全 文 ：核 农 学 报摇 圆园员缘袁圆怨渊怨冤院员远远愿 耀 员远苑远
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员源鄄园远鄄圆猿摇 接受日期院圆园员源鄄员圆鄄圆员
基金项目院国家自然科学基金渊猿园怨苑园圆源缘袁员远源园员园怨猿源冤袁教育部留学回国人员科研启动基金 渊咱圆园员缘暂 猿员员冤袁南京林业大学高学历人才基金
渊郧载蕴圆园员缘园猿愿冤袁安徽省教育厅基金渊噪躁圆园园苑月员员园冤袁安徽省优秀青年教师基金渊圆园园苑躁择员员远员冤
作者简介院李小平袁男袁副教授袁主要从事植物分子生物学研究遥 耘鄄皂葬蚤造院曾责造蚤岳 灶躁枣怎援 藻凿怎援 糟燥皂
通讯作者院尹佟明袁男袁教授袁主要从事分子遗传育种基因组学研究遥 耘鄄皂葬蚤造院贼皂赠蚤灶岳 灶躁枣怎援 糟燥皂援 糟灶
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员缘冤园怨鄄员远远愿鄄园怨
大豆生长素响应因子基因 郧皂粤砸云员苑对
胚轴生长发育的调控作用
李小平员袁圆 摇 曾庆发圆 摇 张根生圆 摇 赵摇 娟圆 摇 陈嬴男员 摇 尹佟明员
渊员 南京林业大学林学院 辕南方现代林业协同创新中心 辕江苏省杨树种质创新与品种改良重点实验室袁
江苏 南京摇 圆员园园猿苑曰圆淮北师范大学生命科学学院 辕安徽省资源植物重点实验室袁安徽 淮北摇 圆猿缘园园园冤
摘摇 要院为丰富大豆分子育种理论袁本文研究了生长素对下胚轴的分子调控机制遥 采用实时荧光定量
孕悦砸 渊择孕悦砸冤 方法袁发现大豆咱郧造赠糟蚤灶藻 皂葬曾 渊蕴援 冤 酝藻则则蚤造造暂生长素响应因子基因 郧皂粤砸云员苑 在大豆子叶尧下
胚轴尧主根和侧根中均有表达袁其中侧根中表达量最高袁下胚轴中表达最低曰外源生长素可以快速诱导该
基因在下胚轴中的表达遥 同时分析了 郧皂粤砸云员苑 和小 砸晕粤 分子 郧皂鄄皂蚤砸员远园 作用位点袁构建了
责郧皂粤砸云员苑颐 颐 皂郧皂粤砸云员苑 渊皂郧皂粤砸云员苑冤 抗降解表达载体并转化大豆遥 皂郧皂粤砸云员苑 转基因大豆叶片尧主
茎尧根和花器官的生长发育与对照组没有显著的区别袁但其下胚轴生长受到明显的抑制遥 皂郧皂粤砸云员苑 下
胚轴对外源生长素的反应与野生型相比袁没有显著差异遥 皂郧皂粤砸云员苑 下胚轴游离 陨粤粤 含量低于野生
型袁编码 陨粤粤螯合酶的 郧皂郧匀猿郾 远 表达上调袁表明 郧皂粤砸云员苑 对生长素动态平衡具有调节作用遥 在
皂郧皂粤砸云员苑 下胚轴中袁郧皂杂粤哉砸圆猿袁郧皂陨粤粤圆袁郧皂粤砸郧韵杂袁郧皂粤砸云员园 和 郧皂粤砸云员远 表达下降袁而 郧皂酝陨砸员远园粤
表达上升袁暗示抗降解表达 郧皂粤砸云员苑 抑制生长素信号转导并扰动了 郧皂酝陨砸员远园粤和其靶基因间的平衡遥
本研究揭示了植物细胞调控下胚轴生长发育的一条新途径院郧皂酝陨砸员远园粤 和 郧皂粤砸云员园 辕 员远 辕 员苑 组成调节
回路并进而影响生长素稳态基因的表达来协调下胚轴细胞伸长袁对大豆分子育种具有重要意义遥
关键词院生长素响应因子曰抗降解表达曰下胚轴曰小 砸晕粤
阅韵陨院员园郾 员员愿远怨 辕 躁援 蚤泽泽灶援 员园园鄄愿缘缘员郾 圆园员缘郾 园怨援 员远远愿
摇 摇 植物下胚轴的细胞结构简单袁是研究光信号和植
物生长因子影响细胞伸长的理想器官渊组织冤遥 在不
同的光照条件下袁下胚轴生长和伸长的主要因素是细
胞形态变化而细胞数目没有很大的改变咱员暂 遥 外源生
长素明显促进大豆下胚轴伸长袁但该促进作用受还原
剂抑制袁提示胞内或胞外具有还原能力的分子削弱了
生长素诱导细胞伸长的功能遥 还原剂的抑制作用可能
是还原剂影响了生长素的运输袁造成下胚轴的生长素
浓度失衡袁从而导致细胞伸长受限袁也可能是还原剂参
与修饰生长素的信号转导组分袁进而影响到下游细胞
响应机制咱圆 原 源暂 遥 生长素与光通过相互作用参与调控下
胚轴的细胞分化和细胞增殖咱缘 原 苑暂 袁然而相关的分子遗
传基础还需要进一步夯实遥
植物组织器官内袁生长素合成部位和功能部位是
不完全重合的袁其功能的发挥需要长和 辕或短距离的极
性运输咱愿 原 怨暂 遥 当生长素运输到功能部位袁还需通过一
系列细胞信号转导事件来完成其生理调控遥 生长素受
体 栽陨砸员尧粤怎曾 辕 陨粤粤 转录因子尧生长素响应因子渊粤砸云泽冤
和具有生长素响应元件渊粤怎曾砸耘泽袁栽郧栽悦晕悦冤的下游靶
基因等是组成生长素细胞信号转导的主要组分咱员园暂 遥
当生长素含量很低时袁粤怎曾 辕 陨粤粤 蛋白与 粤砸云泽 结合袁阻
遏了下游靶基因的转录曰当生长素的含量增多时袁生长
素就会起到分子胶的作用袁使 粤怎曾 辕 陨粤粤 蛋白与 栽陨砸员
结合在一起袁形成 杂悦云栽陨砸员 原 生长素 原 粤怎曾 辕 陨粤粤 复合
体曰之后 粤怎曾 辕 陨粤粤 蛋白被降解袁促使 粤砸云泽 脱离 粤怎曾 辕
陨粤粤的抑制并与下游 粤怎曾砸耘结合袁从而完成生长素的
愿远远员
摇 怨 期 大豆生长素响应因子基因 郧皂粤砸云员苑 对胚轴生长发育的调控作用
信号转导进程咱员员 原 员源暂 遥
植物细胞中袁粤砸云泽 除上述的翻译后调节外袁其转
录产物还受到转录后水平的 皂蚤砸晕粤 的 调 控遥
酝蚤糟则燥砸晕粤泽首先由 砸晕粤聚合酶 陨陨 转录为初始小 砸晕粤
渊责则蚤皂葬则赠 皂蚤糟则燥砸晕粤冤袁然后在 阅悦蕴员 渊 阅蚤糟藻则鄄造蚤噪藻 员冤和
匀再蕴员渊匀赠责燥灶葬泽贼蚤糟 蕴藻葬增藻泽 员冤作用下袁产生约 远园 耀 苑园 灶贼
具有茎环结构的前体 皂蚤砸晕粤 渊责则藻皂蚤藻则 皂蚤糟则燥鄄砸晕粤冤遥
孕则藻鄄皂蚤砸晕粤 在一系列酶和蛋白分子的作用下形成成熟
