全 文 ：摇 核 农 学 报摇 圆园员圆袁圆远渊猿冤院园缘园缘 耀 园缘园怨允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员圆冤园猿鄄园缘园缘鄄园远
红外光谱法研究铬对酵母细胞内蛋白二级结构的影响
刘摇 鹭员 摇 侯东军圆 摇 陈锋亮员袁 猿 摇 吕加平员
渊员郾 中国农业科学院农产品加工研究所 辕农业部农产品加工与质量控制重点开放实验室袁北京摇 员园园员怨猿曰
圆郾 中国动物疫病预防控制中心袁北京摇 员园园员圆缘曰猿郾 山东省农业科学院农产品研究所袁山东 济南摇 圆缘园员园园冤
摘摇 要院利用氨水尧杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄苑缘 对富铬酵母尧空白酵母进行蛋白提取袁采用红外光谱测定及数学方法对
比分析铬作用前后蛋白质二级结构的变化袁探讨铬对蛋白结构的影响遥 结果显示袁铬与蛋白的键合导致
大分子蛋白中的 琢 原螺旋结构和无规则卷曲结构被破坏袁琢 原螺旋结构由 员员郾 猿缘豫降至 员郾 远猿豫 袁无规则
卷曲结构略有下降袁茁 原转角结构增加袁由 猿猿郾 愿愿豫升至 缘圆郾 苑圆豫 袁茁 原折叠结构几乎无变化曰小分子蛋白
的 茁 原折叠结构被破坏袁由 远员郾 源员豫降至 源愿郾 缘源豫 袁无规则卷曲和 琢 原螺旋结构比例增加袁由 员郾 源员豫增加
至 员猿郾 猿园豫 袁琢 原螺旋结构略有增加袁茁 原转角结构几乎无变化遥 与铬结合的大分子蛋白中袁茁 原转角结
构占优势曰与铬结合的小分子蛋白中袁茁 原折叠结构占优势遥
关键词院红外光谱曰 铬曰 二级结构曰 葡萄糖耐量因子曰 酵母
耘云云耘悦栽 韵云 悦则 韵晕 杂耘悦韵晕阅粤砸再 杂栽砸哉悦栽哉砸耘 韵云 再耘粤杂栽 孕砸韵栽耘陨晕 宰陨栽匀 云栽鄄陨砸
蕴陨哉 蕴怎员 摇 匀韵哉 阅燥灶早鄄躁怎灶圆 摇 悦匀耘晕 云藻灶早鄄造蚤葬灶早员袁 猿 摇 蕴灾 允蚤葬鄄责蚤灶早员
渊员郾 运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 粤早则燥鄄枣燥燥凿 孕则燥糟藻泽泽蚤灶早 葬灶凿 匝怎葬造蚤贼赠 悦燥灶贼则燥造袁 酝蚤灶蚤泽贼则赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则藻袁 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣
粤早则燥鄄孕则燥凿怎糟贼泽 孕则燥糟藻泽泽蚤灶早 杂糟蚤藻灶糟藻 葬灶凿 栽藻糟澡灶燥造燥早赠袁悦澡蚤灶藻泽藻 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 月藻蚤躁灶早摇 员园园员怨猿曰
圆郾 悦澡蚤灶葬 粤灶蚤皂葬造 阅蚤泽藻葬泽藻 悦燥灶贼则燥造 悦藻灶贼藻则袁 月藻蚤躁蚤灶早 员园园员圆缘曰 猿郾 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 粤早则燥鄄枣燥燥凿 杂糟蚤藻灶糟藻 葬灶凿 栽藻糟澡灶燥造燥早赠袁
杂澡葬灶凿燥灶早 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻袁 允蚤灶葬灶袁 杂澡葬灶凿燥灶早摇 圆缘园员园园冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 悦澡则燥皂蚤怎皂鄄遭蚤灶凿蚤灶早 泽怎遭泽贼葬灶糟藻 憎葬泽 蚤泽燥造葬贼藻凿 遭赠 葬皂皂燥灶蚤葬 藻曾贼则葬糟贼 葬灶凿 早藻造 枣蚤造贼则葬贼蚤燥灶 糟澡则燥皂葬贼燥早则葬责澡赠援 栽澡藻
泽藻糟燥灶凿葬则赠 泽贼则怎糟贼怎则藻 燥枣 糟澡则燥皂蚤怎皂鄄遭蚤灶凿蚤灶早 泽怎遭泽贼葬灶糟藻 憎葬泽 凿藻贼藻则皂蚤灶藻凿 葬灶凿 葬灶葬造赠扎藻凿 遭赠 云栽鄄陨砸 糟燥皂遭蚤灶藻凿 憎蚤贼澡
