全 文 ：摇 核 农 学 报摇 圆园员圆袁圆远渊苑冤院员园圆缘 耀 员园猿园允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员圆鄄园员鄄圆缘摇 接受日期院圆园员圆鄄园源鄄员远
基金项目院公益性行业渊农业冤科研专项渊圆园员圆园猿园猿苑冤袁中央级公益性科研院所基本科研业务费专项渊圆园员圆在蕴园猿缘冤
作者简介院王会娟渊员怨愿缘鄄冤袁女袁山东高密人袁硕士袁研究方向为食品质量与安全遥 耘鄄皂葬蚤造院园缘园苑圆园猿圆员岳 员远猿援 糟燥皂
通讯作者院刘 摇 阳渊员怨远缘鄄冤袁男袁辽宁本溪人袁博士袁研究员袁博士生导师袁研究方向为农产品真菌毒素控制与脱毒遥 栽藻造院园员园鄄远圆愿员缘愿苑源曰耘鄄皂葬蚤造院
造蚤怎赠葬灶早早岳 澡燥贼皂葬蚤造援 糟燥皂
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员圆冤园苑鄄员园圆缘鄄园远
高产漆酶平菇的筛选及其在降解
黄曲霉毒素 员中的应用
王会娟摇 刘摇 阳摇 邢福国
渊中国农业科学院农产品加工研究所 辕农业部农产品加工综合性重点实验室袁北京摇 员园园员怨猿冤
摘摇 要院通过选择培养基平板培养法和液体发酵培养法筛选得到 圆 株高产漆酶的平菇菌株 孕员 和 孕圆袁并
对平菇菌株产漆酶的培养基进行筛选袁得到产漆酶的最适培养基为最低盐 酝杂酝培养基遥 菌株 孕员 不仅
产漆酶能力最高袁而且降解黄曲霉毒素的能力也最好遥 在 酝杂酝 培养基中培养 员园凿 时袁产漆酶量高达
苑远怨郾 源源哉 辕 蕴袁在 愿园园滋造的反应体系中袁苑怨园滋造粗酶液可以将 员园园园灶早 黄曲霉毒素 月员降解到 圆圆圆郾 远圆灶早袁降解
率为 苑苑郾 苑源豫 袁并且平菇粗酶液降解黄曲霉毒素 月员的能力与其中漆酶的含量呈一定的正相关性遥
关键词院平菇漆酶曰筛选曰降解黄曲霉毒素 月员
杂悦砸耘耘晕陨晕郧 匀陨郧匀鄄孕砸韵阅哉悦栽陨韵晕 蕴粤悦悦粤杂耘 韵云 孕蕴耘哉砸韵栽哉杂 韵杂栽砸耘粤栽哉杂 粤晕阅
阅耘郧砸粤阅粤栽陨韵晕 韵云 粤云月员 月再 孕蕴耘哉砸韵栽哉杂 韵杂栽砸耘粤栽哉杂 蕴粤悦悦粤杂耘
宰粤晕郧 匀怎蚤鄄躁怎葬灶摇 蕴陨哉 再葬灶早摇 载陨晕郧 云怎鄄早怎燥
渊 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 粤早则燥鄄责则燥凿怎糟贼泽 孕则燥糟藻泽泽蚤灶早 杂糟蚤藻灶糟藻 驭 栽藻糟澡灶燥造燥早赠袁 悦澡蚤灶藻泽藻 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽 辕 运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣
粤早则燥鄄责则燥凿怎糟贼泽 责则燥糟藻泽泽蚤灶早 糟燥皂责造藻曾 造葬遭燥则葬贼燥则赠袁 酝蚤灶蚤泽贼则赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则藻袁 月藻蚤躁蚤灶早摇 员园园员怨猿冤
粤遭泽贼则葬糟贼院栽憎燥 澡蚤早澡 造葬糟糟葬泽藻鄄责则燥凿怎糟贼蚤燥灶 泽贼则葬蚤灶泽 孕造藻怎则燥贼怎泽 燥泽贼则藻葬贼怎泽 孕员 葬灶凿 孕圆 憎藻则藻 泽藻造藻糟贼藻凿 遭赠 泽藻造藻糟贼蚤灶早 葬早葬则 责造葬贼藻泽 葬灶凿
