全 文 ：文章编号 :100028551 (2009) 052789205
E. coli 谷氨酸脱羧酶高产菌株选育及发酵条件研究
左　斌1 　刘唐兴2 　丰　来1 　谭显胜3 　孟桂元4
(1. 湖南农业大学生物科技学院 ,湖南 长沙　410128 ; 2. 湖南生物机电职业技术学院 ,湖南 长沙　410127 ;
3. 湖南农业大学生物安全科学技术学院 ,湖南 长沙　410128 ; 4. 湖南农业大学农学院 ,湖南 长沙　410128)
摘 　要 :以普通大肠杆菌 ( E. coli) 为出发菌株 ,以 L2谷氨酸、溴甲酚绿 (pH318～514) 为筛选及指示剂 ,经
亚硝基胍 (NTG) 、UV 诱变处理 ,得到L2谷氨酸脱羧酶活性变异菌株 ,其L2谷氨酸脱羧酶 ( GAD) 活性大幅
度提高 ,比出发菌株酶活性提高了 2122 倍。优化试验显示 :pH 值、发酵时间、诱导剂 L2谷氨酸、硫酸镁
对 GAD 产酶有较大影响。通过对产酶发酵培养基中几种成分单因素变动及正交优化实验 ,对该菌株产
GAD 的诱导剂L2谷氨酸、营养要求和发酵条件进行了研究 ,优化后的发酵培养基组成为牛肉膏 5 gΠL ,蛋
白胨 10 gΠL ,氯化钠 3 gΠL ,L2谷氨酸 015 gΠL ,葡萄糖 115 gΠL ,磷酸二氢钾 2 gΠL ,硫酸镁 017 gΠL。发酵条
件是 :pH618 ,接种菌龄 20 h ,发酵时间 20 h。在优化条件下突变菌株 GAD 活性可达 679017 U ,是出发菌
株的 2176 倍。
关键词 :大肠杆菌 ;谷氨酸脱羧酶 ( GAD) ;溴甲酚绿 ;高产突变株 ;发酵条件
BREEDING OF HIGH GAD PRODUCING E. coli STRAINS AND OPTIMIZATION OF FERMENTATION CONDITIONS
ZUO Bin1 　LIU Tang2xing2 　FENGLai1 　TAN Xian2sheng3 　MENG Gui2yuan4
(11 College of Bio2Science and Technology , Hunan Agricultural University , Changsha , Hunan 410128 ;
21 Hunan Biological and Electromechanical Polytechnic , Changsha , Hunan 410127 ; 31 College of Bio2safety Science and Technology ,
Hunan Agricultural University , Changsha , Hunan 410128 ; 41 College of Agriculture , Hunan Agriculture University , Changsha , Hunan 410128)
Abstract :By using indicators of bromocresol green and L2glutamate (pH318～514) , a high L2glutamate decarboxylase ( GAD)
producing mutant was screened from gener Escherichia coli by N2methyl2N′2nitro2N2nitrosoguanidine (NTG) and UV. The
enzyme activity of mutation strain was 2122 times more than that of starting strains. The results showed that pH , fermentation
time , L2glutamic acid , glucose , KH2 PO4 and MgSO4 , all had effect on GAD production. The optimum medium and
fermentation conditions were optimized by single factor experiments and orthogonal experiment . The optimum medium was as
follows : beef extract 5 gΠL , peptone 10 gΠL , NaCl 3 gΠL , L2glutamic acid 015 gΠL , glucose 115 gΠL , KH2 PO4 2 gΠL , MgSO4
017 gΠL. The optimum conditions were : temperature 37 ℃, pH 618 , incubation time 20h , the inoculated strain age 20h. The
mutant strain GAD production was 2176 times of starting strains in optimum conditions , GAD activity of mutant strains was up
to 679017U.