单链 皂蚤砸晕粤 分子遥 这些成熟单链 皂蚤砸晕粤 通过序列不
完全配对方式寻找其作用靶基因并通过降解转录产物
或抑制靶基因翻译来抑制靶基因的活性咱员缘 原 员苑暂 遥
大豆基因组具有 远 个 郧皂鄄皂蚤砸员远园 基因渊酝陨砸员远园葬
耀 枣冤袁它们编码的小 砸晕粤 可以识别并调控 员圆 个靶基
因的转录活性遥 郧皂粤砸云员苑 基因渊郧造赠皂葬园源早源猿猿缘园郾 员袁以
下统一称为 郧皂粤砸云员苑冤是 郧皂鄄皂蚤砸员远园 的靶基因遥 为
了研究该基因在大豆下胚轴发育中的功能袁本研究分
析了该基因的时空表达模式袁并构建了抑制靶基因降
解的植物双元载体并通过子叶节法转化大豆袁分析了
所获得的转基因相关表型袁发现抗降解表达 郧皂粤砸云员苑
渊为表述简单袁以下称 皂郧皂粤砸云员苑冤 抑制了下胚轴生长
进程并调控有关基因的表达遥 本研究为大豆下胚轴生
长发育的生化与分子生物学机制的深入研究及分子遗
传育种提供一定理论依据遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 供试材料
员郾 员郾 员 摇 菌种和质粒 摇 菌种 耘援 悦燥造蚤 阅匀缘葬曰农杆菌
蕴月源源园源曰植物表达载体 责郧宰月源猿猿 原 酝员袁由淮北师范大
学生命科学学院实验室提供遥
员郾 员郾 圆摇 试剂与酶摇 普通 孕悦砸试剂购自上海生工生物
工程技术服务有限公司曰砸藻葬造鄄贼蚤皂藻 孕悦砸 试剂盒和限制
性内切酶购自 栽葬运葬砸葬 宝生物工程渊大连冤有限公司曰
阅晕粤标准分子量购自北京全式金生物技术有限公司曰
长片段高保真 运韵阅酶购自东洋纺渊上海冤生物科技有
限公司曰栽粤鄄栽燥责燥 糟造燥灶蚤灶早 和 蕴砸 重组反应试剂盒购自
陨灶增蚤贼则燥早藻灶 公司 渊美国冤曰小 砸晕粤 反转录用 杂赠泽贼藻皂
遭蚤燥泽糟蚤藻灶糟藻泽公司渊美国冤生产的 匝怎葬灶贼蚤酝蚤则 砸栽 运蚤贼遥 高
纯质粒小量提取试剂盒袁购自威格拉斯生物技术渊北
京冤有限公司袁其它试剂均为上海生工生物工程技术
服务有限公司产品遥
员郾 员郾 猿 摇 引物 摇 根据 澡贼贼责院 辕 辕 凿蚤葬灶葬援 蚤皂蚤泽援 葬贼澡藻灶葬鄄蚤灶灶燥增
葬贼蚤燥灶援 早则 辕提供 郧皂粤砸云员苑 序列并结合 晕悦月陨数据库相应
耘杂栽袁利用 韵造蚤早燥远郾 园 设计各类引物遥 序列标有下划线
的为 郧皂鄄皂蚤砸员远园 靶序列遥 郧皂粤砸云员苑 原 云员 引物中
悦粤悦悦用于 栽燥责燥克隆遥 转基因鉴定引物院郧皂粤砸云员苑 原
陨云 和 郧皂粤砸云员苑 原 陨砸遥 郧皂粤砸云员苑 原 陨云 是 皂郧皂粤砸云员苑
的 猿忆端 哉栽砸 特定序列袁郧皂粤砸云员苑 原 陨砸 是双元表达载
体上的 郧哉杂基因中的特定序列渊表 员冤遥
员郾 圆摇 试验方法
员郾 圆郾 员摇 荧光定量 孕悦砸摇 定量 孕悦砸所用的材料为营养
生长期渊灾悦冤幼苗的下胚轴咱员愿暂 遥 郧皂酝陨砸员远园粤 的定量
孕悦砸院砸晕粤 提取和反转录按系统生物科学 渊 泽赠泽贼藻皂
遭蚤燥泽糟蚤藻灶糟藻泽冤的 匝怎葬灶贼蚤酝蚤则 砸栽 运蚤贼操作手册进行袁首先对
小 砸晕粤猿忆 端添加腺苷酸形成多聚腺苷酸末端
渊孕燥造赠粤冤袁然后添加寡聚脱氧胸腺嘧啶接头袁最后反转
录形成 糟阅晕粤遥 反转录产物利用通用引物和小 砸晕粤
特异引物进行定量 孕悦砸袁荧光定量 孕悦砸 试剂盒为
栽葬运葬砸葬 杂再月砸 襃 孕则藻皂蚤曾 耘曾 栽葬择栽酝陨陨 渊阅砸砸园愿员粤冤袁相
应引物见表 员遥 酝陨砸员缘远遭为内参基因咱员怨暂 遥 其它基因的
定量 孕悦砸院 砸晕粤提取和反转录按文献进行咱圆园暂 袁内标是
大豆 粤悦栽圆 辕 苑渊郧造赠皂葬园源早猿怨猿愿园郾 猿冤基因遥 粤悦栽圆 辕 苑 定量
引物分别为 郧皂粤悦栽圆 辕 苑 原 云员 和 郧皂粤悦栽圆 辕 苑 原 砸员袁扩增
片段大小为 怨员 遭责遥 郧皂粤砸云员园袁 郧皂粤砸云员远 和 郧皂粤砸云员苑
定量引物分别对应于各基因 猿忆端 哉栽砸袁每对引物允许
扩增相应特异基因序列遥
反 转 录 产 物 通 过 月蚤燥鄄则葬凿 定 量 孕悦砸 仪
渊酝蚤灶蚤韵责贼蚤糟燥灶栽酝公司袁美国冤 进行定量遥 按以下反应体
系进行院 圆曾 孕则藻皂蚤曾 耘曾 栽葬择栽酝陨陨渊阅晕粤 责燥造赠皂藻则葬泽藻尧杂再月砸
郧则藻藻灶 陨尧 孕悦砸 遭怎枣枣藻则尧缘皂酝 酝早悦陨圆尧 凿晕栽孕 皂蚤曾 蚤灶糟造怎凿蚤灶早凿哉栽孕冤员缘 滋蕴曰上游引物 云 员 滋蕴袁下游引物 砸 员 滋蕴曰
糟阅晕粤 模板 圆 滋蕴遥 总体为 猿园 滋蕴遥 定量 孕悦砸仪扩增反
应条件设置院缘园 益 预退火 圆皂蚤灶曰怨缘 益 预变性 员园皂蚤灶曰
怨缘益 变性 员缘泽 原 远园 益 退火 远园 泽 原 苑圆益延伸 猿园 泽渊源园
个循环冤曰苑圆益 充分延伸 员园 皂蚤灶遥 用 圆 原吟吟悦贼法计算相
对表达量遥
员郾 圆郾 圆摇 克隆和测序摇 按照美国 陨灶增蚤贼则燥早藻灶 公司的 栽燥责燥
糟造燥灶蚤灶早方法进行袁切胶回收相应片段与 栽燥责燥 载体按
猿颐 员混合渊员园 滋蕴冤袁用拓扑异构酶在 圆圆 益反应 缘 耀 员园
皂蚤灶袁取反应产物 员 耀 圆 滋蕴渊责悦砸圆郾 员 原 皂郧皂粤砸云员苑冤用电
击转化法转化大肠杆菌感受态细胞 耘援 悦燥造蚤 阅匀缘葬渊月蚤燥鄄
砸葬凿袁 圆郾 缘 噪灾窑怎皂 原员窑皂泽 原员 冤遥 转化得到的阳性克隆
渊卡那霉素抗性袁运葬灶砸冤袁经 孕悦砸 和酶切鉴定后袁送上
海生工测序袁测序正确的克隆用于下游 蕴砸反应遥
员郾 圆郾 猿摇 植物表达载体 责郧皂粤砸云员苑 颐 颐 皂郧皂粤砸云员苑 的构
建摇 构建 责郧皂粤砸云员远 颐 颐 皂郧皂粤砸云员苑 双元表达载体袁首
