全 文 ：摇 核 农 学 报摇 圆园员缘袁圆怨渊怨冤院员苑源怨 耀 员苑缘远允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员源鄄员员鄄园圆摇 接受日期院圆园员源鄄园猿鄄员远
基金项目院宁波市自然科学基金项目渊圆园员源粤远员园员愿怨冤
作者简介院雷纪锋袁男袁主要从事食品质量安全研究遥 耘鄄皂葬蚤造院曾蚤躁蚤葬燥造蚤憎燥责怎岳 员远猿援 糟燥皂
通讯作者院吴祖芳袁男袁教授袁主要从事食品生物技术研究遥 耘鄄皂葬蚤造院 憎怎扎怎枣葬灶早岳 灶遭怎援 藻凿怎援 糟灶
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员缘冤园怨鄄员苑源怨鄄园愿
食品中赭曲霉毒素 粤的前处理方法比较
雷纪锋员 摇 吴祖芳员 摇 张摇 鑫员 摇 陈树兵圆 摇 陈摇 杰圆
渊员 宁波大学海洋学院袁浙江 宁波摇 猿员缘圆员员曰圆 宁波市出入境检验检疫局袁浙江 宁波摇 猿员缘园员圆冤
摘摇 要院为探究食品中霉菌产赭曲霉毒素 粤渊韵栽粤冤精确尧高效和经济的检测方法袁将免疫亲和柱渊 陨粤悦冤尧
悦员愿固相萃取柱渊悦员愿杂孕耘冤尧液液萃取渊蕴蕴耘冤尧旋蒸浓缩渊耘悦冤和玻璃微纤维滤纸渊郧酝云冤相结合袁采用液相
色谱 原四级杆静电场轨道阱质谱渊蕴悦鄄匝鄄韵则遭蚤贼则葬责冤方法检测比较了 源 种前处理方法的差异性遥 结果表
明袁旋蒸浓缩联用玻璃微纤维滤纸 渊 耘悦鄄郧酝云冤 的回收率显著高于其他组合袁依次为 耘悦鄄郧酝云
渊员园源郾 怨源豫 冤袁陨粤悦鄄郧酝云渊怨圆郾 苑远豫 冤袁悦员愿 杂孕耘鄄郧酝云渊愿远郾 愿远豫 冤袁蕴蕴耘鄄郧酝云渊缘缘郾 源圆豫 冤曰免疫亲和柱联用玻璃
微纤维滤纸渊 陨粤悦鄄郧酝云冤的前处理净化效果最好袁基底干净袁杂质种类少且含量低遥 综合样品的检测效
果和检测成本袁旋蒸浓缩和玻璃微纤维滤纸相结合袁以 蕴悦鄄匝鄄韵则遭蚤贼则葬责 检测袁可作为 韵栽粤 检测的一种可
行方法袁该方法检出限为 园郾 园缘 灶早窑皂蕴 原员袁回收率为 员园源郾 怨源豫 袁相对标准偏差小于 圆郾 愿缘豫 渊灶 越 源冤遥 本研
究可为食品中 韵栽粤检测提供理论参考遥
关键词院赭曲霉毒素 粤曰蕴悦鄄匝鄄韵则遭蚤贼则葬责曰检测方法曰前处理
阅韵陨院员园郾 员员愿远怨 辕 躁援 蚤泽泽灶援 员园园鄄愿缘缘员郾 圆园员缘郾 园怨援 员苑源怨
摇 摇 赭曲霉毒素 渊 韵糟澡则葬贼燥曾蚤灶袁韵栽冤主要是由曲霉属
渊粤泽责藻则早蚤造造怎泽 泽责援 冤和青霉属渊孕藻灶蚤糟蚤造造蚤怎皂 泽责援 冤真菌产生
的一类次级代谢产物咱员 原 圆暂 袁赭曲霉毒素 粤渊韵糟澡则葬贼燥曾蚤灶
粤袁韵栽粤冤是其中最重要的一种袁结构如图 员 所示遥 研
究发现袁韵栽粤 具有肾毒性咱猿暂 尧肝毒性咱源暂 尧基因毒性咱缘暂 尧
致畸性咱远暂 尧免疫毒性和胚胎毒性咱苑暂等特点袁毒性仅次
于黄曲霉毒素遥 许多研究人员认为 韵栽粤 是导致上世
纪 缘园 年代巴尔干半岛地方性肾病的主要原因袁并且已
从人的血清咱愿暂 尧尿液咱怨暂等中检测到 韵栽粤遥 韵栽粤在 员怨怨猿
年被国际癌症研究机构划为 陨陨月类致癌物遥
自 员怨苑园 年 韵栽粤 被发现以来袁大量研究证实 韵栽粤
广泛存在于谷物咱员园暂 尧水果咱员员暂 尧咖啡咱员圆 原 员猿暂和葡萄酒咱员源暂
等中遥 由于产 韵栽粤 的霉菌在食品的加工和贮藏过程
中很难被去除袁霉菌污染成为食品中 韵栽粤残留的主要
原因遥 为探究食品中 韵栽粤形成来源及迁移转化规律袁
从根源上提升食品的质量安全袁亟需建立一种食品样
品渊尤其是固体介质冤中 韵栽粤检测的前处理方法遥
图 员摇 韵栽粤的结构图
云蚤早援 员摇 栽澡藻 泽贼则怎糟贼怎则藻 燥枣 韵栽粤
目前袁国内外文献报道检测 韵栽粤 的基本方法有高