凿藻糟燥灶增燥造怎贼蚤燥灶袁 泽藻糟燥灶凿 凿藻则蚤增葬贼蚤增藻 泽责藻糟贼则怎皂 葬灶凿 糟怎则增藻 枣蚤贼贼蚤灶早援 栽澡藻 糟燥皂遭蚤灶葬贼蚤燥灶 燥枣 糟澡则燥皂蚤怎皂 葬灶凿 责则燥贼藻蚤灶 蚤灶 增蚤增燥 则藻泽怎造贼藻凿
蚤灶贼燥 贼澡藻 糟澡葬灶早藻泽 燥枣 贼澡藻 泽藻糟燥灶凿葬则赠 泽贼则怎糟贼怎则藻援 粤泽 贼燥 贼澡藻 澡蚤早澡鄄皂燥造藻糟怎造葬则 憎藻蚤早澡贼 糟澡则燥皂蚤怎皂鄄遭蚤灶凿蚤灶早 泽怎遭泽贼葬灶糟藻袁 贼澡藻
责藻则糟藻灶贼葬早藻 燥枣 琢鄄澡藻造蚤曾 凿藻糟则藻葬泽藻凿 枣则燥皂 员员郾 猿缘豫 贼燥 员郾 远猿豫 葬灶凿 贼澡藻 责藻则糟藻灶贼葬早藻 燥枣 则葬灶凿燥皂 糟燥蚤造 凿藻糟则藻葬泽藻凿 葬 造蚤贼贼造藻援 栽澡藻
责藻则糟藻灶贼葬早藻 燥枣 茁鄄贼怎则灶 蚤灶糟则藻葬泽藻凿 枣则燥皂 猿猿郾 愿愿豫 贼燥 缘圆郾 苑圆豫 袁 遭怎贼 憎澡蚤糟澡 燥枣 茁鄄泽澡藻藻贼 凿蚤凿 灶燥贼 糟澡葬灶早藻援 宰蚤贼澡 则藻早葬则凿 贼燥 贼澡藻 造燥憎鄄
皂燥造藻糟怎造葬则 憎藻蚤早澡贼 糟澡则燥皂蚤怎皂鄄遭蚤灶凿蚤灶早 泽怎遭泽贼葬灶糟藻袁 贼澡藻 责藻则糟藻灶贼葬早藻 燥枣 茁鄄泽澡藻藻贼 凿藻糟则藻葬泽藻凿 枣则燥皂 远员郾 源员豫 贼燥 源愿郾 缘源豫 援 栽澡藻
责藻则糟藻灶贼葬早藻 燥枣 则葬灶凿燥皂 糟燥蚤造 蚤灶糟则藻葬泽藻凿 枣则燥皂 员郾 源员豫 贼燥 员猿郾 猿园豫 葬灶凿 贼澡葬贼 燥枣 琢鄄澡藻造蚤曾 蚤灶糟则藻葬泽藻凿 葬 造蚤贼贼造藻援 栽澡藻 责藻则糟藻灶贼葬早藻 燥枣 茁鄄
贼怎则灶 凿蚤凿 灶燥贼 糟澡葬灶早藻援 栽澡藻 皂葬躁燥则 泽藻糟燥灶凿葬则赠 泽贼则怎糟贼怎则藻 燥枣 贼澡藻 澡蚤早澡鄄皂燥造藻糟怎造葬则 憎藻蚤早澡贼 糟澡则燥皂蚤怎皂鄄遭蚤灶凿蚤灶早 泽怎遭泽贼葬灶糟藻 憎葬泽 茁鄄
贼怎则灶曰 贼澡藻 皂葬躁燥则 泽藻糟燥灶凿葬则赠 泽贼则怎糟贼怎则藻 燥枣 贼澡藻 造燥憎鄄皂燥造藻糟怎造葬则 憎藻蚤早澡贼 糟澡则燥皂蚤怎皂鄄遭蚤灶凿蚤灶早 泽怎遭泽贼葬灶糟藻 憎葬泽 茁鄄泽澡藻藻贼援
运藻赠 憎燥则凿泽院云栽鄄陨砸曰 悦则曰 泽藻糟燥灶凿葬则赠 泽贼则怎糟贼怎则藻曰 早造怎糟燥泽藻 贼燥造藻则葬灶糟藻 枣葬糟贼燥则曰 赠藻葬泽贼
收稿日期院圆园员员鄄园愿鄄圆远摇 接受日期院圆园员圆鄄园员鄄园远
基金项目院国家航天育种工程项目渊圆园园远匀栽圆园园员猿冤袁中央级公益性科研院所基本科研业务费专项渊园园猿圆园员圆园员怨冤
作者简介院刘摇 鹭渊员怨苑愿鄄冤袁女袁河北辛集人袁助研袁博士袁研究方向为乳品科学与乳品微生物遥 耘鄄皂葬蚤造院藻早则藻贼赃造蚤怎造怎岳 赠葬澡燥燥援 糟燥皂援 糟灶
通讯作者院吕加平渊员怨远猿鄄冤袁男袁山西朔州人袁研究员袁博士袁研究方向为乳品加工与乳品微生物遥 耘鄄皂葬蚤造院造增躁责缘愿远岳 增蚤责援 泽蚤灶葬援 糟燥皂
缘园缘
核摇 农摇 学摇 报 圆远 卷
摇 摇 铬渊芋冤是人体的基本营养元素袁主要通过葡萄糖
耐量因子渊郧造怎糟燥泽藻 栽燥造藻则葬灶糟藻 云葬糟贼燥则袁 郧栽云冤协同或增强
胰岛素的作用袁从而影响糖尧脂类尧蛋白质和核酸代谢遥
郧栽云是由三价铬尧烟酸尧谷氨酸尧半胱氨酸和甘氨酸组
成的小肽类物质袁三价铬是 郧栽云的活性中心咱员暂 遥 富铬
酵母是 郧栽云的重要来源遥 郧栽云 可增强胰岛素功能尧促
进糖和脂的代谢袁逆转葡萄糖耐受不良袁提高糖耐量曰
保护胰岛素 茁细胞袁提高胰岛素受体的数量和亲和力
等功能遥 机体 郧栽云 缺乏与域型糖尿病的形成有较为
密切的关系遥
金属离子通过与内源配体渊氨基酸侧链基团冤和
外源配体渊如水分子尧卟啉环尧有机小分子等冤配位袁结
合到蛋白质分子中袁形成金属活性部位咱圆袁猿暂 袁影响蛋白
质结构和赋予蛋白质功能咱源暂 遥 本研究中袁酵母通过生
物吸附和生物转化作用将环境中的无机铬转化为体内
铬蛋白复合物质要要要郧栽云遥 培养初期袁酵母主要通过
生物吸附作用将金属离子结合在微生物细胞表面袁此
时铬仍以无机离子形式存在曰在酵母对数生长期袁酵母
