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In vitro SELECTION FOR STRESS-RESISTANT MUTANTS AND SURVEY ON OFFSPRING CHARACTERISTICS OF PEANUT

离体筛选花生抗逆突变体及其后代特征特性研究



全 文 :核 农 学 报摇 圆园员圆袁圆远渊愿冤院员员园远 耀 员员员园
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员圆鄄园苑鄄圆圆摇 接受日期院圆园员圆鄄园怨鄄员苑
基金项目院山东省自然基金渊在砸圆园员圆悦酝园员源冤袁国家自然基金渊猿员员园员员苑愿冤袁山东省中青年科学家奖励基金渊 月杂圆园园怨晕再园圆愿冤袁山东省青年基金
渊在砸圆园员员悦匝园圆远冤
作者简介院赵明霞渊员怨愿缘鄄冤袁女袁山东潍坊人袁硕士研究生袁研究方向为花生细胞工程遥 耘鄄皂葬蚤造院扎皂曾园圆园远岳 赠葬澡燥燥援 糟燥皂援 糟灶曰
孙海燕渊员怨愿苑鄄冤袁女袁山东即墨人袁在读硕士研究生袁研究方向为植物细胞工程遥 耘鄄皂葬蚤造院赠葬灶扎蚤缘园圆苑岳 员圆远援 糟燥皂
赵明霞和孙海燕并列为本文第一作者遥
通讯作者院王晶珊渊员怨远园鄄冤袁女袁山东莱州人袁博士袁教授袁研究方向为花生遗传育种遥 耘鄄皂葬蚤造院躁泽憎葬灶早猿员怨岳 员圆远援 糟燥皂
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员圆冤园愿鄄员员园远鄄园缘
离体筛选花生抗逆突变体及其后代特征特性研究
赵明霞摇 孙海燕摇 隋炯明摇 乔利仙摇 范乾程摇 王晶珊
渊青岛农业大学生命科学学院 辕山东省高校植物生物技术重点实验室袁山东 青岛摇 圆远远员园怨冤
摘摇 要院在课题组前期研究确立的花生体胚诱导及高频率植株再生体系和确立的适宜平阳霉素渊孕再酝冤
诱变浓度基础上袁进行花生离体诱变及定向筛选抗逆突变体研究遥 以花生品种花育 圆园 号成熟种子胚小
叶为诱变材料袁在含 猿皂早 辕 蕴 孕再酝的诱导培养基上培养 源 周进行诱变处理遥 以羟脯氨酸渊匀再孕冤作为筛选
压力添加于培养基中袁确定体胚萌发阶段培养基中添加 源皂早 辕 蕴 匀再孕袁以及体胚萌发后添加 愿皂早 辕 蕴 匀再孕
为适宜浓度的筛选方法遥 圆园员员 年将获得的 匀再孕耐性苗经嫁接移栽田间袁成熟后 员猿 株耐性嫁接苗获得
种子遥 圆园员圆 年将 员猿 个单株的部分种子分别播种于田间袁生长发育阶段观察发现袁员圆 个耐性植株后代在
株高尧茎枝颜色尧株型尧开花习性等方面与诱变亲本不同袁明显表现出变异袁并且大部分植株后代性状发
生分离遥 员猿 个耐性单株中的 苑 个单株收获的其他种子分别播种于塑料大棚袁苗期进行干旱处理后袁大
部分植株生长正常袁而诱变亲本的生长明显受到抑制曰取干旱处理后的叶片测定 孕韵阅 活性和 杂韵阅 活
性袁结果显示袁这 苑 个耐性单株中的 缘 个单株后代 杂韵阅活性高于亲本袁这 缘 个单株后代中的 源 个 孕韵阅活
性也高于亲本遥
关键词院花生曰离体诱变曰耐羟脯氨酸曰抗逆突变体曰生理生化指标
陨灶 增蚤贼则燥 杂耘蕴耘悦栽陨韵晕 云韵砸 杂栽砸耘杂杂鄄砸耘杂陨杂栽粤晕栽 酝哉栽粤晕栽杂 粤晕阅 杂哉砸灾耘再 韵晕