效液相色谱法渊匀孕蕴悦冤尧酶联免疫吸附法渊耘蕴陨杂粤冤和薄
层层析法渊栽蕴悦冤等咱员缘 原 员苑暂 遥 匀孕蕴悦法可精确地对样品中
的 韵栽粤 进行定性尧定量分析袁但样品检测的前处理要
求高咱员缘暂 遥 耘蕴陨杂粤法简单尧快速尧特异性好尧灵敏度高袁
能同时对多个样品定性或定量检测袁但抗体经常对与
怨源苑员
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
毒素相似的物质表现出交叉反应袁造成假阳性和系统
性的高偏差咱员远暂 遥 栽蕴悦 法虽廉价尧易操作尧易识别目标
物质袁但样品前处理须根据样品性质做不同处理袁存在
灵敏度较差尧耗时尧试剂繁多尧重现性差等缺点咱员苑暂 遥 液
质联用法综合了色谱的分离优势和质谱的高选择性及
高灵敏度优势袁迅速发展成为 韵栽粤 主要检测手段之
一咱员愿 原 圆员暂 袁而液质检测的样品前处理会对检测结果和效
果产生重要影响袁如果样品净化处理不好袁杂质就可能
干扰目标物的检出咱圆员 原 圆缘暂 遥 韵栽粤 样品的前处理方法主
要有免疫亲和柱净化尧固相萃取尧固相微萃取和液液萃
取等袁本研究从食品原料中的微生物产生渊包括微生
物培养物的检测冤角度展开研究袁在液相色谱 原四级
杆静电轨道阱质谱方法渊蕴悦鄄匝鄄韵则遭蚤贼则葬责冤检测的基础
上袁通过比较不同前处理方法提取和净化效果的差异
性袁建立食品中 韵栽粤精确尧高效和经济的检测方法袁旨
在为食品中 韵栽粤 形成来源及迁移转化规律等研究奠
定基础袁也为相关检测提供参考遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 菌种及培养基
赭曲霉菌渊粤援 燥糟澡则葬糟藻怎泽冤袁编号 猿郾 源缘圆园袁购自中国
普通微生物菌种保藏管理中心 渊 悦澡蚤灶葬 郧藻灶藻则葬造
酝蚤糟则燥遭蚤燥造燥早蚤糟葬造 悦怎造贼怎则藻 悦燥造造藻糟贼蚤燥灶 悦藻灶贼藻则袁悦郧酝悦悦冤遥 培
养基均为察氏培养基袁购自杭州微生物试剂有限公司遥
员郾 圆摇 仪器设备与试剂
匝鄄耘曾葬糟贼蚤增藻四极杆静电场轨道阱高分辨质谱仪袁
配置有 耘杂陨 陨陨 离子源 渊 原 冤 渊美国 栽澡藻则皂燥 云蚤泽澡藻则
杂糟蚤藻灶贼蚤枣蚤糟公司冤曰液相色谱系统为带自动进样器的
粤糟糟藻造葬 远园园 高压液相色谱袁色谱柱为 粤贼造葬灶贼蚤泽 悦员愿 渊员缘园皂皂 伊 源郾 远 皂皂袁猿 滋皂冤渊美国 栽澡藻则皂燥云蚤泽澡藻则 杂糟蚤藻灶贼蚤枣蚤糟 公
司冤遥
蕴 原 缘缘园 湘仪台式低速大容量离心机袁湖南长沙湘
仪仪器有限公司曰杂孕载智能型生化培养箱袁宁波江南仪
器厂曰砸耘 原 缘圆悦 旋转蒸发仪袁上海洪纪仪器设备有限
公司曰悦宰鄄悦允 原 圆阅 型超净工作台袁苏州净化设备有限
公司曰哉蕴哉孕 优普超纯水机袁四川优普超纯科技有限公
司曰载匀云鄄阅高速分散器袁上海京工实业有限公司曰圆圆源
原 员悦晕分析天平袁德国 杂葬则贼燥则蚤怎泽公司遥
免疫亲和柱渊 陨粤悦冤袁新加坡 孕则蚤遭燥造葬遭 公司曰蕴悦鄄悦员愿杂孕耘小柱袁德国 悦晕宰 公司曰玻璃微纤维滤纸袁新加坡
孕则蚤遭燥造葬遭 公司遥 实验用水均为电导率大于 员愿郾 圆
酝赘窑糟皂的超纯水遥
韵栽粤标准品袁纯度逸怨愿豫袁新加坡 孕则蚤遭燥造葬遭 公司曰
甲醇渊色谱纯冤尧乙腈渊色谱纯冤袁美国 栽耘阅陨粤 公司曰甲
酸氨渊色谱纯冤尧乙酸渊色谱纯冤袁杭州阿拉丁公司曰孕月杂
磷酸缓冲液渊责匀值 苑郾 园冤袁新加坡 孕则蚤遭燥蕴葬遭公司遥
员郾 猿摇 溶液的配制
员郾 猿郾 员摇 韵栽粤标准溶液的配制摇 精密称取适量 韵栽粤标
准品袁用甲醇 辕乙酸 渊怨愿 颐 圆袁 增 辕 增冤溶解袁配制成浓度
园郾 员园园 皂早窑皂蕴 原员的标准品储备液袁于 源益冰箱保存备