造蚤择怎蚤凿 糟怎造贼怎则藻援 酝杂酝 皂藻凿蚤怎皂 憎葬泽 贼澡藻 皂燥泽贼 泽怎蚤贼葬遭造藻 造蚤择怎蚤凿 皂藻凿蚤怎皂 枣燥则 造葬糟糟葬泽藻鄄责则燥凿怎糟贼蚤燥灶援 栽澡藻 遭藻泽贼 泽贼则葬蚤灶 枣燥则 造葬糟糟葬泽藻鄄
责则燥凿怎糟蚤灶早 葬灶凿 粤云月员 原 凿藻早则葬凿葬贼蚤灶早 憎葬泽 孕造藻怎则燥贼怎泽 燥泽贼则藻葬贼怎泽 泽贼则葬蚤灶 孕员援 栽澡藻 造葬糟糟葬泽藻 葬糟贼蚤增蚤贼赠 糟燥怎造凿 遭藻 苑远怨郾 源源哉 辕 蕴 憎澡藻灶 蚤贼憎葬泽 糟怎造贼怎则藻凿 员园 凿葬赠泽援 员园园园灶早 粤云月员 糟燥怎造凿 遭藻 凿藻早则葬凿葬贼藻凿 贼燥 圆圆圆郾 远圆灶早 遭赠 苑怨园滋造 糟则怎凿藻 藻灶扎赠皂藻 泽燥造怎贼蚤燥灶 葬灶凿 贼澡藻凿藻早则葬凿葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 燥枣 粤云月员 憎葬泽 苑苑郾 苑源豫 援 栽澡藻则藻 憎藻则藻 责燥泽蚤贼蚤增藻 糟燥则增藻造燥燥贼蚤燥灶泽 遭藻贼憎藻藻灶 粤云月员鄄凿藻早则葬凿葬贼蚤灶早 葬灶凿 造葬糟糟葬泽藻 葬糟贼蚤贼蚤贼赠援
运藻赠 憎燥则凿泽院孕造藻怎则燥贼怎泽 燥泽贼则藻葬贼怎泽 造葬糟糟葬泽藻曰 杂藻造藻糟贼曰 粤云月员鄄凿藻早则葬凿葬贼蚤灶早
摇 摇 漆酶渊蕴葬糟糟葬泽藻冤是一种含铜的多酚氧化酶袁与植物
中的抗坏血酸氧化酶尧哺乳动物的血浆铜蓝蛋白同属
蓝色多铜氧化酶渊遭造怎藻皂怎造贼蚤鄄糟燥责责藻则燥曾蚤凿葬泽藻冤家族咱员暂 遥 其
中袁动物尧植物尧真菌咱圆暂和细菌咱猿暂中都能产生漆酶袁但
目前最主要的漆酶生产者仍是一些大型真菌袁如灵芝尧
平菇尧黑木耳等遥 漆酶能催化氧化多种酚类和非酚类
化合物咱源 耀 远暂 袁同时将氧还原成水遥
黄曲霉毒素渊粤枣造葬贼燥曾蚤灶袁粤云栽冤是一类化学结构类似
的二呋喃香豆素衍生物袁分子结构中含有一个二呋喃
环和一个氧杂萘邻酮渊香豆素冤环袁前者为其毒性结
构袁后者与其致癌性有关遥 酝燥贼燥皂怎则葬造 等咱苑暂研究发现袁
平菇发酵液有降解黄曲霉毒素的效果曰粤造遭藻则贼泽 等咱愿暂的
研究发现袁平菇比云芝尧青霉菌尧烟管菌等的产漆酶能
力高袁并且降解黄曲霉毒素的能力与漆酶的活性有一
定的相关性遥 平菇是一种可食用的大型真菌袁其丰富
的资源为筛选高效降解黄曲霉毒素的平菇菌株提供了
便利条件遥 因此袁开展平菇漆酶降解黄曲霉毒素的研
究袁具有很高的实用价值遥 本研究旨在从可食用的真
缘圆园员
核摇 农摇 学摇 报 圆远 卷
菌平菇中袁筛选出能够高效产漆酶且能高效降解黄曲
霉毒素 月员的菌株袁并研究其降解黄曲霉毒素的效果遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 材料
员郾 员郾 员 摇 试剂 摇 粤月栽杂 咱 圆袁 圆忆鄄葬扎蚤灶燥遭蚤泽鄄渊 猿鄄藻贼澡赠造遭藻灶扎鄄
贼澡蚤葬扎燥造蚤灶藻鄄远鄄泽怎造责澡燥灶葬贼藻冤 暂袁美国 杂蚤早皂葬 公司曰黄曲霉毒
素 月员标准品袁美国 杂蚤早皂葬 公司曰黄曲霉毒素 月员酶联免
疫分析渊耘蕴陨杂粤冤检测试剂盒袁北京华安麦科生物技术
有限公司曰乙腈渊色谱纯冤尧甲醇渊色谱纯冤袁美国 云蚤泽澡藻则
公司遥