韵云云杂孕砸陨晕郧 悦匀粤砸粤悦栽耘砸陨杂栽陨悦杂 韵云 孕耘粤晕哉栽
在匀粤韵 酝蚤灶早鄄曾蚤葬摇 杂哉晕 匀葬蚤鄄赠葬灶摇 杂哉陨 允蚤燥灶早鄄皂蚤灶早摇 匝陨粤韵 蕴蚤鄄曾蚤葬灶摇 云粤晕 匝蚤葬灶鄄糟澡藻灶早摇 宰粤晕郧 允蚤灶早鄄泽澡葬灶
渊运藻赠 蕴葬遭 燥枣 孕造葬灶贼 月蚤燥贼藻糟澡灶燥造燥早赠 蚤灶 哉灶蚤增藻则泽蚤贼蚤藻泽 燥枣 杂澡葬灶凿燥灶早袁 悦燥造造藻早藻 燥枣 蕴蚤枣藻 杂糟蚤藻灶糟藻袁 匝蚤灶早凿葬燥 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁
匝蚤灶早凿葬燥袁 杂澡葬灶凿燥灶早摇 圆远远员园怨冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 孕则藻增蚤燥怎泽 泽贼怎凿蚤藻泽 蚤灶 燥怎则 造葬遭 澡葬凿 藻泽贼葬遭造蚤泽澡藻凿 澡蚤早澡 枣则藻择怎藻灶糟赠 燥枣 责造葬灶贼 则藻早藻灶藻则葬贼蚤燥灶 泽赠泽贼藻皂 增蚤葬 泽燥皂葬贼蚤糟
藻皂遭则赠燥早藻灶藻泽蚤泽 葬灶凿 凿藻贼藻则皂蚤灶葬贼蚤燥灶 燥枣 贼澡藻 燥责贼蚤皂怎皂 皂怎贼葬贼蚤燥灶 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 燥枣 责蚤灶早赠葬灶早皂赠糟蚤灶 渊孕再酝冤袁 蚤灶 增蚤贼则燥 皂怎贼葬早藻灶藻泽蚤泽
葬灶凿 凿蚤则藻糟贼藻凿 泽糟则藻藻灶蚤灶早 枣燥则 泽贼则藻泽泽鄄则藻泽蚤泽贼葬灶贼 皂怎贼葬灶贼泽 燥枣 责藻葬灶怎贼 憎藻则藻 糟葬则则蚤藻凿 燥怎贼 蚤灶 贼澡蚤泽 泽贼怎凿赠援 栽澡藻 藻皂遭则赠燥灶蚤糟 造藻葬枣造藻贼泽 燥枣
责藻葬灶怎贼 糟增援 匀怎葬赠怎 圆园 憎藻则藻 糟怎造贼怎则藻凿 燥灶 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 皂藻凿蚤怎皂 泽怎责责造藻皂藻灶贼藻凿 憎蚤贼澡 猿皂早 辕 蕴 孕再酝 枣燥则 源 憎藻藻噪泽 贼燥 蚤灶凿怎糟藻
皂怎贼葬贼蚤燥灶援 匀赠凿则燥曾赠责则燥造蚤灶藻 渊匀再孕冤 憎葬泽 葬凿凿藻凿 贼燥 皂藻凿蚤怎皂 贼燥 责则燥增蚤凿藻 泽藻造藻糟贼蚤燥灶 责则藻泽泽怎则藻曰 贼澡藻 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 憎葬泽 源皂早 辕 蕴 枣燥则
泽燥皂葬贼蚤糟 藻皂遭则赠燥 早藻则皂蚤灶葬贼蚤燥灶 葬灶凿 愿皂早 辕 蕴 枣燥则 责造葬灶贼造藻贼 枣燥则皂葬贼蚤燥灶援 砸藻早藻灶藻则葬贼藻凿 皂怎贼葬灶贼 责造葬灶贼泽 憎藻则藻 贼则葬灶泽责造葬灶贼藻凿 贼燥 贼澡藻 枣蚤藻造凿
葬枣贼藻则 早则葬枣贼 葬灶凿 葬糟糟造蚤皂葬贼蚤燥灶袁 员猿 燥枣 贼澡藻皂 责则燥凿怎糟藻凿 责燥凿泽援 栽澡藻 泽藻藻凿泽 燥枣 贼澡藻泽藻 员猿 泽贼则葬蚤灶泽 憎藻则藻 泽燥憎灶 蚤灶 贼澡藻 枣蚤藻造凿袁 员圆 燥怎贼 燥枣
贼澡藻皂 藻曾澡蚤遭蚤贼藻凿 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 责造葬灶贼 贼赠责藻 糟燥皂责葬则藻凿 憎蚤贼澡 贼澡藻蚤则 憎蚤造凿 贼赠责藻 责葬则藻灶贼 凿怎则蚤灶早 泽藻藻凿造蚤灶早 泽贼葬早藻 葬灶凿 早则燥憎贼澡 泽贼葬早藻泽袁 葬灶凿