用曰临用时袁用甲醇 辕乙酸渊怨愿 颐 圆袁 增 辕 增冤稀释成 员郾 园园尧
圆郾 园园尧缘郾 园园尧员园郾 园园尧圆缘郾 园园尧缘园郾 园园尧员园园郾 园园 灶早窑皂蕴 原员的标
准溶液袁现配现用遥
员郾 猿郾 圆摇 孕月杂磷酸缓冲液的配制摇 准确称取 愿郾 园园 早 氯
化钠尧猿郾 园圆 早 十二水合磷酸氢二钠尧园郾 圆园 早 磷酸二氢
钾尧园郾 圆园 早氯化钾袁加入适量纯水溶解袁员 园园园 皂蕴 容量
瓶定容袁用 员 皂燥造窑蕴 原员氢氧化钠溶液或盐酸溶液调节
责匀值至 苑郾 园袁备用遥
员郾 源摇 试验方法
员郾 源郾 员摇 浸提时间的确定 摇 将培养基灭菌后加入到
圆缘郾 园园 灶早窑皂蕴 原员 韵栽粤 标准溶液中袁分别于 园尧员郾 缘尧猿尧远尧
怨尧员圆尧员愿尧圆源尧源愿尧苑圆尧怨远尧员圆园尧员源源 澡 时间点取样袁蕴悦鄄匝鄄
韵则遭蚤贼则葬责检测袁计算提取率遥
员郾 源郾 圆摇 回收率实验摇 将赭曲霉菌 猿郾 源缘圆园 采用 猿 点接
种法点种于察氏培养基上袁每个点接种 缘郾 园 滋蕴浓度为
员郾 园 伊 员园远糟枣怎窑皂蕴 原员的孢子悬液袁相对湿度 怨园豫 袁圆愿益下
培养 圆源 澡袁准确移取 圆缘 滋蕴浓度为 员郾 园园 滋早窑皂蕴 原员 韵栽粤
标准品至菌生长处袁超净工作台下待溶剂挥发干后袁取
菌体覆盖的固体培养渊基冤介质袁加入 源园 皂蕴 甲醇 辕水
渊愿园颐 圆园袁增 辕 增冤溶液袁均质器高速渊员园 园园园 则窑皂蚤灶 原员冤搅拌
提取 圆 皂蚤灶袁源 园园园 则窑皂蚤灶 原员离心 缘 皂蚤灶袁取上清液袁经表 员
所列的 源 种方法分别处理袁同时以不加标做空白对照遥
其中院粤组和 月组处理前加入 源 倍量的 孕月杂 缓冲液稀
释袁经玻璃纤维滤纸过滤后过柱曰悦 组不经稀释袁经玻
璃纤维滤纸过滤后袁源缘益旋转蒸发至近干曰阅 组取样
后袁加入 源园 皂蕴 乙腈 辕 缘豫 晕葬匀悦韵猿 水溶液 渊怨园 颐 员园袁增 辕 增冤震荡提取 员缘 皂蚤灶袁待分层后弃去上层正己烷袁重复
猿 次遥 收集下层袁用 源园 皂蕴 三氯甲烷 辕水渊缘园颐 缘园袁增 辕 增冤
振荡 员缘 皂蚤灶袁待分层后收集下层袁重复 猿 次袁合并三氯
甲烷提取液袁源园益旋转蒸发至近干遥
摇 摇 样品经上述处理后袁加入 猿郾 园 皂蕴 色谱级甲醇 辕乙
酸渊怨愿 颐 圆袁增 辕 增冤洗脱 韵栽粤袁氮吹至近干袁准确加入 员郾 园
皂蕴甲醇 辕乙酸渊怨愿颐 圆袁增 辕 增冤溶解 韵栽粤袁经 园郾 圆圆 滋皂 有机
微孔滤膜过滤袁蕴悦鄄匝鄄韵则遭蚤贼则葬责 检测遥 实际样品的前处
理方法以上述 源 种方法的最优方法进行遥
园缘苑员
摇 怨 期 食品中赭曲霉毒素 粤的前处理方法比较
表 员摇 样品的前处理方法
栽葬遭造藻 员摇 栽澡藻 责则藻贼则藻葬贼皂藻灶贼 皂藻贼澡燥凿 燥枣 泽葬皂责造藻
组别 郧则燥怎责 粤 月 悦 阅
方法 酝藻贼澡燥凿 玻璃微纤维滤纸 垣免疫亲和柱渊陨粤悦鄄郧酝云冤
玻璃微纤维滤纸 垣 悦员愿柱渊悦员愿 杂孕耘鄄郧酝云冤
玻璃微纤维滤纸 垣旋蒸浓缩
渊耘悦鄄郧酝云冤
玻璃微纤维滤纸 垣液液萃取
渊蕴蕴耘鄄郧酝云冤
摇 摇 晕燥贼藻院 陨粤悦院 陨皂皂怎灶藻 葬枣枣蚤灶蚤贼赠 糟燥造怎皂灶袁 悦员愿 杂孕耘院 悦员愿 泽燥造蚤凿 责澡葬泽藻 藻曾贼贼葬糟贼蚤燥灶 糟燥造怎皂灶袁 耘悦院 耘增葬责燥则葬贼蚤燥灶 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼燥灶袁 蕴蕴耘院 蕴蚤择怎蚤凿鄄造蚤择怎蚤凿 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶袁 郧酝耘院
郧造葬泽泽 皂蚤糟则燥贼蚤遭藻则 枣蚤贼贼藻则援
