全 文 ：摇 核 农 学 报摇 圆园员猿袁圆苑渊愿冤院员员员员鄄员员员苑允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员圆鄄员员鄄园愿摇 接受日期院 圆园员猿鄄园猿鄄圆园
基金项目院安徽省高等学校省级自然科学研究项目渊运允圆园员圆在员园缘冤
作者简介院李娟袁女袁助理研究员袁从事植物分子生物学研究遥 耘鄄皂葬蚤造院造躁赃憎藻造糟燥皂藻赃燥噪岳 员圆远援 糟燥皂
通讯作者院王荣富袁男袁教授袁从事生理生态研究遥 耘鄄皂葬蚤造院 则枣憎葬灶早岳 葬澡葬怎援 藻凿怎援 糟灶
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员猿冤园愿鄄员员员员鄄园苑
小麦 云藻杂韵阅基因的克隆与序列分析
李摇 娟员 摇 杨立新圆 摇 郑文寅猿 摇 武立权猿 摇 王荣富员
渊员 安徽农业大学生物技术中心袁安徽 合肥摇 圆猿园园猿远曰圆 安徽农业大学生命科学学院袁
安徽 合肥摇 圆猿园园猿远曰猿 安徽农业大学农学院袁安徽 合肥摇 圆猿园园猿远冤
摘摇 要院超氧化物歧化酶渊泽怎责藻则燥曾蚤凿藻 凿蚤泽皂怎贼葬泽藻袁 杂韵阅冤是一种广泛存在于真核生物中的金属酶类袁在植物
的抗逆性中起到重要的作用遥 本文以小麦烟农 员怨 号为材料袁提取植株叶片总 砸晕粤袁根据 晕悦月陨 公布的
云藻杂韵阅基因序列设计简并引物袁采用 砸栽鄄孕悦砸 和 砸粤悦耘 技术首次获得小麦抗逆基因 云藻杂韵阅渊郧藻灶月葬灶噪院
允载猿怨愿怨苑苑冤的全长 糟阅晕粤序列遥 生物学软件分析表明袁该序列全长为 员圆苑员遭责袁缘鸳哉栽砸 为 员愿苑遭责袁猿鸳哉栽砸 为
源怨园遭责袁开放阅读框长度为 缘怨员 遭责袁编码 员怨苑 个氨基酸袁分子质量为 圆圆郾 愿运阅袁等电点渊孕陨冤为 缘郾 猿愿圆袁经
月造葬泽贼孕和 悦造怎泽贼葬造曾进行比对发现袁小麦 云藻杂韵阅的氨基酸序列与玉米尧水稻等物种具有高的同源性曰同时袁
利用 酝藻早葬缘 软件进行系统谱系分析袁发现小麦 云藻杂韵阅与玉米和水稻的亲缘关系最近遥
关键词院小麦曰云藻杂韵阅曰克隆曰序列分析
摇 摇 超氧化物歧化酶渊泽怎责藻则燥曾蚤凿藻 凿蚤泽皂怎贼葬泽藻袁杂韵阅冤是普
遍存在于生物体内的能清除超氧阴离子自由基的一类
金属酶袁催化超氧负离子转变成为 韵圆 和 匀圆韵圆 咱员暂 遥 按
与酶蛋白结合的金属离子不同袁植物体内的 杂韵阅主要
分为 猿 类院酝灶杂韵阅渊主要位于线粒体中冤尧悦怎 辕 在灶杂韵阅
渊主要位于细胞质和叶绿体中冤和 云藻杂韵阅 渊主要位于
叶绿体中冤遥 在植物体内袁云藻杂韵阅 多为环境诱导表达
型遥 研究表明袁 云藻杂韵阅与植物的抗病性尧抗盐性尧耐脱
水力尧抗热性尧耐寒性尧耐盐性及抗除草剂的能力密切