皂燥泽贼 燥枣 贼澡藻皂 泽澡燥憎藻凿 则藻皂葬则噪葬遭造藻 泽藻早则藻早葬贼蚤燥灶 燥枣 糟澡葬则葬糟贼藻则泽援 栽澡藻 则藻泽贼 泽藻藻凿泽 枣则燥皂 苑 燥枣 员猿 泽贼则葬蚤灶泽 皂藻灶贼蚤燥灶藻凿 葬遭燥增藻 憎藻则藻
远园员员
摇 愿 期 离体筛选花生抗逆突变体及其后代特征特性研究
泽燥憎灶 蚤灶 贼澡藻 早则藻藻灶 澡燥怎泽藻袁 葬灶凿 憎藻则藻 贼则藻葬贼藻凿 憎蚤贼澡 凿则燥怎早澡贼 泽贼则藻泽泽援 酝燥泽贼 燥枣 贼澡藻 责造葬灶贼泽 早则藻憎 灶燥则皂葬造造赠袁 憎澡蚤造藻 贼澡藻 憎蚤造凿 贼赠责藻
责葬则藻灶贼 泽澡燥憎藻凿 早则燥憎贼澡 则藻贼葬则凿葬贼蚤燥灶援 孕韵阅 葬灶凿 杂韵阅 葬糟贼蚤增蚤贼赠 憎藻则藻 凿藻贼藻则皂蚤灶藻凿 怎泽蚤灶早 造藻葬增藻泽 泽怎遭躁藻糟贼藻凿 贼燥 凿则燥怎早澡贼 泽贼则藻泽泽 葬泽
皂葬贼藻则蚤葬造援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 杂韵阅 增葬造怎藻泽 燥枣 缘 燥怎贼 燥枣 苑 造蚤灶藻泽 憎藻则藻 澡蚤早澡藻则 贼澡葬灶 贼澡葬贼 燥枣 贼澡藻 责葬则藻灶贼曰 贼澡藻 孕韵阅 增葬造怎藻泽
燥枣 贼澡藻泽藻 造蚤灶藻泽 葬造泽燥 澡蚤早澡藻则 贼澡葬灶 贼澡葬贼 燥枣 贼澡藻 责葬则藻灶贼 藻曾责藻糟贼 晕燥援 源圆援
运藻赠 憎燥则凿泽院责藻葬灶怎贼曰 蚤灶 增蚤贼则燥 皂怎贼葬早藻灶藻泽蚤泽曰 匀再孕鄄则藻泽蚤泽贼葬灶贼曰 泽贼则藻泽泽鄄则藻泽蚤泽贼葬灶贼 皂怎贼葬灶贼曰 责澡赠泽蚤燥造燥早蚤糟葬造 葬灶凿 遭蚤燥糟澡藻皂蚤糟葬造 蚤灶凿藻曾藻泽
摇 摇 随着环境的不断恶化袁干旱尧盐碱等逆境胁迫已成
为世界性的问题袁培育多种抗逆性的作物新品种已成
为广大育种工作者的主要育种目标之一遥 花生是我国
重要的油料作物和经济作物袁但花生栽培种中缺乏高
抗性品种资源袁抗逆品种的选育一直是一个难以解决
的问题咱员暂 遥 诱变能够产生自然界不存在的新性状尧新
类型咱圆暂 袁利用诱变与组织培养相结合进行定向筛选突
变体袁可节省人力尧物力尧财力袁缩短育种年限咱圆 耀 源暂 袁因
此袁离体诱变与组织培养结合是获得新种质的有效手
段咱缘暂 遥 利用诱变与组织培养相结合创造新的种质资
源研究已在多种植物上进行袁在抗病性尧抗逆性尧熟性尧
产量尧品质等方面获得了各种各样的优良突变体咱远 耀 怨暂 袁
有的突变体直接应用或作为亲本材料育成了新品
种咱员园袁员员暂 遥 花生离体诱变研究也有报道咱员袁员圆袁员猿暂 袁但仅有
少数获得突变体咱员源袁员缘暂 遥 灾藻灶噪葬贼葬糟澡葬造葬皂 等利用花生愈
伤组织作为诱变材料袁经 酌射线辐照和 酝耘杂诱变处理
后袁培养在含有黑斑病致病菌滤液的培养基上定向筛
选抗病突变体袁后代中获得了对黑斑病抗性明显提高
的植株咱员源暂 遥 酝怎贼澡怎泽葬皂赠 将花生胚性愈伤组织用 酌 射
线辐照尧酝耘杂或叠氮化钠处理后袁进行体胚诱导培养袁
再生植株中叶片形状有明显变化袁单株结果数和荚果
重明显提高咱员缘暂 遥