员郾 源郾 猿摇 韵栽粤样品的检测摇 将赭曲霉 猿郾 源缘圆园 采用 猿 点
接种法点种于 悦粤 培养基上袁分别于 缘尧员园尧员缘尧圆园尧圆缘尧
圆愿尧猿园尧猿苑 和 源圆益下恒温培养 员员 凿袁相对湿度 怨园豫 袁以
员郾 源郾 圆确定的最优前处理方法处理样品袁蕴悦鄄匝鄄韵则遭蚤贼则葬责
检测袁以单点菌群 韵栽粤 的量作为试验菌产 韵栽粤 的相
对含量遥
员郾 源郾 源摇 试验指标与计算方法摇 样品中 韵栽粤在用溶剂
提取过程中袁韵栽粤的提取率在变化袁提取率如式渊员冤所
示遥 在实际样品的定量检测中袁参照蒋春美等咱圆源暂和
月则葬早怎造葬贼等咱圆缘暂的方法并优化袁以单点菌群 韵栽粤 的量作
为试验菌产 韵栽粤的相对含量袁表示一定条件下固定霉
菌数量所产生的 韵栽粤含量袁如式渊圆冤所示遥
提取率 越 即时含量起始含量 伊 员园园豫 渊员冤
相对含量渊灶早窑早原员冤 越 检测值提取率 伊 猿 伊 员渊皂蕴窑早原员冤
渊圆冤
员郾 缘摇 仪器分析条件
员郾 缘郾 员摇 色谱条件摇 色谱柱院粤贼造葬灶贼蚤泽 悦员愿渊员缘园 皂皂 伊 源郾 远
皂皂袁猿 滋皂冤曰流速院园郾 圆 皂蕴窑皂蚤灶 原员曰柱温院猿园益曰进样量院
员园 滋蕴曰流动相院耘 为 缘 皂酝 甲酸氨 园郾 员豫甲酸水 辕乙腈
渊怨缘颐 缘袁增 辕 增冤袁云为 缘 皂酝甲酸氨 园郾 员豫甲酸水 辕乙腈渊缘颐
怨缘袁增 辕 增冤袁流速为 园郾 圆 皂蕴窑皂蚤灶 原员袁洗脱梯度如表 圆 所
示遥
员郾 缘郾 圆摇 质谱条件摇 离子源院电喷雾离子源 耘杂陨渊 原 冤曰
模式院枣怎造造鄄泽糟葬灶曰毛细管温度院猿圆园益曰雾化温度院猿园园益曰
鞘气院源园 粤则遭曰辅助气院员园 粤则遭曰电压院猿 愿园园 灾遥
表 圆摇 匀孕蕴悦检测的洗脱梯度
栽葬遭造藻 圆摇 杂糟澡藻皂藻 燥枣 藻造怎贼蚤燥灶 早则葬凿蚤藻灶贼 枣燥则 匀孕蕴悦 葬灶葬造赠泽蚤泽
流动相
酝燥遭蚤造藻 责澡葬泽藻
时间 栽蚤皂藻 辕 皂蚤灶
园 圆 员圆 员源 员缘 圆缘 圆缘郾 员 猿园
耘 怨缘 远缘 员园 员园 园 园 怨缘 怨缘
云 缘 猿缘 怨园 怨园 员园园 员园园 缘 缘
员郾 远摇 数据处理
运用 杂孕杂杂 员愿郾 园 和 韵砸陨郧陨晕 愿郾 缘 统计分析软件进
行差异显著性分析和多重比较分析遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 仪器测定条件的确定
三重四级杆类质谱仪一般需要通过碎裂母离子产
生的子离子来达到定量分析的目的袁而 匝鄄耘曾葬糟贼蚤增藻 具有
极高的分辨率渊最高可达 员源园 园园园冤袁因此可以在全扫描
模式下通过精确质量数定量目标化合物的母离子遥
本试验中袁在负离子全扫描模式下袁分辨率设定为
猿缘 园园园袁用 粤糟糟藻造葬 远园园 高压液相色谱自动进样器吸取
员园 滋蕴 韵栽粤标准溶液渊圆缘 灶早窑皂蕴 原员冤袁得到 韵栽粤的实际
质量数为 源园圆郾 园苑缘远袁与理论质量数 源园圆郾 园苑缘园 的偏差为
员郾 源怨 伊 员园 原远袁可以满足实际样品的检测需要遥
圆郾 圆摇 标准曲线回归方程的建立
采用甲醇 辕乙酸渊怨愿颐 圆袁增 辕 增冤为溶剂配制的 韵栽粤标
准溶液袁 蕴悦鄄匝鄄韵则遭蚤贼则葬责 检测袁结果表明袁在 员郾 园园 耀
员园园郾 园园 灶早窑皂蕴 原员范围内袁韵栽粤 浓度与峰面积有良好的
线性关系袁线性方程为 再 越 猿员怨员远源载 原 源愿圆员怨郾 怨袁砸圆 越
园郾 怨怨怨怨袁其中 载为 韵栽粤的浓度袁再为峰面积袁根据 猿 倍
信噪比的峰响应值得出方法的最低检测限渊蕴韵阅冤为
园郾 园缘 灶早窑皂蕴 原员遥 匀孕蕴悦 色谱图结果表明袁韵栽粤 的峰形
良好袁分离度高渊图 圆冤遥
圆郾 猿摇 韵栽粤在浸提过程中的变化规律
