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Simultaneous Determination on Three Alkaloids in Bulbs of Fritillaria unibracteata var. wabensis by HPLC-ELSD

HPLC-ELSD法同时检测瓦布贝母三种生物碱的含量


为了建立高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ELSD)测定瓦布贝母3种生物碱(西贝母碱、贝母辛和贝母素乙)含量的方法,本文以Tigerkin C18色谱柱(4.6×150 mm,5 μm)作为分析柱,乙腈-0.1%二乙胺水(70∶30)作为流动相,流速1.0 mL·min-1,ELSD检测器参数设为以压缩空气为载气,流速2.5 L·min-1,漂移管温度75℃进行了试验并确认其为适合的分离和检测条件.结果显示,西贝母碱、贝母辛、贝母素乙分别在0.192~3.84、0.191~3.82和0.178~3.55 μg范围内线性关系良好.精确度,稳定性和重复性试验的RSD均小于3%.平均加样回收率分别为97.75%、100.47%、99.40%,RSD分别为1.0%、2.6%、1.6%(n=6).瓦布贝母样品含量测定值分别为0.0835%、0.0271%、0.0174%, RSD分别为1.3%、2.0%、2.6%(n=3).此法用于测定瓦布贝母生物碱含量,操作简便、快捷,结果稳定可靠,可以为瓦布贝母的质量评价和控制提供参考.


全 文 :核 农 学 报!"#$%!"&"$## $$&.% )$&.A
!"#$%&’"()#*’+&$,-$.*#’/#$&’0*.+%*+1
收稿日期!"#$(*$#*"&!接受日期!"#$%*#%*#(
基金项目!高等学校博士学科点专项科研基金+川贝母内生真菌生物碱类次生代谢产物的研究, ""#$$.$#($$###A#
作者简介!潘峰!男!主要从事药用植物资源开发与利用及其内生真菌的研究% /*0123$ Y15f95LYf$"(4$"H8;J0
通讯作者!吴卫!女!博士生导师!主要从事药用植物资源研究% /*0123$9e7e924L01238;J0
文章编号!$###*&..$""#$%#$#*$&.%*#H
]VBI*/B?-法同时检测瓦布贝母三种生物碱的含量
潘!峰$!侯!凯$!董品利"!陈郡雯$!胡!博$!吴!卫$
" $ 四川农业大学农学院!四川 成都!H$$$(#*" 四川省茂县农业局!四川 茂县!H"("###
摘!要!为了建立高效液相色谱 @蒸发光散射"]VBI*/B?-#测定瓦布贝母 ( 种生物碱"西贝母碱$贝母
辛和贝母素乙#含量的方法!本文以 F2L9XN25 I$&色谱柱"%QH ‘$.# 00!. "0#作为分析柱!乙腈 @#Q$R
二乙胺水"’#b(##作为流动相!流速 $Q# 0B%025 @$!/B?-检测器参数设为以压缩空气为载气!流速 "Q.
B%025 @$!漂移管温度 ’.^进行了试验并确认其为适合的分离和检测条件’ 结果显示!西贝母碱$贝母
辛$贝母素乙分别在 #Q$A" )(Q&%$#Q$A$ )(Q&" 和 #Q$’& )(Q.. "L范围内线性关系良好’ 精确度!稳
定性和重复性试验的 W?-均小于 (R’ 平均加样回收率分别为 A’Q’.R$$##Q%’R$AAQ%#R!W?-分别
为 $Q#R$"QHR$$QHR"% _H#’ 瓦布贝母样品含量测定值分别为 #Q#&(.R$#Q#"’$R$#Q#$’%R! W?-
分别为 $Q(R$"Q#R$"QHR"% _(#’ 此法用于测定瓦布贝母生物碱含量!操作简便$快捷!结果稳定可
靠!可以为瓦布贝母的质量评价和控制提供参考’
关键词!瓦布贝母&]VBI*/B?-&西贝母碱&贝母辛&贝母素乙
-SC$$#Q$$&HAT682PP58$##*&..$Q"#$%Q$#8$&.%
!!瓦布贝母 "9$./.’&$.& #%.3$&*/+&/& \1X8P&3#+%1.1#
是名贵中药川贝的基源种 &$ @"’ !分布于四川岷江上游
山区!生长在海拔 " .## )( ### 0的灌木林下&(’ % $A&(
年唐心曜和岳松健最初命名为瓦布贝母"9?P&3#+%1.1
?8j8F15L9[?8I8j79U# &%’ % "#$# 年出版0中国药典1
"一部#将其收录为川贝母植物新来源&.’ % 近年来实践
证明!瓦布贝母较暗紫贝母等适应环境变化的能力强!