先需要获得 皂郧皂粤砸云员苑 模板遥 根据遗传密码子的简
并性袁本研究把不配对碱基对数提高到 源 对袁但保持编
怨远远员
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
摇 摇 摇 摇 表 员摇 本文所用引物
栽葬遭造藻 员摇 孕则蚤皂藻则泽 怎泽藻凿 蚤灶 贼澡蚤泽 责葬责藻则
引物名称
孕则蚤皂藻则 灶葬皂藻泽
引物序列
孕则蚤皂藻则泽 泽藻择怎藻灶糟藻泽渊缘忆 贼燥 猿忆冤
择郧皂粤砸云员苑 原 云 粤悦栽悦悦郧悦粤粤栽粤栽栽栽郧郧郧悦悦粤郧
择郧皂粤砸云员苑 原 砸 栽悦悦悦粤粤粤粤粤悦粤悦栽栽悦栽郧粤悦栽栽郧
郧皂粤砸云员苑 原 云员 糟葬糟糟悦粤栽悦粤粤栽栽栽悦粤悦粤悦栽粤栽粤粤粤粤悦粤栽悦粤栽
郧皂粤砸云员苑 原 砸员 粤粤粤粤悦粤栽郧郧粤粤悦栽粤粤粤悦粤悦悦悦粤悦
郧皂粤砸云员苑 原 皂云圆 郧悦 栽郧郧葬粤栽早悦粤郧郧郧糟郧悦悦粤郧葬悦粤栽郧粤栽郧悦粤栽栽栽栽悦栽郧悦粤栽悦粤
郧皂粤砸云员苑 原 皂砸圆 粤 栽郧贼悦栽郧郧悦早悦悦悦栽郧糟粤栽贼悦悦粤郧悦粤郧郧粤粤粤粤郧栽粤悦悦粤栽粤粤悦
郧皂粤砸云员苑 原 陨云 悦悦粤郧粤粤悦郧粤悦粤粤郧郧粤悦郧悦
郧皂粤砸云员苑 原 陨砸 粤悦郧郧栽郧粤栽粤栽悦郧栽悦悦粤悦悦悦粤
择郧皂酝陨砸员远园粤 栽郧悦悦栽郧郧悦栽悦悦悦栽郧栽粤栽郧悦悦粤
韵造蚤早燥渊凿栽冤 原 葬凿葬责贼藻则 责则蚤皂藻则 郧粤悦栽悦郧粤郧栽悦郧粤悦粤栽悦郧粤栽栽栽栽栽栽栽栽栽栽栽栽栽栽栽栽栽
择郧皂粤砸云员园 原 云员 粤郧粤栽郧悦栽粤粤栽粤栽郧粤粤悦栽郧粤粤粤粤栽栽悦悦
择郧皂粤砸云员园 原 砸员 粤粤郧粤粤栽粤郧悦粤粤粤悦栽悦郧悦栽悦郧栽郧
择郧皂粤砸云员远 原 云 郧郧粤粤粤粤粤郧郧栽郧郧粤郧郧粤栽粤粤粤郧粤郧
择郧皂粤砸云员远 原 砸 郧粤粤栽郧粤悦栽悦栽悦悦悦栽栽栽郧栽栽栽悦粤粤悦
择郧皂郧匀猿援 远 原 云 郧栽郧郧栽栽郧郧栽粤郧悦栽栽栽栽悦粤栽郧郧
择郧皂郧匀猿援 远 原 砸 栽粤粤粤粤栽悦悦悦悦栽悦悦悦栽栽悦悦栽悦
择郧皂陨粤粤圆 原 云 郧粤悦栽栽栽栽郧粤粤栽悦粤悦栽悦栽粤郧栽郧栽粤栽郧悦
择郧皂陨粤粤圆 原 砸 栽郧粤郧郧粤粤郧粤粤粤悦栽郧悦粤悦悦郧栽粤
择郧皂杂粤哉砸圆猿 原 云 栽栽郧粤悦悦悦粤栽郧悦粤郧粤粤粤郧郧栽栽
择郧皂杂粤哉砸圆猿 原 砸 悦悦粤郧悦粤栽栽郧粤粤粤郧粤栽悦郧郧悦
择郧皂粤砸云郧韵杂 原 云 悦栽栽郧栽郧悦栽粤粤栽悦粤栽悦栽悦郧郧悦栽
择郧皂粤砸云郧韵杂 原 砸 悦粤郧悦悦粤悦粤粤悦粤悦粤粤郧郧栽粤栽郧粤
择郧皂酝陨砸员缘远遭 栽郧粤悦粤郧粤粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧悦粤悦粤
择郧皂粤悦栽圆 辕 苑 原 云 粤粤栽栽悦粤悦郧粤郧粤悦悦粤悦悦栽粤悦粤粤悦
择郧皂粤悦栽圆 辕 苑 原 砸 栽郧粤郧悦悦粤悦悦粤悦栽粤粤郧粤粤悦粤粤栽郧
码蛋白质序列不发生改变渊图 员冤遥 结合 郧皂粤砸云员苑 基
因组序列袁试验设计 圆 对引物袁在引物 皂云圆袁皂砸圆 中引
入不配对的碱基渊表 员冤袁然后通过重叠 孕悦砸 方法获得
皂郧皂粤砸云员苑遥 用 悦栽粤月法获得的大豆渊科丰 猿源冤基因组
为模板袁加入引物 云员 和 皂砸圆 通过 运韵阅 酶进行扩增袁
切胶回收扩增片段 粤曰同理袁用 皂云圆 和 砸圆 进行扩增袁
得到片段 月遥 混合片段 粤和 月形成重叠 孕悦砸模板袁用
引物 云员 和 砸员 和 运韵阅 酶袁 进 行 第 猿 次 孕悦砸
渊 韵增藻则造葬责责蚤灶早 孕悦砸 冤袁 得 到 皂郧皂粤砸云员苑遥 由 于
皂郧皂粤砸云员苑 序列较长袁内有多个内切酶位点袁直接用
酶切连接进行构建比较困难袁所以在引物 郧皂粤砸云员苑 原
云员 的 缘忆 端引入 悦粤悦悦 渊表 员 冤袁 切胶纯化后的
皂郧皂粤砸云员苑 通过 栽燥责燥 克隆到 责耘晕栽砸再 载体上并送上
海生工进行测序袁序列完全正确的用于下游重组反应
渊蕴砸反应冤遥 责耘晕栽砸再载体和植物双元载体 责郧宰月源猿猿
原 酝员 具有进行重组反应的侧翼序列渊葬贼贼蕴和 葬贼贼砸冤袁在
重组酶的存在下可以进行体外 蕴砸 反应袁这样就很容
易构建表达 皂郧皂粤砸云员园 的双元载体遥 此外袁为了使
皂郧皂粤砸云员苑 表达时空性与 郧皂粤砸云员苑 相似袁双元载体
渊责郧皂粤砸云员苑颐 颐 皂郧皂粤砸云员苑冤中包括 郧皂粤砸云员苑 的 缘忆和 猿忆
端调控序列 渊图 圆冤遥 蕴砸反应结束后转化大肠杆菌并
涂布在具有双抗渊卡那霉素和潮霉素袁运葬灶砸 辕 匀赠早砸冤 蕴月
平板上进行培养袁挑选生长健旺的克隆袁提取质粒并酶
切鉴定遥
员郾 圆郾 源 摇 农杆菌转化 摇 取鉴定成功的质粒 员 耀 圆 滋蕴
渊责郧皂粤砸云员苑颐 颐 皂郧皂粤砸云员苑冤用电击转化法转化农杆菌
感受态细胞 蕴月 源源园源渊月蚤燥鄄砸葬凿袁 圆郾 缘 噪灾窑怎皂 原员窑皂泽 原员冤遥
转化后的农杆菌重悬与 员 皂蕴 再耘孕培养基中袁以 圆愿益尧
园苑远员
摇 怨 期 大豆生长素响应因子基因 郧皂粤砸云员苑 对胚轴生长发育的调控作用
注院皂郧皂粤砸云员苑 部分靶序列 与 郧皂鄄皂蚤砸员远园 作用位点的比较遥 在编码氨基酸不变的情况下修改 郧皂鄄皂蚤砸员远园 的结合位点遥
晕燥贼藻院 粤造蚤早灶皂藻灶贼 燥枣 责葬则贼蚤葬造 皂砸晕粤 泽藻择怎藻灶糟藻泽 燥枣 皂郧皂粤砸云员苑 憎蚤贼澡 郧皂鄄皂蚤砸员远园援 栽澡藻 皂郧皂粤砸云员苑 蚤泽 贼澡藻 皂燥凿蚤枣蚤藻凿 皂砸晕粤 贼澡葬贼 澡葬则遭燥则泽
泽赠灶燥灶赠皂燥怎泽 灶怎糟造藻燥贼蚤凿藻 泽怎遭泽贼蚤贼怎贼蚤燥灶泽 蚤灶 皂蚤砸员远园 遭蚤灶凿蚤灶早 泽蚤贼藻泽援
