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The Optimization to Sterilize Escherichia coli With High Pulse Electric Field

高压脉冲电场对大肠杆菌灭菌条件的优化


为了探究高压脉冲电场灭菌技术的最优灭菌参数,以大肠杆菌为试验对象,采用正交试验,对杀菌过程中的一系列参数和影响因素(场强、脉宽、频率、时间、脉冲数等)进行分析,得出了最优的灭菌参数组合。结果表明,对大肠杆菌的灭菌效果影响最大的是脉冲个数,其次是脉宽与场强,最后则是作用时间与脉冲频率。大肠杆菌的最优高压脉冲电场灭菌参数组合为脉宽5μs,脉冲个数400个(即脉冲频率10Hz,作用时间40s),电场强度30kv ·cm-1。本研究对高压脉冲电场灭菌技术在生产线上的应用具有一定的指导意义。


全 文 :核 农 学 报摇 圆园员缘袁圆怨渊愿冤院员缘远远 耀 员缘苑员
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员缘鄄园员鄄园远摇 接受日期院圆园员缘鄄园源鄄圆苑
基金项目院浙江省自然科学基金渊蕴再员源悦员园园园园源冤袁国家自然科学基金渊猿员源园员远远苑冤袁浙江省新苗人才计划渊圆园员源砸源园苑园苑员冤
作者简介院刘珂舟袁女袁讲师袁主要从事医疗仪器及高压脉冲灭菌技术的研究遥 耘皂葬蚤造院造蚤怎噪藻扎澡燥怎岳 澡凿怎援 藻凿怎援 糟灶
通讯作者院同第一作者遥
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员缘冤园愿鄄员缘远远鄄园远
高压脉冲电场对大肠杆菌灭菌条件的优化
刘珂舟员 摇 袁夏冰员 摇 刘摇 露员 摇 杨摇 勇员 摇 韩其国圆 摇 应南娇员
渊员 杭州电子科技大学生命信息与仪器工程学院袁浙江 杭州摇 猿员园园员愿曰 圆杭州电子科技大学自动化学院袁浙江 杭州摇 猿员园园员愿冤
摘摇 要院为了探究高压脉冲电场灭菌技术的最优灭菌参数袁以大肠杆菌为试验对象袁采用正交试验袁对杀
菌过程中的一系列参数和影响因素渊场强尧脉宽尧频率尧时间尧脉冲数等冤进行分析袁得出了最优的灭菌参
数组合遥 结果表明袁对大肠杆菌的灭菌效果影响最大的是脉冲个数袁其次是脉宽与场强袁最后则是作用
时间与脉冲频率遥 大肠杆菌的最优高压脉冲电场灭菌参数组合为脉宽 缘滋泽袁脉冲个数 源园园 个渊即脉冲频
率 员园匀扎袁作用时间 源园泽冤袁电场强度 猿园噪增窑糟皂 原员遥 本研究对高压脉冲电场灭菌技术在生产线上的应用具
有一定的指导意义遥
关键词院高压脉冲电场灭菌曰大肠杆菌曰热灭菌与非热灭菌技术曰正交设计
阅韵陨院员园郾 员员愿远怨 辕 躁援 蚤泽泽灶援 员园园鄄愿缘缘员郾 圆园员缘郾 园愿援 员缘远远
摇 摇 高压脉冲电场渊责怎造泽藻 藻造藻糟贼则蚤糟 枣蚤藻造凿泽袁 孕耘云冤是一种
非热灭菌技术袁与传统热杀菌相比袁具有保持食品的原
有风味尧处理时间短尧能耗低尧对食物中的营养元素影
响较小等特点袁近年来成为国内外的研究热点咱员 原 圆暂 袁而
市场和消费者也越来越需要并呼吁先进的非热灭菌技
术咱猿 原 源暂 遥 多年来袁高压脉冲电场因其良好的应用特征
而受到国内外学者的广泛关注与研究袁并有不同层次
