全 文 ：核 农 学 报 2011，25(3):0421 ～ 0426
Journal of Nuclear Agricultural Sciences
收稿日期:2010-09-17 接受日期:2010-12-13
基金项目:国家自然科学基金项目(30871523)，江苏省自然科学基金项目(BK2009322)
作者简介:周淼平(1968-)，男，江苏兴化人，研究员，硕士，研究方向为小麦生物技术育种。Tel:025-84390298;E-mail:mpzhou@ hotmail． com
通讯作者:张增艳(1963-)，女，河北保定人，研究员，博士，研究方向为小麦抗病分子生物学。Tel:010-68918781;E-mail:zhangzy@ mail． caas．
net． cn
文章编号:1000-8551(2011)03-0421-06
TaPIMP1 过量表达提高转基因小麦纹枯病抗性的研究
周淼平1 周小青1 张增艳2 董 娜2，3 马鸿翔1 姚金保1
(1. 江苏省农业科学院生物技术所 /江苏省农业生物学重点实验室，江苏 南京 210014;
2. 中国农业科学院作物科学研究所 /农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程 /
农业部作物遗传育种重点开放实验室，北京 100081;3. 河南科技学院，河南 新乡 453003)
摘 要:小麦纹枯病是由禾谷丝核菌和立枯丝核菌引起的世界性土传真菌病害，培育并推广小麦纹枯病
抗病品种是控制该病害最经济和最有效的途径。本研究采用基因枪法将由 Ubiquitin 启动子驱动的
TaPIMP1 基因导入常规小麦品种扬麦 158、扬麦 12 号和 Alondra，获得转 TaPIMP1 基因小麦阳性植株 17
株;对上述转基因小麦 T1 和 T2 代植株进行 PCR 检测，结果表明转入的 TaPIMP1 基因能稳定遗传;对 15
株转基因 T2 代植株叶片中 TaPIMP1 的半定量 RT-PCR 结果显示，14 个植株中的表达量均比相应的对
照有不同程度的提高，表明转入的 TaPIMP1 基因能够在转基因小麦植株中表达;对 PCR 检测阳性的 T2
代转基因植株纹枯病抗性鉴定结果显示，大部分转基因植株由于 TaPIMP1 基因的导入和表达，植株的
纹枯病抗性得到提高。
关键词:小麦;转基因;TaPIMP1;纹枯病
OVER-EXPRESSION OF TaPIMP1 ENHANCED RESISTANCE TO WHEAT
SHARP EYESPOT IN TRANSGENIC WHEAT
ZHOU Miao-ping1 ZHOU Xiao-qing1 ZHANG Zeng-yan2 DONG Na2，3 MA Hong-xiang1 Yao Jin-bao1
(1. Institute of Biotechnology /Provincial Key Laboratory of Agrobiology，Jiangsu Academy of Agricultural Sciences，Nanjing，Jiangsu 210014;
2 ． National Key Science Facility of Crop Gene Resources and Gene Improvement /Key Laboratory of Crop Genetic and Breeding，
Ministry of Agriculture / Institute of Crop Science，Chinese Academy of Agricultural Sciences，Beijing 100081;
3. Henan Institute of Science and Technology，Xinxiang，Henan 453003)
Abstract:Wheat sharp eyespot，mainly caused by Rhizoctonia cerealis Vander hoeven and Rhizoctonia solani Kuhn，is a
soil-borne fungal disease worldwide． Developing and applying disease resistant varieties is the most effective and
economical strategy to control the disease． TaPIMP1 gene controlled by maize Ubiquitin promoter was introduced into