图 员摇 皂郧皂粤砸云员苑 皂砸晕粤与 郧皂鄄皂蚤砸员远园 配对示意图
云蚤早援 员摇 杂糟澡藻皂葬贼蚤糟 凿蚤葬早则葬皂 燥枣 皂葬贼糟澡蚤灶早 泽贼则葬贼藻早赠 遭藻贼憎藻藻灶 皂郧皂粤砸云员苑 葬灶凿 郧皂鄄皂蚤砸员远园援
注院皂郧皂粤砸云员苑 由 郧皂粤砸云员苑 的 缘忆和 猿忆端调控序列来调控曰植物筛选抗生素为卡那霉素和草甘膦袁相应基因由花椰菜病毒 猿缘杂
启动子驱动曰蕴月和 砸月分别为 栽鄄阅晕粤左右边界遥
晕燥贼藻院 砸藻泽蚤泽贼葬灶贼 增藻则泽蚤燥灶 皂郧皂粤砸云员苑 蚤泽 凿则蚤增藻灶 遭赠 蚤贼泽藻造枣 则藻早怎造葬贼蚤燥灶 藻造藻皂藻灶贼泽援 晕孕栽陨陨 葬灶凿 孕孕栽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 葬灶贼蚤遭蚤燥贼蚤糟泽 蚤灶 责造葬灶贼泽援 猿缘杂院 糟葬怎造蚤枣造燥憎藻则
皂燥泽葬蚤糟 增蚤则怎泽援 蕴月院 蕴藻枣贼 遭燥则凿藻则援 砸月院 砸蚤早澡贼 遭燥则凿藻则援
图 圆摇 责郧皂粤砸云员苑颐 颐皂 郧皂粤砸云员苑 双元表达载体 栽鄄阅晕粤结构
云蚤早援 圆摇 栽鄄阅晕粤 泽贼则怎糟贼怎则藻 燥枣 贼澡藻 责郧皂粤砸云员苑颐 颐皂 郧皂粤砸云员苑 遭蚤灶葬则赠 增藻糟贼燥则
圆园园 则窑皂蚤灶 原员培养 圆 耀 猿 澡袁然后取 缘园 耀 员园园 滋蕴 涂在具
有卡那霉素和潮酶素 渊匀赠早砸 冤双抗 再耘孕 培养基上袁
圆愿益倒置培养 圆 耀 猿 凿遥 挑选已分散开的单克隆袁经菌
裂解 孕悦砸鉴定稳定表达的阳性克隆袁用子叶节法转化
大豆渊科丰 猿源袁天津农科院提供冤遥
员郾 圆郾 缘摇 载大豆转化摇 以科丰 猿源 品种大豆为材料袁采
用子叶节法进行转化咱圆员 原 圆圆暂 遥 各转化培养基的成分为院
员冤 萌发培养基 渊 郧葬皂遭燥则早 月缘 遭葬泽藻 泽葬造贼袁 杂怎糟则燥泽藻 猿园
皂早窑蕴 原员袁 责匀 值 缘郾 愿袁 粤早葬则 远郾 缘 早窑蕴 原员冤曰圆冤共培养培
养基渊员 辕 员园 郧葬皂遭燥则早 月缘 遭葬泽藻 泽葬造贼袁 郧葬皂遭燥则早 月缘 灾蚤贼葬皂蚤灶袁
酝耘杂 猿郾 怨 早 窑 蕴 原员袁 杂怎糟则燥泽藻 猿园早 窑 蕴 原员袁 月粤孕 员郾 愿
皂早窑蕴 原员袁 郧粤猿 园郾 圆 皂早窑 蕴 原员袁 粤杂 园郾 员 早窑 蕴 原员袁 阅栽栽
圆园园 皂早窑 蕴 原员袁 悦赠泽贼藻蚤灶藻 源园园 皂早窑 蕴 原员袁 责匀 值 缘郾 圆袁
粤早葬则 源郾 缘 早窑 蕴 原员冤曰猿冤芽诱导培养基渊郧葬皂遭燥则早 月缘 遭葬泽藻
泽葬造贼袁 郧葬皂遭燥则早 月缘 灾蚤贼葬皂蚤灶袁 酝耘杂 员郾 圆 早窑蕴 原员袁 杂怎糟则燥泽藻
猿园 早窑 蕴 原员袁 月粤孕 员郾 愿 皂早窑 蕴 原员袁 悦藻枣 圆园园皂早窑蕴 原员袁
悦葬则遭 缘园园 皂早窑 蕴 原员袁 匀赠早 圆缘 耀 缘园 皂早窑蕴 原员袁责匀值 缘郾 源袁
孕澡赠贼葬早藻造 猿郾 园 早窑 蕴 原员 冤曰源冤生根培养基渊郧葬皂遭燥则早 月缘
遭葬泽藻 泽葬造贼袁 郧葬皂遭燥则早 月缘 灾蚤贼葬皂蚤灶袁 酝耘杂 员郾 圆 早 窑 蕴 原员袁
杂怎糟则燥泽藻猿园 早窑 蕴 原员袁 陨粤粤 造 皂早窑 蕴 原员袁 责匀 值 缘郾 愿袁 粤早葬则
远郾 缘 早窑蕴 原员冤遥 大豆筛选抗生素为潮霉素袁筛选过程辅
助以头孢霉素来去除残留农杆菌遥
员郾 圆郾 远摇 下胚轴长度测量摇 一定生长时期的大豆小苗
整齐排列于黑塑料板上袁用 晕陨运韵晕 悦韵韵蕴孕陨载 蕴员圆园 相
机渊日本冤拍照袁照片存入电脑后用 陨皂葬早藻允软件进行下
胚轴长度的测量遥 所有转基因植株都是用稳定遗传的
栽圆 植株进行的遥 所有试验均至少 猿 次生物学重复遥
试验数据采用 杂贼怎凿藻灶贼爷栽 检验分析遥
员郾 圆郾 苑摇 下胚轴游离生长素 陨粤粤 测定摇 大豆下胚轴游
离生长素 陨粤粤测定采用渊陨粤粤冤耘蕴陨杂粤 运蚤贼渊上海瑶韵生
物科技有限公司冤遥
员郾 圆郾 愿摇 半定量 孕悦砸摇 半定量 孕悦砸的材料为营养生长
期渊灾悦冤幼苗的下胚轴袁试验流程按文献咱圆猿 暂方法进
行遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 郧皂粤砸云员苑 在下胚轴中表达最低
基因表达模式可以为其功能研究提供一定的线
索遥 为了分析 郧皂粤砸云员苑 在大豆发育过程中表达模式袁
本研究分别提取生长 员园尧圆园尧圆缘 凿 大豆侧根尧主根尧下
胚轴和子叶的总 砸晕粤袁初步定量后进行反转录袁反转
录产物进行荧光定量 孕悦砸遥 本研究发现 郧皂粤砸云员苑 在
侧根中表达最高袁而在下胚轴中表达最低渊图 猿冤遥
圆郾 圆摇 郧皂粤砸云员苑 表达受外源生长素诱导
生长素响应因子渊粤砸云泽冤是生长素信号组分的重
要成员袁和生长素受体 栽陨砸员尧粤怎曾 辕 陨粤粤 转录因子和具
生长素响应元件渊粤怎曾砸耘泽袁栽郧栽悦晕悦冤的下游基因共同
组成生长素细胞信号转导通路咱员园暂 遥 生长素信号组分
很多成员的转录受外源生长素快速诱导袁这些基因为
员苑远员
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
图 猿摇 郧皂粤砸云员苑 在大豆幼苗各器官中的表达模式
云蚤早援 猿摇 耘曾责则藻泽泽蚤燥灶 责葬贼贼藻则灶 燥枣 郧皂粤砸云员苑
贼澡则燥怎早澡 燥则早葬灶泽 蚤灶 泽燥赠遭藻葬灶 泽藻藻凿造蚤灶早
生长素快速诱导基因遥 在外源生长素处理下胚轴
员缘皂蚤灶 后袁 郧皂粤砸云员苑 皂砸晕粤 表达水平明显提高遥
郧皂粤砸云员苑 皂砸晕粤表达水平在处理 圆园皂蚤灶 后达到最高
水平袁 表达量达到处理前的 缘 倍 渊图 源 冤袁 表明
