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研究报告

生物技术通报
BIOTECHNOLOGY
BULLETIN 2010年第 11期
枣树内参基因 ZjH3的克隆与筛选
孟玉平 1 曹秋芬 1 孙海峰2
( 1山西省农业生物技术研究中心,太原 030031; 2山西大学化学化工学院,太原 030006)


摘
要:
为了克隆和筛选适合于枣树 (Z iziphus jujubaM il.l )基因表达研究用的内参基因, 利用枣结果枝 cDNA文库 ESTs
序列, 克隆获得 4条其它物种常用内参基因的同源基因: 组蛋白 H 3的同源基因全长序列, 命名为 ZHj 3(Z iz iphus jujuba H 3,
GenBank登录号: EU916201); 肌动蛋白的同源基因片段,命名为 Z jAT1(Z iz iphus jujuba ACT, GenBank登录号: EU251882) ;泛素
延伸蛋白同源基因全长序列, 命名为 Z jUBQ (Z iz iphus jujuba UBQ, GenBank登录号: EU916200); 翻译延伸因子的同源基因片
段, 命名为 Z jEF1(Z iz iphus jujuba EF, GenBank登录号 : EU916202)。在相同的条件下,用半定量 RT
PCR方法分析了这 4个潜
在内参基因在枣不同生长时期的结果枝及其茎尖和不同器官中的表达, 结果表明, Z jAT1、Z jUBQ和 Z jEF1基因的表达不恒定,
不适合用作枣树内参基因; 而 ZHj 3基因在不同发育阶段的结果枝及其茎尖、根、茎、叶、芽、花蕾、花、幼果、膨大果实和种子中
均表达稳定, 适合于用作枣树的内参基因。
关键词:
枣树 内参基因 克隆 表达分析
Cloning and Selection ofHousekeeping Gene ZjH3 for Ziziphus jujuba
M eng Yuping
1
Cao Q iufen
1
Sun H aifeng
2
(
1
AgriculturalB iotechnology R esearch Center of Shanx i Province, Taiyuan 030031;
2
College of Chem istry and Chem ical Engineering of Shanxi University, Taiyuan 030006)


Abstrac:t
To se lect re liab le housekeeping gene used in gene express ion stud ies of chinese ju jubes, four potentia l housekeep ing
genes w ere iso la ted from cDNA L ibrary in the F ruit
Bearing Shoo t ofZ iziphus jujubaM il.l including a hom o logue gene o f h istone3 desig

nated ZHj 3( GenBank accession num be r: EU916201 ), a hom o logue gene o f

ac tin designated Z jAT1 ( GenBank accession number:
EU251882), a homo logue gene o f ubiqu itin extension prote in designated Z jUBQ ( GenBank access ion num ber: EU916200), and a hom o