的进展咱缘 原 苑暂 遥 目前袁国内众多学者在从事高压脉冲电
场杀菌机理尧对微生物形态影响尧对微生物压脉冲电场
敏感性因素的分析咱愿 原 怨暂 尧对食品质量影响咱员园 原 员员暂等方面
的研究曰而我国在这方面的研究尚处于起步阶段袁研究
高压脉冲电场杀菌技术具有特别重要的意义遥
大肠杆菌渊耘泽糟澡藻则蚤糟澡蚤葬 糟燥造蚤冤是食物中最常见的一
类致病菌袁其杀灭程度直接决定了一种灭菌方法是否
能够达到工业生产的要求袁因此大肠杆菌的有效杀菌
方式一直是研究的热点咱员圆 原 员猿暂 袁而高压脉冲电场则已经
被证实能够起到一定的杀菌效果咱员源 原 员远暂 遥 因此本文在
使用高压脉冲电场对大肠杆菌进行杀灭的过程中袁采
用正交设计试验袁对杀菌过程中的一系列参数和影响
因素进行分析袁期望得到最优的灭菌参数组合遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 高压脉冲电场灭菌装置
高压脉冲电场系统由脉冲发生器和处理室构成袁
脉冲发生器用于产生参数可调的高压脉冲电场袁处理
室用来装载待处理的物料和安放电极咱猿袁员苑 原 员愿暂 遥 本试
验使用的高压脉冲电场系统由杭州电子科技大学研制
开发袁能够实现输出高压脉冲的电压尧脉宽尧频率和脉
冲数等参数的精确控制袁输出电压 缘园 耀 员园园 噪灾袁脉冲
宽度 员 耀 员园 滋泽袁频率 员 耀 员园园匀扎袁输出方波袁极板面积
猿园园皂皂 伊 猿园园 皂皂袁极板间距在 圆 耀 员园 糟皂袁上下平行可
调遥 从而能够实现多种电场强度满足灭菌试验的各种
要求咱员怨暂 遥 图 员 为高压脉冲电场示意图遥
员郾 圆摇 试验材料
微生物菌种院试验用大肠杆菌渊悦郧酝悦悦 员郾 怨园冤袁由
杭州师范学院生物研究所提供遥
细菌培养基院蛋白胨渊贼则赠责贼燥灶藻 责藻责贼燥灶藻冤 员园早袁 酵母
提取物渊赠藻葬泽贼 藻曾贼则葬糟贼冤 缘早袁 氯化钠渊晕葬悦造冤 缘早袁加双蒸水
至 员蕴袁高温高压灭菌备用遥
远远缘员
摇 愿 期 高压脉冲电场对大肠杆菌灭菌条件的优化
图 员摇 高压脉冲电场示意图
云蚤早援 员摇 栽澡藻 泽糟澡藻皂葬贼蚤糟 凿蚤葬早则葬皂 燥枣 贼澡藻 孕耘云 怎泽藻凿 枣燥则 贼澡藻 藻曾责藻则蚤皂藻灶贼
摇 摇 大肠杆菌悬液的配置院大肠杆菌从固体斜面接种
至牛肉膏蛋白胨培养基袁猿苑益培养 圆源澡袁取 员皂蕴菌液用
无菌水稀释 员园猿 倍后袁充分混匀后袁使菌液浓度为 员园远
耀 员园苑悦云哉窑皂蕴 原员遥
员郾 猿摇 试验方法
通过正交试验参数组合袁每个组合的试验铺 猿 个
培养皿计数袁试验重复 猿 次袁取平均数遥 在高压脉冲电
场灭菌过程中主要因素有 源 个袁即脉宽尧频率尧作用时
间和场强袁本试验通过 圆 次正交试验设计衡量各个参
数对于大肠杆菌杀灭效果的影响程度尧排序袁并探索最
佳的灭菌参数组合遥
试验 员院具体试验设计见表 员遥 试验以脉宽渊滋泽冤尧
频率渊匀扎冤尧作用时间渊泽冤为因素袁根据杭州电子科技大
学自行研制开发的高压脉冲电场的输出特性范围和试
验的稳定性袁每个因素在可选范围内设置低尧中尧高 猿
个水平遥 高压脉冲电场的场强为 猿缘噪灾窑糟皂 原员遥
表 员摇 第 员 次正交试验参数设置表
栽葬遭造藻 员摇 孕葬则葬皂藻贼藻则 泽藻贼贼蚤灶早 燥枣 贼澡藻 员泽贼 燥则贼澡燥早燥灶葬造 藻曾责藻则蚤皂藻灶贼