郧皂粤砸云员苑 是生长素快速诱导基因遥
注院粤院 皂郧皂粤砸云员苑 转基因植株的 孕悦砸鉴定遥 员院 正对照曰圆 耀 源院 皂郧皂粤砸云员苑 原 远 辕 愿 辕 员缘曰缘院 负对照曰酝院 阅晕粤标准分子量遥 月院 半定量 孕悦砸分
摇 摇 摇 摇 析 郧皂粤砸云员苑 在野生型和转基因植株中表达遥 宰栽院 野生型植株曰皂郧皂粤砸云员苑 原 远 辕 愿 辕 员缘院猿 个转基因植株株系援
晕燥贼藻院 粤院 陨凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 皂郧皂粤砸云员苑 贼则葬灶泽早藻灶蚤糟 责造葬灶贼泽 憎蚤贼澡 孕悦砸援 员院 责燥泽蚤贼蚤增藻 糟燥灶贼则燥造援 圆 贼燥 源院 皂郧皂粤砸云员苑 原 远 辕 愿 辕 员缘曰缘院 晕藻早葬贼蚤增藻 糟燥灶贼则燥造援 酝院 阅晕粤
泽贼葬灶凿葬则凿 皂葬则噪藻则援 月院 耘曾责则藻泽泽蚤燥灶 葬灶葬造赠泽蚤泽 枣燥则 皂郧皂粤砸云员苑 贼则葬灶泽早藻灶蚤糟 责造葬灶贼泽 怎泽蚤灶早 泽藻皂蚤鄄择怎葬灶贼蚤贼葬贼蚤增藻 孕悦砸援 宰栽院 宰蚤造凿 贼赠责藻援 皂郧皂粤砸云员苑 原 远 辕 愿 辕 员缘院
摇 摇 摇 摇 栽澡则藻藻 蚤灶凿藻责藻灶凿藻灶贼 贼则葬灶泽早藻灶蚤糟 造蚤灶藻泽援
图 缘摇 皂郧皂粤砸云员苑 转基因植株的鉴定
云蚤早援 缘摇 陨凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 贼则葬灶泽早藻灶蚤糟 责造葬灶贼泽 藻曾责则藻泽泽蚤灶早 则藻泽蚤泽贼葬灶贼 增藻则泽蚤燥灶 燥枣 郧皂粤砸云员苑
圆郾 猿摇 郧皂粤砸云员苑 抗降解表达抑制下胚轴伸长
由于大豆染色体为古多倍体渊孕造葬藻燥责燥造赠责造燥蚤凿冤 咱圆源暂 袁
基因组较大袁基因结构和基因组成与拟南芥和水稻有
一定的区别袁所以用基因缺失突变方式研究大豆
郧皂粤砸云员远 的功能较为困难遥 而通过修饰 郧皂葬鄄
皂蚤则砸员远园 的配对位点袁构建 皂郧皂粤砸云员苑 转基因植株袁可
以从获得性功能角度来研究 郧皂粤砸云员苑 的功能遥 通过
抗降解载体渊 责郧皂粤砸云员苑 颐 颐 皂郧皂粤砸云员苑冤构建和子叶节
转化袁本研究获得了抗降解表达 郧皂粤砸云员苑 的转基因植
株渊皂郧皂粤砸云员苑 原 远 辕 愿 辕 员缘冤 渊图 缘冤遥 转基因植株茎尧叶
和生殖器官发育没有显著变化袁可以产生下一代
图 源摇 外源生长素快速调节 郧皂粤砸云员苑 的表达
云蚤早援 源摇 耘曾燥早藻灶燥怎泽 葬责责造蚤藻凿 葬怎曾蚤灶 蚤灶凿怎糟藻泽
藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 燥枣 郧皂粤砸云员苑 择怎蚤糟噪造赠 蚤灶 澡赠责燥糟燥贼赠造泽
渊栽圆冤袁但所有 皂郧皂粤砸云员苑 转基因植株的下胚轴比对照
组渊空载体转化冤和野生型要短渊图 远冤袁表明 郧皂粤砸云员苑
编码的蛋白直接参与下胚轴的细胞生长过程并抑制下
胚轴的伸长遥
圆郾 源摇 郧皂粤砸云员苑 抗降解表达不影响生长素的敏感性
郧皂粤砸云泽通过抑制或激活下游基因方式参与生长
素信 号 调 控遥 皂郧皂粤砸云员苑 抗 降 解 表 达 造 成
郧皂粤砸云员苑皂砸晕粤 稳定性增加且 皂郧皂粤砸云员苑 转基因植
株的下胚轴细胞伸长受到抑制袁暗示 郧皂葬鄄皂蚤则砸员远园 和
靶基因之间的平衡关系在下胚轴伸长发育过程中显得
非常重要遥 下胚轴的细胞伸长受到抑制可能影响到下
胚轴对外源生长素敏感性遥 为了探究转基因下胚轴对
生长素敏感性袁本研究把各基因型种子种在含有不同
浓度生长素的培养基上并放在黑暗条件下连续培养
员园凿遥 结果发现袁转基因植株和野生型对照下胚轴受到
生长素抑制程度基本相同渊图 苑冤袁表明 郧皂粤砸云员苑 抗降
解表达并没有影响到下胚轴对外源生长素的敏感性遥
圆苑远员
摇 怨 期 大豆生长素响应因子基因 郧皂粤砸云员苑 对胚轴生长发育的调控作用
注院鄢鄢表示 责 约 园郾 园员 差异极显著遥
晕燥贼藻院 鄢鄢蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽贼则燥灶早 泽贼葬贼蚤泽贼蚤糟 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶糟藻 葬贼 园郾 园员 造藻增藻造援
图 远摇 郧皂粤砸云员苑 抗降解表达抑制大豆下胚轴伸长
云蚤早援 远摇 砸藻泽蚤泽贼葬灶贼 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 枣燥则 郧皂粤砸云员苑
泽怎责责则藻泽泽藻泽 泽燥赠遭藻葬灶 澡赠责燥糟燥贼赠造泽 早则燥憎贼澡
图 苑摇 外源生长素 陨粤粤对 皂郧皂粤砸云员苑 转基因
植株下胚轴伸长的影响
云蚤早援 苑摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 藻曾燥早藻灶燥怎泽 陨粤粤 燥灶 藻造燥灶早葬贼蚤燥灶
燥枣 皂郧皂粤砸云员苑 澡赠责燥糟燥贼赠造泽
圆郾 缘摇 郧皂粤砸云员苑 抗降解表达导致游离生长素浓度降
低
植物下胚轴生长主要表现为下胚轴细胞伸长遥 下
胚轴细胞伸长受到光尧生长素和赤霉素等多个因子的
影响遥 增加内源游离生长素浓度可以促进下胚轴的伸
长袁而增加光强则抑制下胚轴的细胞伸长遥 郧皂粤砸云员苑
抗降解表达转基因植株下胚轴较短袁暗示其下胚轴的
游离生长素含量可能会减少遥 本研究分析了野生型袁
转基因对照和抗降解表达植株下胚轴的游离 陨粤粤 含
量遥 结果发现袁抗降解表达转基因大豆下胚轴游离
陨粤粤含量明显低于野生型和转基因对照渊表 圆冤袁提示