员郾 员郾 圆摇 仪器摇 哉灾 原 源愿园圆杂 型双光束紫外可见分光光
度计袁尤尼柯渊上海冤仪器有限公司曰杂蚤早皂葬 员 原 员源 小型
高速离心机袁杂蚤早皂葬 公司曰杂运再 原 员员园圆糟 型全温度恒温
摇床袁上海苏坤实业有限公司曰粤晕郧耘蕴 氮吹仪袁杭州奥
盛仪器有限公司曰灾燥则贼藻曾 郧藻灶蚤怎泽 猿 涡旋混合器袁德国
陨运粤公司曰月蚤燥鄄砸葬凿 远愿园 全自动酶标仪袁美国 月蚤燥鄄则葬凿 公
司曰再允 原 员源缘园 型超净工作台袁江苏苏州净化设备公司遥
员郾 员郾 猿摇 菌株摇 平菇 孕员尧孕圆尧孕哉陨尧匀尧杂运尧粤员园尧宰月缘尧匀载
均为本实验室保藏菌株遥
员郾 员郾 源摇 培养基摇 在 苑 种培养基中袁除 孕阅粤 斜面培养
基用做菌种保藏外袁其他几种均用做菌种筛选遥
孕阅粤斜面培养基院去皮马铃薯 圆园园早袁葡萄糖 圆园早袁
琼脂 员缘早袁蒸馏水 员园园园皂造袁责匀自然曰
木质素降解选择培养基渊蕴阅杂酝冤院麸皮水解液渊以
干麸皮木质素计冤 园郾 猿早袁 运圆 匀孕韵源 员郾 园早袁 晕葬悦造 园郾 缘早袁酝早杂韵源窑苑匀圆 韵 园郾 猿早袁 晕葬晕韵猿 圆郾 缘早袁 悦葬悦造圆 园郾 员早袁 云藻悦造猿园郾 园员早袁水 员园园园皂造袁调节 责匀苑郾 源曰
愈创木酚 原木质素降解选择培养基 渊郧蕴阅杂冤院向
木质素降解选择培养基中加入愈创木酚 原乙醇溶液袁
终浓度为 园郾 园源豫 曰
琢 原萘酚 原木质素降解选择培养基渊晕蕴阅杂冤院在木
质素降解选择培养基中加入 琢 原萘酚 原乙醇溶液袁终
浓度为 园郾 缘皂皂燥造 辕 蕴曰
葡萄糖麦芽酵母培养基渊郧酝再冤院葡萄糖 员园早袁麦芽
提取物 员园早袁酵母提取物 源早袁琼脂 员缘早袁蒸馏水 员园园园皂造袁
责匀自然曰
最低盐培养基渊酝杂酝冤院蔗糖 圆园早袁酵母提取物 猿早袁
渊晕匀源冤圆杂韵源源郾 缘早袁运圆匀孕韵源猿早袁酝早杂韵源窑苑匀圆韵 员早袁柠檬酸园郾 圆缘早袁悦葬悦造圆窑圆匀圆韵 园郾 园缘早袁微量元素混合液 员园皂造袁蒸馏
水 员园园园皂造袁责匀缘郾 缘曰
矿物盐培养基 渊酝杂月冤咱怨袁园暂 院葡萄糖 员园早袁运圆 匀孕韵源圆早袁酝早杂韵源窑苑匀圆韵 园郾 缘早袁悦葬悦造圆窑圆匀圆韵 园郾 员早袁盐酸硫胺素
员皂早袁酒石酸铵 园郾 圆早袁微量元素混合液 员园皂造袁蒸馏水
员园园园皂造袁责匀自然曰
微量元素混合液 渊 皂皂燥造 辕 蕴冤 咱员员暂 院甘氨酸 苑郾 愿早袁
酝早杂韵源窑苑匀圆韵 员圆早袁酝灶杂韵源窑匀圆韵 圆郾 怨早袁晕葬悦造 员苑早袁云藻杂韵源窑苑匀圆韵 园郾 猿缘怨早袁悦燥悦造圆 园郾 苑苑缘早袁悦葬悦造圆窑圆匀圆韵 园郾 怨早袁在灶杂韵源窑苑匀圆韵 园郾 猿源愿早袁悦怎杂韵源窑缘匀圆韵 园郾 园源早袁运粤造渊杂韵源冤圆窑员圆匀圆韵园郾 园圆员早袁匀猿 月韵猿 园郾 员远早袁晕葬酝燥韵源 园郾 园源员早袁用蒸馏水定容
至 员园园园皂造遥
员郾 圆摇 试验方法
员郾 圆郾 员摇 菌株的活化摇 将菌株从 孕阅粤试管斜面转接到
郧酝再固体平板中央袁猿园益恒温培养 缘凿袁进行活化遥
员郾 圆郾 圆摇 高产漆酶菌株的筛选摇 采用两步法筛选高产
漆酶的平菇菌株院渊员冤选择培养基平板法袁即用打孔器
将平板菌株制成直径 苑皂皂的菌种塞袁分别取 员 片菌种
塞置于 蕴阅杂酝尧郧蕴阅杂 和 晕蕴阅杂 培养基平板中央渊蕴阅杂酝