本课题组前期利用平阳霉素渊孕再酝冤作为诱变剂
进行花生离体诱变研究袁确立了适宜的平阳霉素诱变
浓度和诱变培养时间咱员圆暂 遥 在此基础上袁本研究以羟脯
氨酸作为抗逆筛选压力添加于培养基中袁进行定向筛
选抗逆突变体袁旨在为开拓花生新的育种途径奠定基
础袁获得的抗逆突变体可直接或间接用于花生育种遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 植物材料
供试材料院花生品种花育 圆园 号的成熟种子遥
员郾 圆摇 方法
员郾 圆郾 员摇 基本培养基及培养方法摇 基本培养基院体胚诱
导培养基为 酝杂月缘 垣 缘皂早 辕 蕴 圆袁源鄄阅 垣 猿园早 辕 蕴 蔗糖 垣 愿早 辕 蕴
琼脂曰体胚萌发培养基为 酝杂月缘 垣 源皂早 辕 蕴 月粤孕 垣 猿园早 辕 蕴
蔗糖 垣 愿早 辕 蕴 琼脂遥 培养条件均为 圆缘益尧员猿澡 辕 凿 光照尧
猿园园园造曾遥
员郾 圆郾 圆摇 平阳霉素诱变处理摇 以花育 圆园 号种子胚小叶
为诱变培养材料袁以 孕再酝作为诱变剂添加于培养基中
进行诱变处理遥 孕再酝 诱变浓度及诱变培养时间参照
赵明霞等的方法咱员圆暂 遥
选取饱满的种子去子叶袁将种胚置于 苑缘豫的酒精
浸泡 圆园泽袁再用 园郾 员豫升汞浸泡 员园皂蚤灶袁进行表面消毒袁
用无菌水漂洗 缘 次后袁 置于装有无菌水的广口瓶中浸
泡 员圆 耀 员远澡遥 取出浸泡的种胚袁置于无菌培养皿中分
离胚小叶袁然后接种到添加 猿皂早 辕 蕴 孕再酝的诱导培养基
上培养 源 周进行诱变处理及诱导体胚形成遥
员郾 圆郾 猿摇 匀再孕 筛选浓度的确定摇 花生各个生长发育时
期对逆境的耐受性不同遥 同理袁组织培养条件下各阶
段对逆境胁迫的耐受程度亦不同遥 本研究以 匀再孕 模
拟逆境条件袁添加于培养基中进行定向筛选抗逆突变
体遥 为确立各培养阶段适宜的筛选浓度袁试验在 猿 个
不同培养时期分别进行遥 淤体胚诱导阶段加筛选压袁
将胚小叶外植体接种在添加不同浓度 匀再孕渊园袁圆袁源袁远袁
愿皂早 辕 蕴冤的诱导培养基上进行培养遥 于体胚萌发阶段
加筛选压袁在未添加 匀再孕的诱导培养基上培养 源 周后
形成体胚的外植体袁转移到添加 匀再孕渊园袁源袁远袁愿袁员园皂早 辕
蕴冤的体胚萌发培养基上进行培养遥 盂体胚萌发后的
成苗阶段加筛选压袁在前 圆 个处理阶段进行正常培养袁
即胚小叶外植体在诱导培养基上培养 源 周后形成体胚
丛袁将体胚丛转移到体胚萌发培养基上再培养 源 周袁大
部分体胚萌发袁然后将萌发小苗转移到新鲜培养基上
继代培养袁培养基中添加 匀再孕渊园袁远袁愿袁员园袁员圆皂早 辕 蕴冤遥
每处理分别培养 源 周后观察试验结果遥
员郾 圆郾 源摇 抗逆突变体的筛选摇 花育 圆园 号胚小叶外植体
经诱变处理后进行定向筛选袁筛选培养以上述确定的
适宜 匀再孕筛选浓度为基础遥 为避免筛选的材料生长
过慢或褐变袁采用加筛选压和不加筛选压各培养 源 周
的方式进行交替培养遥
员郾 圆郾 缘摇 耐 匀再孕 再生苗的嫁接与移栽 摇 以 匀再孕 筛选
获得的花育 圆园 号再生苗为接穗袁苗龄约 员园凿 的花育
圆猿 号为砧木袁参照郝世俊等咱员远暂的方法在超净工作台
内进行无菌嫁接遥 嫁接苗的驯化移栽及管理参照于新
玲等咱员暂的方法进行遥 圆园员员 年进行抗性苗的嫁接袁经驯