通过生物转化作用袁铬与肽链上的羰基氧发生配位袁与
蛋白质结合袁形成铬蛋白质复合物咱缘袁远暂 遥 氨水可以有
效提取酵母菌体内的铬蛋白复合物质咱苑 耀 怨暂 遥 酝藻则贼扎咱员园暂
等将化学合成物和富铬酵母中提取的 郧栽云 的性质对
比袁推测 郧栽云是由三价铬离子与烟酸尧甘氨酸尧谷氨酸
和半胱氨酸形成的八面体配合物袁它以三价铬为中心袁
与 圆 个烟酸以吡啶氮反式配位袁氨基酸用来满足其余
的配位数遥 晕藻蚤造藻咱员员暂等通过反相层析提取尧体外脂肪细
胞培养鉴定活性成分袁采用猿员孕核磁共振对 猿 个分离组
分进行组成和结构分析袁发现组分中含有多种有机磷
酸盐尧无机磷酸盐和聚磷酸盐类物质遥 王翀咱员圆暂利用紫
外光谱和红外光谱研究铬在酵母细胞中的赋存形式袁
通过对比普通酵母和富铬酵母的紫外光谱图和红外光
谱图发现酵母对铬进行生物吸附作用时袁固体紫外图
谱中没有铬特征峰的出现曰当铬经细胞生物转化袁通过
与肽链上的羰基氧发生配位与蛋白质结合袁蛋白质二
级结构发生改变袁紫外图谱中出现铬的特征峰遥 目前袁
有关 郧栽云结构研究仍在探索之中袁针对铬通过酵母生
物吸附尧生物转化作用进入酵母体内成为有机铬从而
对所结合蛋白结构影响的研究也较少遥
本课题组在对富铬酵母中的富铬蛋白分离纯化的
研究中袁发现存在大尧小 圆 个有机铬峰遥 小分子物质与
郧栽云 特性相吻合袁大分子物质的有机铬峰经质谱等技
术检测可能为 匀月栽员 蛋白或 猿鄄磷酸甘油醛脱氢酶或核
蛋白体蛋白遥 目前研究报道酵母中 郧栽云 为一小分子
含铬物质袁而针对酵母中大分子含铬化合物还未见报
道遥 本研究通过分子筛对富铬酵母和空白酵母的氨水
提取物进行分离袁分别收集大尧小分子含铬物质袁利用
红外光谱仪测定其红外吸收光谱袁应用 韵孕哉杂缘郾 缘 软件
对红外图谱进行处理袁通过差谱技术尧导数光谱技术尧
傅立叶去卷积化技术尧谱带拟合技术分析红外光谱图袁
定量分析二级结构的变化袁探讨铬渊芋冤对蛋白结构的
影响遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 材料与试剂
本试验采用的菌株为经航天诱变后的酿酒酵母
再杂鄄猿袁保存于中国农业科学院农产品加工研究所微生
物实验室曰杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄苑缘袁美国 孕澡葬则皂葬糟蚤葬 公司曰铬标
准溶液渊员园园园滋早 辕 皂造冤袁中国计量科学院曰硝酸 渊优级
纯冤尧高氯酸渊优级纯冤尧溴化碘尧三氧化铬尧氨水尧葡萄
糖渊均为分析纯冤袁国药集团化学试剂有限公司曰酵母
浸粉尧大豆蛋白胨尧琼脂袁北京陆桥技术有限责任公司曰
分析用水为去离子水遥
员郾 圆摇 仪器与设备
哉耘砸栽耘载苑园 型傅立叶变换近红外光谱仪袁德国曰
苑远怨再孕鄄员缘粤型粉末压片机袁天津市科器高新技术公司曰
悦载郧常压生物电脑层析系统院悦载郧鄄员 层析柜尧阅月杂鄄员园园
自动部分收集器尧匀蕴鄄圆月 数显横流泵尧匀阅鄄员 核酸蛋白
检测器袁上海沪西分析仪器厂曰哉灾猿园员园 日立紫外可见
分光光度计袁日本曰酝阅杂鄄远 微波消解 辕萃取仪袁上海新仪
微波化学科技有限公司曰粤粤远猿园园 火焰原子吸收分光
光度计袁日本曰阅蕴鄄悦允鄄陨晕高性能无菌试验台袁哈尔滨市
东联公司曰栽杂粤韵 匀杂陨晕 栽匀鄄猿缘远园 高压灭菌锅袁珠海市造
鑫企业有限公司曰匀在匝鄄云员远园 摇床培养箱渊哈尔滨市东
联公司冤尧栽郧蕴鄄员远郧高速冷冻离心机袁上海安亭科学仪
器厂曰砸耘缘圆鄄怨怨 型号旋转蒸发仪袁上海亚荣生化仪器
厂曰宰匀鄄猿 微型旋涡震荡器袁上海沪西分析仪器厂曰杂蕴鄄
晕电子天平袁上海民桥精密仪器有限公司曰责匀计袁意大
利遥
员郾 猿摇 方法
员郾 猿郾 员摇 富铬酵母及对照空白酵母的培养咱远暂 摇 种子液
培养院取 原 圆园益甘油保藏的原始菌种袁接种于 圆园皂造 辕
圆缘园皂造三角摇瓶 再孕阅 液体培养基中袁圆愿益袁圆园园则 辕 皂蚤灶
培养 员缘澡遥
工作发酵液培养院将单独灭菌三氯化铬溶液按一