初步研究发现袁采用溶剂提取固体培养渊基冤介质
中 韵栽粤 的过程中袁韵栽粤 的浓度随提取时间呈下降趋
势遥 为确定样品中 韵栽粤的最适提取时间袁分别于不同
时间点取样定量检测遥
员缘苑员
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
图 圆摇 韵栽粤标准品的 匀孕蕴悦色谱图
云蚤早援 圆摇 栽澡藻 匀孕蕴悦 糟澡则燥皂葬贼燥早则葬皂 燥枣 韵栽粤 泽贼葬灶凿葬则凿
由图 猿 可知袁韵栽粤 浓度随提取时间呈下降趋势袁
园 澡浓度为 圆缘郾 园圆 灶早窑皂蕴 原员袁在 员郾 缘 澡 内浓度迅速下降
到 员愿郾 圆怨 灶早窑皂蕴 原员曰在 员郾 缘 耀 猿 澡 内逐渐降至 员苑郾 圆猿
灶早窑皂蕴 原员曰在 猿 耀 源愿 澡 间为 员苑郾 园怨 耀 员苑郾 远员 灶早窑皂蕴 原员袁处
于稳定状态袁组间 砸杂阅 值为 园郾 怨员豫 袁组内 砸杂阅 值处于
园郾 猿圆豫 耀员郾 缘怨豫 曰在 源愿 耀 员源源 澡 间袁韵栽粤的含量呈现先
降后升的趋势袁组间差异较大渊砸杂阅 越 源缘郾 园圆豫 冤袁各组
平行间的 砸杂阅值同样较低袁处于 园郾 远愿豫 耀员郾 远圆豫 遥 因
此袁选择 猿 耀 源愿 澡时间段内作为样品中 韵栽粤 提取时间
范围遥 为提高试验的准确性和可重复性袁选择 猿 耀 源愿 澡
的中间点 圆源 澡 为最佳提取时间袁此时 韵栽粤 含量为
员苑郾 圆源 灶早窑皂蕴 原员袁提取率为 远愿郾 怨员豫 遥
表 猿摇 不同前处理方法加标回收率结果渊灶 越源冤
栽葬遭造藻 猿摇 砸藻糟燥增藻则赠 燥枣 韵栽粤 泽葬皂责造藻 遭赠 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 责则藻贼则藻葬贼皂藻灶贼 皂藻贼澡燥凿渊灶 越源冤
项目 陨贼藻皂泽 粤 月 悦 阅
加标量 孕造怎泽 泽糟葬造葬则 辕 渊灶早窑皂蕴 原员 冤 圆缘郾 园圆 依 园郾 园怨 圆缘郾 园圆 依 园郾 园怨 圆缘郾 园圆 依 园郾 园怨 圆缘郾 园圆 依 园郾 园怨
试样本底 月葬糟噪早则燥怎灶凿 辕 渊灶早窑皂蕴 原员 冤 圆郾 远圆 依 园郾 园圆遭 圆郾 源苑 依 园郾 园源遭 猿郾 员远 依 园郾 园猿葬 圆郾 源缘 依 园郾 园愿遭
回收量 砸藻糟燥增藻则赠 糟燥灶贼藻灶贼 辕 渊灶早窑皂蕴 原员 冤 圆猿郾 苑员 依 园郾 圆缘遭 圆员郾 怨愿 依 园郾 源源糟 圆远郾 圆远 依 园郾 猿苑葬 员猿郾 愿苑 依 园郾 远缘凿
回收率 砸藻糟燥增藻则赠 辕 豫 怨圆郾 苑远 依 员郾 猿愿遭 愿远郾 愿远 依 员郾 圆源糟 员园源郾 怨源 依 员郾 源怨葬 缘缘郾 源圆 依 圆郾 缘怨凿
砸杂阅 辕 豫 圆郾 员园 猿郾 怨怨 圆郾 愿缘 怨郾 猿远
摇 摇 注院不同小写字母代表差异显著渊孕 约 园郾 园缘冤遥
晕燥贼藻泽院 阅蚤枣枣藻则藻灶贼 泽皂葬造造 造藻贼贼藻则泽 皂藻葬灶 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 园郾 园缘 造藻增藻造援
圆郾 源摇 不同前处理下加标回收率的比较
由表 猿可知袁源种前处理方法两两之间的加标回收
率均表现为显著水平渊孕 约园郾 园缘冤袁且 悦组 跃 粤组 跃 月组
跃 阅组袁分别为 员园源郾 怨源豫尧怨圆郾 苑远豫尧愿远郾 愿远豫和 缘缘郾 源圆豫曰
各方法的相对标准偏差较小袁粤组尧月 组和 悦 组较 阅组
的精密度高袁重现性好遥 同时袁图 源 表明袁粤 组尧月 组尧悦
组和 阅组的净化效果存在差异袁其中 粤组的基底干净袁
图 猿摇 韵栽粤在提取过程中的变化
规律渊灶 越源冤
云蚤早援 猿摇 栽澡藻 糟澡葬灶早藻 燥枣 韵栽粤 蚤灶 贼澡藻