相关咱圆 原 源暂 遥 这些逆境胁迫因子和一些化学物质都能引
起 云藻杂韵阅 表达量的迅速升高袁从而减少氧胁迫伤
害咱缘 原 愿暂 遥 在 杂韵阅转基因研究中袁云藻杂韵阅 转基因植株较
对照植株表现出更强的抗逆性咱怨暂 遥 云藻杂韵阅 基因作为
植物体内重要的抗逆性基因袁于 造怨苑猿 年首次从大肠杆
菌中分离得到的咱员园暂 袁此后在拟南芥尧大豆尧番茄尧银杏
等植物中也陆续获得 云藻杂韵阅 基因全序列咱员员 原 员猿暂 袁但对
小麦 云藻杂韵阅基因的克隆和研究较少遥 小麦是人类的
主要粮食作物袁其种植面积和产量受到干旱尧盐渍尧冷
害等非生物逆境的极大限制遥 发掘利用抗逆基因资
源袁培育抗逆高产新品种是应对逆境胁迫尧提高小麦生
产水平最经济有效的途径遥 本研究以小麦烟农 员怨 号
为材料袁通过简并引物袁采用 砸栽鄄孕悦砸 和 砸粤悦耘 技术首
次获得小麦 云藻杂韵阅基因 糟阅晕粤 的全长袁并进行序列分
析袁为小麦 云藻杂韵阅基因的相关研究提供一定的分子基
础遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 材料
小麦烟农 员怨 号种子由徽农业大学农学院种子实
验室保存提供遥 砸晕粤 提取试剂盒尧 孕则蚤皂藻 杂藻则蚤责贼 栽酝
砸藻增藻则泽藻 栽则葬灶泽糟则蚤责贼葬泽藻反转录试剂盒尧克隆载体 责酝阅 原
员怨栽 增藻糟贼燥则尧 阅蕴圆园园园 酝葬则噪藻则尧 栽葬择 聚合酶尧大肠杆菌
阅匀缘葬 感受态细胞购自 栽葬运葬砸葬 公司曰 杂酝粤砸栽藻则栽酝
砸粤悦耘 糟阅晕粤 粤皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 运蚤贼 购自 悦造燥灶贼藻糟澡 公司曰
陨孕栽郧尧载鄄早葬造尧氨卞青霉素 渊 粤皂责冤 购自 杂蚤早皂葬 公司曰
哉晕陨匝鄄造园 柱式 阅晕粤胶回收试剂盒尧质粒提取试剂盒购
自 孕则燥皂藻早葬公司曰其余试剂均为国产分析纯遥
员郾 圆摇 方法
员郾 圆郾 员摇 材料的处理和总 砸晕粤 的提取 摇 将小麦烟农
员怨 号种子用 园郾 缘豫氯化汞消毒 圆源澡 后袁播种于铺有滤
纸的培养皿中袁在光照培养箱中培养遥 三叶期时袁取新
员员员员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
鲜嫩叶袁提取总 砸晕粤遥 小麦总 砸晕粤 提取采用 砸晕粤蚤泽燥
孕造怎泽试剂盒袁具体操作参照说明书进行遥
员郾 圆郾 圆 摇 砸栽鄄孕悦砸 扩增 糟阅晕粤 特异片段 摇 取 圆滋早 总
砸晕粤反转录袁用 砸葬灶凿燥皂远 为反转录引物袁按照 栽葬运葬砸葬
公司 孕则蚤皂藻杂藻则蚤责贼 栽酝 砸藻增藻则泽藻 栽则葬灶泽藻则蚤责贼葬泽藻 说明书进行
操作袁反转录合成 糟阅晕粤遥 以 糟阅晕粤 第一链作为 孕悦砸