编号
晕燥援
因素 云葬糟贼燥则
脉宽 粤
孕怎造泽藻 憎蚤凿贼澡 粤 辕 滋泽
频率 月
云则藻择怎藻灶糟赠 月 辕 匀扎
时间 悦
栽蚤皂藻 悦 辕 泽
员 圆 员 缘
圆 缘 员园 员圆
猿 员园 员园园 源园
摇 摇 平板计数法计数院取对照组和高压脉冲电场作用
后的菌悬液各 园郾 圆皂蕴袁涂平板袁倒置于恒温培养箱中培
养 源愿澡后计菌落数遥
试验 圆院具体试验设计见表 圆遥 根据正交试验 员 的
结果袁在正交试验 圆 中改变 员 个参数袁以脉宽渊滋泽冤尧脉
冲个数渊个冤尧场强渊 噪灾窑糟皂 原员 冤为因素曰与正交试验 员
相同在可选范围内将每个因素设置低尧中尧高 猿 个水
平遥 高压脉冲电场的输出频率定为 员园匀扎遥
摇 摇 平板计数法计数院取对照组和高压脉冲电场作用
后的菌悬液各 园郾 圆皂蕴袁涂平板袁倒置于恒温培养箱中培
养 源愿澡后计菌落数遥
表 圆摇 第 圆 次正交试验参数设置表
栽葬遭造藻 圆摇 孕葬则葬皂藻贼藻则 泽藻贼贼蚤灶早 燥枣 贼澡藻 圆灶凿
燥则贼澡燥早燥灶葬造 藻曾责藻则蚤皂藻灶贼
编号
晕燥援
因素 云葬糟贼燥则
脉宽 葬
孕怎造泽藻 憎蚤凿贼澡 葬 辕 滋泽
脉冲个数 遭
晕怎皂遭藻则 遭 辕 灶
场强 糟
云蚤藻造凿 泽贼则藻灶早贼澡 糟 辕 渊噪灾窑糟皂 原员 冤
员 员 源园 圆园
圆 缘 员圆园 猿园
猿 员园 源园园 猿缘
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 脉宽尧频率及作用时间对杀菌效果的影响
为了研究各因素的重要程度袁即对杀菌效果的影
响袁分别对脉宽尧频率尧作用时间 猿 因素取合理水平袁选
择正交试验表 蕴怨渊猿源冤进行试验遥 试验共 怨 组袁各组条
件下大肠杆菌的存活率如图 圆 所示遥 由图 圆 可知袁怨
苑远缘员
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
种条件组合中第 缘 组和第 远 组的灭菌效果最好袁大肠
杆菌的存活率都在 员园豫以下遥
表 猿摇 第 员 次正交试验结果及相关性分析表
栽葬遭造藻 猿摇 栽澡藻 员泽贼 燥则贼澡燥早燥灶葬造 则藻泽怎造贼泽 葬灶凿 贼澡藻 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 增葬则蚤葬灶糟藻
试验号 栽藻泽贼 晕燥援 因素 云葬糟贼燥则泽粤 月 悦
空白项
月造葬灶噪
细菌存活率
杂怎则增蚤增葬造 砸葬贼蚤燥 辕 豫
员 员 员 员 员 苑园郾 远远
圆 员 圆 圆 圆 圆苑郾 远猿
猿 员 猿 猿 猿 猿苑郾 缘源
源 圆 员 圆 猿 圆苑郾 源缘
缘 圆 圆 猿 员 源郾 圆怨
远 圆 猿 员 圆 苑郾 缘源
苑 猿 员 猿 圆 员缘郾 圆愿
愿 猿 圆 员 猿 圆园郾 圆源
怨 猿 猿 圆 员 远猿郾 缘园
玉 员猿缘援 愿猿豫 员员猿援 猿怨豫 怨愿援 源猿豫 员猿愿援 源缘豫
域 猿怨援 圆愿豫 缘圆援 员远豫 员员愿援 缘怨豫 缘园援 源缘豫
芋 怨怨援 园圆豫 员园愿援 缘愿豫 缘苑援 员圆豫 愿缘援 圆猿豫
运员 源缘援 圆愿豫 猿苑援 愿园豫 猿圆援 愿员豫 源远援 员缘豫 撞 越圆苑源郾 员猿
运圆 员猿援 园怨豫 员苑援 猿怨豫 猿怨援 缘猿豫 员远援 愿圆豫