varieties of Yangmai 158，Yangmai 12 and Alondra via particle bombardment method，and 17 of transgenic plants were
obtained． PCR analysis of TaPIMP1 gene in T1 and T2 transgenic plants indicated that the gene could be transferred to
descendant stably． The results of semi-quantitative RT-PCR in 15 T2 transgenic plants showed that TaPIMP1 expression
level of 14 transgenic plants was increased in different extent compared to control． This suggested the gene could be
expressed in the plants of T2 generation． Evaluation of the wheat sharp eyespot resistance evaluation in T2 positive
transgenic plants showed that the resistance to wheat sharp eyespot was enhanced in most transgenic plants due to the
introduction and expression of the TaPIMP1 gene．
Key words:wheat;transformation;TaPIMP1;sharp eyespot
124
核 农 学 报 25 卷
小麦纹枯病(Wheat sharp eyespot)是由禾谷丝核
菌(Rhizoctonia cerealis Vander hoeven)和立枯丝核菌
(Rhizoctonia solani Kuhn)引起的一种重要的世界性土
传真菌病害。20 世纪 80 年代以来，随着施肥水平的
不断提高、耕作制度的改变以及感病品种的大面积推
广，纹枯病已成为我国长江中下游麦区和黄淮麦区的
主要病害。一般病田病株率为 10% ～ 20%，重病田块
可达 60% ～ 80%以上，由此造成的产量损失严重，轻
者减产 5% ～ 10%，重者减产 40%，甚至颗粒无收［1，2］。
目前，我国小麦纹枯病的防治依然以化学防治为主，化
学防治不仅成本高，而且会造成环境污染，同时化学防
治的效果还直接受施药时期、天气等诸多环境因素的
影响。培育并应用抗纹枯病小麦新品种无疑是控制该
病害最经济和最有效的途径。多年的种质材料鉴定研
究也发现，在已经筛选的近千份材料中，没有发现对该
病害免疫的小麦品种 (系)，高抗的材料也较匮
乏［3 ～ 5］。对纹枯病的主要小麦抗源的抗性遗传和抗病
数量性状位点分析结果表明，小麦纹枯病抗性是由主
基因和微效基因共同作用的数量性状，并且存在复杂
的基因互作［6 ～ 9］。由于遗传方式复杂，给常规育种带
来诸多困难，如周期长、预见性差等，直接影响了小麦
纹枯病抗性改良的进度。转基因技术由于周期短、针
对性强等优点，已成为提高作物抗病能力的新手段。
采用这一方法，来自于小麦近缘种中间偃麦草的乙烯
反应因子基因和抗菌肽 Rs-AFP2 等基因已导入小麦，
并获得纹枯病抗性提高的转基因小麦［10，11］。
MYB 是植物中较大的转录因子家族之一。对一
些 MYB 基因功能研究表明，它们主要参与调控植物细
胞周期［12］、器官形态建成［13］、次生代谢［14］、花色素的
合成［15］以及对逆境胁迫反应的应答［16］等，而对 MYB
参与植物抗病反应调控的报道较少［17］。本课题组根
据拟南芥 AtMYB108 基因同源的小麦 EST 序列分离了
小麦 TaPIMP1 基因，发现 TaPIMP1 基因的过量表达
增强了转基因烟草对青枯病的抗性，转录表达分析表
明禾谷丝核菌的侵染可使该基因表达上调，推测该基
因可能参与对小麦纹枯病抗性反应的调控［18］。但
TaPIMP1 基因过量表达能否提高小麦的纹枯病抗性
尚不清楚。
本研究采用基因枪转化法将由 Ubiquitin 启动子
驱动的 TaPIMP1 基因导入小麦品种扬麦 158、扬麦 12
号和 Alondra，对转基因小麦及其后代进行分子鉴定与
纹枯病抗性分析，以探索转基因小麦 TaPIMP1 基因的