模板袁从 郧藻灶月葬灶噪上查找已登录植物 云藻杂韵阅酶的氨基
酸序列袁用 阅晕粤杂贼葬则软件进行比对分析袁依据该基因的
保守区设计简并引物 云粤 和 砸粤渊表 员冤袁进行 孕悦砸 反
应遥 扩增程序为 怨源益预变性 猿皂蚤灶袁怨源益变性 猿园泽袁缘缘益
退火 猿园泽袁苑圆益延伸 员皂蚤灶袁共 猿园 个循环袁再 苑圆益下延伸
员园皂蚤灶遥 扩增产物通过 员郾 圆豫琼脂糖电泳检测是否有
特异性条带生成袁 凝胶电泳回收纯化 孕悦砸 产物袁 将该
片段连接到 责酝阅 原 员怨栽 载体上袁 转化大肠杆菌 阅匀缘葬
感受态细胞袁通过蓝白斑筛选试验和菌液 孕悦砸筛选阳
性克隆袁并对阳性克隆进行序列测定和分析遥
表 员摇 小麦 云藻杂韵阅基因 糟阅晕粤克隆和表达分析所用引物
栽葬遭造藻 员摇 孕则蚤皂藻则泽 怎泽藻凿 枣燥则 云藻杂韵阅 糟阅晕粤 糟造燥灶蚤灶早 葬灶凿 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 葬灶葬造赠泽蚤泽 蚤灶 贼澡蚤泽 则藻泽藻葬则糟澡
引物名称
孕则蚤皂藻则 灶葬皂藻
编号
杂藻则蚤葬造 晕燥援 引物序列 孕则蚤皂藻则 泽藻择怎藻灶糟藻渊缘忆 原 猿忆冤
简并引物
阅藻早藻灶藻则葬贼藻凿 责则蚤皂藻则泽
云粤 渊 正向 云燥则憎葬则凿 责则蚤皂藻则冤
砸粤 渊 反向 砸藻增藻则泽藻 责则蚤皂藻则冤
悦粤再栽郧郧郧郧晕粤粤砸悦粤再悦粤
郧悦砸栽郧再栽悦悦悦粤晕粤悦砸栽悦
猿忆砸粤悦耘 基因特异引物
猿忆砸粤悦耘 早藻灶藻 泽责藻糟蚤枣蚤糟 责则蚤皂藻则
云孕 渊 正向 云燥则憎葬则凿 责则蚤皂藻则冤 粤悦悦悦郧粤粤粤栽郧悦栽粤栽悦粤粤悦悦悦粤悦栽栽郧悦
缘忆砸粤悦耘 基因特异引物
缘忆砸粤悦耘 早藻灶藻 泽责藻糟蚤枣蚤糟 责则蚤皂藻则
砸孕渊 反向 砸藻增藻则泽藻 责则蚤皂藻则 冤 栽栽郧栽粤郧郧悦悦栽悦悦栽栽郧粤栽郧粤郧郧栽悦悦栽悦郧
韵砸云 扩增引物
孕则蚤皂藻则泽 燥枣 韵砸云 葬皂责造蚤糟葬贼蚤燥灶
云蕴砸渊 正向 云燥则憎葬则凿 责则蚤皂藻则冤
砸蕴砸渊 反向 砸藻增藻则泽藻 责则蚤皂藻则冤
粤栽郧粤郧悦粤郧郧悦郧郧郧悦郧郧栽郧郧粤郧悦栽郧悦粤
栽悦粤栽郧悦悦粤悦栽郧郧郧粤栽粤郧栽栽郧郧栽栽悦粤
摇 摇 注院 引物中 再代表 悦 辕 栽曰砸代表 粤 辕 郧曰 晕代表 粤 辕 栽 辕 悦 辕 郧
晕燥贼藻院 陨灶 贼澡藻泽藻 责则蚤皂藻则泽袁再 凿藻造藻早葬贼藻泽 悦 辕 栽曰 砸 凿藻造藻早葬贼藻泽 粤 辕 郧曰晕 凿藻造藻早葬贼藻泽 粤 辕 栽 辕 悦 辕 郧
员郾 圆郾 猿摇 糟阅晕粤 的 猿忆 辕 缘忆砸粤悦耘 反应 摇 根据 员郾 圆郾 圆 测序
结果设计特异引物 云孕 和 砸孕渊表 员冤用 悦造燥灶贼藻糟澡 公司