责则燥糟藻泽泽 燥枣 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶渊灶 越源冤
杂质种类少且含量低曰月 组次之袁表现为基底杂质种类
较 粤组多袁含量高曰悦组和 阅组再次之袁表现为基底杂质
种类较 粤组和 月组增多袁含量明显上升遥
摇 摇 通过比较 源 种前处理方法的回收率尧净化效果和
精密度可知袁粤组和 悦 组优于 月 组和 阅 组袁且 粤 组在
获得最佳净化效果的同时可得到理想的回收率袁缺点
是成本较高曰悦 组在获得最佳回收率的同时也可获得
较好的净化效果袁其最大的优势在于前处理成本低袁在
样品的处理中首选 悦方法遥
圆郾 缘摇 韵栽粤样品的检测
参考 圆郾 源 的结果袁以旋蒸浓缩结合玻璃纤维滤纸
对不同温度下培养的赭曲霉 猿郾 源缘圆园 进行前处理袁蕴悦鄄
匝鄄韵则遭蚤贼则葬责检测袁结果表明袁该方法的重现性好袁相对
标准偏差在 圆郾 猿园豫 耀缘郾 猿缘豫 渊表 源冤遥
猿摇 讨论
本试验通过比较 源 种前处理方法的回收率尧净化
效果和精密度袁发现 陨粤悦鄄郧酝云 法和 耘悦鄄郧酝云 法优于
圆缘苑员
摇 怨 期 食品中赭曲霉毒素 粤的前处理方法比较
摇 摇 摇 摇
图 源摇 不同前处理 韵栽粤样品的 蕴悦鄄匝鄄韵则遭蚤贼则葬责总离子流图
云蚤早援 源摇 栽澡藻 蕴悦鄄匝鄄韵则遭蚤贼则葬责 贼燥贼葬造 蚤燥灶 糟澡则燥皂葬贼燥早则葬皂 燥枣 韵栽粤 泽葬皂责造藻 遭赠 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 责则藻贼则藻葬贼皂藻灶贼 皂藻贼澡燥凿
表 源摇 赭曲霉 猿郾 源缘圆园 不同温度下产 韵栽粤情况渊灶 越猿冤
栽葬遭造藻 源摇 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 燥枣 韵栽粤 枣燥则皂葬贼蚤燥灶 遭赠 粤援 燥糟澡则葬糟藻怎泽
猿郾 源缘圆园 葬贼 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 贼藻皂责藻则葬贼怎则藻泽 渊灶 越猿冤
温度
栽藻皂责藻则葬贼怎则藻 辕 益
相对含量
砸藻造葬贼蚤增藻 糟燥灶贼藻灶贼 辕 渊灶早窑早 原员 冤 砸杂阅 辕 豫
源 员园郾 园猿 依 园郾 猿怨 猿郾 怨员
员园 缘猿郾 源猿 依 圆郾 远怨 缘郾 园源
员缘 源愿缘郾 源愿 依 圆缘郾 怨苑 缘郾 猿缘
圆园 愿圆缘郾 愿圆 依 源猿郾 猿员 缘郾 圆源
圆缘 员园 员圆源郾 圆 依 猿远缘郾 怨愿 猿郾 远员
圆愿 圆源 圆源愿郾 远 依 远苑员郾 圆猿 圆郾 苑苑
猿园 猿愿 圆圆苑郾 园源 依 怨源园郾 园远 圆郾 源远
猿苑 员猿愿郾 猿怨 依 远郾 苑缘 源郾 愿苑
源圆 员苑郾 源苑 依 园郾 源园 圆郾 猿
悦员愿杂孕耘鄄郧酝云法和 蕴蕴耘鄄郧酝云法袁且 陨粤悦鄄郧酝云 法在获得
最佳净化效果的同时可得到理想的回收率曰耘悦鄄郧酝云
法在获得最佳回收率的同时也可获得较好的净化效
果遥 以 耘悦鄄郧酝云法进行样品前处理袁蕴悦鄄匝鄄韵则遭蚤贼则葬责 检
测袁作为固体培养渊基冤介质中 韵栽粤 的检测方法袁重现
性好袁回收率高袁检测限低遥
在本研究的制样过程中袁考虑到 韵栽粤 为痕量待检
物质袁在取样时以整个菌体覆盖的培养渊基冤介质为试
样袁以甲醇 辕水渊愿园 颐 圆园袁增 辕 增冤溶液为溶剂高速搅拌提
取袁而蒋春美等咱圆源暂和 月则葬早怎造葬贼等咱圆缘暂在筛选葡萄中 韵栽粤
产生菌的研究中袁用打孔器打取固体培养渊基冤介质袁
以甲醇为溶剂漩涡振荡提取袁过滤膜后直接进样袁操作
虽简捷袁但此方法处理样品存在大量杂质干扰检测袁且
由于取样不均衡尧量少导致误差较大袁本试验的取样方