logue gene o f trans lation e longation fac to r 1
designated Z jEF1( GenBank accession number: EU916202). Express ion o f these genes in
the fru it
bearing shoot dur ing diffe rent grow th period and its apices tissue, vegeta tive shoo t, and different o ther tissues we re ana ly zed by
using sem i
quantitative RT
PCR under the sam e cond itions. The results show ed that Z jAT1, Z jUBQ and Z jEF1 gene revea led unstab le
expression and w ere no t su itable as housekeep ing genes, bu t ZHj 3 w as the most su itab le housekeeping gene forZ iz iphus jujuba, based on
its stab le expression in different o rgans.
Key words:
Z iz iphus jujuba H ousekeeping genes C lon ing Expression ana lys is
收稿日期: 2010
04
14
基金项目:山西省自然科学基金项目 ( 2008011062
2, 2010011038
2)
作者简介:孟玉平,男,副研究员,主要从事果树生物技术研究; E
m ai:l m engyup ing@ yah oo. com. cn
通讯作者:曹秋芬, E
m ai:l caoq iufeng@ yahoo. com. cn
基因表达分析在生命科学的众多研究领域中变
得日趋重要,其研究的深入将为农业科学领域探索
植物生命的相关基因、了解基因表达调控的复杂网
络、解析其丰产性、抗逆性等遗传奥秘、最终为人类
改良和培养植物新品种服务大有裨益。枣树是一种
古老的果树, 为鼠李科 ( Rhamnaceae)枣属 ( Z iziphus
jujuba M il.l )植物, 原产于我国黄河流域,其果实鲜
食、加工、药用兼具, 经济价值很高。枣树具有耐干
旱、耐瘠薄、寿命长、结果早、易管理等优点,在我国
北方的大多数地区已成为农村经济产业之一。枣树
与其它落叶果树显著不同的生物学特征之一是结果
枝为脱落性枝 (也叫枣吊 ), 结果枝每年春天发生于
结果母枝 (枣股 ), 秋天脱落,它的生长和花芽分化
同时进行,当年花芽分化、当年开花结果,具有花芽
生物技术通报 B iotechnology
Bulletin 2010年第 11期
分化快、多的特点 [ 1]。为了探讨枣树花芽形成、抗
逆性等优良特性及其有关基因的调控机理, 我们构
建了枣树结果枝 cDNA文库 [ 2 ] ,从 cDNA文库入手
逐步对枣树的基因信息展开了研究。在进行基因研
究的过程中,如在转录水平进行基因表达定量的分
析、实时定量 PCR、RNA印迹、蛋白质印迹等, 都需
要应用内参基因对目标基因的表达量进行验证,以
期获得真实可靠的结果。内参基因又称管家基因,
是指所有细胞中组成型表达的一类基因, 其产物是
维持细胞各种基本生命活动所必需的。从理论上
讲,试验所选择的内参基因不仅仅存在于所有的样
品中, 而且其表达水平应不受试验条件影响 [ 3 ]。然
而,大量的研究表明, 目前还没有通用的内参基因符
合这一条件,目前主要内参基因的表达水平与器官
类型、发育阶段和外界环境条件有关 [ 4] , 一种内参
基因不可能适用于所有植物,最好的选择就是内参
基因表达量在自己所研究的各组织中变化较小。据
报道研究者已经调查筛选了多种植物的内参基因,
主要包括白杨、土豆、葡萄、大麦、水稻、松树、拟南芥
和烟草等植物 [ 5- 7] , 而涉及枣树中的内参基因还未
见报道。对于新材料的基因表达研究, 必须找到合
适的内参基因,为此, 本试验从枣树结果枝 cDNA文
库中克隆出几种组成型基因,并进行了表达比较,目
的是要筛选出适合于枣树的内参基因。
1
材料与方法
1
1
材料
试验材料取自山西省农业生物技术研究中心试
验园 40多年生的壶瓶枣树 ( Z iziphus jujuba M il.l

Hupingzao
) ,于春天刚萌发不久生长发育旺盛时期
采集长度大约为 5 - 10 mm的结果枝,用于提取总
RNA进行 cDNA文库构建及基因克隆。另外,为了分
析目的基因片段在不同生长时期的不同器官中的表
达,结果枝从发芽后到停止生长期间,在生长旺盛的
前期每隔 2 d和生长后期每隔一周取样一次, 毛根于
5月中旬、营养枝幼茎于 5月上旬、成熟叶片于 6月下
旬、芽于 5月下旬、花蕾于 5月中旬、花于 5月下旬、幼
果于 6月中旬、膨大果实和种仁于 7月下旬分别取样,
所有采集的材料用冰壶从试验园取回后做适当剥离、
修整,液氮快速冷冻后置于- 70
冰箱保存备用。
试验用限制性内切酶、T4 DNA连接酶以及 PCR
用 Taq酶等常规分子生物学试剂购自大连宝生物有
限公司, M
MLV第一链 cDNA合成试剂盒购自 BB I
(加拿大 )。
1
2
内参基因 cDNA片段的克隆及序列分析
从结果枝组织中提取总 RNA,逆转录成 cDNA,
构建 cDNA质粒文库 [ 2] , 将从 cDNA文库中随机克
隆出的 469个片段委托北京奥科公司测序,测序结
果提交 NCBI进行 BLAST检索,并应用 BLAST程序
在 GenB ank上进行相似性比较,选出与组蛋白、肌动
蛋白、泛素延伸蛋白和翻译延伸因子同源性高、有可
能作为内参基因的片段, 利用 Compute pI/Mw too l
( http: / /us. expasy. org / tools/p i_ too.l htm l)预测该蛋
白质的理论等电点和分子量, 用在线分析软件 Prosite
( expasy. org /prosite / ) 进行结构域预测。
1
3
内参基因 cDNA片段在不同器官中的表达分析
提取所采结果枝、结果枝茎尖、毛根、幼茎、叶
片、芽、花蕾、花、幼果、膨大果实和种仁等组织的总
RNA, 进行反转录,反转录反应条件按照试剂盒说明
进行,以反转录产物为模板, 进行 RT
PCR反应。
根据上述 1
2筛选出的 4个假定内参基因 cD