遗传稳定性以及该基因表达与纹枯病抗性的关系。
1 材料与方法
1. 1 植物材料及转化质粒
转基因小麦受体品种扬麦 158 和扬麦 12 号由江
苏里下河地区农科所提供，Alondra 为墨西哥引进品
种。受体材料为小麦开花后 12 ～ 14d 的幼胚或继代 3
个月的胚性愈伤。转化质粒为 pACMYB(图 1)，该质
粒含有 Ubiquitin 组成型启动子驱动的 TaPIMP1 基因
以及抗除草剂 L-PPT(L-phosphinothricin)的选择标记
bar 基因。
图 1 质粒 pACMYB
Fig． 1 Plasmid pACMYB
1. 2 小麦的转化及再生植株的获得
转化采用基因枪方法，质粒的包裹、基因枪轰击以
及转基因植株的筛选参照周淼平等［19］略作修改，质粒
DNA 用量为 1μg /枪，金粉用量 125μg /枪，轰击压力
1100psi，轰击距离 8. 5cm。
幼胚与愈伤组织于轰击前 4 ～ 6h 至轰击后 12h 采
用 0. 4mol /L 山梨醇高渗处理，轰击后缓培 4d，转入愈
伤诱导培养基(MS 基本培养基添加 2mg /L 2，4-D)，
21d 后，愈伤组织转入分化培养基(MS 基本培养基添
加 1mg /L KT 和 1mg /L NAA)，分化 42d，愈伤组织的
诱导和分化均采用 3mg /L L-PPT 为选择压，分化的幼
苗转入生根培养基(1 /2MS)，约 21d 后，已经生根 6 ～
8cm 长的再生苗转移到盆钵中用于检测。检测阳性植
株为 T0 代植株，T1 和 T2 代植株均由上代植株通过套
袋自交产生。
224
3 期 TaPIMP1 过量表达提高转基因小麦纹枯病抗性的研究
1. 3 转基因小麦 TaPIMP1 基因的分子检测
取抗 L-PPT 的再生植株叶片采用 CTAB 法抽提
DNA，分别进行 bar 基因和 TaPIMP1 基因 PCR 检测，
bar 基 因 上 游 引 物 ( bar-F ): 5 ’-
CGGTCTGCACCATCGTCAACCACT-3’，下游引物(bar-
R):5’-GAAACCCACGTCATGCCAGTTCCC-3’，扩增片
段预计为 402bp。TaPIMP1 基因检测采用嵌合引物，
上游引物 F1 在 Ubiquitin 启动子中，下游引物 R1 在
TaPIMP1 基 因 中， 上 游 引 物 F1: 5 ’-
GCCCTGCCTTCATACGCTAT-3’，下游引物 R1:5’-
TCCGCCAGTAGTTCTTGACC-3’，预计扩增片段长度为
504bp。PCR 反应总体积为 20μl，含 1 × TaKaRa buffer
(bar 基因)或 1 × TaKaRa GC bufferⅠ(TaPIMP1 基
因)，1. 5mmol /L MgCl2，0. 2mmol /L dNTPS，0. 4mmol /
L bar 基因引物或 TaPIMP1 基因嵌合引物，50ng 模板
DNA，1U TaKaRa Tag 酶。PCR 反应条件:95℃预变性
3min;94℃ 30s，62℃(bar 基因)或 60℃(TaPIMP1 基
因)45s，72℃ 45s，共 35 个循环;最后 72℃延伸 5min。
扩增产物采用 1. 2%琼脂糖凝胶电泳检测分析。
1. 4 转基因小麦 TaPIMP1 基因的表达分析
取 PCR 阳性植株或纹枯病病菌侵染后 0、3、6、9、
12、24 和 48h 的植株叶片置于液氮中碾碎，采用
Promega 公司生产的 AxyPrep RNA 提取试剂盒提取总
RNA，TaKaRa PrimeScriptTM RT-PCR Kit 进行 cDNA 链
的 合 成。 采 用 actin 基 因 (actin-F: 5 ’-
TACTCCCTCACAACAACC-3 ’， actin-R: 5 ’-
GCTCCTGCTCATAATCAA-3’)作为内标基因，使样品
cDNA 模板浓度一致;TaPIMp1 基因的 RT-PCR 分析，
使用 WMP1-F:5’-GGCAACCGCTGGTCCAAGAT-3’，
WMP1-R:5’-CGAGGTGTCAGGGCTCATAGTAC-3’，复
性温度 60℃，PCR 反应体系及扩增产物的观察方法同
转基因植株 PCR 检测。
1. 5 转基因小麦的纹枯病抗性鉴定
纹枯病抗性鉴定采用牙签接种法，于拔节期将带
有纹枯病病菌的牙签嵌入到小麦植株贴近地面的基部
叶鞘，保湿 7d。小麦乳熟期进行纹枯病病害调查，计
算株系平均病情严重度和平均病情指数。病情严重度
调查根据王裕中等［20］方法略作修改:0 级:无病症;1