形态较大!具有栽培前景% 长期以来!由于用药量的不
断增大!川贝母的需求也日益增大!但其生长年限长!多
达 % 年以上!且主要分布于川西高原!加之对其野生资
源的肆意开发!野生川贝母资源日渐枯竭!已处于濒危
状态&H’ !目前己被列入国家三级保护植物名单% 因而!
就瓦布贝母作为川贝母药材比较适宜栽培的基源种来
说!其人工栽培技术已日趋成熟!逐渐形成规模&’’ !对其
活性成分进行研究显的很有必要%
贝母类药材主要药用有效成分为生物碱类 &&’ !已
发现的贝母生物碱绝大部分属于甾体类型!其中多为
异甾衍生物 &A’ % 这类生物碱在结构上无共轭双键!很
难直接用高效液相色谱 @紫外检测器 "]VBI*aO#法
测定!而用柱前衍生化的间接 ]VBI*aO法!则会增加
样品预处理时间!对结果稳定性造成不利影响!同时!
衍生化试剂价格昂贵 &$#’ !不利于大规模检测应用%
]VBI*/B?-"蒸发光散射检测器# 分析贝母生物碱是
一种优良的检测方法!已经用于多种贝母属植物的检
测 &$$ @$"’ !但对瓦布贝母有效成分的检测!报道不多!仅
有学者曾采用 ]VBI*/B?-对瓦布贝母的单种或两种
生物碱进行了检测 &$( @$%’ % 本文采用 ]VBI*/B?-色谱
法!建立了一种快速(准确(简便并能同时对瓦布贝母
( 种生物碱进行含量检测的方法!旨在为人工栽培瓦
布贝母的质量控制和评价提供参考%
!"材料和方法
!#!"仪器"试剂"对照品与样品
$Q$Q$!仪器!B@"$(# 高效液相色谱仪!购自日本日
立 "]CF,I]C#株式会社!检测器为 ,3[9;U "###/?
/B?-*可移动小型空气压缩机!购自日本东芝公司*
E"### 色谱工作站*,5N9F-B@%#+台式离心机!购自
%.&$
!$# 期 ]VBI*/B?-法同时检测瓦布贝母三种生物碱的含量
上海安亭科学仪器厂*]VF型超声波清洗器!购自上
海冠特超声仪器有限公司*?1X3JX27P+V"$$-型电子天
平!购自北京赛多利斯科学仪器有限公司%
$Q$Q"!试剂!乙腈(甲醇为色谱纯"成都市科龙化工
试剂厂#!二乙胺(氯仿(浓氨水为分析纯!纯净水"乐
百氏#%
$Q$Q(!标准物质!西贝母碱 "]VBI% A&R!批号
"#$$#($$#(贝母辛"]VBI%A&R!批号 "#$$#%"$#!均
购自上海源叶生物科技有限公司!贝母素甲"]VBI%
A&R!批号 ?k]"#$"#&"(#购自成都思科华生物技术
有限公司!贝母素乙 "]VBI%AAQAR!批号 $$#.’ @
"#$$$##购于中国药品生物制品检定所%
$Q$Q%!样品!采自四川省茂县松坪沟川贝母规范化
种植基地!为该基地经多年人工驯化后的栽培瓦布贝
母!取其 ( 年生健康鳞茎!当地海拔高度为 ( #%# 0%
并 经 四 川 农 业 大 学 吴 卫 教 授 鉴 定 为 瓦 布 贝 母
&9$./.’&$.& #%.3$&*/+&/& ]P21J9[k8I8 ]P21\1X8
P&3#+%1.1" ?8j8F15L9[?8I8j79# m8-8B27! ?8
d15L9[?8I8IU95’ &$’ %
!#$"色谱条件
F2L9XN25 I$&"%QH ‘$.# 00!. "0#色谱柱!柱温为
室温!流动相$乙腈 @#Q$R二乙胺水 "’#b(# #!流速
$Q# 0B)025 @$*/B?-检测器参数$以压缩空气为载
气!流速 "Q. B)025 @$!漂移管温度 ’.^% 以贝母辛含
量计算理论塔板数不低于 " ###%
!#F"供试品溶液的制备
将采集到的瓦布贝母用自来水清洗干净后置烘箱
中 .#^烘干% 用粉碎机粉碎后过 H# 目筛% 精密称取
瓦布贝母粉末 $QA&("Q#"("Q## L% 置 .# 0B离心管
中!加浓氨水 % 0B浸润 $ U% 精密加入氯仿 @甲醇
"%b$#混合液 %# 0B!称重混匀!%.^超声 $ U!放冷后
称重!补足损失的重量"溶液#!% ### X)025 @$离心 $.