Key words : Escherichia coli ;L2glutamate decarboxylase ;bromocresol green ;high production mutant ;fermentation conditions
收稿日期 :2009203217 　接受日期 :2009206208
基金项目 :国家自然科学基金 (30570351) ;教育部新世纪优秀人才计划项目 (NCET20620710)
作者简介 :左　斌 (19652) ,男 ,湖南长沙人 ,博士 ,讲师 ,主要从事酶和发酵工程研究。E2mail :zuobin200451 @1631com　　谷氨酸脱羧酶 ( glutamate decarboxylase , GAD ;EC41111115)是生物体内广泛存在的一种酶 ,分布于从哺乳动物到单细胞有机体的生物中 ,有重要的生理学作用 ,在哺乳动物体内催化 L2谷氨酸的α位脱羧反应 生成重要的抑制性神经递质γ2氨基丁酸 ( GABA) [1 ,2 ] 。GAD有较广泛的应用前景。在医药领域有望作为诊断酶来区分和预测糖尿病并作为诊疗型酶制剂[3 ] ,作为药剂体内注入可预防胰岛炎 IDDM[4 ,5 ]等。在工业生
987　核 农 学 报　2009 ,23 (5) :789～793Journal of Nuclear Agricultural Sciences
产上 ,GAD 是生物转化富集 GABA 的重要生产酶 ,了解
高产酶菌株选育、发酵生产特性具有重要意义。
至今为止 ,细菌中研究最多最深入的就是大肠杆
菌 ( E. coli) GAD ,其获取比较方便 ,在所考查的 GAD 中
最有代表性 ,可被培养基中的谷氨酸诱导生成 ,产量可
达 10 mgΠL [6 ] ,近几年来 , E. coli GAD 的生产已形成产
业 ,然而野生型菌株 GAD 产量活性都比较低 ,对生产
应用形成制约。目前已有通过基因工程方法获得高产
E. coli GAD 的报导 ,但基因工程菌株较难获得 ,后续
技术支持困难 ,因此需要一种新的方法获得高产 GAD
菌株。本试验为此作了有益探索 ,即通过诱变来打破
其正常的调控机制 ,选育变异高产菌株提高产量。其
选育原理为 : GAD 能专一催化L2谷氨酸脱羧 (L2Glu) 生
成 GABA 和 CO2 [10 ] ,高 GAD 活性菌株在在选择培养基
上生长时快速大量累积 GABA ,因 pH 值变化可用溴甲
酚绿作指示剂 ,使高产酶突变菌株菌落异常显色 ,具体
反应过程如下 :
L - Glu
GAD
GABA ↑+ CO2 ↑
试验以 E. coli 为出发菌株 ,经亚硝基胍 (NTG) 、紫
外线 (UV)复合处理 ,以 L2谷氨酸为筛选剂 ,溴甲酚绿
(pH318～514) 为指示剂 ,获得 1 株 GAD 高产突变菌
株 ,通过优化试验对该菌株产 GAD 的特点、营养及发
酵条件进行了研究。
1 　材料与方法
111 　材料
11111 　菌种 　大肠杆菌 ( Escherichia coli) 为湖南农业
大学食品科技学院微生物实验室保存的菌株。
11112 　仪器与试剂 　所用仪器包括超净工作台、30W
紫外光灯、磁力搅拌器、日立 UV 3000 型分光光度计、
恒温水浴锅、THZ C 恒温振荡器、日立 CR22E 型离心
机和雷滋便携式 pH 计。所用试剂包括溴甲酚绿[7 ] 、L2
谷氨酸、亚硝基胍 (NTG)为德国进口 ,其余试剂均为市
售分析纯生化试剂。
11113 　培养基 　种子及平板培养基 :蛋白胨 10 gΠL ,
牛肉浸膏 5 gΠL ,氯化钠 3 gΠL ,水 1000 ml ,pH 616 ;产酶
培养基 :葡萄糖 3 gΠL ,蛋白胨 10 gΠL ,牛肉浸膏 5 gΠL ,
氯化钠 3 gΠL ,磷酸二氢钾 3 gΠL ,硫酸镁 015 gΠL ,L2谷
氨酸 1 gΠL ,水 1000 ml ,pH 616 ; GAD 选择培养基 :种子
培养基 + 溴甲酚绿 + 011 %L2谷氨酸。
112 　培养方法
11211 　GAD 选择培养基的配制 　250 ml 种子培养基
溶化冷却至 45 ℃左右 ,用移液器加入 200μl 溴甲酚
绿 ,以 2 %L2谷氨酸消除颜色 ,倒平板备用。
11212 　诱变菌体培养　将活化 13 h 的菌种接种至装
液量为 150 ml 基础种子培养基三角瓶中 ,接种量 5 % ,
于 37 ℃以 140 rΠmin 恒温培养箱振荡培养。
11213 　突变菌株诱变及筛选鉴定　4000 rΠmin 离心收
集培养了 9 h 的菌体 ,用灭菌生理盐水洗涤 1 次。用
pH 615 的磷酸缓冲液制成 108 个Πml 的菌悬液。经 UV
或NTG诱变处理后的菌悬液涂于平皿 ,每皿 012 ml ,
培养一定时间后统计菌落数 D ,未经诱变的相同菌悬
液样本在相同条件下涂平皿培养 ,统计菌落数 C ,致死
率 R 值的计算为 :R = (C - D)ΠC。
NTG化学诱变 :取菌悬液 5 ml 加入至 15 mm ×150