定浓度无菌操作加入到已灭菌的 再孕阅发酵培养基中袁
种子液按 员园豫的接种量接种到发酵培养基袁于 圆愿益袁
圆园园则 辕 皂蚤灶摇床培养 源源澡袁发酵接束后袁发酵液 缘园园园则 辕
远园缘
摇 猿 期 红外光谱法研究铬对酵母细胞内蛋白二级结构的影响
皂蚤灶离心 员园皂蚤灶收集菌体袁去离子水洗 猿 次袁去除游离
无机铬袁冷冻干燥富铬酵母菌体遥 工作发酵液中不添
加三氯化铬培养得到对照酵母菌体遥
员郾 猿郾 圆摇 氨水提取及浓缩处理摇 将干燥好的酵母菌体
与 园郾 员皂燥造 辕 蕴的氨水以 员 颐 圆园 比例混匀后袁猿苑益震荡提
取 猿澡遥 源益条件下袁员园园园园则 辕 皂蚤灶 离心 猿园皂蚤灶袁收集上清
液遥 将上清液置于旋转蒸发仪于 缘缘益尧转速为 怨园则 辕
皂蚤灶抽真空浓缩至一定体积袁 原 源益备用遥
员郾 猿郾 猿摇 杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄苑缘 凝胶过滤层析摇 称取一定量的
杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄苑缘 干胶置于微滤除菌的去离子水内于
怨园益膨胀 猿澡袁膨胀结束后袁轻微搅拌去除上层漂浮的
破碎颗粒袁加入一定量的去离子水调整其浓度为
苑缘豫 遥 装柱前用超声波处理 猿园皂蚤灶去除悬浮液体内气
泡遥
杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄苑缘 柱渊员郾 远 伊 员园园糟皂冤经去离子水平衡
圆 个柱体积后袁用去离子水为洗脱液袁流速为 园郾 猿皂造 辕
皂蚤灶曰温度 园益 耀 源益曰每管收集 猿皂造遥 对洗脱液进行在
线 圆远园灶皂尧圆愿园灶皂 跟踪检测袁采用火焰原子吸收法检测
金属含量分布遥 收集尧合并目的管液体后袁冷冻干燥备
用遥
员郾 猿郾 源摇 层析液中金属 悦则含量的测定咱怨暂
员郾 猿郾 源郾 员摇 微波消化 摇 淤预处理院将 郧栽云 层析液置于
溶样杯内袁加入 源皂造 硝酸袁置于加热板袁员远园益 加热
猿园皂蚤灶曰于氧化尧消化院将预处理液稍冷后袁再加入
园郾 缘皂造高氯酸和 缘豫 渊质量分数冤过硫酸铵溶液 猿皂造遥
将此混合物置于微波消解仪内进行微波消解遥 消解完
毕用去离子水定容至 员缘皂造遥
员郾 猿郾 源郾 圆摇 火焰原子吸收光谱法测定摇 铬提取液消解
后袁参照 郧月 辕 栽员缘缘缘缘郾 远鄄员怨怨缘咱员猿暂火焰原子吸收光谱法
测定铬含量遥
员郾 源摇 中红外光谱仪测定及数据处理
应用 哉耘砸栽耘载苑园 型傅立叶变换近红外光谱仪渊德
国布鲁克冤进行酵母蛋白二级结构测定分析遥 取干燥
的酵母蛋白样品 员 药匙袁溴化钾 缘 耀 员园 药匙袁然后在红
外灯下于玛瑙研体中研磨 员缘皂蚤灶袁在粉末压片机上压
片袁员源噪早压力保持约 圆皂蚤灶袁将制得均匀透明的薄片放
入红外光谱仪中测定红外光谱遥
测定条件院光谱范围 源园园 耀 源园园园糟皂 原员袁分辨率为
愿糟皂 原员袁信号扫描累加 远源 次遥
采用 韵孕哉杂缘郾 缘 软件进行相应的图谱处理分析遥
通过差谱技术尧导数光谱技术尧傅立叶去卷积化技术尧
谱带拟合技术分析红外光谱图遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 凝胶过滤层析
杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄苑缘 对富铬酵母氨水提取物的蛋白图
谱和铬离子分布图谱如图 员 所示遥 检测波长为 粤圆愿园尧
粤圆远园遥 粤圆愿园 是蛋白质的特征吸收波长袁粤圆远园 是 郧栽云
的特征吸收波长遥 通过这 圆 个波长同时在线监测以及
测定层析液中铬的含量来分析 郧栽云 在蛋白组分中的
分布遥 杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄苑缘 对空白酵母氨水提取物层析图