运猿 猿猿援 园员豫 猿远援 员怨豫 员怨援 园源豫 圆愿援 源员豫
砸 猿圆援 员怨豫 圆园援 源员豫 圆园援 源怨豫 圆怨援 猿猿豫
图 圆摇 不同组合下的大肠杆菌存活率
云蚤早援 圆摇 栽澡藻 泽怎则增蚤增葬造 则葬贼蚤燥灶 燥枣 耘蕴 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 责葬则葬皂藻贼藻则
摇 摇 将 怨 组试验结果进行正交分析渊表 猿冤袁结果表明袁
砸粤 跃 砸月抑砸悦袁说明所选的 猿 个因素中对灭菌效果影响
最大的为脉宽袁而频率和作用时间的影响程度相当遥
摇 摇 由正交试验 员 中各因素变化趋势可知袁对大肠杆
菌灭菌效果最好的组合条件是院高压脉冲电场的输出
脉宽 缘滋泽袁频率 员园匀扎袁作用时间 源园泽 时的灭菌效果最
好袁此时袁场强大小为 猿缘噪灾窑糟皂 原员渊图 猿冤遥
图 猿摇 不同因素对大肠杆菌存活率的影响趋势
云蚤早援 猿摇 栽澡藻 贼则藻灶凿泽 贼燥 贼澡藻 泽怎则增蚤增葬造 则葬贼蚤燥 燥枣
耘蕴 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 枣葬糟贼燥则泽
此外袁表 猿 的结果也表明袁砸粤 跃 砸空白项 跃 砸月抑砸悦袁
说明所选的 猿 个因素渊脉宽尧频率尧时间冤并不完全包
含对灭菌效果影响最大的因素袁因此袁本研究又进行了
第 圆 次正交试验遥
愿远缘员
摇 愿 期 高压脉冲电场对大肠杆菌灭菌条件的优化
圆郾 圆摇 脉宽尧脉冲个数尧场强对杀菌效果的影响
由于第 员 次正交试验结果表明频率和时间对灭菌
效果的影响相当袁所以在第 圆 次正交试验中用二者的
乘积袁即脉冲个数渊脉冲个数 越频率×时间冤作为其中
一个影响因素袁场强作为另一个影响因素袁再加上对灭
菌效果影响最大的脉宽袁构成了第 圆 次正交试验的 猿
个因素遥
分别对脉宽尧脉冲个数尧电场强度 猿 因素取合理水
平袁选择正交试验表 蕴怨 渊猿源 冤进行试验遥 试验共 怨 组袁
各组条件下大肠杆菌的存活率见图 源遥 由图 源 可知袁怨
种条件组合中第 圆 组和第 远 组的灭菌效果最好袁大肠
杆菌的存活率都在 员园豫左右遥
表 源摇 第 圆 次正交试验结果及相关性分析表
栽葬遭造藻 源摇 栽澡藻 圆灶凿 燥则贼澡燥早燥灶葬造 则藻泽怎造贼泽 葬灶凿 贼澡藻 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 增葬则蚤葬灶糟藻
试验号
栽藻泽贼 晕燥援
因素 云葬糟贼燥则泽
葬 遭 糟
空白项
月造葬灶噪
细菌存活率
杂怎则增蚤增葬造 砸葬贼蚤燥 辕 豫
员 员 员 员 员 员园员郾 苑猿
圆 员 圆 圆 圆 怨郾 苑员
猿 员 猿 猿 猿 员苑郾 缘苑
源 圆 员 圆 猿 源缘郾 苑圆
缘 圆 圆 猿 员 员缘郾 缘园
远 圆 猿 员 圆 苑郾 源员
苑 猿 员 猿 圆 远圆郾 怨愿
愿 猿 圆 员 猿 苑缘郾 员员
怨 猿 猿 圆 员 圆怨郾 愿员
玉 员圆怨援 园圆豫 圆员园援 源猿豫 员愿源援 圆远豫 员源苑援 园猿豫
域 远愿援 远源豫 员园园援 猿圆豫 愿缘援 圆源豫 愿园援 员园豫
芋 员远苑援 愿怨豫 缘源援 苑怨豫 怨远援 园缘豫 员猿愿援 源员豫