025!取提取液 "# 0B!置蒸发皿蒸干!残渣用甲醇溶
解!定容至 " 0B!#Q%. "0有机滤头过滤备用%
!#K"对照品溶液制备
分别精确称取贝母素乙(贝母素甲(西贝母碱(贝
母辛标准品 HQHH((Q’#($$Q.#($$Q%. 0L!分别定容到
$# 0B容量瓶!再分别精密量取 %Q#(HQ#("Q.("!. 0B
混合得到其 浓度分别为 #Q$’’H( #Q$%&#( #Q$A"#(
#Q$A$# 0L)0B@$的混标溶液% 同时将四种标准品溶
液分别稀释到 #Q((((#Q(’#(#Q(&((#Q(&$ 0L)0B@$的
单标溶液% 经过 #Q%. "0有机滤膜过滤后备用%
!#P"标准曲线测定
将上述混合标准品稀释 . 倍!分别进样 .($#($.
"B*同时将未稀释混标品溶液分别进样 .($#($.("#
"B% 测定不同浓度下的色谱峰面积!考察标准曲线%
!#G"精密度"重复性和系统稳定性试验
取对照品混标溶液进样 $# "B!重复 H 次!考察此
方法的精密度% 然后取瓦布贝母药材对照粉末 . 份!
每份 " L!精密称定% 按 $Q( 项下方法制备供试溶液!
各进样 $# "B!考察此方法的重复性% 取供试品溶液
分别于 #(((H(A($"($. U 进样测定!考察其系统稳定
性% 通过其相对标准偏差 "W?-! X931[2\9P[15:1X:
:9\21[2J5#值是否小于 (R判断考察项目是否达到要
求%
!#]"加样回收率测定
取已知含量的瓦布贝母样品粉末!分 ( 个重量梯
度"#Q&&($Q## 和 $Q"# L#!每梯度重复 " 次取样!精密
称定% 每个样品梯度依次分别加入混标溶液 .Q#(%Q%
和 (Q. 0B"混标溶液中西贝母碱(贝母辛和贝母素乙
浓度分别为 #Q#AH#(#Q#AA.(#Q#&&& 0L)0B@$ #!以确
保药材中所含生物碱与加入生物碱理论值之和在一个
相对稳定的范围内% 将加入对照品溶液样品在 .#^
挥干后按照 $Q( 项下方法制得供试溶液% 进样测定!
考察其加样回收率%
!#W"样品测定
取瓦布贝母粉末 " L!精密称定!重复 ( 次!按 $Q(
项下方法制备供试溶液!按 $Q" 项下色谱条件测试!按
照标准曲线计算瓦布贝母样品内西贝母碱(贝母辛和
贝母素乙含量%
$"结果与讨论
$#!"=>?@IM?7R法适合用于瓦布贝母甾体生物碱
测定
目前!aO检测器作为一种十分常见的检测工具
在质量控制中广泛使用!如张德权等 &$.’就利用其检测
大豆卵磷脂!本实验室候凯等 &$H’和代沙等 &$’’也曾利
用其分别测定过川白芷内源激素和紫苏品系间酚类物
质组成及含量% 但是贝母类药材大部分生物碱为甾体
生物碱!其无共轭双键!无紫外吸收谱!虽然部分贝母
类生物碱具有紫外吸收谱!但是其吸收峰处于紫外波
段边缘!这些都导致用常见的 aO检测器无法完成检
测!而 /B?-检测器是利用光散射作用进行检测!可弥
补 aO检测器的不足% 黄林芳等 &$"’ 曾成功利用
]VBI*/B?-色谱法对川贝母"9?*.$$;"1& -8-J5#不
同加工方法鳞茎中的贝母辛(贝母甲素和贝母乙素 (
种生物碱的含量进行测量% /B?-对于其它无紫外吸
..&$
核!农!学!报 "& 卷
收或吸收很弱的化合物也是很好的检测器!如龙施华
等 &$&’就有效地利用 ]VBI*/B?-色谱法对大豆茎秆可
溶性糖含量进行了检测% 因而建立 ]VBI*/B?-法测
定此类不适宜 ]VBI*aO法测定的化合物就显得很重
要% 利用 ]VBI*/B?-法对目前生物碱含量测定研究
并不充分的瓦布贝母来说!也显得十分重要% 实际上!