谱如图 圆 所示袁洗脱过程中的检测波长同样为 粤圆愿园尧
粤圆远园遥 图 员 显示袁以 粤圆愿园 为特征吸收波长的图谱有 圆
个相隔较远的峰曰而以 粤圆远园 为特征吸收波长的图谱
也有 圆 个相隔较远的峰曰且这 圆 组波长的 圆 个峰重合袁
图 员摇 富铬酵母氨水提取物
杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄苑缘 凝胶层析图
云蚤早援 员摇 耘造怎贼蚤燥灶 凿蚤葬早则葬皂 燥枣 杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄苑缘
悦澡则燥皂葬贼燥早则葬责澡赠 燥枣 葬皂皂燥灶蚤葬 藻曾贼则葬糟贼
枣则燥皂 贼澡藻 糟澡则燥皂蚤怎皂 藻灶则蚤糟澡藻凿 赠藻葬泽贼
分别命名 孕藻葬噪员尧孕藻葬噪圆遥 根据 杂藻责澡葬凿藻曾郧鄄苑缘 的分级范
围渊猿园园园 耀 愿园园园园阅冤判断 孕藻葬噪员 分子量大于 愿园园园园阅袁
孕藻葬噪圆 分子量小于 猿园园园阅遥 有机铬检测显示洗脱液中
有机铬的分布也形成了 圆 个峰袁且铬峰出现的位置和
蛋白吸收特征峰以及 郧栽云 特征吸收峰的位置一致遥
富铬酵母氨水提取物通过凝胶层析得到 圆 个含铬的蛋
白峰院大分子含铬蛋白组分和小分子含铬蛋白组分遥
图 圆 显示空白酵母氨水提取物的蛋白峰的峰形和峰位
与富铬酵母氨水提取物的峰形和峰位一致袁不含铬离
子袁圆 个峰位分别为 孕月员尧 孕月圆遥 分别收集 孕藻葬噪员尧
孕藻葬噪圆尧孕月员尧孕月圆袁冷冻干燥袁用于红外光谱测定遥
圆郾 圆摇 中红外图谱分析
圆郾 圆郾 员摇 谱图处理及峰的指认摇 用于二级结构分析的
红外谱带为酰胺玉尧域尧芋带遥 到目前为止袁研究最多
苑园缘
核摇 农摇 学摇 报 圆远 卷
图 圆摇 对照酵母氨水提取物
杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄苑缘 凝胶层析图
云蚤早援 圆 耘造怎贼蚤燥灶 凿蚤葬早则葬皂 燥枣 杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄苑缘
悦澡则燥皂葬贼燥早则葬责澡赠 燥枣 葬皂皂燥灶蚤葬 藻曾贼则葬糟贼
枣则燥皂 赠藻葬泽贼 憎蚤贼澡燥怎贼 郧则猿 垣
和应用最为普遍的是蛋白质和多肽的傅立叶红外酰胺
玉带遥 酰胺玉带去卷积谱中的各子峰精确峰位由二阶
导数谱确定袁各子峰的结构归属通过对已知结构的蛋
白质研究予以确定遥 具体操作步骤简略如下院选择测
员苑园园 耀 员远园园糟皂 原员的酰胺玉带光谱曰做去卷积变换和二
阶导数数值处理袁求出去卷积谱和二阶导数谱曰确定子
峰峰位并作曲线拟合处理求出各子峰面积袁找出结构
与谱带的对应关系袁得到 琢 原螺旋尧茁 原折叠及无规则
卷曲等多种结构信息袁定量分析获得各种二级结构的
相对含量遥 月赠造藻则尧运则蚤皂皂 等指认了红外酰胺玉带子峰
位置和二级结构成分的对应关系遥 详见表 员遥
表 员摇 蛋白质酰胺 陨带组分的
特征频率和峰的归属
栽葬遭造藻 员摇 云栽鄄陨砸 枣则藻择怎藻灶糟蚤藻泽 燥枣 责则燥贼藻蚤灶 葬皂蚤凿藻 遭蚤灶凿泽玉
葬灶凿 贼澡藻蚤则 葬泽泽蚤早灶皂藻灶贼泽 贼燥 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 泽藻糟燥灶凿葬则赠 泽贼则怎糟贼怎则藻
频率 枣则藻择怎藻灶糟赠 渊糟皂 原员 冤 归属 葬贼贼则蚤遭怎贼蚤燥灶
员远圆源 依 源郾 园 茁 原折叠 茁鄄泽澡藻藻贼员远猿员 依 猿郾 园 茁 原折叠 茁鄄泽澡藻藻贼员远猿苑 依 猿郾 园 茁 原折叠 茁鄄泽澡藻藻贼员远源缘 依 源郾 园 无规则卷曲 则葬灶凿燥皂 糟燥蚤造员远缘猿 依 源郾 园 琢 原螺旋 琢鄄澡藻造蚤曾员远远猿 依 源郾 园 茁 原转角 茁鄄贼怎则灶员远苑员 依 猿郾 园 茁 原转角 茁鄄贼怎则灶员远苑缘 依 缘郾 园 茁 原折叠 茁鄄泽澡藻藻贼员远愿猿 依 圆郾 园 茁 原转角 茁鄄贼怎则灶员远愿怨 依 圆郾 园 茁 原转角 茁鄄贼怎则灶员远怨源 依 圆郾 园 茁 原转角 茁鄄贼怎则灶