法和前处理方法可以很好的克服这一缺陷遥 此外袁预
试验在前处理中使用了玻璃微纤维滤纸袁发现其对样
品中 韵栽粤的净化起到了显著的作用袁并且能够改善
匀孕蕴悦的峰形曰样品在淋洗过程中袁淋洗液以 责匀值 苑郾 园
的 孕月杂磷酸缓冲液效果好于去离子水袁可为样品的前
处理起到积极的作用遥
本文通过 耘悦鄄郧酝云袁陨粤悦鄄郧酝云和 悦员愿杂孕耘鄄郧酝云 猿 种
猿缘苑员
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
前处理方法处理样品袁蕴悦鄄匝鄄韵则遭蚤贼则葬责 检测袁平均回收
率分别为 员园源郾 怨源豫 尧怨圆郾 苑远豫和 愿远郾 愿远豫 袁砸杂阅 值分别
为 圆郾 愿缘豫 尧圆郾 员园豫和 猿郾 怨怨豫 袁而相关报道中采用 陨粤悦鄄
匀孕蕴悦鄄云蕴阅法检测葡萄酒中的 韵栽粤 含量袁其平均回收
率为 怨园豫 袁砸杂阅值平均为 源豫 咱圆远暂 曰酝藻凿蚤灶葬 等咱圆苑暂在测定
啤酒中的赭曲霉毒素 粤时袁采用沃特世硅胶固相萃取
小柱渊宰葬贼藻则泽 泽藻责鄄责葬糟噪 泽蚤造蚤糟葬冤或赭曲霉毒素试验免疫
茶和性柱渊韵糟澡则葬 贼藻泽贼 蚤皂皂怎灶燥葬枣枣蚤灶蚤贼赠 糟燥造怎皂灶泽冤 圆 种净化
柱处理检测啤酒中赭曲霉毒素 粤袁结果表明 圆 种前处
理方法回收率均在 愿园豫左右曰砸藻蚤灶泽糟澡 等咱圆愿暂在用液质
联用测定葡萄酒中赭曲霉毒素 粤 的研究中以沃特世
混合型阴离子固相萃取小柱 渊 宰葬贼藻则泽 燥葬泽蚤泽 酝粤载
糟葬则贼则蚤凿早藻泽冤作为前处理小柱袁平均回收率可达 愿园豫 遥
此外袁圆园园员 年美国分析化学家组织 渊 粤泽泽燥糟蚤葬贼蚤燥灶 燥枣
韵枣枣蚤糟蚤葬造 粤灶葬造赠贼蚤糟葬造 悦澡藻皂蚤泽贼泽袁 粤韵粤悦冤官方推荐使用 员豫
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释袁陨粤悦净化袁圆郾 缘豫 晕葬悦造 和 园郾 缘豫 晕葬匀悦韵猿 水溶液渊员颐 员袁增 辕 增冤淋洗袁最后以甲醇洗脱袁匀孕蕴悦鄄云蕴阅 法检测袁加
标回收率在 愿园豫以上咱圆怨暂 遥 王耀等咱猿园暂采用免疫学方法
快速检测 韵栽粤袁以替代毒素标品曰该方法的线性检测
范围为 园郾 圆缘 耀 愿 灶早窑皂蕴 原员袁检测下限为 园郾 员 灶早窑皂蕴 原员遥
通过比较发现袁本文建立的方法和同类研究相比袁在加
标回收率和可重复性方面有一定的优势袁尤其是 耘悦鄄
郧酝云法在获得最佳回收率的同时可获得较好的净化
效果袁其原因可能是袁耘悦鄄郧酝云 法处理样品时袁韵栽粤 的
损失主要是瓶壁上的残留袁但操作中加入较大量渊猿
皂蕴冤的溶剂并多次振荡洗脱可以最大程度地减少损
失袁玻璃纤维滤纸在净化的过程中也起到了积极的作
用袁而 陨粤悦鄄郧酝云法和 悦员愿 杂孕耘鄄郧酝云 法在过柱时会有损
失且无法避免遥 耘悦鄄郧酝云法最明显的优势在于前处理
成本低袁适于批量检测遥
试验还发现袁在用溶剂提取培养基中的 韵栽粤 时袁
韵栽粤浓度随提取时间呈下降趋势袁在最初 猿 澡 内 韵栽粤
含量迅速下降 猿员郾 员豫 袁变化明显袁随后的 源缘 澡 内处于
稳定状态袁故提取时间可选在 猿 耀 源愿 澡 内袁以确保数据
的可靠性曰这种变化可能是培养基中琼脂对 韵栽粤具有
一定的吸附作用而导致的袁这一发现可为研究培养基
中 韵栽粤检测结果的准确性提供参考遥
源摇 结论
本文建立了一种相对准确尧高效和经济的 韵栽粤 检
测方法袁取培养后完整的菌体及菌体覆盖的培养渊基冤
介质袁加入甲醇 辕水渊愿园颐 圆园袁增 辕 增冤溶液袁均质器高速渊员园
园园园 则窑皂蚤灶 原员 冤搅拌提取 圆 皂蚤灶袁源 园园园 则窑皂蚤灶 原员离心 缘
皂蚤灶袁所得上清液袁以旋蒸浓缩尧免疫亲和柱尧悦员愿固相萃