本试验确实构建了一种基于 ]VBI*/B?-色谱法适宜
于瓦布贝母多种生物碱同时测定的方法%
注$ $8西贝母碱 "8贝母辛 (8贝母素乙 %8贝母素甲
EJ[9$ $8?2Y920259"8V9202P259(8V92025259%8V920259
图 !"混合对照品溶液#T$和瓦布贝母药材样品#S$的色谱图
4356!"%9)89+,:&2,5+&: ,0+)0)+)18)/-’/2&18)#T$ &1;B@)$%&3"’1#"1" Q&+6C"&#$*%*S-(’-/#S$
$#$"提取方法选择
本试验试图同时检测栽培瓦布贝母四种生物碱
"西贝母碱(贝母辛(贝母素乙和贝母素甲#!但结果未
能从瓦布贝母样品中检测得到贝母素甲色谱峰% 这可
能是由于贝母属药材在浓氨水浸润后!用氯仿 @甲醇
"%$$#混合液提取!在低温超声条件下并不适合提取
贝母素甲!而用 &#^加热回流较好% 这从韩静等 &$A’ (
程显隆等 &"#’ (姜艳等 &"$’ (赵高琼等 &$%’多位学者的研究
中可以看出!他们采用加热回流都提出了贝母素甲%
尽管如此!超声法对其它种类生物碱提取效果明显!尤
其是贝母素乙% 本试验提取瓦布贝母鳞茎贝母素乙的
含量明显高于赵高琼等 &$%’的文献记载!可能就是因为
提取方法的差异%
$#F"系统适应性考察
本试验拟利用 ]VBI*/B?-同时分离四种贝母主
要生物碱"西贝母碱(贝母辛(贝母素乙和贝母素甲#!
初步试验发现贝母素甲(乙拖尾严重!且出峰时间较
长!故加入了 #Q$R的二乙胺!拖尾现象得到改善*将
乙腈比例设定为 ’#R!发现尽管西贝母碱和贝母辛未
能实现基线分离!但是其分离度达到 $Q#!基本满足分
离要求!分离在 "( 025 内完成!提高了分离效率*按照
贝母辛计算!系统的理论塔板数为 % $##%
$#K"标准曲线的绘制
以峰面积的自然对数为纵坐标!标准品含量的自
然对数为横坐标绘制标准曲线!经回归处理!得西贝母
碱(贝母辛(贝母素乙和贝母素甲回归曲线分别是$j
_$Q($’$iK$$Q.%" "$_#QAAA" #!j_$Q(.%’iK
$"Q("’ "$_#QAAA( #! j_$Q%’#"i K$"Q#$& "$_
#QAAA##!j_$Q("&"iK$"Q#&"$_#QAAA"#!其分别在
#Q$A" )(Q&%(#Q$A$ )(Q&"(#Q$’& )(Q.. 和 #Q$%& )
H.&$
!$# 期 ]VBI*/B?-法同时检测瓦布贝母三种生物碱的含量
"QAH "L范围内进样量与峰面积呈现良好的线性关
系% 色谱图见图 $%
$#P"精密性"重复性和稳定性试验
取对照品混标溶液进样 $# "B!重复 H 次!结果西
贝母碱 W?-_"Q#R!贝母辛 W?-_"Q%R!贝母素乙
W?-_"Q.R!贝母素甲 _"QHR% 表明该方法精密性
良好%
重复性检测结果表明本试验未从瓦布贝母粉末中
提取到贝母素甲% 而其他三种主要生物碱稳定性良
好!西贝母碱 W?-_"Q%R!贝母辛 W?-_"QHR!贝母
素乙 W?-_"Q&R%
稳定性试验测定显示!在 $. U 内!西母碱(贝母辛
和贝母素乙的 W?-值分别为 "Q#R("Q#R("Q(R% 这
表明供试品在 $. U 内稳定性良好%
$#G"加样回收率试验
根据加样回收率试验所得相应成分的峰面积!由
标准曲线计算生物碱含量!得西贝母碱(贝母辛和贝母
素乙的平均回收率分别为 A’Q’.R"W?-_$Q#R! % _
H!见表 $#!$##Q%’R"W?-_"QHR! % _H!见表 "#和
AAQ%#R"W?-_$QHR!% _H!见表 (#%
表 !"西贝母碱加样回收率试验#$fG$
%&’()!"V)8,Q)+N 2)/2+)/-(2/,0/3.)3:31)#$fG$