圆郾 圆郾 圆摇 金属铬对大分子蛋白二级结构的影响 摇 图 猿
原 粤为 孕月员 的 云栽鄄陨砸光谱及曲线拟合谱遥 其强峰位于
员远圆苑糟皂 原员和 员远苑圆糟皂 原员处袁其二级结构定量分析结果为
猿猿郾 愿愿豫为 茁 原转角袁猿远郾 缘怨豫为 茁 原折叠袁员员郾 猿缘豫为 琢
原螺旋袁员苑郾 猿怨豫为无规则卷曲袁园郾 苑源豫为氨基酸侧链遥
图 猿 原 月为 孕藻葬噪员 的 云栽鄄陨砸 光谱及曲线拟合谱遥 其强
峰位于 员远圆苑糟皂 原员和 员远远猿糟皂 原员处袁其二级结构定量分
析结果为 缘圆郾 苑圆豫为 茁 原 转角袁猿缘郾 远怨豫为 茁 原 折叠袁
员郾 远猿豫为 琢 原螺旋袁怨郾 源豫为无规则卷曲袁园郾 远源豫为氨
基酸侧链遥 相比大分子空白对照袁大分子富铬蛋白红
外光谱图显示院铬与蛋白的键合使得 员远源苑糟皂 原员尧
员远缘缘糟皂 原员向高波数漂移形成 员远远猿 糟皂 原员处的吸收曰
员远园怨糟皂 原员处的峰位与二级结构关系不大袁属于氨基酸
侧链的震动遥
圆郾 圆郾 猿摇 金属铬对小分子蛋白二级结构的影响 摇 图 源
原 粤为 孕月圆 的 云栽鄄陨砸光谱及曲线拟合谱遥 其强峰位于
员远猿远糟皂 原员处袁二级结构定量分析结果为 远员郾 源员豫为 茁
原 折叠袁圆猿郾 怨缘豫 为 茁 原 转角袁员员郾 苑苑豫 为 琢 原 螺旋袁
员郾 源员豫为无规则卷曲袁员郾 源缘豫为氨基酸侧链遥 图 源 原 月
为 孕藻葬噪圆 的 云栽鄄陨砸 光谱及曲线拟合谱遥 其强峰位于
员远猿缘糟皂 原员和 员远远愿糟皂 原员处袁二级结构定量分析结果为
源愿郾 缘源豫为 茁 原折叠袁圆源郾 园猿豫为 茁 原转角袁员猿郾 源圆豫为 琢
原螺旋袁员猿郾 猿园豫为无规则卷曲袁园郾 苑员豫为氨基酸侧链遥
相比与小分子空白对照袁小分子富铬蛋白的红外光谱
图显示院铬与蛋白的键合使得 员远猿缘糟皂 原员向高波数漂移
形成 员远源猿糟皂 原员和 员远缘员糟皂 原员处的吸收曰员远园怨糟皂 原员处的
峰位与二级结构关系不大袁属于氨基酸侧链的震动遥
猿摇 讨论
金属与蛋白质的结合会破坏蛋白二级结构袁引起
蛋白质二级结构的变化遥 蛋白肽链与金属离子或含金
属小分子之间的相互作用会影响蛋白质功能的关系遥
有研究报道 悦怎圆 垣离子与蛋白肽键的键合可以诱导或
增强 琢 原螺旋构象的生成咱员愿暂 遥 蛋白质红外吸收光谱
中的 员苑园园 耀 员缘园园糟皂 原员的酰胺带袁包括 员苑园园 耀 员远园园糟皂 原员
的酰胺玉带及 员远园园 耀 员缘园园糟皂 原员处的酰胺域带袁可用于
归属蛋白质的二级结构并探讨其内部氢键结合的情
况咱猿暂 遥 最基本的二级结构类型有 琢 原螺旋结构和 茁 原
折叠结构袁此外还有 茁 原转角和自由回转遥 其中 琢 原
螺旋结构是蛋白质中最主要尧最稳定的螺旋结构形式曰
茁 原 折叠结构是一种具有特定的几何形状的伸展结
构袁通常比 琢 原螺旋结构更为稳定遥 含有高比例的 茁
原折叠结构的蛋白质一般呈现高变性温度遥
本研究中袁铬与蛋白的键合导致二级结构发生了
变化遥 如大分子中袁 琢 原 螺旋结构由 员员郾 猿缘豫 降至
愿园缘
摇 猿 期 红外光谱法研究铬对酵母细胞内蛋白二级结构的影响
图 猿摇 孕月员 与 孕藻葬噪员 云栽鄄陨砸光谱
云蚤早援 猿摇 云栽鄄陨砸 泽责藻糟贼则葬 燥枣 孕月员 葬灶凿 孕藻葬噪员
粤院 孕月员曰 月院 孕藻葬噪员
员郾 远猿豫 袁无规则卷曲结构略有下降袁茁 原 转角结构增
加袁由 猿猿郾 愿愿豫升至 缘圆郾 苑圆豫 袁茁 原折叠结构几乎无变
化袁据此推测铬与大分子蛋白的结合促使部分 琢 原螺
旋结构和无规则卷曲结构转变为 茁 原转角结构曰小分
子蛋白的 茁 原折叠结构由 远员郾 源员豫降至 源愿郾 缘源豫 袁无规
则卷曲由 员郾 源员豫增加至 员猿郾 猿园豫 袁琢 原螺旋结构略有增
加袁茁 原转角结构几乎无变化袁推测部分 茁 原折叠结构