级:叶鞘有典型病斑，但不侵茎;2 级:病菌侵入茎秆，
病斑宽度环茎不超过茎秆周长的 1 /2;3 级:病斑环茎
宽度在 1 /2 ～ 3 /4 茎秆周长;4 级:病斑环绕茎秆 3 /4
以上或茎秆已软腐;5 级:枯孕穗或枯白穗。
病情指数按以下公式计算:
病情指数 = ［(Σ 各级病株数 × 各级代表值)/
(总株数 × 最高级代表值)］× 100
2 结果与分析
2. 1 转基因小麦植株的获得
采用基因枪法分别转化 Alondra 胚性愈伤组织
186 块，Alondra、扬麦 158 和扬麦 12 号的幼胚 676 个、
1209 个、495 个。轰击后的幼胚或胚性愈伤组织转入
含 3mg /L L-PPT 的愈伤组织诱导筛选培养基中，幼胚
都能诱导出愈伤组织，胚性愈伤碎片也能正常增殖，表
明该浓度 L-PPT 对愈伤组织的诱导和增殖没有明显的
影响。诱导 21d 的愈伤转到植株筛选再生培养基，14d
后有绿芽点出现，转化的愈伤组织与未转化的愈伤组
织分化形成绿芽点的频率差别不大，但含绿芽点的愈
伤组织转入新鲜的含 L-PPT 筛选再生培养基，未转化
的对照愈伤组织分化的绿芽点伸长受到明显抑制，分
化的芽尖逐渐失绿发黄，随着时间的推移，愈伤组织也
开始变黄并逐渐死亡;转化的愈伤组织变化趋势大多
与未转化的对照相似，少部分绿芽点可以分化出幼苗。
如表 1 所示，以幼胚为转化受体的 Alondra、扬麦 158
和扬麦 12 号分别获得 33、140 和 15 株抗 L-PPT 的再
生植株，轰击的 Alondra 胚性愈伤组织也分化出 8 株抗
性苗。
2. 2 转基因小麦的分子检测
对筛选培养基分化再生的抗 L-PPT 植株进行 PCR
分析(图 2)。结果表明，大部分再生植株是假阳性植
株，共筛选到含 bar 基因的转基因植株 23 株，平均转
化效率为 0. 9%，其中以胚性愈伤组织为外植体的平
均转化效率为 0. 5%，以幼胚为外植体的平均转化效
率为 0. 9%。对 bar 基因阳性的植株采用嵌合引物扩
增 TaPIMP1 基因，发现部分转基因植株只含有 bar 基
因，TaPIMP1 基因已不完整或缺失，共筛选到含
TaPIMP1 基因的转基因植株 17 株，其中转 TaPIMP1
基因 Alondra 6 株，转 TaPIMP1 基因扬麦 158 有 9 株，
转 TaPIMP1 基因扬麦 12 号 2 株。对上述转基因小麦
T1 和 T2 代部分转基因植株进行 PCR 检测，表明
TaPIMP1 基因能遗传给下一代。
2. 3 转基因小麦 TaPIMP1 基因的表达分析
分别随机选取以 Alondra 和扬麦 158 为受体的、
PCR 检测阳性的转基因 T2 代植株叶片，提取 RNA，利
用 RT-PCR 分析这些转基因小麦植株中 TaPIMP1 基
因表达量。结果如图 3 所示，对照 Alondra 和扬麦 158
显示内源 TaPIMP1 基因的表达量，转基因植株中的表
达量为所转基因和内源基因表达量之和，除转基因小
324
核 农 学 报 25 卷
麦植株 B64 － 9 － 9 中 TaPIMP1 基因的表达量较受体
小麦对照扬麦 158 的稍有降低，其余 14 个转基因小麦
植株中 TaPIMP1 基因表达量均比受体小麦对照有不
同程度提高，其中 B125 － 7 － 17、B64 － 9 － 11、B64 － 9
－ 15、B208 － 5 － 5 和 B208 － 5 － 14 等中 TaPIMP1 的
表达量提高了 1 倍。这些结果说明，转入的 TaPIMP1
基因能够在转基因小麦植株中表达，致使这些转基因
植株中 TaPIMP1 基因表达超量。
表 1 转基因小麦的获得
Table 1 Regeneration of transgenic wheat
品种
variety
外植体
explant
轰击外植体数
number of explant
transferred
抗 PPT 再生植株数
number of plantlets
with PPT resistance
PCR 检测阳性数
number of positive
plantlets by PCR
TaPIMP1 bar
Alondra 愈伤 callus 186 8 1 1
Alondra 幼胚 immature embryo 676 33 5 5
扬麦 158 Yangmai 158 幼胚 immature embryo 1209 140 9 14
扬麦 12 号 Yangmai 12 幼胚 immature embryo 495 15 2 3