皂郧皂粤砸云员苑 通过降低游离 陨粤粤 含量来抑制下胚轴的
细胞伸长遥 进一步分析发现袁影响 陨粤粤 动态平衡的基
因 郧皂郧匀猿郾 远 表达上调渊图 愿冤袁而 郧皂郧匀猿郾 远 编码的产
物是与游离态的 陨粤粤 螯合袁形成螯合态的 陨粤粤袁说明
皂郧皂粤砸云员苑 下胚轴游离 陨粤粤 被 郧皂郧匀猿郾 远 过多地螯
合袁导致游离的 陨粤粤 含量下降遥 此外袁郧皂杂粤哉砸圆郾 猿尧
郧皂陨粤粤圆 和 郧皂粤砸郧韵杂是促进细胞生长的基因袁这些基
因在 皂郧皂粤砸云员苑 植株中受到一定程度抑制渊图 愿冤袁暗
示 郧皂粤砸云员苑 可能直接结合到这些基因的启动子区域
并抑制它们的转录进而抑制细胞生长遥
表 圆摇 生长 员园凿大豆下胚轴游离 陨粤粤含量
栽葬遭造藻 圆摇 云则藻藻 陨粤粤 造藻增藻造泽 蚤灶 澡赠责燥糟燥贼赠造泽 燥枣
员园 原 凿葬赠鄄燥造凿 造蚤早澡贼鄄早则燥憎灶 泽藻藻凿造蚤灶早泽
基因型
郧藻灶燥贼赠责藻
陨粤粤含量
陨粤粤 糟燥灶贼藻灶贼泽 辕 渊灶早窑早 原员云宰冤
科丰 猿源 远郾 猿怨 依 园郾 圆圆 葬
对照 远郾 圆怨 依 园郾 员远 葬
皂粤砸云员苑 原 远 源郾 猿怨 依 园郾 员愿 遭
皂粤砸云员苑 原 愿 源郾 员远 依 园郾 园苑 糟
皂粤砸云员苑 原 员缘 源郾 圆源 依 园郾 员员 遭
摇 摇 注院图中数值是平均值 依 标准差袁不相同字母表示差异显著渊 责 约
园郾 园缘冤遥
晕燥贼藻院 阅葬贼葬 则藻责则藻泽藻灶贼 皂藻葬灶 依 杂阅援 栽澡藻 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 造藻贼贼藻则泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻
泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 园郾 园缘 造藻增藻造援
注院 郧皂杂粤哉砸圆郾 猿尧郧皂陨粤粤圆 和 郧皂粤砸郧韵杂 是生长素早期响应基因曰
郧皂粤砸郧韵杂 是生长素螯合基因遥
晕燥贼藻院 郧皂杂粤哉砸圆郾 猿袁 郧皂陨粤粤圆 葬灶凿 郧皂粤砸郧韵杂 葬则藻 藻葬则造赠 葬怎曾蚤灶 则藻泽责燥灶泽藻
早藻灶藻泽 葬灶凿 郧皂粤砸郧韵杂 蚤泽 葬 早藻灶藻 蚤灶增燥造增藻凿 蚤灶 葬怎曾蚤灶 糟澡藻造葬贼蚤燥灶 蚤灶 增蚤增燥援
图 愿摇 皂郧皂粤砸云员苑 对 郧皂杂粤哉砸圆郾 猿尧郧皂陨粤粤圆尧
郧皂粤砸郧韵杂和 郧皂郧匀猿郾 远 表达的影响
云蚤早援 愿摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 皂郧皂粤砸云员苑 燥灶 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 造藻增藻造泽 燥枣 早藻灶藻泽
郧皂杂粤哉砸圆郾 猿袁 郧皂陨粤粤圆袁 郧皂粤砸郧韵杂 葬灶凿 郧皂郧匀猿郾 远
圆郾 远 摇 皂郧皂粤砸云员苑 通过 郧皂鄄酝陨砸员远园粤 间接抑制
郧皂粤砸云员园 和 郧皂粤砸云员远 的表达
郧皂鄄酝陨砸员远园粤编码的成熟 郧皂鄄皂蚤砸员远园粤 通过识别
靶基因 郧皂粤砸云员园袁郧皂粤砸云员远 和 郧皂粤砸云员苑袁抑制它们的
转录和 辕或翻译袁精确地调控细胞的生长和发育袁各靶
猿苑远员
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
基因在特定的细胞和组织发育进程中发挥重要的生物
学功能遥 在 皂郧皂粤砸云员苑 下 胚 轴 中袁 郧皂粤砸云员园 和
郧皂粤砸云员远 下降渊图 怨冤曰进一步分析发现 郧皂鄄酝陨砸员远园粤
的表达水平显著提高袁暗示 皂郧皂粤砸云员苑 通过 郧皂鄄
酝陨砸员远园粤间接抑制 郧皂粤砸云员园 和 郧皂粤砸云员远 的表达遥
图 怨摇 皂郧皂粤砸云员苑 影响 郧皂鄄酝陨砸员远园粤尧
郧皂粤砸云员园 和 郧皂粤砸云员远 的表达
云蚤早援 怨摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 皂郧皂粤砸云员苑 燥灶 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 燥枣
郧皂鄄酝陨砸员远园粤袁 郧皂粤砸云员园 葬灶凿 郧皂粤砸云员远 蚤灶 澡赠责燥糟燥贼赠造泽
猿摇 讨论
生长素响应因子 粤砸云泽 参与植物生长袁发育等多
个生物学过程遥 在蛋白结构域分布和组成上袁不同的
响应因子有一定的差异袁而这可能决定它们功能上的
差异遥 郧皂粤砸云员园尧 郧皂粤砸云员远 和 郧皂粤砸云员苑 都是 郧皂鄄
注院方框代表蛋白结构域而直线代表连接结构域之间的氨基酸序列遥
晕燥贼藻院月燥曾 则藻责则藻泽藻灶贼泽 责则燥贼藻蚤灶 凿燥皂葬蚤灶 憎澡藻则藻葬泽 造蚤灶藻泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 葬皂蚤灶燥 葬糟蚤凿 泽藻择怎藻灶糟藻泽 造蚤灶噪蚤灶早 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 凿燥皂葬蚤灶泽援
图 员园摇 生长素响应因子 粤砸云员园 辕 员远 辕 员苑 的结构域构成示意图
云蚤早援 员园摇 杂糟澡藻皂葬贼蚤糟 燥枣 凿燥皂葬蚤灶 责葬贼贼藻则灶 燥枣 葬怎曾蚤灶 则藻泽责燥灶泽藻 枣葬糟贼燥则泽 粤砸云员园 辕 员远 辕 员苑
酝陨砸员远园粤的靶基因袁进化上聚为一类袁但 郧皂粤砸云员苑 的
结构域构成与 郧皂粤砸云员园尧 郧皂粤砸云员远 明 显 不 同袁