mm的无菌试管中 ,加入 015 %NTG的稀释液振荡 ,大
量稀释终止诱变作用 ,涂布于选择平板 37 ℃培养 4 d。
UV 诱变 :用磁力搅拌器搅拌菌悬液 ,在紫外光 (30
W ,距离 30 cm)照射处理 20 s ,在红灯下涂布于选择培
养基平皿上 ,用黑布包裹平板 ,于 37 ℃避光培养 4 d。
筛选及鉴定过程[11 ] :化学诱变得到的菌株 UV 复
诱变 ,检出平板上出现的纯绿色菌落发酵收集菌体 ,转
化L2谷氨酸 ,转化液以纸层析鉴定 ,层析液为正丁醇∶
冰醋酸∶蒸馏水 = 4∶1∶3 ,014 %茚三酮显色 ,用 Berthelot
显色法测定表征酶活性的各菌株 OD630 。
113 　分析
菌种接入产酶发酵培养基 ,培养条件同 11212。
11311 　菌体酶活　取 20 ml 发酵菌液以 8000 rΠmin 离
心 5 min ,收集菌体于 100 ml 浓度 2 %L2谷氨酸液中 ,于
37 ℃以 140 rΠmin 振荡转化反应 1h。取 012 ml 转化液
到加有 1 ml 蒸馏水的试管中 ,添加 012 molΠL 硼酸缓冲
液 (pH910) 1 ml ,使酶反应终止。以 Berthelot 显色法[9 ]
测定转化液中的 GABA 浓度。反应体系含 6 % (体积
比)苯酚 2 ml ,有效氯含量 10 % ,次氯酸钠 018 ml ,在
630 nm 测定OD 值。以OD 值变化表征酶活变化 ,酶比
活性定义为在 37 ℃、pH418 时 1 g 湿菌体 1 h 所转化产
生的 GABA 微摩尔数 ,单位为 U ,即 1U = 110μmolΠg·h ,
1OD630 = 30491347U。
11312 　GABA 浓度标准曲线　从图 1 标准曲线可以看
出 ,在 0105～016g 范围内 ,光吸收 (OD630 ) 值与 GABA
浓度吻合较好。
2 　结果与分析
211 　出发菌株的产酶特性
出发大肠杆菌菌株为短杆菌 ,菌落圆形无色 ,略呈
097 核　农　学　报 23 卷
透明状 ,经产酶培养基 37 ℃发酵培养收集菌体测定 ,
OD630为 01714 ,即 GAD 活性为 245519 U。
图 1 　GABA 浓度标准曲线
Fig. 1 　The standard curve of GABA concerntration
212 　UV 及化学诱变致死率
140 rΠmin 震荡发酵培养 9 h 菌株的致死率在 70 %
～85 %时正向突变率较高 ,由图 22a 看出 ,菌株的死亡率
在NTG诱变 30 min 时达 80 % ,UV 诱变 30 s 时达 85 % ,
因此菌体采用 015 %NTG诱变 30 min ,UV 诱变 30 s。
图 2 　诱变剂量与菌体存活的关系
Fig. 2 　The survival rate of Rhodotorula glutinis
treated by NTG and UV
213 　高产 GAD 菌株的筛选
经 NTG及 UV 单独或复合诱变后 ,在选择平板上
检出异常显色菌落 ,发酵培养后离心收集 20 ml 发酵
液中的菌体 ,转化 2 %L2谷氨酸 ,通过纸层析鉴定和
Berthelot 显色法筛选高产菌株。
21311 　产酶能力鉴定 　从选择平板得到多株异常显
色菌落 ,收集菌体震荡转化 L2谷氨酸 1 h ,经 Berthelot
显色法初筛 ,其中 4 株菌株 ( E1、E2、E3、E4) 经转化液
点样层析 ,点样量 20μl。从层析图 (图 3)可以看出 ,检
出菌株均具有与标准 GABA 样品相同的 Rf 值的层析
点 ,即均具有 GAD 活性。
图 3 　突变菌株转化 L2谷氨酸纸层析图
Fig. 3 　Thin layer chromatogram of mutation strain
for L2glutamic acid convertion
标样上点为 GABA ,下点为L2谷氨酸 ; E1、E2、E3、E4 为突变株
The upper spot of saimple was GABA ,the lower spot was L2Glutamic acid ;
E1、E2、E3、E4 were abnormal color strains , respectively
21312 　遗传稳定性菌株的检出 　将筛选出的高产
GAD 菌株进行试管斜面传代 ,在基础发酵培养基中摇
瓶发酵 ,收集菌体测定各菌株每代菌体转化液 OD630
值 ,结果如表 1 所示[12 ] 。表 1 表明 ,E4 菌株 OD630值高
且稳定。
表 1 　突变菌株 E4 的遗传稳定性筛选
Table 1 　The stability of mutation strain E4
代数 generation 2 4 6 8
吸光值 OD630 11528 ±010757 11521 ±010065 11496 ±010780 11518 ±010929
注 : 3 表示 P < 0105。
Note : 3 means P < 0105.