图 2 部分 T0 代转化植株的 bar 基因(A)、TaPIMP1 基因(B)的 PCR 检测
Fig． 2 PCR analysis for bar gene (A)and TaPIMP1 gene (B)in T0 transgenic plants
M:DL2000 Marker;1:质粒 pACMYB;2:扬麦 158;3 ～ 17:抗 PPT 再生植株
M:DL2000 Marker;1:Plasmid pACMYB;2:Yangmai 158;3 ～ 17:Plantlets with PPT resistance
2. 4 病原菌侵染对转基因小麦 TaPIMP1 基因表达的
影响
小麦 TaPIMP1 基因的表达受纹枯病病原菌 R．
cerealis 侵染的诱导，转基因受体对照扬麦 158 在未侵染
时，TaPIMP1 基因表达量较低，侵染后 9h 时，表达达到
高峰，随后表达量逐渐降低;转基因植株 208 在未侵染
时 TaPIMP1 基因量已经很高，但表达高峰也在 9h 出
现，且侵染后 48h，仍能维持较高的表达水平(图 4)。
2. 5 转基因小麦的纹枯病抗性鉴定
对 PCR 检测阳性的转基因小麦 T2 代部分植株进
行纹枯病抗性鉴定。结果表明，大部分转 TaPIMP1 基
因植株的纹枯病抗性得到提高，可能是由于 TaPIMP1
基因导入后表达量提高的缘故。以 Alondra 为受体的
B125 的 T2 代植株的纹枯病病情指数在 20 ～ 40 之间，
对照 Alondra 病情指数为 45. 7;以扬麦 158 为受体的
转 TaPIMP1 基因小麦株系 B64 和 B208 的 T2 代 10 个
植株纹枯病病情指数均小于 30(见表 2)，对照扬麦
158 病情指数为 51. 4。
3 讨论
MYB 虽然是植物中最大的转录因子家族，但迄今
关于与抗病相关的 MYB 转录因子的报道并不多。从
烟草中克隆的由 TMV 侵染诱导表达的 myb1 基因参与
过敏反应及系统获得抗性，位于水杨酸调控路径的下
游，调控 PR1 等病程相关蛋白的表达［21］。拟南芥
AtMYB30 是植物过敏反应的正调控因子，AtMYB30 超
量表 达 可 增 加 转 该 基 因 的 烟 草 和 拟 南 芥 对
Pseudomonas syringae 和 Cercospora nicotianae 等病原菌
的抗性［17］。Mengiste 等从拟南芥中克隆的 AtBOS1
(AtMYB108)基因可抑制 Botrytis cinere 等腐生真菌的
生 长［22］。与 AtMYB108 有 一 定 同 源 性 的 小 麦
TaPIMP1 基因的过量表达可增强转基因烟草对青枯
病的抗性［12］。
本研究通过对转 TaPIMP1 基因小麦 3 代材料的
PCR、RT-PCR 分析及纹枯病抗性鉴定，证实 TaPIMP1
的过量表达确实可增强转基因小麦的纹枯病抗性，对
424
3 期 TaPIMP1 过量表达提高转基因小麦纹枯病抗性的研究
图 3 T2 代转基因植株中 TaPIMP1 表达量的半定量 RT-PCR 分析
Fig． 3 Expression of TaPIMP1 in T2 transgenic plants by RT-PCR
1:Alondra;2 ～ 6:Alondra 转基因植株 B125 T2 后代 B125 － 7 － 5，B125 － 7 － 6，B125 － 7 － 15，B125 － 7 － 16，B125 －
7 － 17;7:扬麦 158;8 ～ 12:扬麦 158 转基因植株 B64 T2 后代 B64 － 9 － 6，B64 － 9 － 7，B64 － 9 － 9，B64 － 9 － 11，B64
－ 9 － 15;13:扬麦 158;14 ～ 18:扬麦 158 转基因植株 B208 T2 后代 B208 － 5 － 5，B208 － 5 － 9，B208 － 5 － 12，B208
－ 5 － 14，B208 － 5 － 21
1:Alondra;2 ～ 6:T2 plants of B125 derived from Alondra，B125 － 7 － 5，B125 － 7 － 6，B125 － 7 － 15，B125 － 7 － 16，
B125 － 7 － 17;7:Yangmai 158;8 ～ 12:T2 plants of B64 derived from Yangmai 158，B64 － 9 － 6，B64 － 9 － 7，B64 － 9 －
9，B64 － 9 － 11，B64 － 9 － 15;13:Yangmai 158;14 ～ 18:T2 plants of B208 derived from Yangmai 158，B208 － 5 － 5，