培养基平板为对照培养基平板冤袁将平板倒置尧放于
猿园益恒温培养箱中培养袁每天定时观察菌落形态袁测量
菌丝圈尧变色圈直径袁记录变色圈颜色深浅以分析判断
其产漆酶能力遥 渊圆冤液体发酵培养法袁将初筛得到的
高产漆酶的平菇菌株进行液体发酵培养袁定量测定产
漆酶的能力袁即取 圆 片菌种塞接种到装有 员园园皂造 液体
培养基的 圆缘园皂造 三角瓶中袁液体培养基分别为 郧酝再尧
酝杂酝和 酝杂月袁置于 猿园益袁圆园园则 辕 皂蚤灶 摇床培养 员圆凿袁每
源愿澡取样袁测定漆酶活力遥
员郾 圆郾 猿摇 漆酶酶活力的测定 摇 测定漆酶酶活力采用
粤月栽杂 作为底物咱苑 袁员 圆暂 袁用紫外分光光度计在波长
源员源灶皂处测定吸光度值遥 以每分钟氧化 员滋皂燥造 粤月栽杂
所需要的漆酶量作为 员 个酶活力单位渊哉冤遥 按如下公
式计算漆酶酶活力 粤院
粤 越 员园远着 伊
灾总灾酶 伊
驻韵阅
驻贼
其中袁 着为吸光系数袁 着 越 猿远园园园 蕴窑渊皂燥造窑糟皂冤 原员曰
灾总和 灾酶分别为反应体系的总体积和反应粗酶液体
积曰漆酶酶活力单位为 哉 辕 蕴遥
并按如下公式计算单位酶活降解量 皂院
皂 越 渊皂粤云月员 原 皂忆粤云月员冤粤 伊 灾 伊 员园园园
摇 摇 其中袁皂粤云月员为 粤云月员添加量袁单位 灶早曰 皂忆粤云月员 为粤云月员剩余量袁单位 灶早曰粤为漆酶酶活袁单位 哉 辕 蕴曰灾为酶
液体积袁单位 滋造曰单位酶活降解量 皂袁单位为 滋早遥
员郾 圆郾 源摇 黄曲霉毒素 月员的提取与测定摇 根据刘畅等咱员源暂
文献中改进的溶剂法提取黄曲霉毒素 月员袁按照黄曲霉
毒素 月员 耘蕴陨杂粤检测试剂盒使用说明书中的操作步骤袁
测定黄曲霉毒素 月员的含量遥
远圆园员
摇 苑 期 高产漆酶平菇的筛选及其在降解黄曲霉毒素 月员中的应用
员郾 圆郾 缘 摇 黄曲霉毒素 月员 的降解 摇 平菇发酵液经员园园园园则 辕 皂蚤灶离心 缘皂蚤灶后袁吸取离心后的上清液 苑怨园滋造
加入到 员郾 缘皂造 灭菌离心管中袁再向离心管中加入浓度
为 员园园滋早 辕 皂造 的黄曲霉毒素 月员标准溶液 员园滋造袁置于猿园益袁圆园园则 辕 皂蚤灶摇床培养 苑圆澡遥
员郾 猿摇 数据处理
所有处理均设 猿 次重复袁使用 杂粤杂 怨郾 园 软件作统
计分析遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 高产漆酶平菇菌株的初筛
从图 员 可以看出袁平菇菌株在 郧蕴阅杂 和 晕蕴阅杂 两
种选择培养基上分别产生红褐色和蓝黑色的变色圈遥
菌株在 郧蕴阅杂培养基上的变色圈色泽较 晕蕴阅杂 培养基
深袁但经过相同时间培养后袁其变色圈直径小于 晕蕴阅杂
培养基遥
图 员摇 平菇漆酶与不同培养基的颜色反应
云蚤早援 员摇 悦燥造燥则 则藻葬糟贼蚤燥灶 燥枣 孕造藻怎则燥贼怎泽 燥泽贼则藻葬贼怎泽 造葬糟糟葬泽藻 燥灶 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 葬早葬则 责造葬贼藻泽
蕴阅杂酝院木质素降解选择培养基曰晕蕴阅杂院琢 原萘酚 原木质素降解选择培养基曰郧蕴阅杂院愈创木酚 原木质素降解选择培养基遥 下同遥