NA片段: ZHj 3, Z jAT1, Z Uj BQ, ZjEF1, 所得核苷酸精
确序列各设计一对引物, 并委托上海生工合成。各
基因的引物序列及其利用梯度 PCR筛选的最佳退
火温度如表 1所示。
表 1 RT
PCR分析用引物序列
基因 引物序列 ( 5
- 3
) 退火温度 (
)
ZHj 3( EU916201)

P1: GAGGAAGCAACTG

GCAACTAAGG
60

P2: CTACGAGCAAGCTG

GATATCCTTC
ZjAT1( EU251881)
P1: GTGCTCGACTCTGGA

GATGGTGTG
56
P2: CGGCGATTCCAGGG

AACATTGTGG
ZjUBQ ( EU916200)
P1: CTCTGCAACGATGC

AGATCTTCTG
60
P2: CATCCACCTTGTAGA

ACTGGAC
ZjEF1 ( EU916202)
P1: CATTGTGGTCATTGG

CCATGT
58
P2: AGCAGCAGATCATC

TGCTTGAC
102
2010年第 11期 孟玉平等:枣树内参基因 ZHj 3的克隆与筛选
为了比较这几个基因在不同材料中的相对表达
丰度, 每个材料的 PCR反应模板均取自同一批次的
反转录产物。RT
PCR反应体系体积均为 50
L,含
有 2
L的反转录产物、10
mo l dNTPs、10 pmo l引
物和 1
5 U Taq DNA聚合酶。 PCR反应程序: 94

预变性 5 m in, 94
30 s,最佳退火温度如表 1, 30 s,
72
延伸 1 m in、循环 40次,最后 72
延伸 5 m in。
取 5
L PCR产物, 1
2%琼脂糖凝胶电泳分析并照
相保存。考虑到过多的 PCR循环次数可能无法反
映出功能基因在不同器官或不同发育阶段的表达
水平差异, 进一步比较分析了 ZHj 3基因在相同反
应体系和反应条件下循环 30次和循环 40次的产
物丰度。
2
结果与分析
2
1
枣树组蛋白 ZHj 3基因全长序列分析及其同源
性比较
从枣树结果枝 cDNA文库中分离得到序列长
度为 600 bp的插入片段, 该片段包含 1个 411 bp
完整开放阅读框, 编码含 136个氨基酸的完整开
放阅读框, 阅读框内有两个组蛋白信号域 (图 1)。
其预测的蛋白质分子量为 15
2679 kD, 等电点
11
29, 命名为 ZHj 3 ( Z iziphus jujuba H 3) , G enBank
登录号为 EU 916201。
方框部分为起始密码子; * 为终止密码子;斜体部分为两
个组蛋白信号域;下划线部分为组蛋白 ZHj 3引物序列
图 1
Z jH3 cDNA的全长核苷酸序列和推导的氨基酸序列
将 ZHj 3基因的序列与 GenBank登录的其它植
物的 H3基因进行对比, ZHj 3与其它植物同源基因有
很高的相似性,在核苷酸水平上同源性与杨树 (Popu

lus trichocarpa) H3( XM 002333566
1)、拟南芥 ( Arabi

dop sis thaliana ) H3 ( AK227656
1)、玉米 ( Z ea mays )
H3 ( DQ245222
1)均为 84%,与苹果 (Malus
domes