B208 － 5 － 9，B208 － 5 － 12，B208 － 5 － 14，B208 － 5 － 21
图 4 纹枯病病原菌侵染对 TaPIMP1 基因表达的影响
Fig． 4 Effect of Rhizoctonia cerealis infection on expression of TaPIMP1
1 ～ 7:扬麦 158，病原菌侵染 0，3，6，9，12，24，48h;8 ～ 14:208 转基因植株，病原菌侵染 0，3，6，9，12，24，48h
1 ～ 7:Yangmai 158，0，3，6，9，12，24，48h after inoculation;8 ～ 14:208 transgenic plant，
0，3，6，9，12，24，48h after inoculation
T2 代 PCR 阳性转基因植株的纹枯病抗性鉴定结果表
明，大部分转 TaPIMP1 基因植株的纹枯病病情指数比
相应的未转基因对照降低，最高降低 61. 1%。如以扬
麦 158 为受体的转 TaPIMP1 基因小麦株系 B64 和
B208 的 T2 代植株 B64 － 9 － 6、B64 － 9 － 9、B64 － 9 －
11、B208 － 5 － 5 和 B208 － 5 － 29 等的纹枯病病情指数
只有 20，有望从中筛选出纹枯病抗性较好的品系。由
于它们的受体亲本是适应性广且大面积种植的小麦品
种扬麦 158，一旦获得抗病稳定的小麦新品系(种)，则
有利于这些纹枯病抗性材料在生产上发挥作用。
路妍等研究发现转 Rs-AFP2 基因的转基因小麦中
Rs-AFP2 表达量高低与其抗性程度成正比［11］。本研
究结果表明，转基因植株 TaPIMP1 基因表达量的高低
与其纹枯病抗性不完全成正比关系，这可能与所转的
目的 基 因 有 关 系。 Rs-AFP2 是 防 卫 反 应 的 下 游
基因，其表达的产物直接作用于病原菌，而TaPIMP1
524
Journal of Nuclear Agricultural Sciences
2011，25(3):0421 ～ 0426
表 2 T2 代部分转基因植株的纹枯病抗性鉴定
Table 2 Evaluation of resistance to wheat sharp eyespot in T2 plants
株系
line
平均病级
average disease grade
病情指数
disease index
株系
line
平均病级
average disease grade
病情指数
disease index
B125 － 7 － 1
B125 － 7 － 5
B125 － 7 － 6
B125 － 7 － 15
B125 － 7 － 16
B125 － 7 － 17
B125 － 7 － 21
B125 － 7 － 25
Alondra
B64 － 9 － 1
B64 － 9 － 6
B64 － 9 － 7
B64 － 9 － 9
1. 5
1. 5
1. 7
2. 0
2. 0
1. 5
1. 8
1. 0
2. 3
1. 3
1. 0
1. 5
1. 0
30. 0
30. 0
33. 3
40. 0
40. 0
30. 0
36. 0
20. 0
45. 7
25. 0
20. 0
30. 0
20. 0
B64 － 9 － 11
B64 － 9 － 12
B64 － 9 － 15
B64 － 9 － 21
B208 － 5 － 5
B208 － 5 － 6
B208 － 5 － 9
B208 － 5 － 17
B208 － 5 － 18
B208 － 5 － 20
B208 － 5 － 21
B208 － 5 － 29
扬麦 158
Yangmai 158
1. 0
1. 3
1. 5
1. 3
1. 0
1. 8
2. 0
1. 5
1. 3
1. 3
2. 0
1. 0
2. 6
20. 0
25. 0
30. 0
26. 7
20. 0
35. 0
40. 0
30. 0
26. 7
26. 7
40. 0
20. 0
51. 4
基因是转录因子，植株体内维持一定的表达量足以调
控下游抗病基因的表达，过高的表达量并不一定诱导
下游基因的大量表达。另外，本研究使用的 RT-PCR
分析方法与引物是否也会影响对 TaPIMP1 基因表达
量分析的准确性也有待今后进一步研究验证。本研究
虽然证实 TaPIMP1 基因过量表达可提高转基因小麦
的纹枯病抗性，但其作用机理还不清楚，有待今后研究
予以阐明。