药材重量
FU9e92LU[Jf
;X7:9:X7LTL
样品含量
IJ5[95[PJf
P10Y39PT0L
加入量
,::2[2J5T0L
测得量
Z91P7X9:T0L
回收率
W9;J\9XMTR
平均值
Z915TR
相对标准偏差
W?-TR
#8&’& ’A" #8’(% #8%&# $8$A( A&8"& A’8’. $8#
#8&’A ##& #8’(% #8%&# $8$’’ AH8A$
#8AA( $(( #8&(# #8%"" $8"%$ AA8$%
#8AA( "$$ #8&(# #8%"" $8"#& AH8%&
$8$A# $$( #8AA% #8((H $8(#( A’8A’
$8$A$ ##" #8AA. #8(&H $8(## A’8’#
表 $"贝母辛加样回收率试验#$fG$
%&’()$"V)8,Q)+N 2)/2+)/-(2/,0.)3:3/31)#$fG$
药材重量
FU9e92LU[Jf
;X7:9:X7LTL
样品含量
IJ5[95[PJf
P10Y39PT0L
加入量
,::2[2J5T0L
测得量
Z91P7X9:T0L
回收率
W9;J\9XMTR
平均值
Z915TR
相对标准偏差
W?-TR
#Q&’& ’A" #Q"(& #Q%’& #Q’#& A&QA. $##Q%’ "QH
#Q&’A ##& #Q"(& #Q%’& #Q’$. AAQ&(
#QAA( $(( #Q"HA #Q%"# #Q’"# $#%Q.%
#QAA( "$$ #Q"HA #Q%"# #QH’$ A’Q%#
$Q$A# $$( #Q("" #Q((% #QHH% AAQ’(
$Q$A$ ##" #Q("" #Q(H% #QH’$ $#"Q(.
表 F"贝母素乙加样回收率试验#$fG$
%&’()F"V)8,Q)+N 2)/2+)/-(2/,0.)3:3131)#$fG$
药材重量
FU9e92LU[Jf
;X7:9:X7LTL
样品含量
IJ5[95[PJf
P10Y39PT0L
加入量
,::2[2J5 T0L
测得量
Z91P7X9: T0L
回收率
W9;J\9XMTR
平均值
Z915 TR
相对标准偏差
W?-TR
#Q&’& ’A" #Q$.( #Q%%% #Q.&& A&Q%( AAQ%# $QH
#Q&’A ##& #Q$.( #Q%%% #Q.&$ A’Q"%
#QAA( $(( #Q$’( #Q(A$ #Q.’% $#$Q&#
#QAA( "$$ #Q$’( #Q(A$ #Q.HH $##Q%(
$Q$A# $$( #Q"#& #Q($$ #Q.$’ AAQHA
$Q$A$ ##" #Q"#& #Q($$ #Q.$% A&Q&$
’.&$
核!农!学!报 "& 卷
$#]"供试品的测定
取瓦布贝母粉末 "L!精密称定!重复 ( 次!按 $Q(
项下方法制备供试溶液!按 $Q" 项下色谱条件测试!按
照标准曲线计算瓦布贝母样品内西贝母碱(贝母辛和
贝母素乙含量平均值分别为 #Q#&( .R(#Q#"’ $R和
#Q#$’ %R"表 %#% 其西贝母碱含量高于伊利贝母中
西贝母碱含量较高品种 &""’ % 贝母辛的含量则与同样
于 "#$# 版0中国药典1"一部#收录的川贝母基源种太
白贝母基本一致 &"(’ !该结果也支持了刘晶等 &$(’对瓦
布贝母和太白贝母中贝母辛含量测定结果% 但其贝母
辛的含量低于彭泽贝母"#Q#%& ’R#贝母辛含量 &"%’ %
就贝母素乙而言!其含量与川贝母 " #Q##H ..R )
#Q#$H &AR# &$"’基本一致!低于浙贝母 "#Q#(( %R )
#Q$". %R# &"$’ (彭泽贝母"#Q$## &R )#Q$$$ .R# &".’