tica)H 3 ( AY347801
1)为 82%, 与番茄 (Lycop ersicon
esculentum )H3 ( BT014570
1)为 81%。在氨基酸水
平上与 GenBank中登录的其它植物组蛋白基因的
同源性均在 95%以上,其中与高粱 ( Sorghum bicol

or) H3( EES01811
1)和日本稻 (Oryza sativa japon ica
group)H3(AAX92952
1)的同源性为 100% ,与玉米
( Zeamays) H3( ACG40473
1)的同源性为 99% , 与
苜蓿 (M edicago sativa )H3( AAA32 655
1)的同源性
为 98%。
2
2
枣树 Z jAT1、ZUj BQ、ZjEF1基因的序列特征
同时克隆命名为 Z jAT1( Z iziphus jujuba A ct in1)
的是一序列长 478 bp,编码 159个氨基酸的肌动蛋白
cDNA不完全序列, GenBank核苷酸登录号为 EU251
882;氨基酸登录号为 ABX09991。该段核苷酸序列与
其它植物同源区域进行比对结果表明, 与高粱 SV

SOAC1( X79378)同源性为 78%, 与拟南芥 ACT1
( NM179953)和 AAC1(M 20016)的同源性均为 77%,
与拟南芥 ACT2(NM112764)、ACT3(NM115235)、ACT7
( NM 121018)、ACT11 ( NM 112046)和 ACT12 ( NM1145
19)、夏堇 ACT4 ( AB330990)和向日葵中 ACTIN
( AF28 2624) 的同源性为 76% - 76
6%。在氨基
酸水平上 Z jAT1与水稻中肌动蛋白 ( CAA33874)和
拟南芥中的 ACT11 ( AAM 65277 )同源性最高, 为
88% ;其次与拟南芥的 ACT3 ( AAC23632 )、高粱
ACT ( CAA55923 )、马铃薯 ACT ( AAB40097 )均为
87% ;与金鱼藤 ACT ( AAL89713)和黄瓜 ACT ( AAZ
74666)是 86%。说明获得的 cDNA片段是肌动蛋
白基因在枣树中的同源片段。
同时克隆命名为 ZUj BQ ( Z iziphus jujuba UBQ )
的是核苷酸序列长度为 694 bp,包含一个 468 bp的
完整开放阅读框, 编码 156个氨基酸完整序列。
GenBank核苷酸登录号为 EU916200,氨基酸登录号
为 EU251882。 BLASTx分析表明, 与马铃薯 UBQ
( CAA71132
1)、棉花 UBQ ( AAZ83341
1)、苹果树
UBQ ( AAO38879
1)和拟南芥 UBQ (AAA32906
1)
同源性分别为 100%、99%、97% 和 96%, 属于泛素
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生物技术通报 B iotechnology
Bulletin 2010年第 11期
延伸蛋白家族成员。
同时克隆命名为 Z jEF1( Z iziphus jujuba EF)的
是核苷酸序列长 736 bp,包含 682 bp、编码 227个氨
基酸的不完全序列。G enB ank核苷酸登录号为
EU 916202,氨基酸登录号为 ACG70965
1。BLASTx
分析表明,氨基酸序列与棉花 EF1 ( ABA12223
1)、
拟南芥

EF1 (AAF79822
1)、香蕉

EF1 ( AAY56
337
1) 和荔枝 ( L itchi ch inensis)