造蚤早灶蚤灶鄄凿藻早则葬凿蚤灶早 泽藻造藻糟贼蚤增藻 皂藻凿蚤怎皂 琢鄄灶葬责澡贼澡燥造鄄造蚤早灶蚤灶鄄凿藻早则葬凿蚤灶早 泽藻造藻糟贼蚤增藻 皂藻凿蚤怎皂曰 郧蕴阅杂院 早怎葬蚤葬糟燥造鄄造蚤早灶蚤灶鄄凿藻早则葬凿蚤灶早 泽藻造藻糟贼蚤增藻皂藻凿蚤怎皂
摇 摇 从表 员 可以看出袁愿 株平菇菌株在 猿 种培养基上
生长良好袁生长圈直径都大于 源园皂皂袁其中平菇 孕员尧孕圆尧
孕哉陨 猿 株菌株在 蕴阅杂酝 和 晕蕴阅杂 培养基上的生长圈直
径明显大于其他菌株袁在 郧蕴阅杂 培养基中袁孕员尧孕圆尧孕哉陨
和 杂运尧匀没有显著差异遥 菌株在 晕蕴阅杂 培养基上的生
长圈直径明显大于 郧蕴阅杂 培养基袁并且都明显小于在
蕴阅杂酝培养基上的生长圈直径遥
愿株平菇菌株在 晕蕴阅杂培养基平板和 郧蕴阅杂培养基
平板上的变色圈直径都比较大渊都大于 源园皂皂冤袁说明这
愿株菌株产漆酶的能力比较高遥 其中袁菌株 孕员尧孕圆尧孕哉陨
在 晕蕴阅杂培养基平板上的变色圈直径明显大于其他菌
株袁但彼此之间没有显著差异袁表明这 猿 株平菇产漆酶
的能力明显高于其他菌株曰在 郧蕴阅杂 培养基平板上袁孕员尧
孕圆尧孕哉陨和 匀变色圈之间没有显著差异袁但明显大于其
他菌株遥 因此袁本试验选择平菇 孕员尧孕圆尧孕哉陨进行液体发
酵袁筛选液体发酵高产漆酶的平菇菌株遥
表 员摇 平菇菌株在不同培养基平板上生长 远凿的产酶情况
栽葬遭造藻 员摇 蕴葬糟糟葬泽藻鄄责则燥凿怎糟蚤灶早 燥枣 孕造藻怎则燥贼怎泽 燥泽贼则藻葬贼怎泽 燥灶 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 葬早葬则 责造葬贼藻泽 燥枣 远 凿葬赠泽
菌株
泽贼则葬蚤灶
蕴阅杂酝渊皂皂冤 郧蕴阅杂渊皂皂冤 晕蕴阅杂渊皂皂冤
粤 月 粤 月 粤 月
孕员 垣 渊远愿郾 员苑葬冤 园渊 原 冤 垣 渊缘缘郾 猿猿葬冤 缘苑郾 猿猿葬渊 垣垣垣 冤 垣 渊远源郾 猿猿葬冤 远苑郾 猿猿葬渊 垣垣垣 冤
孕圆 垣 渊远缘郾 愿猿葬冤 园渊 原 冤 垣 渊缘源郾 猿猿葬冤 缘苑郾 远苑葬渊 垣垣垣 冤 垣 渊远源郾 猿猿葬冤 远苑郾 园园葬渊 垣垣垣 冤
杂运 垣 渊缘怨郾 愿猿遭冤 园渊 原 冤 垣 渊缘圆郾 员苑葬冤 源愿郾 猿猿遭渊 垣垣 冤 垣 渊缘缘郾 园园遭冤 缘愿郾 远苑遭渊 垣垣 冤
匀 垣 渊缘愿郾 愿猿遭冤 园渊 原 冤 垣 渊缘员郾 缘园葬冤 缘源郾 园园葬渊 垣垣 冤 垣 渊缘缘郾 园园遭冤 缘怨郾 猿猿遭渊 垣垣 冤
孕哉陨 垣 渊远源郾 缘园葬冤 园渊 原 冤 垣 渊缘猿郾 缘园葬冤 缘远郾 远苑葬渊 垣垣垣 冤 垣 渊远园郾 员苑葬冤 远猿郾 猿猿葬遭渊 垣垣垣 冤
匀载 垣 渊缘缘郾 缘园遭糟冤 园渊 原 冤 垣 渊源缘郾 缘园遭冤 源远郾 缘园遭糟渊 垣 冤 垣 渊源怨郾 缘园糟冤 缘猿郾 员苑糟渊 垣 冤
宰月缘 垣 渊缘猿郾 员苑糟冤 园渊 原 冤 垣 渊源员郾 猿猿糟冤 源源郾 员苑糟渊 垣 冤 垣 渊源苑郾 猿猿糟冤 缘园郾 远苑糟凿渊 垣 冤
粤员园 垣 渊缘员郾 愿猿糟冤 园渊 原 冤 垣 渊源园郾 缘园糟冤 源员郾 员苑糟凿渊 垣 冤 垣 渊源远郾 园园糟冤 源愿郾 猿猿凿渊 垣 冤
注院粤袁表示菌株生长状况渊 垣生长袁 原不生长冤袁括号中表示菌落圈直径渊皂皂冤曰月袁表示变色圈直径渊皂皂冤袁括号中表示颜色深浅渊 原无反应袁 垣较强袁 垣
