGGCGCTGCTCACGATC
2F5-L 2F5-H
Kan
His tag
Xho I
4E10-H 4E10-LNco I
pET28a+
5 231 bp lacI
Vrc01Esp31-HF
Vrc01Esp31-HF
G4SvreH-R
4E10-H 䟽ਐPCR 4E10-L
4E10720 bp
Xho IоNco IXho IоNco I
G4S4E10L-F XhoI4E10L-R
XhoI4E10L-R
2F5-H
Esp312F5-L)
Esp312F5-LF Xho12F5-H5
2F5822 bp
His tag Xho I
1
2F5
Nco I
lacI
Kan
pET28a/2F5-scFv
6 053 bp
His tag
Xho I
1
4E10
lacI
Kan
pET28a/2F5-scFv
5 951 bp
pBR322 origin
䟽ਐ2F5-L
2F5-LR
PCR
G4S2F5-LR G4S2F5-HFG4S2F5-HR
图 2 pET28a/2F5-scFv 与 pET28a/4E10-scFv 重组质粒的构建过程
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2013年第10期180
次，5% 脱脂奶粉封闭，每孔 200 μL，37℃封闭 1.5 h；
0.05% PBST 洗 5 次，2F5-scFv 和 4E10-scFv 作 为 一
抗梯度稀释，37℃孵育 1.5 h ；0.05% PBST 洗 5 次，
加 入 抗 His 标 签 鼠 单 克 隆 抗 体（1∶1 000 稀 释 ），
37 ℃ 孵 育 1 h ；0.05% PBST 洗 5 次， 加 HRP 标 记
的山羊抗小鼠 IgG（1∶2 000 稀释），每孔 50 μL，
37℃孵育 1 h ；0.05% PBST 洗 5 次，加入底物显色
液（TMB），每孔 50 μL，37℃孵育 15 min ；加入 50
μL 终止液（2 mol/L H2SO4）终止反应，用酶标仪检
测 450 nm 的光吸收值。
2F5-scFv 与 OD（2F5）-Fc 的 ELISA 试 验 是 用
碳酸盐缓冲液 1/10 稀释原核表达纯化后的 2F5-scFv
包被微孔板，真核表达的 OD（2F5）-Fc 蛋白［13］作
为抗原，系列梯度稀释后与包被的单链抗体孵育，
HRP 标记的山羊抗人 IgG（1∶1 000 稀释）检测抗
原蛋白上的 Fc 标签，方法同上。
2 结果
2.1 重组质粒的构建及酶切鉴定
经重叠 PCR 得到约 820 bp 的 2F5-scFv 基因序列；
Nco I、Xho I 双酶切重组质粒得到约 800 bp 的条带
（图 3），说明 2F5-scFv 外源片段已经插入载体，测
序结果也进一步证实重组质粒 pET-28a/2F5-scFv 构
建成功。
5000
bp
M1 2
800
1 ：质粒 pET-28a/2F5-scFv ；2 ：质粒 pET-28a/2F5-scFv 的 Xho I 和
Nco I 双酶切 ；M ：DNA Marker
图 3 pET-28a/2F5-scFv 重组质粒的构建
经重叠 PCR 得到约 720 bp 的 4E10-scFv 基因序
列 ；重组质粒 pET-28a/4E10-scFv 和空质粒 pET-28a
（+）分别经 Xho I 单酶切，比较酶切产物片段大小可
见重组质粒的酶切产物片段比空载体单酶切片段大
（图 4），说明外源片段已经插入载体，测序结果也
进一步证实重组质粒 pET-28a/4E10-scFv 构建成功。
5000
3000
bp
M 1 2
1 ：pET-28a/4E10-scFv 质粒的 Xho I 单酶切 ；2 ：空载体 pET28a（+）
的 Xho I 单酶切 ；M ：DNA Marker
图 4 pET-28a/4E10-scFv 重组质粒的酶切鉴定
2.2 单链抗体2F5-scFv与4E10-scFv的表达、纯化
及复性
IPTG 诱 导 重 组 蛋 白 2F5-scFv 和 4E10-scFv 在