EF1 ( ABF0011
5
1) 同源性分别为 99%、97%、96% 和 95%, 是翻
译延伸因子的同源基因片段。
2
3
ZHj 3、ZjAT1、ZUj BQ和 Z jEF1基因在不同生长
期结果枝和营养枝中的表达与比较
为了在 ZHj 3、ZjAT1、ZUj BQ和 ZjEF1基因当中
确定那个最合适作为枣树的内参基因, 分析和比较
了它们在不同生长时期结果枝和幼嫩营养枝中的表
达特征。结果 (图 2)显示, ZHj 3在 4月 15日、21
日、23日、25日、27日和 5月 10日 ( 1- 5泳道 ) 5个
生长阶段的结果枝中以及在幼嫩营养枝中都有表
达, Z jAT1基因在 5个生长阶段的结果枝和营养枝
中均没有表达, ZUj BQ基因在幼嫩营养枝和部分生
长阶段的结果枝中有表达, Z jEF1基因在幼嫩的营
养枝中没有表达, 在部分生长阶段的结果枝中有表
达。相比较而言, ZHj 3基因在所有检测过的枝条材
料中表达较为稳定。
2
4
ZHj 3、ZjAT1、ZUj BQ、Z jEF1基因在不同生长阶
段结果枝茎尖表达与比较
枣树结果枝的茎顶端分生组织始终处于叶原
基和花原基分化状态, 先端分化出的叶腋间分生
组织始终处于花芽分化的早期阶段。为了筛选出
适用于结果枝先端分生组织的内参基因, 在结果
枝生长期每隔 1周取样 1次, 检测和比较 ZHj 3和
ZjAT1、Z Uj BQ、ZjEF1的基因表达情况。检测结果
(图 3)表明, Z jAT1基因仅仅在 5月 5日、6月 16
日和 6月 30日的材料中检测到有表达; ZHj 3、
ZUj BQ、ZjEF1基因在所有的先端材料中均有表达,
但是 Z Uj BQ、Z jEF1的基因表达丰度不稳定, ZUj BQ
基因在 5月 19日、26日和 6月 2日的材料中为弱表
达, Z jEF1在 6月 2日和 30日的材料中表达微弱,
只有 ZHj 3基因在所有的结果枝先端组织材料中表
现出稳定的高表达。
1- 5.结果枝; 6.营养枝; M. DNA m arker DL2000
图 2
ZjH3、ZjAT1、ZjUBQ、ZjEF1基因在幼嫩
结果枝和营养枝中的表达与比较
图中数据是取样日期; M. DNA m arker DL2000
图 3
Z jH3、ZjAT1、ZjUBQ、Z jEF1基因在不同
生长时期结果枝先端部位的表达与比较
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2010年第 11期 孟玉平等:枣树内参基因 ZHj 3的克隆与筛选
2
5
ZHj 3和 ZjAT1、ZUj BQ、Z jEF1基因在不同器官
中的表达与比较
进一步检测了 ZHj 3、Z jAT1、ZUj BQ、ZjEF1基因
在根、茎、叶、芽、花蕾、花、幼果、膨大果实果肉和种
仁中的表达。结果 (图 4)显示, 在花和幼果中可以
检测到 Z jAT1基因的微弱表达; ZUj BQ基因除在芽
和膨大果实果肉中没有检测到外, 在其它器官中都
有表达;在根、茎、叶、芽、幼果和种仁组织中可以检
测到 Z jEF1 基因的表达。此外, Z jAT1、ZjEF1、
Z Uj BQ基因除了表达谱不同外, 表达水平也存在差
异,说明这几个基因表达与器官类型和结果枝发育
阶段有关。只有 ZHj 3基因在所有器官中均可以检
测到表达,而且表达比较稳定。
2
6
ZHj 3基因表达丰度分析
以上通过分析相同模板用量下 ZHj 3、Z jAT1、
Z Uj BQ和 ZjEF1基因的 40个循环反应产物,发现在
不同类型枝条、结果枝先端以及各种器官中均可以
检测到 ZHj 3基因的稳定表达。为了进一步了解
ZHj 3基因的表达丰度,电泳分析了相同模板和相同
反应条件下 30个循环和 40个循环反应的 PCR产
物,结果 (图 5- 图 7)表明, 30个循环的 PCR产物
条带也清晰,说明 ZHj 3基因表达丰度较高,适于研
究不同发育阶段和不同器官表达水平的差异研究。
也进一步说明 ZHj 3基因是研究枣结果枝分化、生长
与花发育相关基因表达用合适的内参基因。
1- 9. 分别为根、茎、叶、芽、花蕾、花、幼果、膨大果、种仁;
M. DNA m ark er DL2000
图 4
ZjH3、ZjAT1、ZjUBQ、Z jEF1基因在
不同器官中的表达与比较
A. 30个循环; B. 40个循环; 1 - 5.结果枝; 6.营养枝; M.
DNA m arker DL2000
图 5
幼嫩结果枝和营养枝中 ZjH3基因在不同
循环次数条件下 PCR产物分析
A. 30个循环; B. 40个循环;图中数据是取样日期; M.
DNA m ark er DL2000
图 6
不同生长时期结果枝先端部位中 Z jH3基因在不
同循环次数条件下 PCR产物分析
3
讨论
为了保证半定量 RT
PCR或 Real tim e PCR结
果可靠, 必须对 PCR反应体系和反应条件进行优
化,还必须选择合适的内参基因。理想的内参基因
应在各种试验因素条件下, 各种类型的组织或细胞
中均有恒定表达。然而,大量的研究结果表明,任何
一种内参基因的所谓恒定表达都只是在一定类型的
细胞或试验因素作用下
有范围
的恒定, 在其它类
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生物技术通报 B iotechnology