取柱结合玻璃微纤维滤纸处理袁蕴悦鄄匝鄄韵则遭蚤贼则葬责 检测袁
均可以得到理想的检测结果遥 其中袁耘悦鄄郧酝云 组合的
净化效果最好袁基底干净袁杂质种类少且含量低袁加标
回收率为 怨圆郾 苑远豫 曰耘悦鄄郧酝云 组合的回收率最高袁为
员园源郾 怨源豫 袁显著高于其他组合遥 综合考虑样品检测效
果和检测成本袁可选择旋蒸浓缩和玻璃微纤维滤纸相
结合进行前处理袁蕴悦鄄匝鄄韵则遭蚤贼则葬责 检测袁作为 韵栽粤 的检
测方法袁该方法回收率高袁检出限低袁且前处理成本低遥
参考文献院
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毒素 粤在咖啡中的产生及其对咖啡生产的影响研究咱 允暂 援 安徽
农业科学袁圆园员猿袁源员渊猿冤院员圆圆怨 原 员圆猿员
源缘苑员
摇 怨 期 食品中赭曲霉毒素 粤的前处理方法比较
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咱员缘暂 摇 郝俊冉袁 许文涛袁 黄昆仑援 赭曲霉毒素 粤 生成转化及致毒机制
的研究进展咱允暂 援 食品工业科技袁圆园员圆袁猿猿渊员圆冤院源圆苑 原 源猿员
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咱圆园暂 摇 王松雪袁 王雄袁 何志军袁 刘焓袁 薛斌袁 张艳袁 孙长坡袁 马小妮袁
王岩袁 高晓春援 郧月 辕 栽 圆缘圆圆园 原 圆园员园 粮油检验 原粮食中赭曲霉毒
素 粤的测定 原高效液相色谱法和荧光光度法咱杂暂援 北京院中华人
民共和国国家质量监督检验检疫总局袁 圆园员园
咱圆员暂 摇 陈杰袁 莫艳霞袁 徐银君袁 倪梅林袁 陈树兵援 进口葡萄酒中赭曲霉
毒素 粤的含量分析咱允暂 援 酿酒科技袁圆园员圆袁渊员冤院 员园苑 原 员园怨
咱圆圆暂摇 王敬袁陈瑞春袁 郭春海袁窦彩云援 液相色谱 原串联质谱法测定植
物源性食品中 员远 种氨基甲酸酯类农药及其代谢物咱 允暂 援 食品安
全质量检测学报袁 圆园员猿袁 源渊缘冤院员源缘愿 原 员源远远
咱圆猿暂摇 庞世琦袁 刘青袁 李志勇袁 潘丙珍袁 罗敏袁 刘茜袁 陈文锐援 葡萄酒
中赭曲霉毒素 粤检测方法优化咱允暂 援 食品科学袁 圆园员猿袁 猿源渊圆源冤院
员怨猿 原 员怨远
咱圆源暂摇 蒋春美袁 师俊玲袁 刘延琳援 赭曲霉毒素产生菌筛选方法的对比
与优选咱 允暂 援 西北农林科技大学学报院自然科学版袁 圆园员圆袁 源园
渊猿冤院 员远怨 原 员苑源
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泽责藻糟贼则燥皂藻贼则赠 葬枣贼藻则 糟燥皂遭蚤灶藻凿 葬灶蚤燥灶鄄藻曾糟澡葬灶早藻 辕 则藻增藻则泽藻凿鄄责澡葬泽藻 糟造藻葬灶鄄怎责
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原 员缘怨缘
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蚤灶 憎蚤灶藻 葬灶凿 遭藻藻则 遭赠 蚤皂皂怎灶燥葬枣枣蚤灶蚤贼赠 糟燥造怎皂灶 糟造藻葬灶怎责 葬灶凿 造蚤择怎蚤凿
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咱猿园暂摇 王耀袁 胡骁飞袁 裴亚峰袁 赵东袁 刘运超袁 张改平袁 李志西袁 邓瑞
广援 赭曲霉毒素 粤 模拟表位的筛选及免疫学鉴定咱 允暂 援 核农学
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缘缘苑员
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