BL21（DE3）宿主菌中表达，与不加 IPTG 诱导的
对照组相比较，可知目的蛋白在两种宿主细胞中都
得到了表达。同时，融合蛋白均以包涵体形式存在
于沉淀中。改用 Rosetta-gami2（DE3）pLysS 菌表达
2F5-scFv 和 4E10-scFv，发现融合蛋白仍旧以包涵体
形式存在于沉淀中。对包涵体进行尿素变性处理，
利用镍离子亲和层析的方法纯化融合蛋白，纯化的
蛋白经 SDS-PAGE 电泳分析（图 5），在相对分子量
约 27、29 kD 处 2F5 和 4E10 单链抗体可见单一条带。
对单链抗体蛋白进行透析复性，复性所得产物
有部分存在于上清中（图 6）。
2.3 抗原GST-MPER的表达
在 BL21（DE3）细胞中加 IPTG 诱导重组蛋白
GST-MPER 表达，与不加 IPTG 诱导的对照相比较，
可知目的蛋白在宿主细胞中都得到了表达 ；与空载
体对照相比较，目的蛋白比空载体中表达的 GST 蛋
白偏大。电泳结果（图 7）显示表达的 GST-MPER
分子量大小正确，而且存在于上清中。
2.4 ELISA检测单链抗体2F5-scFv和4E10-scFv
采用 ELISA 法检测纯化后的单链抗体与抗原的
特异性结合活性，误差线代表标准误差，结果如图
8 所示。用 2F5-scFv 包被 ELISA 板，检测 2F5-scFv
与真核表达的抗原 OD（2F5）-Fc 的结合能力，其
阴性对照不加抗原。结果显示，2F5-scFv 与抗原 OD
（2F5）-Fc 有特异性结合活性（图 8-A）。
用 GST-MPER 抗 原 包 被 ELISA 板， 检 测 2F5-
scFv 和 4E10-scFv 与原核表达的 MPER 抗原的结合
2013年第10期 181刘秀侠等 ：单链抗体 2F5 和 4E10 的原核表达、纯化和鉴定
能力，其阴性对照不加 2F5-scFv 和 4E10-scFv。结
果显示，两种单链抗体与该抗原都有特异性结合活
性（图 8-B、C）。
3 讨论
1989 年，Horton 等［14］ 成 功 建 立 了 重 叠 延 伸
PCR 技术，此技术使外源蛋白基因的克隆和拼接可
以快速简单的得以实现［15］。本研究采用重叠 PCR
技术，通过两次 PCR 扩增，高效、快捷、经济地扩
增出编码 2F5 和 4E10 单链抗体的 DNA 序列。
本研究选用具有蛋白表达量高、易纯化等优点
的大肠杆菌表达系统。2F5 和 4E10 单链抗体在原
核表达菌 BL21（DE3）中以包涵体形式存在，原因
可能在于二硫键的形成是有困难的。选用 Rosetta-
2F5-scFv
1 2 3 4 5 6 7 8 9 M
25.0
35.0
kD
A 1 2 3 4 5 6 7 8 9 M
25.0
35.0
kD
4E10-scFv
B
A ：2F5-scFv 在 BL21（DE3）中诱导表达及蛋白纯化 ；B ：4E10-scFv 在 BL21（DE3）中诱导表达及蛋白纯化 ；1 ：IPTG 未诱导的全菌体破碎后上
清 ；2 ：IPTG 诱导的全菌体破碎后上清 ；3 ：IPTG 未诱导的全菌体破碎后沉淀 ；4 ：IPTG 诱导的全菌体破碎后沉淀 ；5 ：8 mol/L 尿素溶解 ；6 ：50
mmol/L 咪唑洗脱 ；7 ：100 mmol/L 咪唑洗脱 ；8 ：200 mmol/L 咪唑洗脱 ；9 ：500 mmol/L 咪唑洗脱 ；M ：蛋白质 Marker
图 5 重组蛋白诱导表达的可溶性分析与蛋白纯化
35.0
25.0
kD
M 1 2 3 4
M ：蛋白质 Marker ；1.2F5-scFv 复性后上清 ；2 ：2F5-scFv 复性后沉淀 ；3 ：
4E10-scFv 复性后上清 ；4 ：4E10-scFv 复性后沉淀
图 6 2F5-scFv 和 4E10-scFv 的复性后 SDS-PAGE
36.0
22.0 GST-MPER
GST
kD
M 1 2 3 4 5 6 7
M ：蛋白质 Marker ；1 ：IPTG 诱导的 pGEX-2T 空载体全菌体 ；2 ：IPTG