杂酝粤砸栽栽酝 砸粤悦耘 糟阅晕粤 粤皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 运蚤贼 试剂盒扩增
糟阅晕粤的 猿忆末端和 缘忆末端袁 扩增产物与 栽 载体连接并
测序遥
员郾 圆郾 源摇 韵砸云 的验证摇 将保守片段序列与 缘忆砸粤悦耘 序
列尧猿忆砸粤悦耘 序列进行拼接袁获得 云藻杂韵阅 基因的 糟阅晕粤
序列全长遥 以 云蕴砸 辕 砸蕴砸渊表 员冤为引物对袁扩增 云藻杂韵阅
基因的 韵砸云袁测序验证遥
员郾 圆郾 缘摇 云藻杂韵阅基因的序列分析 摇 运用 月造葬泽贼曾 进行比
对袁分析 云藻杂韵阅 基因和其他物种序列相似性遥 用
悦造怎泽贼葬造载软件对 云藻杂韵阅基因所编码的氨基酸与其它物
种的氨基酸序列进进行同源比对遥 利用 酝藻早葬缘 软件
对 云藻杂韵阅 基因所编码的氨基酸与其它物种的氨基酸
序列进行系统谱系分析遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 总 砸晕粤的提取及 砸栽鄄 孕悦砸扩增
利用 砸晕粤蚤泽燥 孕造怎泽 试剂盒提取小麦叶片的总
砸晕粤袁电泳检测表明袁砸晕粤 样品呈现 猿 条带袁分别为
圆愿杂则砸晕粤尧员愿杂则砸晕粤 和 缘杂则砸晕粤袁其中 圆愿杂则砸晕粤 条带的
亮度比 员愿杂则砸晕粤条带要亮渊图 员冤袁表明 砸晕粤样品完整
性好袁降解程度小遥 总 砸晕粤样品通过反转录合成单链
图 员摇 总 砸晕粤的甲醛变性凝胶电泳
云蚤早援 员摇 云燥则皂葬造凿藻澡赠凿藻 早藻造
藻造藻糟贼则燥责澡燥则藻泽蚤泽 燥枣 贼燥贼葬造 砸晕粤
糟阅晕粤袁以 糟阅晕粤 为模板袁云粤尧砸粤 为引物进行 孕悦砸 扩
增袁 扩增产物经 员郾 圆豫 琼脂糖凝胶电泳分析袁在 源圆园遭责
处出现一条特异条带袁 主带明显渊图 圆冤遥 将此片段回
收纯化克隆至 责酝阅 原 员怨栽 载体上并测序袁全长 源圆远遭责遥
序列分析表明院 此片段推导的氨基酸序列与已报道的
圆员员员
摇 愿 期 小麦 云藻杂韵阅基因的克隆与序列分析
其他植物 云藻杂韵阅基因的相应序列的一致性皆在 缘园豫
以上袁扩增得到的片段应为小麦中 云藻杂韵阅 基因的
糟阅晕粤特异片段遥
渊员援 阅晕粤标准分子量袁 圆援 砸栽鄄孕悦砸 扩增产物冤
渊员援 酝葬则噪藻则 圆援 栽澡藻 责则燥凿怎糟贼 燥枣 砸栽鄄孕悦砸冤
图 圆摇 砸栽鄄孕悦砸 扩增产物的电泳检测
云蚤早援 圆 耘造藻糟贼则燥责澡燥则藻泽 蚤泽 燥枣 贼澡藻 责则燥凿怎糟贼 燥枣 砸栽鄄孕悦砸
图 猿摇 砸粤悦耘扩增产物的电泳检测渊酝援 阅晕粤标准分子量 粤援 猿忆砸粤悦耘 月援 缘忆砸粤悦耘 悦援 悦阅杂冤