214 　突变菌株 E4 产酶条件的优化
21411 　诱导剂 L2谷氨酸浓度对产酶的影响 　L2谷氨
酸是 GAD 产生的必要条件。在基础产酶培养基的基
础上 ,采用不同 L2谷氨酸浓度配制培养基对突变菌株
进行发酵试验 ,酶活性曲线如图 4 所示。由图 4 可知 ,
代表 GAD 产量的 OD630 随着 L2谷氨酸浓度升高而增
加 ,突变菌株酶活性较高的 L2谷氨酸浓度分别为 015、
110 和 115 gΠL ,但过高的 L2谷氨酸浓度对大肠杆菌突
197　5 期 E. coli 谷氨酸脱羧酶高产菌株选育及发酵条件研究
变株产酶有抑制作用 ,显示培养基 L2谷氨酸浓度对
GAD 诱导有最适范围 ,过高过低都不利于酶的生产。
图 4 　L2谷氨酸及葡萄糖浓度对 GAD 的产量的影响
Fig. 4 　Effect of different L2glutamic acid and glucose
concentration on GAD production
A、B、C、D、E、F :谷氨酸浓度分别为 011、015、110、115、210、215gΠL ,葡
萄糖浓度分别为 110、115、210、215、310、315 gΠL
A ,B , C ,D , E , F : The concentration of glutamate were 011 ,015 ,110 ,115 ,
210 ,215 and glucose were 110 ,115 ,210 ,215 ,310 ,315gΠL respectively
21412 　葡萄糖浓度的选择 　分别以不同浓度葡萄糖
进行产酶试验 ,结果如图 4 所示。随着葡萄糖浓度增
加 ,发酵液 OD630值相应增加 ,突变株酶活性较高的葡
萄糖浓度分别为 115、210、215 gΠL。显示葡萄糖对大肠
杆菌 GAD 产量有较大影响 ,可能的原因是大肠杆菌生
长有优先利用葡萄糖的特点 ,对菌量的初期增长有促
进作用 ,影响菌体谷氨酸脱羧酶产量 ,但过高的浓度葡
萄糖菌体产酶反而呈下降趋势 ,其单因子最佳浓度为
115 gΠL。
21413 　磷酸二氢钾和硫酸镁对产酶的影响 　在产酶
培养基的基础上 ,采用不同浓度的磷酸二氢钾和硫酸
镁进行发酵试验。如图 5 所示 ,磷酸二氢钾、硫酸镁浓
度的差异引起了 OD630值差异 ,在基础发酵培养基中磷
酸二氢钾含量为 2、3 和 4 gΠL 时产酶量较高 ,OD630值分
别为达到 11029、11111 和 11189 ,硫酸镁含量为 013、
015、017 gΠL 时 , OD630 值分别达到 01943、11003 和
11162 ,显示磷酸二氢钾、硫酸镁的这 3 个浓度梯度均
为产酶的较佳浓度。
21414 　4 个因子对产酶影响正交优化试验结果　以单
因素试验结果为依据 ,采用正交 (L9 34 ) 试验分析其中
4 个因子对产酶影响[13 ] 。结果表明 (表 2) ,产酶发酵
培养基中 4 个因子每个组合之间对诱变菌株产酶的影
响差异极显著 ,4 个因子对诱变菌株产酶的影响依次
为L2谷氨酸、葡萄糖、硫酸镁和磷酸二氢钾。组合
A1B1 C1D1 的OD630值最高 ,平均值为 11654 ,但从正交优
化试验结果推测出来的最佳组合为 A1B1 C1D4 , 以
A1B1 C1D4 进行发酵 ,OD630 值为 11762 ,所以 A1B1 C1D4
为摇瓶发酵培养基中 4 个因子的最佳浓度 ,即 L2谷氨
酸 015 gΠL ,葡萄糖 115 gΠL ,磷酸二氢钾 210 gΠL ,硫酸镁
017 gΠL。
图 5 　硫酸镁和磷酸二氢钾浓度
对 GAD 产量的影响
Fig. 5 　Effect of MgSO4 andKH2 PO4 concentration
on GAD production
A、B、C、D、E、F :硫酸镁浓度分别为 1、2、3、4、5、6 gΠL ,磷酸二氢钾浓
度分别为 011、013、015、017、019、110 gΠL
A、B、C、D、E、F : The concentration of MgSO4 were 1 ,2 ,3 ,4 ,5 ,6gΠL and
KH2PO4 were 011 ,013 ,015 ,017 ,019 ,110gΠL respectively
表 2 　4 个因子正交优化( L934 )试验结果
Table 2 　Results and analysis of the orthogonal
experiment (L9 34 ) about four factors
试验号
No.