郧皂粤砸云员苑 缺少 粤哉载 赃 陨粤粤 结构域 渊图 员园 冤袁暗示
郧皂粤砸云员苑 具有与 郧皂粤砸云员园袁郧皂粤砸云员远 不同的生物学
功能遥 通 过 比 较 皂郧皂粤砸云员园 或 皂郧皂粤砸云员远 与
皂郧皂粤砸云员苑 大豆的表型袁发现它们参与调控的器官不
一样袁皂郧皂粤砸云员园 和 皂郧皂粤砸云员远 植株叶片衰老进程受
到影响袁而 皂郧皂粤砸云员苑 除调控下胚轴伸长外袁叶片衰
老并没有受到影响袁暗示 粤砸云泽的 粤哉载赃陨粤粤 结构域对
叶片发育调控起重要作用袁但对大豆下胚轴发育的作
用不大遥
和野生型相比袁皂郧皂粤砸云员苑 下胚轴长度缩短渊图
远冤袁游离生长素 陨粤粤含量明显降低渊表 圆冤袁郧皂粤砸郧韵杂尧
郧皂杂粤哉砸圆郾 猿尧郧皂陨粤粤圆 表达下调和 郧皂郧匀猿郾 远 表达上调
渊图 愿冤袁表明 郧皂粤砸云员苑 直接参与调控下胚轴的细胞
伸长过程袁是下胚轴伸长的负调节因子遥 郧皂粤砸郧韵杂尧
郧皂杂粤哉砸圆郾 猿尧郧皂陨粤粤圆 是受生长素快速诱导的调节细
胞生长基因袁这些基因的表达在 皂郧皂粤砸云员苑 下胚轴中
受到抑制袁表明 皂郧皂粤砸云员苑 减弱了生长素细胞信号转
导过程遥 郧皂郧匀猿郾 远 编码的产物是螯合 陨粤粤 酶袁
郧皂郧匀猿郾 远 转录增加暗示细胞内螯合游离 陨粤粤 程度的
加强袁而这种增强势必造成游离生长素浓度的下降
渊表 圆冤遥 当然袁游离 陨粤粤 浓度下降也可能是由于生长
素合成基因表达下降所造成的袁我们比较了生长素合
成基因在野生型和转基因植株之间的表达袁发现没有
显著改变袁表明 郧皂粤砸云员苑 主要通过 郧皂郧匀猿郾 远 来调控
陨粤粤的存在形态和 辕或动态平衡遥
为了探究 皂郧皂粤砸云员苑 下胚轴对外源生长素的反
应袁本研究把转基因和野生型大豆直接接种在含有不
同浓度的生长素培养基上袁观察下胚轴生长变化袁比较
各自的抑制程度遥 分析发现袁虽然 皂郧皂粤砸云员苑 下胚轴
较短袁但对外源生长素反应与对照基本一致袁暗示细胞
的信号转导过程和外源生长素反应是相对独立的遥
成熟的 酝蚤糟则燥砸晕粤 通过不完全互补模式识别相应
的靶基因并抑制靶基因的转录和 辕或翻译咱圆缘 原 圆愿暂 遥 在大
豆下胚轴发育进程中袁郧皂鄄酝陨砸员远园粤 编码的成熟 郧皂鄄
皂蚤砸员远园粤 通过识别 郧皂粤砸云员园袁郧皂粤砸云员远 和 郧皂粤砸云员苑
并抑制其转录和 辕或翻译遥 植物通过这种抑制关系精
确地调控细胞的生长和发育遥 然而袁当一个成熟的小
砸晕粤基因抑制多个靶基因时袁这些靶基因间是否存在
有相互调控还不太清楚遥 在 皂郧皂粤砸云员苑 下胚轴中袁
郧皂鄄酝陨砸员远园粤的表达增加而 郧皂粤砸云员园 和 郧皂粤砸云员远 下
降袁暗示 皂郧皂粤砸云员苑 通过 郧皂鄄酝陨砸员远园粤 间接抑制
郧皂粤砸云员园 和 郧皂粤砸云员远 的表达遥 这种靶基因间的相互
调控可能是下胚轴细胞伸长所需的靶基因 郧皂粤砸云泽 总
源苑远员
摇 怨 期 大豆生长素响应因子基因 郧皂粤砸云员苑 对胚轴生长发育的调控作用
量是一定的袁当这种平衡被打破时袁细胞须通过直接或
间接途径来修正这种平衡遥
源摇 结论
大豆生长素响应因子 郧皂粤砸云员苑 是生长素快速反
应基因袁通过 郧皂郧匀猿郾 远 来抑制游离生长素 陨粤粤 含量袁
调节下胚轴的细胞伸长遥 郧皂鄄酝陨砸员远园粤 及其靶基因
渊郧皂粤砸云员园袁郧皂粤砸云员远 和 郧皂粤砸云员苑冤组成调节网络袁参
与大豆下胚轴的生长与发育遥
参考文献院
咱 员 暂摇 悦藻灶凿则藻葬怎 耘袁 栽则葬葬泽 允袁 阅藻皂燥泽 栽袁 悦则葬灶凿躁藻葬灶 韵袁 悦葬遭燥糟澡藻 酝袁 匀燥枣贼藻
匀援 悦藻造造怎造葬则 遭葬泽蚤泽 燥枣 澡赠责燥糟燥贼赠造 早则燥憎贼澡 蚤灶 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 贼澡葬造蚤葬灶葬咱 允暂 援
孕造葬灶贼 孕澡赠泽蚤燥造燥早赠袁 员怨怨苑袁 员员源渊员冤院 圆怨缘 原 猿园缘
咱 圆 暂摇 酝燥则则藻 阅 允袁 月则蚤早澡贼皂葬灶 粤 韵袁 匀蚤凿葬造早燥 粤袁 晕葬增葬泽 孕援 杂藻造藻糟贼蚤增藻
蚤灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 燥枣 葬怎曾蚤灶鄄泽贼蚤皂怎造葬贼藻凿 晕粤阅匀 燥曾蚤凿葬泽藻 葬糟贼蚤增蚤贼赠 葬灶凿 藻造燥灶早葬贼蚤燥灶
早则燥憎贼澡 燥枣 泽燥赠遭藻葬灶 澡赠责燥糟燥贼赠造泽 遭赠 贼澡蚤燥造 则藻葬早藻灶贼泽咱允暂 援 孕造葬灶贼 孕澡赠泽蚤燥造燥早赠袁
员怨怨缘袁 员园苑渊源冤院 员圆愿缘 原 员圆怨员
咱 猿 暂摇 郧则葬赠 宰 酝袁 韵泽贼蚤灶 粤袁 杂葬灶凿遭藻则早 郧袁 砸燥皂葬灶燥 悦 孕袁 耘泽贼藻造造藻 酝援 匀蚤早澡
贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 责则燥皂燥贼藻泽 葬怎曾蚤灶鄄皂藻凿蚤葬贼藻凿 澡赠责燥糟燥贼赠造泽 藻造燥灶早葬贼蚤燥灶 蚤灶
粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽咱 允暂 援 孕则燥糟藻藻凿蚤灶早泽 燥枣 贼澡藻 晕葬贼蚤燥灶葬造 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁
员怨怨愿袁 怨缘渊员圆冤院 苑员怨苑 原 苑圆园圆
咱 源 暂摇 酝燥则藻造造 郧袁 砸怎遭藻则贼蚤 陨援 杂澡葬凿藻 葬增燥蚤凿葬灶糟藻 则藻泽责燥灶泽藻泽援 阅则蚤增蚤灶早 葬怎曾蚤灶 葬造燥灶早
造葬贼藻则葬造 则燥怎贼藻泽咱允暂 援 孕造葬灶贼 孕澡赠泽蚤燥造燥早赠袁 圆园园园袁员圆圆渊猿冤院远圆员 原 远圆远