云蚤早援 猿摇 耘造藻糟贼则燥责澡燥则藻泽 蚤泽 燥枣 贼澡藻 责则燥凿怎糟贼 燥枣 砸粤悦耘渊员援 酝葬则噪藻则 粤援 猿忆砸粤悦耘 月援 缘忆砸粤悦耘 悦援 悦燥凿蚤灶早 泽藻择怎藻灶糟藻冤
圆郾 圆摇 猿忆 辕 缘忆砸粤悦耘和 韵砸云的验证
利用引物对 云孕 辕 哉孕酝 和 砸孕 辕 哉孕酝 分别进行 猿忆
砸粤悦耘和 缘忆砸粤悦耘袁 各扩增出一特异条带袁 测序后分析
表明袁它们分别是小麦 云藻杂韵阅 基因的 猿忆端序列袁长度
员园怨圆遭责渊图 猿 原 粤冤曰小麦 云藻杂韵阅 基因的 缘鸳端序列袁长度
源源园遭责渊图 猿 原 月冤遥 采用 阅晕粤酝粤晕 软件将获得的保守
片段序列尧缘忆端序列尧猿忆端序列进行拼接袁得到长度为
员圆苑员 遭责的小麦 云藻杂韵阅 基因 糟阅晕粤 全长序列袁根据拼
接后的序列设计扩增 云藻杂韵阅 基因完整 韵砸云 的引物
云蕴砸 辕 砸蕴砸袁扩增得到一条 缘怨源 的 阅晕粤 片段渊 图 猿 原
悦冤袁测序表明该片段的序列与拼接序列的 韵砸云 部分
完全一致无碱基突变遥
圆郾 猿摇 小麦 云藻杂韵阅基因 糟阅晕粤全长序列分析
获得的 糟阅晕粤序列全长 员圆苑员遭责袁缘忆哉砸栽 为 员愿苑遭责袁
猿忆哉栽砸 为 源怨园遭责袁开放阅读框长度为 缘怨员遭责遥 经 月造葬泽贼灶
搜索表明袁 此片段在碱基序列和推导的氨基酸序列上
与报道的水稻渊韵则赠扎葬 泽葬贼蚤增葬 陨灶凿蚤糟葬 郧则燥怎责冤尧玉米渊在藻葬
皂葬赠泽冤和短柄草渊月则葬糟澡赠责燥凿蚤怎皂 凿蚤泽贼葬糟澡赠燥灶冤尧欧洲油菜
渊月则葬泽泽蚤糟葬 灶葬责怎泽冤尧拟南芥渊粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 贼澡葬造蚤葬灶葬冤尧龙眼
渊 阅蚤皂燥糟葬则责怎泽 造燥灶早葬灶 冤尧 葡 萄 渊 灾蚤贼蚤泽 增蚤灶蚤枣藻则葬 冤尧 蓖 麻
渊砸蚤糟蚤灶怎泽摇 糟燥皂皂怎灶蚤泽冤尧马玲薯渊杂燥造葬灶怎皂 糟澡葬糟燥藻灶泽藻冤和大
豆渊郧造赠糟蚤灶藻 皂葬曾冤等植物内 云藻杂韵阅 基因 糟阅晕粤 相应序
列有 远缘豫 耀怨园豫的相似性遥 将该序列命名为 栽则蚤贼蚤糟怎皂
葬藻泽贼蚤增怎皂 云藻杂韵阅袁图 源 是其核苷酸序列和推导的氨基酸
序列本序列已提交到 郧藻灶月葬灶噪渊登录号院允载猿怨愿怨苑苑冤遥
圆郾 源摇 小麦 云藻杂韵阅的蛋白序列分析
小麦 云藻杂韵阅 基因编码一个 员怨苑 个氨基酸残基的
多肽序列袁利用 阅晕粤泽贼葬则 软件分析其蛋白质产物的一
级结构袁结果表明袁蛋白质片段产物分子质量为
圆圆郾 愿运阅袁其中强酸性氨基酸渊阅尧耘冤 造愿 个尧强碱性氨基
酸渊运尧砸冤圆苑 个尧极性氨基酸渊晕尧悦尧匝尧杂尧栽尧再冤苑猿 个尧疏
水氨基酸 渊 粤尧 陨尧 蕴尧 云尧宰尧灾冤 源猿 个袁等电点 渊 孕陨冤为