苑园员员
核摇 农摇 学摇 报 圆远 卷
化后移栽于青岛农业大学试验田袁生长发育阶段进行
观察和记载袁成熟后分单株收获荚果遥 圆园员圆 年将单株
收获的种子部分播种于塑料大棚进行干旱处理袁其余
部分播种于青岛农业大学试验田袁苗期及生长发育阶
段观察记录性状变异及分离情况遥
员郾 圆郾 远摇 生理生化指标测定摇 粗酶提取院取塑料大棚中
经干旱处理的植株渊酝圆代冤叶片袁称取鲜叶样品 园郾 缘早
于预冷的研钵中袁加入少量聚乙烯吡咯烷酮渊孕灾孕冤和
二氧化硅袁加 员皂造 园郾 园缘皂燥造 辕 蕴 的磷酸缓冲液渊责匀苑郾 愿冤
冰浴中研磨成浆袁加缓冲液使最终体积为 缘皂造遥 将提
取液于 员园园园园则 辕 皂蚤灶 冷冻离心 圆园皂蚤灶袁上清液 源益保存
备用遥
超氧化物歧化酶渊杂韵阅冤活性测定参照郝再彬的方
法咱员苑暂 遥
过氧化物酶 渊 孕韵阅冤活性测定参照张志良的方
法咱员愿暂 遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 匀再孕适宜筛选浓度的确定
对花育 圆园 号胚小叶组织培养体胚诱导及其萌发尧
成苗的 猿 个不同阶段适宜的 匀再孕筛选浓度进行研究袁
结果表明袁不同培养时期适宜的筛选浓度不同遥 试验
淤袁将胚小叶接种在添加不同浓度 匀再孕的诱导培养基
上袁培养 源 周后观察结果显示袁匀再孕 严重抑制体胚形
成袁除未添加 匀再孕的对照外袁无论培养基中添加 匀再孕
浓度高低袁胚小叶外植体均形成疏松的愈伤组织袁所有
培养基上均未观察到体胚的形成遥 因此推断袁体胚诱
导阶段不适于 匀再孕定向筛选遥
试验于袁在未添加 匀再孕的诱导培养基上培养 源 周
形成体胚的外植体袁转移到添加 匀再孕的体胚萌发培养
基上进行培养遥 转移 源 周后结果显示袁添加 愿皂早 辕 蕴
匀再孕 的培养基上培养的体胚完全死亡袁而添加 源皂早 辕 蕴
匀再孕的培养基上袁体胚虽没有完全致死袁但已严重抑
制其生长渊图版 员冤遥 因此袁源皂早 辕 蕴 匀再孕 可作为体胚萌
发阶段抗逆筛选浓度遥
摇 摇 试验盂袁在前 圆 个处理阶段均不进行抗逆筛选袁只
进行正常培养遥 将体胚萌发长成的小苗转移到新鲜培
养基上进行继代培养袁培养基中添加不同浓度的
匀再孕遥 在添加 匀再孕的培养基上培养 源 周后观察再生
苗生长情况袁 未添加 匀再孕 的对照袁再生苗生长旺盛曰
添加 远皂早 辕 蕴 匀再孕时袁再生苗的生长一定程度上受到抑
制袁但仍有新叶长出曰添加 员圆皂早 辕 蕴 匀再孕 时袁再生苗完
全致死曰而添加 愿皂早 辕 蕴 匀再孕 时袁再生苗生长受到严重
抑制渊图版 圆冤遥 确定成苗期 匀再孕 的筛选浓度为 愿皂早 辕
蕴遥
圆郾 圆摇 孕再酝诱变处理及 匀再孕耐性苗的定向筛选
将花育 圆园 号种子胚小叶培养在添加 猿皂早 辕 蕴 孕再酝
的诱导培养基上袁诱变处理和体胚诱导同时进行遥 培
养 员园凿后袁外植体开始形成乳白色愈伤组织袁培养 猿 耀
源 周袁部分愈伤组织逐渐褐化或者形成玻璃化愈伤组
织袁另有部分能够形成体胚渊图版 猿鄄粤冤遥
诱变培养 源 周后袁将形成体胚的外植体转移到体
胚萌发培养基上促使体胚萌发袁同时进行耐 匀再孕定向
筛选遥 依据上述确定的 匀再孕筛选浓度袁首先在培养基