运员 源猿援 园员豫 苑园援 员源豫 远员援 源圆豫 源怨援 园员豫 撞 越猿远缘郾 缘缘
运圆 圆圆援 愿愿豫 猿猿援 源源豫 圆愿援 源员豫 圆远援 苑园豫
运猿 缘缘援 怨远豫 员愿援 圆远豫 猿圆援 园圆豫 源远援 员源豫
砸 猿猿援 园怨豫 缘员援 愿愿豫 猿猿援 园园豫 圆圆援 猿员豫
摇 摇 由表 源 可知袁砸葬尧砸遭尧砸糟均大于 砸空白项袁说明所选的
各因素对灭菌效果的影响是可靠的袁脉宽尧脉冲个数及
场强这 猿 因素在对灭菌效果的产生影响的各因素中是
重要的遥 比较极差的大小时袁所选的 猿 个因素中对灭
菌效果影响最大的是脉冲个数袁其次是脉宽袁最后是场
强大小遥 而场强大小和脉宽的影响程度相差无几遥 图
缘 表明对大肠杆菌最好的组合条件是脉宽 缘滋泽袁脉冲个
数 源园园 个袁电场强度 猿园噪灾窑糟皂 原员时的灭菌效果最好袁此
时袁脉冲频率为 员园匀扎遥
图 源摇 不同条件组合下的大肠杆菌存活率
云蚤早援 源摇 栽澡藻 泽怎则增蚤增葬造 则葬贼蚤燥灶 燥枣 耘蕴 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 责葬则葬皂藻贼藻则
猿摇 讨论
高压脉冲电场在灭菌过程中涉及的影响因素很
多袁如场强尧脉宽尧频率和作用时间等遥 学者们一直在
努力探求这些因素对于灭菌效果的影响咱圆园 原 圆圆暂 遥 本试
验首次通过正交设计衡量各个因素对于灭菌效果的影
怨远缘员
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
图 缘摇 不同因素对大肠杆菌存活率的影响趋势
云蚤早援 缘摇 栽澡藻 贼则藻灶凿泽 贼燥 贼澡藻 泽怎则增蚤增葬造 则葬贼蚤燥
燥枣 耘蕴 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 枣葬糟贼燥则泽
响遥 正交试验极大节省了试验时间袁也增加了试验结
果的稳定性袁减少了引入不必要误差的可能遥 通常在
面对涉及多因素多水平的参数优选试验时袁大多数学
者都倾向于选择正交试验袁并验证了结果的可行
性咱圆猿暂 遥 本试验共进行 圆 次 怨 组试验袁通过对试验结果
的正交分析袁将高压脉冲电场在杀菌过程中涉及的 源
个主要因素袁即场强尧脉宽尧频率和作用时间袁进行了影
响的重要性排序袁并得出了最佳的灭菌参数组合遥
对于高压脉冲电场灭菌的作用机理目前有多种假
定模型的分析袁如细胞膜穿孔效应尧电磁机制模型尧粘
弹极性形成模型尧电解产物效应及臭氧效应等咱圆源 原 圆缘暂 遥
目前袁大部分学者普遍认同细胞膜穿孔效应遥
细胞膜穿孔效应认为袁高压脉冲电场的高场强使
细菌膜的通透性增大袁膜上出现小孔袁强度降低袁同时
脉冲电场在极短时间内电压剧烈波动袁在膜上产生振
荡效应遥 孔的加大和振荡效应的共同作用使细胞发生
崩溃咱圆远 原 圆苑暂 遥 而本试验也表明作用频率和作用时间对
灭菌效果的作用相当袁两者的乘积袁即作用脉冲个数才
是影响灭菌效果的关键因素遥 当场强达到一定的临界
值袁造成细胞膜穿孔后袁振荡效应才是决定灭菌效果的
关键遥 由图 源 中可知袁脉冲个数越多袁振荡效应越明
显袁灭菌效果也就越好袁而场强在达到 猿园噪灾窑糟皂 原员之
后袁增加场强对于灭菌效果的影响则不大遥 同时袁有研
究表明袁脉冲宽度与电场对细胞膜破裂有着密切的关