缘郾 猿愿圆遥 运用 月造葬泽贼孕 进行比对发现袁小麦 云藻杂韵阅 的氨
基酸序列与水稻渊韵则赠扎葬 泽葬贼蚤增葬 允葬责燥灶蚤糟葬 郧则燥怎责冤尧玉米
渊在藻葬 皂葬赠泽冤和短柄草渊月则葬糟澡赠责燥凿蚤怎皂 凿蚤泽贼葬糟澡赠燥灶冤具有
很高的同源性袁都在 愿缘豫以上袁与欧洲油菜渊月则葬泽泽蚤糟葬
灶葬责怎泽冤尧 拟南芥 渊 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 贼澡葬造蚤葬灶葬 冤尧 葡萄 渊 灾蚤贼蚤泽
增蚤灶蚤枣藻则葬冤尧马玲薯渊 杂燥造葬灶怎皂 糟澡葬糟燥藻灶泽藻冤和大豆渊郧造赠糟蚤灶藻
皂葬曾冤等的同源性为 远园豫 耀 苑员豫 遥 从氨基酸多序列对
比可以看出袁不同物种 云藻杂韵阅氨基酸序列存在多个高
度保守区域袁结果见图 缘遥 利用 酝藻早葬缘 软件进行系统
谱系分析发现小麦 云藻杂韵阅与短柄草尧玉米和水稻的亲
缘关系较近袁结果见图 远遥
圆郾 缘摇 小麦 云藻杂韵阅蛋白质的三维结构预测
依据同源建模的预测方法袁 应用 杂憎蚤泽泽鄄皂燥凿藻造 构
建的小麦 云藻杂韵阅蛋白高级结构模型渊图 苑冤袁 预测的蛋
白结构模型有 苑 个 琢 原螺旋和 猿 个 茁 原折叠袁含有较
猿员员员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
注院方框中 葬贼早为起始密码子曰方框中 贼早葬为终止密码子曰方框中 贼早早早葬为核苷酸保守的序列曰
宰耘匀粤再再为蛋白质的保守序列曰箭头为 责燥造赠渊粤冤遥
晕燥贼藻院 葬贼早院 杂贼葬则贼 糟燥则凿燥灶曰 贼葬早院 贼藻则皂蚤灶葬贼蚤燥灶曰 贼早早早葬院 栽澡藻 糟燥灶泽藻则增葬贼蚤增藻 泽藻择怎藻灶糟藻 燥枣 灶怎糟造藻燥贼蚤凿藻 泽藻择怎藻灶糟藻曰
宰耘匀粤再再院 栽澡藻 糟燥灶泽藻则增葬贼蚤增藻 泽藻择怎藻灶糟藻 燥枣 葬皂皂燥灶蚤葬 灶怎糟造藻燥贼蚤凿藻曰 粤则则燥憎 澡藻葬凿 蚤灶凿蚤糟葬贼藻凿 责燥造赠 粤 贼葬蚤造援
图 源摇 小麦 云藻杂韵阅基因的核苷酸序列及推测的氨基酸序列
云蚤早援 源摇 晕怎糟造藻燥贼蚤凿藻 泽藻择怎藻灶糟藻 葬灶凿 凿藻凿怎糟藻凿 葬皂蚤灶燥 葬糟蚤凿 泽藻择怎藻灶糟藻 燥枣 云藻杂韵阅 枣则燥皂 栽则蚤贼蚤糟怎皂 葬藻泽贼蚤增怎皂
高程度的 琢 原螺旋袁而 茁 原折叠较少袁这与 云藻杂韵阅蛋白
的一般结构相符合遥
猿摇 讨论
干旱尧高温尧低温尧盐胁迫等逆境严重影响植物生
长袁危及植物生存遥 研究表明袁 在逆境条件下袁 植物
的抗性与植物体内能否维持较高的 杂韵阅 活性水平有
关袁环境胁迫能诱导植物 杂韵阅 基因的表达咱 员源暂 遥 目前袁
许多不同类型的 杂韵阅 基因已被克隆并转化到多种植
物中袁研究结果表明袁杂韵阅 在转基因植物中的过量表