转变为无规则卷曲和 琢 原螺旋结构袁但 茁 原折叠结构
仍占主要结构组分渊源愿郾 缘源豫 冤遥
在前人对富铬酵母铬结合蛋白研究中袁郧栽云 是唯
一报道的酵母细胞内含铬肽类物质咱员源 耀 员苑暂 遥 王翀咱员圆暂利
用红外光谱技术扫描普通酵母和富铬酵母研究铬对蛋
白结构的影响袁试验结果显示酰胺玉带的吸收峰从
员远缘苑郾 苑愿糟皂 原员移动至 员远源远郾 园圆糟皂 原员袁峰形发生变化遥 本
研究利用氨水提取尧分子筛提取含铬蛋白袁分别以空白
酵母氨水提取物的分离组分为对照袁以红外光谱技术
测定铬结合前后红外光谱袁通过数学方法解析图谱袁探
讨蛋白组分二级结构发生的具体变化遥 在富铬酵母蛋
白纯化过程中袁发现与小分子含铬物质存在的同时袁还
存在 员 个大分子含铬物质袁且分子量大于 愿园园园园阅遥 空
白酵母氨水提取物层析图谱显示院同样存在 圆 个蛋白
峰袁且峰形和出峰位置与富铬酵母的分离物的峰几乎
一致遥 推测铬经过细胞的生物吸附和转化作用袁在酵
母体内通过某些键与氨基酸等部位发生键和袁在成分
上仅仅多了铬的键和袁因此峰形和峰的位置几乎无异遥
对于大分子含铬蛋白物质袁由于其氨基酸侧链更多袁更
易发生键和袁但这并不意味着具备与 郧栽云 同样的生理
功能袁需要后续功能试验对其进行功能考察遥
参考文献院
咱 员 暂摇 酝藻则贼扎 宰援 栽澡藻 则燥造藻 燥枣 藻造藻皂藻灶贼泽 蚤灶 贼澡藻 葬早蚤灶早 责则燥糟藻泽泽 咱酝暂援 孕则燥早则藻泽泽
蚤灶 悦造蚤灶蚤糟葬造 葬灶凿 月蚤燥造燥早蚤糟葬造 砸藻泽藻葬则糟澡袁 员怨怨园袁猿圆远院圆圆怨 原 圆源园
咱 圆 暂摇 匀燥造皂 砸 匀袁 运藻灶灶藻责燥 孕袁 杂燥造燥皂燥灶 耘 陨援 杂贼则怎糟贼怎则葬造 葬灶凿 枣怎灶糟贼蚤燥灶葬造
葬泽责藻糟贼泽 燥枣 皂藻贼葬造 泽蚤贼藻泽 蚤灶 遭蚤燥造燥早赠 咱允暂 援 悦澡藻皂蚤糟葬造 砸藻增蚤藻憎泽袁员怨怨远袁 怨远院
圆圆猿怨 原 圆猿员源
咱 猿 暂摇 蕴蚤怎 悦袁 载怎 匀 允援 栽澡藻 皂藻贼葬造 泽蚤贼藻 葬泽 葬 贼藻皂责造葬贼藻 枣燥则 贼澡藻 皂藻贼葬造造燥责则燥贼藻蚤灶
泽贼则怎糟贼怎则藻 枣燥则皂葬贼蚤燥灶 咱 允暂 援 允燥怎则灶葬造 燥枣 陨灶燥则早葬灶蚤糟 月蚤燥糟澡藻皂蚤泽贼则赠袁 圆园园圆袁
愿愿院 苑苑 原 愿远
怨园缘
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
圆园员圆袁圆远渊猿冤院园缘园缘 耀 园缘员园
图 源摇 孕月圆 与 孕藻葬噪圆 云栽鄄陨砸光谱
云蚤早援 源摇 云栽鄄陨砸 泽责藻糟贼则葬 燥枣 孕月圆 葬灶凿 孕藻葬噪圆
粤院 孕月圆曰 月院 孕藻葬噪圆
咱 源 暂摇 王建华袁卫亚丽袁文宗河袁何建川援蛋白质结构的 云栽鄄陨砸研究进展
咱允暂 援化学通报袁 圆园园源袁 渊苑冤院源愿圆 原 源愿远
咱 缘 暂 摇 在藻贼蚤糟 灾 郧袁 杂贼藻澡造蚤噪鄄贼燥皂葬泽 灾袁 郧则遭葬 杂袁 藻贼 葬造援 悦澡则燥皂蚤怎皂 怎责贼葬噪藻 遭赠
杂葬糟糟澡葬燥皂赠糟藻泽 糟藻则藻增蚤泽蚤葬藻 葬灶凿 蚤泽燥造葬贼蚤燥灶 燥枣 早造怎糟燥泽藻 贼燥造藻则葬灶糟藻 枣葬糟贼燥则 枣则燥皂
赠藻葬泽贼 遭蚤燥皂葬泽泽 咱允暂 援 允燥怎则灶葬造 燥枣 月蚤燥泽糟蚤藻灶糟藻袁 圆园园员袁 圆远 渊圆冤院圆员苑 原 圆圆猿
咱 远 暂摇 刘摇 鹭袁吕加平袁高艳红援 空间搭载高产葡萄糖耐量因子渊郧栽云冤
酵母的选育咱允暂 援微生物学通报袁 圆园园怨袁 猿远 渊圆冤院圆圆猿 原 圆猿园
咱 苑 暂 摇 粤灶凿藻则泽燥 砸粤袁 孕燥造葬灶泽噪赠 酝 酝袁 砸燥早蚤灶泽噪蚤 耘 耘袁 藻贼 葬造援 云葬糟贼燥则泽 葬枣枣藻糟贼蚤灶早
贼澡藻 则藻贼藻灶贼蚤燥灶 葬灶凿 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶 燥枣 赠藻葬泽贼 糟澡则燥皂蚤怎皂 咱 允暂 援 允燥怎则灶葬造 燥枣