Bulletin 2010年第 11期
型的细胞中或试验因素作用下则是变化的, 有时可
以是十几倍、几十倍甚至是上百倍的差异 [ 8]。盲目
地使用一种内参基因作为内参,一方面可能使基因
表达的微小差异难以发现, 另一方面可能引致错误
甚至相反的结论 [ 9]。因此, 就基因表达而言, 选择
合适的内参基因是十分重要的。
A. 30个循环; B. 40个循环; 1 - 9. 分别为根、茎、叶、芽、花
蕾、花、幼果、膨大果实、种仁; M. DNA m arker DL2000
图 7
不同器官中 ZjH3基因在不同循环
次数条件下 PCR产物分析
在研究枣树花发育功能基因的过程中, 开始企
图用 ZjAT1作为内参基因, 结果发现它不能恒定表
达,所以不得不筛选合适的内参基因 [ 10 ]。从已构建
的枣结果枝 cDNA文库中,将随机测序获得的 ESTs
序列与 NCB I非冗余蛋白质数据库进行比对分析,
筛选出一些常用于多种植物基因表达的内参基因,
然后通过半定量 RT
PCR分析了 4个有可能作为内
参基因的表达谱。
肌动蛋白是真核生物细胞骨架中的一种基本结
构组分。许多植物肌动蛋白的研究结果表明, 他们
由复杂的基因家族编码。植物肌动蛋白通常由
376- 377个氨基酸残基组成, 具有高度的保守性和
表达稳定性,其编码基因常被看做植物基因表达分
析常用的内参之一。除少数单细胞原生动物、藻类、
酵母类外,所有的多细胞真核生物的肌动蛋白都由
多基因家族编码 [ 11 ] , 因而具有数量不等的异型体。
各异型体基因的编码区保守性很强, 但非编码区差
异较大,其表达具有时间和空间上的差异 [ 12 ] ,以适
应不同组织和细胞类型在不同发育时期的需要。肌
动蛋白在植物生长和发育过程中起着多种重要作
用,如细胞分裂、细胞器定向运动、细胞极性的建立、
细胞形状和分裂板的决定等细胞学过程。然而, 在
本研究得到的枣树结果枝 ZjAT1基因具有时间和空
间上表达特异性, 表达谱最窄, 不适合作为内参
基因。
泛素延伸蛋白广泛存在于所有真核生物中, 是
一种小分子蛋白,由泛素介导的泛素 -蛋白水解酶
复合体通路是细胞质和细胞核内依赖于 ATP的非
溶酶体途径的蛋白质降解通路, 高效并高度选择性
地对细胞内的蛋白进行转换 [ 13] , 参与细胞周期调
整、细胞生长与凋亡、细胞信号感受、转录催化、离子
通道、免疫应答以及抗原呈递等多种生命过程。泛
素蛋白具有极其保守的氨基酸序列。枣树 ZUj BQ
基因是泛素延伸蛋白的同源基因, 但是它在枣树不
同器官以及不同发育阶段的表达并不恒定, 也不适
合作为枣基因表达用内参基因, 这与南欧海松泛素
延伸蛋白的研究相似 [ 14]。
翻译延伸因子是真核生物在细胞内普遍存在且
大量表达的一种多聚体核糖体蛋白质,在蛋白质合
成过程中起重要作用,其序列具有高度的保守性,具
有内参基因的特性 [ 15 ]。枣树 Z jEF1基因是翻译延
伸因子的同源基因片段, 在枣树不同器官中表达差
异较大,不适合作为枣树中的内参基因。
组蛋白是存在于生物染色体上的一类低分子量
的碱性蛋白,是构成染色体蛋白质纤丝结构的主要
成分,在所有处于分裂状态的细胞中表达,包括 H1,
H 2A, H2B, H3, H4共 5种, 其中 H 3、H 4进化上极为
保守,在所有已知的蛋白质中是最保守的一类蛋白。
研究发现,组蛋白 H3有多种翻译后的修饰,包括甲
基化、乙酞化、磷酸化以及 ADP核糖基化。组蛋白
H 3作为内参基因的研究报道较少, 但是在本研究中
结果表明组蛋白 ZHj 3基因在不同器官、不同生长时
期的结果枝及其顶端组织中都有表达, 表达最稳定,
最适宜用于枣树基因表达研究的内参基因。
参 考 文 献
[ 1] 孟玉平,孙海峰,曹秋芬,等.壶瓶枣花芽分化与落性枝生长发育
观察.果树学报, 2009, 26( 4) : 487
491.
[ 2] 孟玉平,曹秋芬,孙海峰,等.枣结果枝 cDNA文库的构建与部分
EST s分析.华北农学报, 2009, 24( 5) : 102
106.
[ 3] S chm ittgen TD, Zakra jsek BA. E ffect on experim en tal treatm en t on
hou sekeep ing gen e exp ress ion: validation by real
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2010年第 11期 孟玉平等:枣树内参基因 ZHj 3的克隆与筛选
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PCR. J B iochem B iophysM ethod s, 2000, 46 ( 1
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[ 4] Th el lin O, ZorziW, Lakaye B, et a.l H ou sek eep ing genes as in ternal
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基因组学与应用生物学