参考文献:
［1］ 姚金保，姚国才，杨学明，钱存鸣 ．中国小麦抗纹枯病育种研究进
展［J］．江苏农业学报，2007，23(3):248 － 251
［2］ 张会云，陈荣振，冯国华，刘东涛，王 静，王晓军，楼辰军，张 凤 ．
中国小麦纹枯病的研究现状与展望［J］．麦类作物学报，2007，27
(6):115O － 1153
［3］ 史建荣，王裕中，陈怀谷，沈素文 ．小麦纹枯病品种抗性鉴定技术
及抗病资源的筛选与分析［J］． 植物保护学报，2000，27(2):107
－ 112
［4］ 杨立军，杨小军，喻大昭，王绍南 ． 小麦品种(系)对纹枯病抗性
鉴定及抗病资源的筛选［J］．植物保护，2001，27(2):4 － 7
［5］ 万映秀，王文相，张平治，曹文昕，赵 莉 ． 小麦纹枯病抗性鉴定技
术及抗性资源筛选［J］．中国农学通报，2009，25(7):223 － 226
［6］ 张小村，李斯深，赵新华，李瑞军 ． 15 个小麦重组自交系群体抗
纹枯病性的遗传分析［J］． 麦类作物学报，2004，24(3):13 － 16
［7］ 汤 颋，任丽娟，蔡士宾，吴纪中，陆维忠，陈建民，马鸿翔 ． 小麦
ARz 抗纹枯病的 QTL 定位研究［J］． 麦类作物学报，2004，24
(4):11 － 16
［8］ 吴纪中，颜 伟，蔡士宾，任丽娟，汤 颋 ． 小麦纹枯病抗性的主基
因 +多基因遗传分析［J］． 江苏农业学报，2005，21(1):6 － 11
［9］ 任丽娟，张 旭，周淼平，陆维忠，马鸿翔 ． 小麦抗纹枯病和赤霉病
QTL 定位研究［J］． 麦类作物学报，2007，27(3):416 － 420
［10］ Chen L，Zhang Z Y，Liang H X，Liu H X，Du L P，Xu H J，Xin Z
Y． Overexpression of TiERF1 enhances resistance to sharp eyespot in
transgenic wheat［J］． Journal Experimental Botany，2008，59:4195
－ 4204
［11］ 路 妍，张增艳，任丽娟，刘宝业，廖 勇，徐惠君，杜丽璞，马鸿翔，
任正隆，井金学，辛志勇 ． 转 Rs-AFP2 基因小麦的分子分析及其
纹枯病抗性［J］． 作物学报，2009，35(4):640 － 646
［12］ Berckmans B，Veylder L D． Transcriptional control of the cell cycle．
Current Opinion in Plant Biology［J］． 2009，12:599 － 605
［13］ Zhong R，Ye Z H． Regulation of cell wall biosynthesis． Current
Opinion in Plant Biology［J］，2007，10:564 － 572
［14］ Endt D V，Kijne J W，Memelink J． Transcription factors controlling
plant secondary metabolism: what regulates the regulators［J］．
Phytochemistry，2002，61:107 － 114
［15］ Allan A C，Hellens R P，Laing W A． MYB transcription factors that
colour our fruit［J］． Trends in Plant Science，2008，13(3):99 －
102
［16］ 刘 蕾，杜 海，唐晓凤，吴燕民，黄玉碧，唐益雄 ． MYB 转录因子在
植物抗逆胁迫中的作用及其分子机理［J］． 遗传，2008，30
(10):1265 － 1271
［17］ Vailleau F，Daniel X，Tronchet M，Montillet J L，Triantaphylides
C，Roby D． A R2R3-MYB gene，AtMYB30，acts as a positive
regulator of the hypersensitive cell death program in plants in
response to pathogen attack［J］． Proceeding of the National Academy
of Sciences，2002，99(15):10179 － 10184
［18］ 周贤尧，董 娜，刘红霞，张怀渝，张增艳 ． 小麦 TaPIMP1 基因的