达可以不同程度地提高植物对环境胁迫的抵抗能
力咱 员缘 原 员远暂 遥 云藻杂韵阅一直以来被认为是一种比较原始的
杂韵阅类型袁多见于原核细胞及少数植物细胞中袁呈黄
褐色袁据推测在植物细胞中该酶一般位于叶绿体内遥
云藻杂韵阅的结构较 悦怎 辕 在灶杂韵阅 简单袁每个亚基的活性中
心金属离子袁都是与 员 个水分子和 猿 个组氨酸渊匀蚤泽冤残
基及 员 个天门冬氨酸渊粤泽责冤残基的羧基氧配位袁呈畸
变四方锥构型咱员苑暂 遥 云藻杂韵阅一般为二聚体或四聚体袁每
个亚基含 园郾 缘 耀 员郾 园 个 云藻 原子遥 它们在空间结构上袁
含有较高程度的 葬 原 螺旋袁而 茁 原 折叠较少遥 植物
云藻杂韵阅基因的碱基序列和编码的氨基酸序列具有较
高的保守性袁同类植物 云藻杂韵阅 基因的进化关系较近遥
陈鸿鹏等咱员愿暂经过比对 云藻杂韵阅 完整的 皂砸晕粤 序列袁发
现有 员 个很保守的序列袁即 栽郧郧郧粤曰而蛋白质的保守
序列有 猿 个袁分别是 云晕晕粤尧云郧杂郧宰尧宰耘匀粤再再遥 李琳
玲等咱 圆暂对不同植物的 云藻杂韵阅 氨基酸序列作进化树分
析袁结果显示 云藻杂韵阅 可以被分为三大类袁其中被子植
源员员员
摇 愿 期 小麦 云藻杂韵阅基因的克隆与序列分析
图 缘摇 小麦 云藻杂韵阅的氨基酸序列同源性比较分析
云蚤早援 缘摇 栽则蚤贼蚤糟怎皂 葬藻泽贼蚤增怎皂 云藻杂韵阅 葬皂蚤灶燥 葬糟蚤凿 泽藻择怎藻灶糟藻泽 葬造蚤早灶皂藻灶贼
图 远摇 云藻杂韵阅基因物种间进化树
云蚤早援 远摇 酝燥造藻糟怎造葬则 责澡赠造燥早藻灶蚤糟 贼则藻藻 燥枣 贼澡藻 葬皂蚤灶燥 葬糟蚤凿 泽藻择怎藻灶糟藻泽 燥枣 贼澡藻 责造葬灶贼 云藻杂韵阅 早藻灶藻 枣葬皂蚤造赠
缘员员员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
图 苑摇 小麦 云藻杂韵阅 蛋白三维结构预测图
云蚤早援 苑摇 猿阅 杂贼则怎糟贼怎则藻 责则藻凿蚤糟贼蚤燥灶 燥枣 栽则蚤贼蚤糟怎皂
葬藻泽贼蚤增怎皂 云藻杂韵阅 责则燥贼藻蚤灶
物马铃薯尧拟南芥尧龙眼等为一组袁较低等单核植物衣
藻和杜氏盐藻作为一组袁而银杏尧荚果蕨和海岸松作为
裸子植物分为一组遥 本研究以小麦烟农 员怨 号为材料袁
提取植株叶片总 砸晕粤袁根据 晕悦月陨 公布的 云藻杂韵阅 基因
序列设计简并引物袁采用 砸栽鄄孕悦砸 和 砸粤悦耘 技术获得
小麦抗逆基因 云藻杂韵阅的全长序列袁获得的 糟阅晕粤 序列
全长 员圆苑员遭责袁缘忆哉砸栽为 员愿苑遭责袁猿忆哉栽砸为 源怨园遭责袁开放阅
读框长度为 缘怨员遭责遥 结果表明袁该基因的碱基序列和
编码的氨基酸序列与同为单子叶植物的水稻尧玉米等
植物中的 云藻杂韵阅基因序列具有较高的同源性袁同时具