系咱圆愿暂 袁而本试验的结果也证明袁当脉宽达到一定临界
值后袁增加脉宽并不能起到得到更好的灭菌效果遥
此外袁通过正交分析袁场强和脉宽对于灭菌效果的
影响程度相当袁表明该 圆 种因素都是通过造成细胞膜
破裂从而起到杀菌效果的遥
虽然通过正交分析和各因素的趋势变化袁本试验
得到了对于大肠杆菌的最佳灭菌参数组合遥 但这一参
数组合仅仅只限于对大肠杆菌的灭菌操作遥 不同菌种
对电场的承受能力有很大的不同袁相同条件下的电场
灭菌袁不同的菌种存活率也不同咱圆源袁圆苑暂 遥 尽管各因素的
重要性排序可能保持不变袁但最佳参数一定会有差别遥
因此袁在具体应用时袁应针对不同的菌种进行试验袁以
此得到最佳的灭菌参数遥
源摇 结论
本文以大肠杆菌为试验对象袁通过正交试验袁分析
了高压脉冲电场各个参数对于杀菌效果的影响权重遥
结果表明袁影响权重由大到小分别为院脉冲个数袁脉宽
和场强袁作用时间和频率遥 最好的高压脉冲电场杀灭
大肠杆菌的参数组合为脉宽 缘滋泽袁脉冲个数 源园园 个渊即
脉冲频率 员园匀扎袁作用时间 源园泽冤袁电场强度 猿园噪灾窑糟皂 原员遥
不同菌种在高压脉冲电场灭菌技术中的最佳灭菌参数
可为进一步建立大肠杆菌灭菌动力学模型奠定基础遥
参考文献院
咱 员 暂摇 允藻赠葬皂噪燥灶凿葬灶 杂袁 允葬赠葬泽 阅 杂袁 匀燥造造藻赠 砸 粤援 孕怎造泽藻凿 藻造藻糟贼则蚤糟 枣蚤藻造凿
责则燥糟藻泽泽蚤灶早 燥枣 枣燥燥凿泽院 葬 则藻增蚤藻憎 咱 允 暂 援 允燥怎则灶葬造 燥枣 云燥燥凿 孕则燥贼藻糟贼蚤燥灶袁
员怨怨怨袁 远圆渊怨冤院 员园愿愿 原 员园怨远
咱 圆 暂摇 张艳袁王圣开袁崔俊林援 高压脉冲电场在食品加工中的应用咱 允暂 援
农产品加工渊学刊冤袁 圆园员圆袁 渊怨冤院员缘源 原 员缘苑
咱 猿 暂摇 陈新梅袁李莹袁陈新华援 高压脉冲电场灭菌方法研究概况咱 允暂 援
中国执业药师袁 圆园员源袁 员员渊圆 辕 猿冤院猿愿 原 源员
咱 源 暂摇 陈锦权援 非热力技术在果汁及茶饮料加工中的应用研究咱 允暂 援
饮料工业袁 圆园员猿袁 员远渊圆冤院源苑 原 源怨
咱 缘 暂摇 冯叙桥袁王月华袁徐方旭援 高压脉冲电场技术在食品质量与安全
中的应用进展咱允暂 援 食品与生物技术学报袁 圆园员猿袁 猿圆渊源冤院猿猿苑 原
猿源远
咱 远 暂摇 蕴蚤 杂援 孕怎造泽藻凿 藻造藻糟贼则蚤糟 枣蚤藻造凿 责则燥糟藻泽泽蚤灶早 燥枣 枣怎灶糟贼蚤燥灶葬造 枣燥燥凿泽 咱 阅暂援
悦燥造怎皂灶遭怎泽院 栽澡藻 韵澡蚤燥 杂贼葬贼藻 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 圆园园猿
咱 苑 暂摇 运则蚤泽贼蚤灶葬 粤袁 哉造枣 砸袁 耘造蚤泽葬遭藻贼澡 月援 陨灶葬糟贼蚤增葬贼蚤燥灶 燥枣 藻泽糟澡藻则蚤糟澡蚤葬 糟燥造蚤袁
造蚤泽贼藻则蚤葬 蚤灶灶燥糟怎葬 葬灶凿 泽葬糟糟澡葬则燥皂赠糟藻泽 糟藻则藻增蚤泽蚤葬藻 蚤灶 则藻造葬贼蚤燥灶 贼燥
皂藻皂遭则葬灶藻 责藻则皂藻葬遭蚤造蚤扎葬贼蚤燥灶 葬灶凿 泽怎遭泽藻择怎藻灶贼 造藻葬噪葬早藻 燥枣 蚤灶贼则葬糟藻造造怎造葬则
糟燥皂责燥怎灶凿泽 凿怎藻 贼燥 责怎造泽藻凿 藻造藻糟贼则蚤糟 枣蚤藻造凿 责则燥糟藻泽泽蚤灶早 咱允暂 援 陨灶贼藻则灶葬贼蚤燥灶葬造