未诱导的 pGEX-2T（MPER）全菌体 ；3 ：IPTG 诱导的 pGEX-2T（MP-
ER）全菌体 ；4 ：IPTG 未诱导的全菌体破碎后上清 ；5 ：IPTG 诱导的全
菌体破碎后诱导上清 ；6 ：IPTG 未诱导的全菌体破碎后沉淀 ；7 ：IPTG
诱导的全菌体破碎后沉淀
图 7 GST-MPER 诱导表达的可溶性分析
0.45
A
B
C
OD2F5-Fc䱤ᙗሩ➗
0.35
0.25
0.15
0.10
1/4 1/8 1/16ᣇ৏OD2F5-FcⲴ㌫ࡇởᓖ〰䟺
੨ݹ
ᓖ٬
OD
45
0n
m

1/32 1/64
4 2 1
2F5-scFVⲴ㌫ࡇởᓖ〰䟺μg/mL0.5 0.25
0.20
0.30
0.05
0
0.25
0.15
0.10
੨ݹ
ᓖ٬
OD
45
0n
m

0.20
0.30
0.05
0
2 1 0.5
4E10-scFv㌫ࡇởᓖ〰䟺μg/mL0.25 0.125
0.25
0.15
0.10
੨ݹ
ᓖ٬
OD
45
0n
m

0.20
0.30
0.05
0
0.40
2F5-scFv䱤ᙗሩ➗
4E10-scFv䱤ᙗሩ➗
A ：2F5-scFv 和 OD（2F5）-Fc 蛋 白 的 ELISA 反 应 ；B ：2F5-scFv 与 GST-
MPER 抗原的 ELISA 反应 ；C ：4E10-scFv 与 GST-MPER 抗原的 ELISA 反应
图 8 ELISA 法测定 2F5-scFv 和 4E10-scFv 的活性
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2013年第10期182
gami2（DE3）pLysS 表达菌作为改进方案，其既能
补充 7 种稀有密码子，又能够促进二硫键的形成，
帮助表达需要借助二硫键形成正确折叠构象的真核
蛋 白。 但 是 2F5 和 4E10 单 链 抗 体 在 Rosetta-gami2
（DE3）pLysS 表达菌中依然是以包涵体形式存在的。
单链抗体在大肠杆菌中表达经常形成无活性的包涵
体［16］。包涵体形成的原因比较多，例如蛋白合成速
度太快，大肠杆菌的还原环境不利于二硫键的形成，
培养条件不佳等［17］。
用 8 mol/L 尿素使 2F5 和 4E10 单链抗体变性，
利用镍离子亲和层析的方法得到纯化蛋白，经复性
得到可溶性的单链抗体。真核表达抗原 OD（2F5）-
Fc 检测出 2F5 单链抗体具有特异性结合活性，OD
（2F5）-Fc 是 Chen 等［13］ 已经证明具有活性的抗原。
原核细胞表达的抗原 GST-MPER 的 ELISA 检测结果
表明了单链抗体与 GST-MPER 抗原有特异性识别活
性。但是，试验所得的 OD 值数据都偏小，分析其
原因可能在于复性后的 2F5 和 4E10 单链抗体的浓
度偏低，另外经过变性和复性过程获得的单链抗体
的活性可能会受到影响。目前掌握的包涵体的分离
纯化技术没有一套方法能使蛋白质同时获得较高的
得率和活性［18］，蛋白复性一直是困扰人们的难题。
我们将在提高 2F5 和 4E10 的单链抗体的产量及提
高其活性方面进行深入的研究。总之，本研究得到
了 2F5 和 4E10 的单链抗体及原核表达的 MPER 抗原，
为进一步开展 2F5 和 4E10 抗体与 MPER 抗原表位
的相互作用的研究打下了基础。
4 结论
成 功 构 建 了 pET28a/2F5-scFv 和 pET28a/4E10-
scFv 重组质粒，IPTG 诱导其在大肠杆菌中表达，成
功获得了 2F5-scFv 和 4E10-scFv 蛋白。ELISA 检测
纯化后的单链抗体 2F5 和 4E10 与包含 MPER 表位
的重组蛋白间有特异性反应。
参 考 文 献
［1］ 鲁莎 , 席丽艳 . HIV 感染和真菌感染［J］. 皮肤病与性病 ,
2010, 32（2）：13- 15.
［2］ Sheng L, Cao WK. HIV/AIDS epidemiology and prevention in
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