中添加 源皂早 辕 蕴 匀再孕袁成苗后增加到 愿皂早 辕 蕴遥为避免筛
选的培养材料生长过慢或褐变袁采用加筛选压和不加
筛选压各培养 源 周进行交替培养遥 在含有 匀再孕 的培
养基上培养 源 周后袁大部分外植体及体胚死亡袁仅有少
数存活曰幸存的体胚丛转到不含筛选压的体胚萌发培
养基上袁慢慢恢复生长袁接触培养基的部分形成大量绿
色致密的愈伤组织袁源 周后再转至筛选培养基上袁转接
时将褐化的愈伤组织切除袁如此循环反复袁直至出苗
渊图版 猿鄄月冤袁最终获得少量耐 匀再孕再生苗遥
圆郾 猿摇 耐 匀再孕再生苗的嫁接移栽
当耐 匀再孕再生苗生长至 圆糟皂时进行无菌嫁接遥 以
苗龄约 员园凿的花育 圆猿 号无菌苗为砧木袁再生苗为接穗
进行无菌嫁接遥 圆园员员年将驯化后的嫁接苗移栽于试验
田遥 移栽 远周后观察发现袁源圆号再生苗当代即表现出性
状变异袁茎枝颜色变为紫色渊图版 猿鄄悦冤袁而诱变亲本为
绿色遥 嫁接苗按常规进行田间管理袁成熟后按单株收获
荚果袁共有 员猿株 匀再孕耐性苗得到种子渊图版 猿鄄阅冤遥
圆郾 源摇 匀再孕耐性苗后代渊酝圆冤分离和变异情况圆园员圆 年将 员猿 个酝员耐性嫁接植株收获的种子部分
播种于大田袁以诱变亲本花育 圆园 号为对照遥 生长发育
阶段观察结果显示袁员猿 个植株渊猿员 耀 源猿 号冤后代中袁除
猿圆 号无明显变异外袁其他 员圆 个植株后代在株高尧茎枝
颜色尧株型尧开花习性等方面与诱变亲本不同袁明显表
现出变异袁并且观察到大部分植株后代性状发生分离遥
猿员 号尧猿怨 号尧源园 号尧源员 号尧源猿 号植株后代整体明显变
矮渊图版 源鄄月冤曰猿愿 号后代中的 员 株变矮袁分枝数增多曰
源圆 号后代大部分植株茎枝变成紫色尧半匍匐型尧分枝
数明显增多成为密枝型尧交替开花渊图版 源鄄悦冤袁同一植
株后代的其他少部分植株矮小袁而诱变亲本花育 圆园 号
茎枝绿色袁株型直立袁疏枝袁连续开花渊图版 源鄄粤冤曰其他
耐性嫁接苗后代也均发生变异和分离渊图版 源鄄阅冤遥
圆郾 缘摇 匀再孕耐性苗后代渊酝圆冤干旱胁迫下的表现苑 个 匀再孕耐性植株渊猿猿 号尧猿源 号尧猿缘 号尧猿苑 号尧源员
愿园员员
摇 愿 期 离体筛选花生抗逆突变体及其后代特征特性研究
号尧源圆 号尧源猿 号冤收获的部分种子 圆园员圆 年分别播种于
塑料大棚袁以诱变亲本花育 圆园 号作对照遥 播种时浇
水袁之后 员 个半月不浇水袁进行干旱胁迫处理遥 结果显
示袁大部分 匀再孕耐性植株后代生长正常曰而花育 圆园 号
生长明显受抑制袁棵较小袁部分叶片枯黄遥 生长发育前
期干旱胁迫处理也影响后期生长袁播种约 猿 个月后观
察袁花育 圆园 号植株矮小袁而大部分 匀再孕耐性植株后代
生长正常渊图版 缘冤遥
圆郾 远摇 杂韵阅活性和 孕韵阅活性
生长发育前期干旱胁迫处理 员 个半月后袁取叶片
测定 杂韵阅 活性和 孕韵阅 活性袁结果分别列于图 远 和图
苑遥 从图 远 可以看出袁测试的 苑 个耐性植株后代中 猿猿
号尧猿源 号尧猿缘 号尧源员 号尧源圆 号 缘 个植株后代的 杂韵阅 活
性高于诱变亲本花育 圆园 号袁特别是 猿猿尧猿源尧猿缘 号 杂韵阅
活性明显升高袁是亲本的 圆 耀 猿 倍遥 猿苑 号植株后代略
低于亲本袁而 源猿 号植株后代明显低于亲本遥