咱 缘 暂摇 杂憎葬则怎责 砸援 粤怎曾蚤灶 糟则燥泽泽鄄贼葬造噪院 陨灶贼藻早则葬贼蚤燥灶 燥枣 泽蚤早灶葬造蚤灶早 责葬贼澡憎葬赠 贼燥
糟燥灶贼则燥造 责造葬灶贼 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼咱 允暂 援 孕造葬灶贼 酝燥造藻糟怎造葬则 月蚤燥造燥早赠袁 圆园园圆袁 源怨
渊猿 辕 源冤院源员员 原 源圆远
咱 远 暂摇 栽蚤葬灶 悦 耘袁 酝怎贼燥 匀袁 匀蚤早怎糟澡蚤 运袁 酝葬贼葬皂怎则葬 栽袁 栽葬贼藻皂葬贼泽怎 运袁 运燥泽澡蚤遭葬
栽袁 再葬皂葬皂燥贼燥 运 栽援 阅蚤泽则怎责贼蚤燥灶 葬灶凿 燥增藻则藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 燥枣 葬怎曾蚤灶 则藻泽责燥灶泽藻
枣葬糟贼燥则 愿 早藻灶藻 燥枣 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 葬枣枣藻糟贼 澡赠责燥糟燥贼赠造 藻造燥灶早葬贼蚤燥灶 葬灶凿 则燥燥贼
早则燥憎贼澡 澡葬遭蚤贼袁蚤灶凿蚤糟葬贼蚤灶早 蚤贼泽 责燥泽泽蚤遭造藻 蚤灶增燥造增藻皂藻灶贼 蚤灶 葬怎曾蚤灶 澡燥皂藻燥泽贼葬泽蚤泽
蚤灶 造蚤早澡贼 糟燥灶凿蚤贼蚤燥灶咱允暂 援 孕造葬灶贼 允燥怎则灶葬造袁 圆园园源袁 源园渊猿冤院猿猿猿 原 猿源猿
咱 苑 暂摇 蕴藻赠泽藻则 韵援 阅赠灶葬皂蚤糟 蚤灶贼藻早则葬贼蚤燥灶 燥枣 葬怎曾蚤灶 贼则葬灶泽责燥则贼 葬灶凿 泽蚤早灶葬造蚤灶早 咱允暂 援
悦怎则则藻灶贼 月蚤燥造燥早赠袁 圆园园远袁 员远渊员员冤院 源圆源 原 源猿猿
咱 愿 暂摇 阅澡葬则皂葬泽蚤则蚤 晕袁 耘泽贼藻造造藻 酝援 粤怎曾蚤灶 泽蚤早灶葬造蚤灶早 葬灶凿 则藻早怎造葬贼藻凿 责则燥贼藻蚤灶
凿藻早则葬凿葬贼蚤燥灶 咱允暂 援 栽则藻灶凿泽 孕造葬灶贼 杂糟蚤藻灶糟藻袁 圆园园源袁怨渊远冤院猿园圆 原 猿园愿
咱 怨 暂摇 栽蚤憎葬则蚤 杂 月袁 宰葬灶早 载 允袁 匀葬早藻灶 郧袁 郧怎蚤造枣燥赠造藻 栽 允援 粤怎曾 辕 陨粤粤 责则燥贼藻蚤灶泽
葬则藻 葬糟贼蚤增藻 则藻责则藻泽泽燥则泽 葬灶凿 贼澡藻蚤则 泽贼葬遭蚤造蚤贼赠 葬灶凿 葬糟贼蚤增蚤贼赠 葬则藻 皂燥凿怎造葬贼藻凿 遭赠
葬怎曾蚤灶 咱允暂 援 孕造葬灶贼 悦藻造造袁 圆园园员袁员猿渊员圆冤院 圆愿园怨 原 圆愿圆圆
咱员园暂 摇 运藻责蚤灶泽噪蚤 杂袁 蕴藻赠泽藻则 韵援 栽澡藻 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 云鄄遭燥曾 责则燥贼藻蚤灶 栽陨砸造 蚤泽 葬灶
葬怎曾蚤灶 则藻糟藻责贼燥则 咱允暂 援 晕葬贼怎则藻袁 圆园园缘袁源猿缘 渊苑园源员冤院源源远 原 源缘员
咱员员暂 摇 再葬灶早 载袁 蕴藻藻 杂袁 杂燥 允 匀袁 阅澡葬则皂葬泽蚤则蚤 杂袁 阅澡葬则皂葬泽蚤则蚤 晕袁 郧藻 蕴袁 允藻灶泽藻灶
悦袁 匀葬灶早葬则贼藻则 砸袁 匀燥遭遭蚤藻 蕴袁 耘泽贼藻造造藻 酝援 栽澡藻 陨粤粤员 责则燥贼藻蚤灶 藻灶糟燥凿藻凿
遭赠 粤载砸缘 葬灶凿 蚤泽 泽怎遭泽贼则葬贼藻 燥枣 杂悦云栽 砸陨 造 咱允暂 援 孕造葬灶贼 允燥怎则灶葬造袁 圆园园源袁 源园
渊缘冤院 苑苑圆 原 苑愿圆
咱员圆暂 摇 蕴蚤葬糟怎皂 耘袁 砸藻藻凿 允 宰援 郧藻灶藻贼蚤糟泽 燥枣 粤怎曾 辕 陨粤粤 葬灶凿 粤砸云 葬糟贼蚤燥灶 蚤灶 责造葬灶贼
早则燥憎贼澡 葬灶凿 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼 咱 允暂 援 孕造葬灶贼 酝燥造藻糟怎造葬则 月蚤燥造燥早赠袁 圆园园圆袁 源怨
渊猿 辕 源冤院猿愿苑 原 源园园
咱员猿暂 摇 栽葬灶 载袁 悦葬造凿藻则燥灶鄄灾蚤造造葬造燥遭燥泽 蕴 陨袁 杂澡葬则燥灶 酝袁 在澡藻灶早 悦袁 砸燥遭蚤灶泽燥灶 悦
灾袁 耘泽贼藻造造藻 酝袁 在澡藻灶早 晕援 酝藻糟澡葬灶蚤泽皂 燥枣 葬怎曾蚤灶 责藻则糟藻责贼蚤燥灶 遭赠 贼澡藻 栽陨砸员
怎遭蚤择怎蚤贼蚤灶 造蚤早葬泽藻咱允暂 援 晕葬贼怎则藻袁 圆园园苑袁 源源远渊苑员猿远冤院 远源园 原 远源缘
咱员源暂摇 砸藻藻凿 允 宰援 砸燥造藻泽 葬灶凿 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 燥枣 粤怎曾 辕 陨粤粤 责则燥贼藻蚤灶泽 蚤灶 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽援
栽则藻灶凿泽 孕造葬灶贼 咱允暂 援 杂糟蚤藻灶糟藻袁 圆园园员袁 远渊怨冤院源圆园 原 源圆缘
咱员缘暂摇 灾燥蚤灶灶藻贼 韵援 韵则蚤早蚤灶藻援 月蚤燥早藻灶藻泽蚤泽 葬灶凿 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 责造葬灶贼 皂蚤糟则燥砸晕粤泽
咱允暂 援 悦藻造造袁 圆园园怨袁员猿远 渊源冤院 远远怨 原 远愿苑
咱员远暂摇 杂怎灶噪葬则 砸袁 悦澡蚤灶灶怎泽葬皂赠 灾袁 在澡怎 允 匀袁 在澡怎 允 运援 杂皂葬造造 砸晕粤泽 葬泽 遭蚤早
责造葬赠藻则泽 蚤灶 责造葬灶贼 葬遭蚤燥贼蚤糟 泽贼则藻泽泽 则藻泽责燥灶泽藻泽 葬灶凿 灶怎贼则蚤藻灶贼 凿藻责则蚤增葬贼蚤燥灶咱允暂 援
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