允燥怎则灶葬造 燥枣 云燥燥凿 酝蚤糟则燥遭蚤燥造燥早赠袁 圆园园缘袁 远缘渊怨怨冤院员怨 原 猿圆
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的影响咱允暂 援 西南农业学报袁 圆园员猿袁 圆远渊猿冤院 员圆园苑 原 员圆员员
咱 怨 暂摇 宋艳波袁刘振宇袁郭玉明援 基于电镜观察及介质理论分析高压脉
冲电场处理果蔬机理咱允暂 援 核农学报袁 圆园员圆袁 圆远渊员冤院怨员 原 怨源
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抗氧化活性的影响咱 允暂 援 食品与生物技术学报袁 圆园员猿袁 猿圆渊猿冤院
园苑缘员
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
圆园员缘袁圆怨渊愿冤院员缘远远 耀 员缘苑员
猿员愿 原 猿圆猿
咱员员暂摇 谢媚袁曹锦轩袁张玉林袁廖国周袁潘道东袁黄鸿兵援 高压脉冲电场
杀菌技术在肉品加工中的应用进展咱 允暂 援 核农学报袁 圆园员源袁 圆愿
渊员冤院怨苑 原 员园园
咱员圆暂摇 刘红霞袁陈杰瑢袁周媛援 远程氧等离子体对大肠杆菌的灭菌效果
与机理研究咱允暂 援 西安交通大学学报袁 圆园园愿袁 源圆渊员冤院怨远 原 员园园
咱员猿暂摇 万怡灶袁王玉林袁王哲人袁董向红袁温廷益袁霍爱群援 载银活性碳
纤维对大肠杆菌的灭菌作用咱允暂 援 天津大学学报袁 员怨怨怨袁 猿圆渊缘冤院
远圆员 原 远圆源
咱员源暂摇 廖小军袁钟葵袁王黎明袁史梓男援 高压脉冲电场对酵母和大肠杆
菌的杀灭效果咱允暂 援 食品与发酵工业袁 圆园园猿袁 圆怨渊员园冤院员怨 原 圆圆
咱员缘暂摇 廖小军袁钟葵袁王黎明袁史梓男援 高压脉冲电场对橙汁大肠杆菌
和理化性质的影响效果咱允暂 援 食品科学袁 圆园园猿袁 圆源渊远冤院缘怨 原 远员
咱员远暂摇 刘珂舟袁杨勇袁袁夏冰袁韩其国袁屠亚威袁符米静援 高压脉冲电场
与热灭菌技术相结合对大肠杆菌的杀菌效果咱 允暂 援 食品工业科
技袁 圆园员源袁 猿缘渊圆冤院员源园 原 员源圆袁员源怨
咱员苑暂摇 再怎 蕴袁 云葬灶早 栽袁 悦澡藻灶 允援 杂贼怎凿赠 燥灶 贼澡藻 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼 燥枣 糟澡葬皂遭藻则泽 枣燥则
责怎造泽藻凿 藻造藻糟贼则蚤糟 枣蚤藻造凿 咱允暂 援 云燥燥凿 驭 酝葬糟澡蚤灶藻则赠袁 圆园园怨袁 圆缘渊缘冤院怨缘 原
员园园
咱员愿暂摇 赵文锋袁康云艳援 便携式高压脉冲电场灭菌装置试验咱允暂 援 江苏
农业科学袁 圆园员猿袁 源员渊圆冤院圆远园 原 圆远圆
咱员怨暂摇 韩其国袁杨勇袁徐平袁刘珂舟援 基于 陨郧月栽 的高压脉冲电源研制
咱允暂 援 电子电力技术袁 圆园员园袁 源源渊苑冤院远猿 原 远源
咱圆园暂摇 延二宝袁雷争鸣袁桑小文袁魏新劳援 不同压力条件下高压脉冲电
场灭菌效果研究咱允暂 援 哈尔滨理工大学学报袁 圆园员圆袁 员苑渊猿冤院员怨 原
圆圆
咱圆员暂摇 宰燥怎贼藻则泽 孕袁 粤造增葬则藻扎 陨袁 砸葬泽燥 允援 悦则蚤贼蚤糟葬造 云葬糟贼燥则泽 凿藻贼藻则皂蚤灶蚤灶早
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