图 远摇 耐 匀再孕突变体 酝圆代 杂韵阅活性
云蚤早援 远摇 杂韵阅 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 匀再孕鄄 则藻泽蚤泽贼葬灶贼 皂怎贼葬灶贼泽 蚤灶 酝圆早藻灶藻则葬贼蚤燥灶
由图 苑 可看出袁测试的 苑 个耐性植株后代中袁猿猿
号尧猿源 号尧猿缘 号尧源员 号 源 个植株后代的 孕韵阅 活性较诱
变亲本花育 圆园 号 孕韵阅活性高遥 图 远 和图 苑 还可以说
明袁杂韵阅活性和 孕韵阅 活性测定结果比较一致袁杂韵阅 活
性高于亲本的 猿猿 号尧猿源 号尧猿缘 号尧源员 号尧源圆 号中袁仅有
源圆 号植株后代 孕韵阅活性低于对照袁其他 源 个植株后代
孕韵阅活性均高于亲本遥 而 源猿 号植株后代 杂韵阅活性和
孕韵阅活性在测试材料中均最低袁明显低于亲本遥
猿摇 讨论
孕再酝是一种抗生素袁作为一种新的诱变剂袁被证
明具有安全尧高效尧诱变频率高尧范围大等特点袁具有广
阔的开发和应用前景咱员怨暂 遥 本研究利用 孕再酝 作为诱变
剂袁获得的 匀再孕 耐性苗经嫁接移栽田间袁员猿 株获得种
子遥 圆园员圆 年将收获的种子分别播种于大田袁酝圆代 员圆
个植株后代发生变异和分离遥
图 苑摇 耐 匀再孕突变体 酝圆代 孕韵阅活性
云蚤早援 苑摇 孕韵阅 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 匀再孕鄄则藻泽蚤泽贼葬灶贼 皂怎贼葬灶贼泽 蚤灶 酝圆早藻灶藻则葬贼蚤燥灶
孕韵阅可以清除生物体内氧自由基袁避免组织细胞
受到伤害袁在生物抗逆境胁迫尧抗衰老中起很重要的作
用袁孕韵阅在细胞内含量的升高证明细胞在逆境中的活
力增强咱圆园暂 遥 杂韵阅的主要功能也是清除生物体内超氧
离子基团袁防御活性氧或其他过氧化物自由基对细胞
膜的伤害咱圆员暂 遥 曹必好和雷建军在甘蓝离体诱变研究
中袁以 匀再孕作为筛选压力袁获得的耐性植株其 杂韵阅 活
性和 孕韵阅活性均高于亲本袁并表现出较强的耐旱性尧
耐盐性咱圆圆暂 遥 姜慧芳等在花生干旱胁迫下测定 杂韵阅 活
性袁结果表明袁抗旱品种的 杂韵阅活性升高较多曰而敏感
品种的 杂韵阅活性升高较少咱圆员暂 遥 脯氨酸作为渗透调节
物质在耐盐尧抗旱等生理中具有重要作用遥 以脯氨酸
类似物要羟脯氨酸渊匀再孕冤作为选择压力袁通过组织培
养手段袁已先后在许多作物上获得耐 匀再孕的变异细胞
系袁并表现出较强的抗逆性咱圆园袁圆圆袁圆猿暂 遥 张栋梁等利用无
性系变异筛选茄子耐 匀再孕突变体袁再生植株表现出较
强的耐冷性咱圆猿暂 遥 李红等对紫花苜蓿进行离体诱变和
匀再孕定向筛选袁获得的变异体与诱变亲本相比 孕韵阅活
性显著提高袁并表现出更强的抗旱性和抗寒性咱圆园暂 遥 本
研究中离体诱变获得的 匀再孕 耐性植株经嫁接移栽田
间袁苑 个单株收获的部分种子袁圆园员圆 年分别播种于塑料
大棚袁苗期进行干旱胁迫处理后袁大部分 匀再孕 耐性植
株后代生长正常袁而诱变亲本花育 圆园 号生长明显受抑
制袁杂韵阅活性和 孕韵阅 活性测定结果表明袁大部分耐性
植株后代 杂韵阅 活性和 孕韵阅 活性明显高于诱变亲本袁
说明这些耐性苗可能为抗逆突变体遥
源摇 结论
本研究利用安全尧高效的 孕再酝作为诱变剂进行花