克隆及其转基因烟草的抗病性分析［J］． 作物学报，2010，36
(6):911 － 917
(下转第 442 页)
624
Journal of Nuclear Agricultural Sciences
2011，25(3):0436 ～ 0442
胀期间耐低温性种质筛选的指标，鉴定出耐低温种质
A4。相关分析结果表明，耐低温性与亚油酸含量呈显
著正相关，与油酸含量呈显著负相关，与脂肪含量显著
正相关，但与蛋白质、棕榈酸、蔗糖含量和百仁重的相
关性均不显著。
参考文献:
［1］ 禹山林 ．中国花生品种及其系谱［M］． 上海:上海科学技术出版
社，2008，12:1
［2］ 万书波 ． 中国花生栽培学［M］． 上海:上海科学技术出版社，
2003，12:20 － 21
［3］ 史普想，王铭伦，于洪波，潘德成，吴占鹏，王慧新 ．不同成熟度花
生种子萌动期低温对苗期生长发育的影响［J］．作物杂志，2009，
1:78 － 81
［4］ 封海胜 ．花生种子吸胀期间耐低温性鉴定［J］． 中国油料，1991，
1:67 － 70
［5］ 王晶珊，封海胜，栾文琪 ． 低温对花生出苗的影响及耐低温种质
的筛选［J］．中国油料，1985，3:28 － 32
［6］ Wang C T，Yu S L，Zhang S W，Wang X Z，Tang Y Y，Zhang J C，
Chen D X． Novel protocol to identify true hybrids in normal oleate x
high oleate crosses in peanut ［ J］． Electronic Journal of
Biotechnology，2010，13(5):1 － 7
［7］ 韦善君，孙振元，巨关升，韩 蕾，余龙江 ． 冷诱导基因转录因子
CBF1 的组成型表达对植物的抗寒性及生长发育的影响［J］． 核
农学报，2005，19 (6):465 － 468
［8］ 廖泳祥，黄 静，高 梅，李 东，薛晶晶，张红宇，徐培洲，吴先
军 ．水稻制种中杂交种子穗发芽生理特性研究［J］． 核农学报，
2009，23(5):864 － 867
［9］ Jungman B S． The effect of fatty acid profiles on peanut seed
germination at low soil temperatures［D］． Texas Tech University，
2000
［10］ 李育军，赵玉田，常汝镇，梁博文，孙建英 ． 大豆萌发期对 6℃低
温的反应［J］． 大豆科学，1990，9(2):136 － 144
［11］ 龚顺良，周玉萍 ．高寒山区海拔高度对不同生态类型玉米籽粒营
养成分的影响［J］． 贵州农业科学，2005，33(6):35 － 37
［12］ 张建军，闫世江，王 浩，司龙亭，马志国，杨佳明 ．黄瓜种子脂肪
酸含量与耐低温性关系的研究［J］． 安徽农业科学，2008，36
(12):4859 － 4861
(责任编辑 王媛媛
櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀櫀
)
(上接第 426 页)
［19］ 周淼平，沈晓蓉，章静娟，黄益洪，任丽娟，陆维忠 ． 小麦基因枪
法转化技术的改进［J］． 江苏农业学报，1999，15(1):62 － 64
［20］ 王裕中，吴志凤，史建荣，陈怀谷，邵伯坤 ． 小麦纹枯病流行规
律研究［J］． 江苏农业科学，1993，(麦类纹枯病专辑):48 － 53
［21］ Yang Y，Klessig D F． Isolation and characterization of a tobacco
mosaic virus-inducible myb oncogene homolog from tobacco［J］．
Proceeding of the National Academy of Sciences，1996，93:14972
－ 14977
［22］ Mengiste T，Chen X， Salmeron J，Dietrich R． The BOTRYTIS
SUSCEPTIBLE1 Gene Encodes an R2R3MYB Transcription Factor
Protein That Is Required for Biotic and Abiotic Stress Responses in
Arabidopsis［J］． The Plant Cell，2003，15:2551 － 2565
(责任编辑 王媛媛)
244