垣强袁 垣垣垣很强冤曰数字后不同字母表示相同培养基下袁不同菌株间变色圈直径间差异显著渊责 约 园郾 园缘冤遥
晕燥贼藻院 粤 阅蚤枣枣藻则藻灶贼 造藻贼贼藻则泽 皂藻葬灶 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 葬皂燥灶早 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 泽贼则葬蚤灶泽 燥灶 贼澡藻 泽葬皂藻 糟燥造燥则鄄泽藻造藻糟贼蚤燥灶 责造葬贼藻渊责 约 园郾 园缘冤 援
苑圆园员
核摇 农摇 学摇 报 圆远 卷
圆郾 圆摇 高产漆酶平菇菌株的复筛
从图 圆 可以看出袁孕员尧孕圆尧孕哉陨 猿 株平菇在 酝杂酝 培
养基中的产漆酶能力明显高于 郧酝再 和 酝杂月 培养基袁
因此确定平菇产漆酶的最佳培养基为 酝杂酝 培养基遥
不同菌株间袁孕员 和 孕圆 产漆酶的能力明显高于 孕哉陨袁但
菌株 孕员 和 孕圆 产漆酶的能力没有显著差异遥
圆郾 猿摇 平菇漆酶降解黄曲霉毒素 月员的能力
从表 圆 可以看出袁孕员 和 孕圆 菌株降解黄曲霉毒素
月员的能力都比较高袁其中袁菌株 孕员 培养 员园凿时袁漆酶酶
活最高袁为 苑远怨郾 源源哉 辕 蕴袁苑怨园滋造粗酶液可以将 员园园园灶早的
黄曲霉毒素 月员降解到 圆圆圆郾 远圆灶早袁降解率为 苑苑郾 苑源豫 袁单
位酶活降解量为 员郾 圆愿滋早曰菌株 孕圆 培养 愿凿 时袁漆酶酶
活最高袁为 苑圆猿郾 愿猿哉 辕 蕴袁苑怨园滋造粗酶液可以将 员园园园灶早的
黄曲霉毒素 月员降解到 源园园郾 愿苑灶早袁降解率为 缘怨郾 怨员豫 袁单
位酶活降解量为 员郾 园缘滋早遥 菌株 孕员 的最高酶活尧降解
黄曲霉毒素月员的能力以及单位酶活降解黄曲霉毒素
图 圆摇 平菇菌株在不同液体培养基中的漆酶活性渊哉 辕 蕴冤
云蚤早援 圆摇 蕴葬糟糟葬泽藻 葬糟贼蚤增蚤贼赠渊哉 辕 蕴冤燥枣 孕造藻怎则燥贼怎泽 燥泽贼则藻葬贼怎泽
泽贼则葬蚤灶泽 葬枣贼藻则 糟怎造贼怎则藻凿 蚤灶 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 造蚤择怎蚤凿 皂藻凿蚤葬
郧酝再为葡萄糖麦芽酵母培养基曰
酝杂酝为最低盐培养基曰酝杂月矿物盐培养基遥
郧酝再院 早造怎糟燥泽藻 皂葬造贼 赠藻葬泽贼 皂藻凿蚤怎皂曰 酝杂酝院 皂蚤灶蚤皂葬造 泽葬造贼
皂藻凿蚤怎皂曰 酝杂月院 皂蚤灶藻则葬造 泽葬造贼泽 皂藻凿蚤怎皂遥
月员量都高于菌株 孕圆袁具有明显优越性遥
表 圆摇 平菇漆酶降解黄曲霉毒素 月员的能力
栽葬遭造藻 圆摇 阅藻早则葬凿葬贼蚤燥灶 燥枣 粤云月员 遭赠 孕造藻怎则燥贼怎泽 燥泽贼则藻葬贼怎泽 造葬糟糟葬泽藻
菌株
泽贼则葬蚤灶
酶活
藻灶扎赠皂藻 葬糟贼蚤增蚤贼赠
渊哉 辕 蕴冤
最高漆酶产量培养时间
蚤灶糟怎遭葬贼蚤燥灶 贼蚤皂藻 燥枣
澡蚤早澡藻泽贼 赠蚤藻造凿 渊凿冤
苑怨园滋造粗酶液降解黄曲霉毒素 月员总量粤云月员 鄄凿藻早则葬凿葬贼蚤灶早 糟燥灶贼藻灶贼 燥枣 苑怨园滋造 糟则怎凿藻藻灶扎赠皂藻 泽燥造怎贼蚤燥灶 渊灶早冤
单位酶活
降解量渊滋早 辕 哉冤
孕员 苑远怨郾 源源 员园 苑苑苑郾 猿愿 依 圆愿郾 缘源 员郾 圆愿 依 园郾 园缘