和平贝母 "#Q#$H (R )#Q#"H $R# &"H’贝母乙素的含
量% 上述结果表明贝母属不同物种的生物碱含量存在
较大差异!这可能是导致不同贝母类药材疗效存在较
大的差异的主要原因%
本试 验 还 发 现! 瓦 布 贝 母 总 生 物 碱 至 少 为
#Q$"&#R!明显高于川贝母药材其它四种植物鳞茎的
总生物碱含量"川贝母的含量为 #Q#&R!暗紫贝母为
#Q#%R!梭砂贝母为 #Q#’R!甘肃贝母为 #Q#.R# &"’’ %
这与张大永等 &"&’研究结果一致!也在一定程度上说明
表明该方法和测定结果可靠%
表 K"瓦布贝母样品西贝母碱"贝母辛和贝母素乙含量测定结果#$fF$
%&’6K"@,12)12/,0/3.)3:31)’ .)3:3/31)&1;.)3:3131)31B@)$%&3"’1#"1" Q&+6C"&#$*%*S-(’-/#$fF$
检测成分
,513M[9P
瓦布贝母样品生物碱测定含量
IJ5[95[PJf13N13J2:P25 9?#%.3$&*/+&/& \1X8P&3+%1.1+73<7P
样品 $
?10Y39$TR
样品 "
?10Y39"TR
样品 (
?10Y39(TR
平均值
Z915TR
相对标准偏差
W?-TR
西贝母碱 ?2Y920259 #Q#&% & #Q#&" & #Q#&( # #Q#&( . $Q(
贝母辛 V9202P259 #Q#"’ " #Q#"’ . #Q#"H . #Q#"’ $ "Q#
贝母素乙 V92025259 #Q#$H A #Q#$’ ’ #Q#$’ ’ #Q#$’ % "QH
F"结论
本试验建立了利用 ]VBI*/B?-法测定瓦布贝母
( 种主要生物碱"西贝母碱(贝母辛和贝母素乙#含量
的方法!此方法具有测量结果准确!精度高!重复性好!
结果可靠的优点% 并且利用此方法成功测定了栽培品
瓦布贝母鳞茎三种生物碱的含量!结果表明瓦布贝母
与贝母属一些其它物种在上述三种生物碱含量间存在
一定差异!而且瓦布贝母比川贝母药材的其它基源种
的总生物碱含量更高% 在瓦布贝母实际生产种植过程
中!本方法可以为其质量评价和控制提供了新的手段
和参考%
参考文献!
& $ ’!刘震东!王曙!陈心启8关于瓦布贝母的分类等级研究&>’8云南
植物研究! "##A! ($"#"# $ $%. @$&"
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& % ’!唐心曜!岳松健8贝母属)四川植物志 "第七卷# &Z’8四川$ 四
川民族出版社! $AA$
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贝母!栽培瓦布贝母及浙贝母药效学比较&>’8中国实验方剂学
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况&>’8天然产物研究与开发! "##%! $H"%# $ (HH @(’$
& A ’!李飞!颜冬梅!刘红宁!朱卫丰!罗永明!范崔生!杨世林8国产贝
母属植物化学成分的研究进展&>’8世界科学技术$ 中医药现代
化!"##.! ’""# $ "H @($
&$#’!陈娟丽8渐危药用植物平贝母产活性成分内生真菌的研究&-’8
西安$ 西北大学!"##’
&$$’!mU15LV! B2>! mU15LGi! V2]D! mU15Lj]! W715 ]B! d7 >
m8,513MP2PJfU7Y9U9525925 [U9[J[1313N13J2:PfXJ0 9$./.’&$.&
;#4+;+%1.1’8>J7X513Jf]71lUJ5La52\9XP2[MJf
?;295;915: F9;U5J3JLM! "##&! "&"$# $ $$& @$"#
&$"’!黄林芳!陈士林!刘辉!王丽芝!张艺!罗焜8]VBI*/B?-测定不
同加工方法川贝母中 ( 种生物碱&>’8中成药! "##A! ($"$## $
$.H# @$.H%
&$(’!刘晶!王曙!辛贵忠!李会军!李萍8]VBI*/B?-测定太白贝母和
瓦布贝母中贝母辛的含量&>’8中国药学杂志! "#$#! %."$(# $
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研究&>’8新疆中医药! "##.! "("H# $ ’ @A
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碱的含量测定&>’8中药材! "#$$! (%"’# $ $#(% @$#(’
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贝甲素和浙贝乙素&>’8中草药! "##H! (’"%# $ H## @H#"
&"H’!王振月!侯素云!王志林!赵海鹏!唐先明!王宗权8不同产地不同
物候期平贝母的贝母乙素含量研究&>’8中药材! "##H! "A"$$#
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