粤早则蚤糟怎造贼怎则藻 葬灶凿 云燥燥凿 悦澡藻皂蚤泽贼则赠袁 员怨苑愿袁 圆远 渊源冤院愿缘愿 原 愿远员
咱 愿 暂 摇 栽燥藻责枣藻则 耘 宰袁 酝藻则贼扎 宰袁 孕燥造葬灶泽噪赠 酝 酝袁 藻贼 葬造援 孕则藻责葬则葬贼蚤燥灶 燥枣
糟澡则燥皂蚤怎皂鄄糟燥灶贼葬蚤灶蚤灶早 皂葬贼藻则蚤葬造 燥枣 早造怎糟燥泽藻 贼燥造藻则葬灶糟藻 枣葬糟贼燥则 葬糟贼蚤增蚤贼赠 枣则燥皂
遭则藻憎藻则爷泽 赠藻葬泽贼 藻曾贼则葬糟贼泽 葬灶凿 遭赠 泽赠灶贼澡藻泽蚤泽 咱允暂 援 允燥怎则灶葬造 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则藻
葬灶凿 云燥燥凿 悦澡藻皂蚤泽贼则赠袁 员怨苑远袁 圆缘 渊员冤院员远圆 原 员远远郾
咱 怨 暂 摇 刘摇 鹭袁吕加平袁高艳红援 酵母源性葡萄糖耐量因子渊郧栽云冤含量
测定方法的研究咱允暂 援食品与发酵工业袁 圆园园怨袁 猿缘 渊员冤院员源园 原 员源源
咱员园暂摇 酝藻则贼扎 宰援 耘枣枣藻糟贼泽 葬灶凿 皂藻贼葬遭燥造蚤泽皂 燥枣 早造怎糟燥泽藻 贼燥造藻则葬灶糟藻 枣葬糟贼燥则 咱 允暂 援
晕怎贼则蚤贼蚤燥灶 砸藻增蚤藻憎泽援 员怨苑缘 袁猿猿 渊缘冤院员圆怨 原 员猿缘
咱员员暂 摇 耘凿藻灶泽 晕 运袁 砸藻葬增藻 蕴 粤袁 月藻则早葬灶葬 酝 杂袁 藻贼 葬造援 再藻葬泽贼 藻曾贼则葬糟贼
泽贼蚤皂怎造葬贼藻泽 早造怎糟燥泽藻 皂藻贼葬遭燥造蚤泽皂 葬灶凿 蚤灶澡蚤遭蚤贼泽 造蚤责燥造赠泽蚤泽 蚤灶 则葬贼 葬凿蚤责燥糟赠贼藻泽
蚤灶 增蚤贼则燥 咱允暂 援 晕怎贼则蚤贼蚤燥灶则援 圆园园圆袁 员猿圆院员员源员 原 员员源愿
咱员圆暂摇 王摇 翀援啤酒酵母对重金属 悦则渊芋冤生物转化及生物吸附的研究
咱阅暂援西安院西北大学袁 圆园园缘
咱员猿暂摇 郧月 辕 栽员缘缘缘缘郾 远 原 员怨怨缘袁固体废物总铬的测定咱杂暂
咱员源暂摇 杂怎皂则葬造 运 匀袁 灾蚤灶糟藻灶贼 允 月援 陨泽 早造怎糟燥泽藻 贼燥造藻则葬灶糟藻 枣葬糟贼燥则 葬灶 葬则贼蚤枣葬糟贼
责则燥凿怎糟藻凿 遭赠 葬糟蚤凿 澡赠凿则燥造赠泽蚤泽 燥枣 造燥憎鄄皂燥造藻糟怎造葬则鄄憎藻蚤早澡贼 糟澡则燥皂蚤怎皂鄄
遭蚤灶凿蚤灶早 泽怎遭泽贼葬灶糟藻 咱允暂 援 孕燥造赠澡藻凿则燥灶袁 员怨怨苑袁 员远 渊圆猿冤院 源员苑员 原 源员苑苑
咱员缘暂摇 阅葬增蚤泽 阅 酝袁 匀燥造凿泽憎燥则贼澡 耘 杂袁 杂澡藻则则蚤枣枣 允 蕴援 栽澡藻 蚤泽燥造葬贼蚤燥灶 燥枣 早造怎糟燥泽藻
贼燥造藻则葬灶糟藻 枣葬糟贼燥则泽 枣则燥皂 遭则藻憎藻则 爷 泽 赠藻葬泽贼 葬灶凿 贼澡藻蚤则 则藻造葬贼蚤燥灶泽澡蚤责 贼燥
糟澡则燥皂蚤怎皂 咱允暂 援 允燥怎则灶葬造 燥枣 月蚤燥糟澡皂藻蚤糟葬造 酝藻凿蚤糟蚤灶藻袁 员怨愿缘 袁猿猿院圆怨苑 原
猿员员
咱员远暂摇 匀葬赠造燥糟噪 杂 允袁 月怎糟噪造藻赠 孕 阅袁 月造葬糟噪憎藻造造藻造 蕴 云援 杂藻责葬则葬贼蚤燥灶 燥枣
遭蚤燥造燥早蚤糟葬造造赠 葬糟贼蚤增藻 糟澡则燥皂蚤怎皂 耀 糟燥灶贼葬蚤灶蚤灶早 糟燥皂责造藻曾藻泽 枣则燥皂 赠藻葬泽贼
藻曾贼则葬糟贼泽 葬灶凿 燥贼澡藻则 泽燥怎则糟藻泽 燥枣 早造怎糟燥泽藻 贼燥造藻则葬灶糟藻 枣葬糟贼燥则渊郧栽云冤 葬糟贼蚤增蚤贼赠
咱允暂 援 允燥怎则灶葬造 燥枣 陨灶燥则早葬灶蚤糟 月蚤燥糟澡藻皂蚤泽贼则赠袁 员怨愿猿袁员愿院员怨缘 原 圆员员
咱员苑暂摇 匀葬赠造燥糟噪 杂 允袁 月怎糟噪造藻赠 孕 阅袁 月造葬糟噪憎藻造造藻造 蕴 云援 栽澡藻 则藻造葬贼蚤燥灶泽澡蚤责 燥枣
糟澡则燥皂蚤怎皂 贼燥 贼澡藻 早造怎糟燥泽藻 贼燥造藻则葬灶糟藻 枣葬糟贼燥则域咱允暂援 允燥怎则灶葬造 燥枣 陨灶燥则早葬灶蚤糟
月蚤燥糟澡藻皂蚤泽贼则赠袁 员怨愿猿袁员怨 院员园缘 原 员员苑
咱员愿暂摇 黄仲贤援金属蛋白研究中几个值得注意的动向咱 允暂 援 化学进展袁
圆园园圆袁员源渊源冤院猿员愿 原 猿圆圆
渊责任编辑摇 裴摇 颖冤
园员缘