孕圆 苑圆猿郾 愿猿 愿 缘怨怨郾 员猿 依 圆圆郾 源苑 员郾 园缘 依 园郾 园源
圆郾 源摇 平菇菌株 孕员 降解黄曲霉毒素 月员能力与其漆酶
酶活的相关性
图 猿摇 平菇 孕员 降解黄曲霉毒素 月员能力
与产漆酶能力的分析
云蚤早援 猿摇 栽澡藻 葬灶葬造赠泽蚤泽 遭藻贼憎藻藻灶 粤云月员鄄凿藻早则葬凿葬贼蚤燥灶 葬灶凿
造葬糟糟葬泽藻 责则燥凿怎糟贼蚤燥灶 燥枣 孕造藻怎则燥贼怎泽 燥泽贼则藻葬贼怎泽 泽贼则葬蚤灶 孕员
从图 猿 可以看出袁平菇菌株 孕员 降解黄曲霉毒素
月员的能力呈先升高后降低的趋势袁其在酝杂酝培养基中
产漆酶的能力也呈先升高后降低的趋势袁并且两者的
变化趋势基本保持一致袁经分析袁菌株 孕员 漆酶降解黄
曲霉毒素 月员的能力与漆酶酶活性的相关系数为 园郾 愿缘袁
说明 孕员 降解黄曲霉毒素 月员 的能力与漆酶酶活性呈高
度正相关遥
猿摇 讨论
猿郾 员摇 高产漆酶菌株的筛选及其机理
漆酶是一种胞外酶袁能将愈创木酚尧琢 原萘酚聚合
为低分子聚合物要愈创木酚或 琢 原萘酚的四聚体和五
聚体袁从而在培养基上显色袁显色越深袁显色范围越大袁
表示漆酶酶活越高遥 漆酶能够降解木质素袁其降解产
物可为菌体生长提供所需要的碳源袁因此选用木质素
作为菌株生长的唯一碳源袁并分别添加愈创木酚和 琢
原萘酚成为无机盐选择培养基 郧蕴阅杂 和 晕蕴阅杂咱员源 耀 员远暂 袁
根据菌株在选择培养基上的生长情况尧以及变色圈的
大小尧颜色深浅等特征袁可以初步筛选出高产漆酶的菌
株遥 再通过液体发酵培养法袁对菌株产漆酶的能力进
行定量测定袁圆 种方法相结合袁可以提高选择负荷水
平遥
平菇可以分泌多种同工漆酶袁其对愈创木酚和 琢
原萘酚的催化专一性不同袁从而导致愈创木酚和 琢 原
萘酚对菌株的生长产生不同的影响遥 菌株在选择培养
基上的培养结果表明袁变色圈的大小与生长圈的大小
愿圆园员
摇 苑 期 高产漆酶平菇的筛选及其在降解黄曲霉毒素 月员中的应用
呈现出较好的一致性袁愈创木酚和 琢 原萘酚对菌株的
生长具有一定的抑制作用袁可以减缓菌株细胞生长的
速率曰根据菌株在选择培养基平板的变色圈结果可以
得出袁菌株对 琢 原萘酚的耐受性比对愈创木酚的耐受
性高袁同时王剑峰等咱员源暂研究发现愈创木酚对漆酶的生
物合成具有明显的诱导作用袁使得菌株在添加愈创木
酚的培养基上的变色圈色泽深袁但变色圈直径小遥
平菇菌株在不同液体培养基中的培养结果表明袁
最适合平菇菌株产漆酶的培养基为 酝杂酝培养基袁可能
是因为 酝杂酝培养基 责匀缘郾 缘 的偏酸性条件更适合菌株
产漆酶袁这与漆酶在酸性 责匀 条件下活性和催化效率
高的性质相一致咱远暂 遥 国外报道咱愿暂筛选的平菇菌株最
高产漆酶能力达 源员远郾 猿怨哉 辕 蕴袁而本研究筛选到的平菇
菌株 孕员尧孕圆 产漆酶的能力分别高出国外报道菌株的
愿源郾 苑怨豫 尧苑猿郾 愿猿豫 遥 在后续的研究中袁我们将进一步优
化菌株产漆酶的发酵条件袁提高菌株产漆酶的能力袁为
工业化生产漆酶提供更好的支撑遥
猿郾 圆摇 平菇漆酶降解黄曲霉毒素 月员的研究
粤造遭藻则贼泽等咱愿暂在研究真菌漆酶降解黄曲霉毒素 月员
的能力时袁测定黄曲霉毒素 月员的含量采用高效液相色
谱法渊匀孕蕴悦冤袁这种方法对样品的纯度要求很高袁因此
样品的前处理过程比较复杂耗时袁不适宜用于大量样