生离体诱变袁以 匀再孕 作为筛选压力袁获得的耐性再生
苗经嫁接移栽田间袁员猿 个植株获得成熟种子遥 圆园员圆 年
怨园员员
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将部分收获的种子分别播种于大田袁其中 员圆 个植株后
代发生变异和分离袁说明基因发生突变曰苑 个植株后代
进行干旱处理后袁大部分植株表现生长正常袁而诱变亲
本生长明显受抑制袁其中 缘 个植株后代的 杂韵阅活性高
于诱变亲本袁这 缘 个中的 源 个植株后代 孕韵阅活性也高
于诱变亲本袁证实这些突变体具有较强的抗旱能力遥
这些突变体的耐盐性尧耐冷性有待于进一步研究遥
本研究结果可为开拓花生新的育种途径提供依
据袁获得的突变体有望直接或间接用于花生育种遥
参考文献院
咱 员 暂 摇 于新玲袁刘录祥袁乔利仙袁隋炯明袁郭宝太袁徐丽娟袁王晶珊援 高能
混合离子场辐照对花生胚小叶组织培养及植株再生的影响咱允暂 援
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咱 圆 暂 摇 刘进平袁郑成木援 诱变结合植物组织培养在植物育种中的应用
渊综述冤 咱允暂 援上海农业学报袁圆园园源袁圆园渊员冤院员怨 原 圆圆
咱 猿 暂摇 刘进平袁郑成木援体外选择与体细胞无性系变异在抗病育种中的
应用咱允暂 援遗传袁圆园园圆袁 圆源渊缘冤院远员苑 原 远猿园
咱 源 暂 摇 吴伟刚袁刘桂茹袁杨学举援 诱变与组织培养相结合在植物育种中
的应用咱允暂 援中国农学通报袁 圆园园缘袁圆员渊圆员冤院员怨苑 原 圆园员
咱 缘 暂摇 孙光祖袁唐凤兰袁王广金袁李忠杰袁张月学袁阎文义袁孙德全袁孙摇
岩援辐射诱变与生物技术结合创造小麦新种质的研究 陨陨 咱 允暂 援 小
麦新种质的创造窑麦类作物袁员怨怨愿袁员愿渊远冤院员 原 源
咱 远 暂摇 陈摇 丽袁董举文袁唐寅袁陈明亮袁宋学孟援 耘酝杂 诱变处理定向筛选
杨树耐盐突变体研究咱允暂 援上海农业学报袁圆园园苑袁 圆猿渊猿冤院愿远 原 怨员
咱 苑 暂摇 姜长阳袁宁淑香袁杨文新袁肖荣俊援愈伤组织辐射诱变选育玉兰新
品系咱允暂 援园艺学报袁圆园园圆袁圆怨渊缘冤院源苑猿 原 源苑远
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物理动态袁 员怨怨圆袁怨渊源冤院源缘 原 源远
咱员员暂摇 杨保安援辐射与组培复合育成野霞光冶等 源 个菊花新品种咱 允暂 援河
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对花生胚小叶体细胞胚胎发生的影响咱 允暂 援 核农学报袁 圆缘渊源冤院
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咱员远暂摇 郝世俊袁隋炯明袁乔利仙袁王晓杰袁王晶珊援 花生组培苗嫁接技术
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步研究咱允暂 援湖北农业科学袁圆园园愿袁源苑渊苑冤院愿园缘 原 愿园怨
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