基因组学与应用生物学
是由广西大学主管和主办,公开发行的双月刊科技期刊。广西大学聘请中国农业大学李宁院
士任主编, 北京大学教授朱玉贤博士和海南省热带农业资源研究所所长方宣钧博士任执行主编, 国内众多的著名学者出任
编委。

基因组学与应用生物学
主要刊登现代生物技术的前沿学科和基础学科如基因组学、分子细胞遗传学、生化与分子生物
学、应用生物学等相关的原始研究成果。刊登植物、动物及微生物领域的生物在组织、器官、细胞、染色体、蛋白质、基因、酶、
发酵工程等不同水平上的现代生物技术等基础与应用基础研究的成果。本刊按国际标准编排, 题目摘要、图表、引用文献等
均实行中英文对照, 实现网上领先发表模式。

基因组学与应用生物学
, 前身是原
广西农业大学学报
, 创刊于 1982年。广西农业大学合并入广西大学以后更名为

广西农业生物科学
。
广西农业生物科学
已入编
中文核心期刊要目总览
2008年版 (即第五版 )之综合性农业科学类的
核心期刊, 是中国科学引文数据库 ( CSCD )来源期刊,也是中国科技核心期刊即中国科技论文统计源期刊。 2001年入选国家
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中国期刊方阵
, 先后被国际知名检索系统


英国国际农业与生物科学研究中心 ( CAB I)、美国
化学文摘

( CA )、美国
剑桥科学文摘: 自然科学
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动物学记录
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文摘杂志
( A J)等收录。
承载着
广西农业生物科学
的历史与荣誉,
基因组学与应用生物学
将在新的高度开拓奋进, 为现代生命科学和应用生
物学的研究与发展提供学术交流的平台,使之成为中国科学家走向世界的桥梁。

基因组学与应用生物学
Genom ics and Applied B io logy
, ISSN 1674- 568X, CN 45- 1369 /Q,双月 28日出版, 国内定价:

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