品的检测袁酶联免疫吸附测定法渊耘蕴陨杂粤冤测定黄曲霉
毒素 月员的含量袁具有灵敏尧快速尧特异性强尧成本较低
等特点咱员苑袁员愿暂 袁同时经过多次试验证明袁操作回收率比
较高袁介于 怨员郾 缘员豫 耀 怨源郾 缘缘豫之间遥 因此袁为了提高
试验效率袁试验过程中我们采用酶联免疫吸附测定法
渊耘蕴陨杂粤冤测定黄曲霉毒素 月员的含量遥
目前袁关于平菇漆酶的研究主要有平菇漆酶的重
组表达咱员缘袁员远暂 尧染料脱色咱员愿袁员怨暂等袁而在平菇漆酶降解黄
曲霉毒素 月员方面袁开展的研究则相对较少袁仅 粤造遭藻则贼泽
等对平菇漆酶降解黄曲霉毒素 月员的能力进行了研究袁
发现平菇 杂贼圆 原 猿 菌株 苑怨园滋造 发酵液可以将 员员圆园灶早 黄
曲霉毒素 月员降解到 苑员苑郾 怨圆灶早袁降解率为 猿缘郾 怨豫 曰而本
研究筛选到的平菇菌株 孕员 苑怨园滋造 发酵液可以将
员园园园灶早黄曲霉毒素 月员降解到 圆圆圆郾 远圆灶早袁降解率为苑苑郾 苑源豫 曰平菇菌株 孕员 比平菇菌株 杂贼圆 原 猿 的发酵液降
解黄曲霉毒素 月员能力高出 怨猿郾 猿猿豫 袁其降解能力相当
于 员皂造平菇菌株 孕员 发酵粗酶液可以将 源怨皂造含有黄曲
霉毒素 月员超过国家限量标准渊圆园皂早 辕 蕴冤一倍的溶液降
解到国家限量标准遥 在后续研究中袁本研究将进一步
优化菌株 孕员 降解黄曲霉毒素 月员的最适条件袁以提高
其降解黄曲霉毒素 月员的能力
源摇 结论
通过选择培养基平板培养法和液体发酵法对平菇
菌株产漆酶的能力进行比较分析袁筛选得到高产漆酶
的平菇菌株 孕员尧孕圆袁并筛选得到平菇产漆酶的最适培
养基为 酝杂酝 培养基遥 进一步研究平菇 孕员尧孕圆 发酵液
降解黄曲霉毒素 月员的能力袁发现平菇 孕员 发酵液降解
黄曲霉毒素 月员的能力明显高于 孕圆袁并且平菇 孕员 发酵
液降解黄曲霉毒素 月员的能力与其漆酶活性呈一定的
正相关性遥
参考文献院
咱 员 暂摇 钞亚鹏袁钱世均援 真菌漆酶及其应用咱允暂 援 生物工程进展袁 圆园园员袁
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咱员员暂摇 王剑锋袁苏国成袁 刘建玲袁王摇 璋援 烟管菌漆酶合成的营养条件
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素 月员 吸附菌株的筛选及吸附机理研究咱 允暂 援 核农学报袁 圆园员园袁
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咱员源暂摇 王剑锋袁 刘建玲袁 王摇 璋援从土壤中筛选产漆酶微生物菌株的研
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咱员缘暂摇 任广明袁 李滇华袁 曲娟娟袁 于学佳袁 王摇 朋援 漆酶高产菌株筛选
及漆酶基因片段的克隆咱允暂 援 中国林副特产袁 圆园员园袁 渊缘冤 院 猿怨 原
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咱员愿暂摇 杨清香袁王摇 涛袁 王摇 栋袁李学梅援 平菇漆酶的性质和应用研究
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