有该基因的 员 个核苷酸保守序列 栽郧郧郧粤 和 员 个蛋白
质保守序列 宰耘匀粤再再遥 对预测编码的氨基酸序列片
段分析发现袁其 葬 原螺旋结构所占比例远远大于口 茁 原
折叠结构袁符合植物中 云藻杂韵阅的序列结构特征遥
源摇 结论
小麦 云藻杂韵阅基因全长序列的获得在小麦中尚属
首次遥 本文对该基因序列和编码的蛋白序列进行了分
析袁这为继续了解小麦 云藻杂韵阅基因的表达状况提供了
基础资料袁同时也丰富了小麦的抗逆基因资源袁为小麦
的高产稳产提供分子基础遥 下一步的工作是继续深化
该基因的表达及抗性分析的研究遥
参考文献院
咱 员 暂 摇 砸葬遭蚤灶燥憎蚤贼糟澡 匀袁 云则蚤凿燥增蚤糟澡 陨援 杂怎责藻则燥曾蚤凿藻 则葬凿蚤糟葬造泽袁 泽怎责藻则燥曾蚤凿藻
凿蚤泽皂怎贼葬泽藻 葬灶凿 燥曾赠早藻灶 贼燥曾蚤糟蚤贼赠 蚤灶 责造葬灶贼泽 咱 允暂 援 孕澡燥贼燥糟澡藻皂蚤泽贼则赠 葬灶凿
孕澡燥贼燥遭蚤燥造燥早赠袁员怨愿猿袁猿苑渊远冤院远苑怨 原 远怨园
咱 圆 暂摇 李琳玲袁程华袁许锋袁王燕袁常杰袁程水源援银杏铁型超氧化物歧化
酶基因渊郧遭云藻杂韵阅冤的克隆与表达咱 允暂 援 果树学报袁圆园园怨袁圆远渊远冤院
愿源园 原 愿源远
咱 猿 暂摇 杨鸯鸯袁李云袁丁勇袁徐春雷袁张成桂袁刘英袁甘莉援 甘蓝型油菜
悦怎 辕 在灶杂韵阅和 云藻杂韵阅基因的克隆及菌核病菌诱导表达咱 允暂 援作物
学报袁圆园园怨袁猿缘渊员冤院苑员 原 苑愿
咱 源 暂摇 阅藻泽葬蚤噪 运袁 杂蚤增葬噪葬皂蚤 杂援 孕怎则蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 葬灶凿 遭蚤燥糟澡藻皂蚤糟葬造 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤扎葬贼蚤燥灶
燥枣 葬 泽怎责藻则燥曾蚤凿藻 凿蚤泽皂怎贼葬泽藻 枣则燥皂 贼澡藻 泽燥造怎遭造藻 枣则葬糟贼蚤燥灶 燥枣 贼澡藻 糟赠葬灶
遭葬糟贼藻则蚤怎皂 杂责蚤则怎造蚤灶葬鄄责造葬贼藻灶泽蚤泽 咱 允暂 援 宰燥则造凿 允燥怎则灶葬造 燥枣 酝蚤糟则燥遭蚤燥造燥早赠
葬灶凿 月蚤燥贼藻糟澡灶燥造燥早赠袁 圆园园苑袁 圆猿渊员圆冤院 员远远员 原 员远远远
咱 缘 暂摇 粤造泽澡藻则 砸 郧袁 耘则贼怎则噪 晕袁 匀藻葬贼澡 蕴 杂援 砸燥造藻 燥枣 泽怎责藻则燥曾蚤凿藻 凿蚤泽皂怎贼葬泽藻
渊 杂韵阅冤 蚤灶 糟燥灶贼则燥造造蚤灶早 燥曾蚤凿葬贼蚤增藻 泽贼则藻泽泽 蚤灶 责造葬灶贼泽 咱 允 暂 援 允燥怎则灶葬造 燥枣
耘曾责藻则蚤皂藻灶贼葬造 月燥贼葬灶赠袁圆园园圆袁缘猿渊猿苑圆冤院员猿猿员 原 员猿源员
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