L2谷氨酸
L2glutamic acid
(gΠL) 葡萄糖glucose(gΠL) 磷酸二氢钾KH2PO4(gΠL) 硫酸镁MgSO4(gΠL) OD630
A B C D
1 1 (015) 1 (115) 1 (210) 1 (013) 11654
2 1 (015) 2 (210) 2 (310) 2 (015) 11337
3 1 (015) 3 (215) 3 (410) 3 (017) 11383
4 2 (110) 1 (115) 2 (310) 3 (017) 11270
5 2 (110) 2 (210) 3 (410) 1 (013) 01856
6 2 (110) 3 (215) 1 (210) 2 (015) 01927
7 3 (115) 1 (115) 3 (410) 2 (015) 01899
8 3 (115) 2 (210) 1 (210) 3 (017) 01886
9 3 (115) 3 (215) 2 (310) 1 (013) 01743
R1 11458 11274 11156 11084
R2 11018 11026 11117 11054
R3 01843 11018 11046 11180
OD630 01651 01256 01110 01126 F = 44103433
注 :33表示差异极显著 ,L 934 表示 4 因素 3 水平 9 处理正交试验。
Note :33 means significant difference , L934 means 4 factors that deal with 3 level
of 9 orthogonal test .
215 　诱变菌株培养条件的优化
21511 　pH 值对突变株 GAD 产酶及菌量的影响 　调
节产酶培养基至不同 pH ,于 37 ℃下以 140 rΠmin 振荡
培养 15h ,测定酶活和菌体量 ,结果如图 6 所示。在
297 核　农　学　报 23 卷
pH610～712 范围内 ,菌株能较好生长 ,产酶能力也较
高 ,产酶量最高时 pH 值为 618 ,因此确定最适合突变
菌株产 GAD 的发酵液 pH在 618 左右。此时酶活性为
OD630 ,湿菌体量为 012333 g。但在 pH610～712 范围
内 ,pH值对发酵液中菌体量的影响并不显著。
图 6 　pH 值对谷氨酸脱羧酶产酶及菌量的影响
Fig. 6 　Effect of pH value on GAD production
and E. coli weight
21512 　突变株接种菌龄对菌株 GAD 产酶及菌量的影
响　菌体在不同生长阶段的机体机能不尽相同 ,相应
菌体的生产能力和产酶能力差别较大。考察了 7～23
h 内 6 个时间点接种菌龄对菌株 GAD 生产能力情况 ,
结果见图 7。由图 7 可知 ,在接种菌龄 20 h 时发酵产
酶能力最高 ,用培养超过 20 h 菌龄的菌株接种 ,发酵
产酶能力降低 ,但收集的诱变株菌体生产量以培养
13 h菌龄的菌株接种为最高 ,诱变菌株产菌量最高的
接种时间和产酶量最高的接种时间不一致。诱变菌株
产酶最佳接种菌龄为 20 h。
图 7 　接种菌龄对菌体量及产酶的影响
Fig. 7 　Effect of incubation age on GAD production
and E. coli weight
21513 　发酵培养时间对 GAD 产酶量及菌量的影响 　
分别将装有培养液量 150 ml 的三角瓶于 37 ℃以
140 rΠmin条件下振动培养不同时间后 ,测定菌体量和
酶活性 ,结果如图 8 所示。由图 8 可见 ,发酵液中菌体
量和酶活性随发酵培养时间推移而增高 ,当菌体培养
至 20 h 时 ,诱变菌株的 OD630 达到 11617 ,菌体量达到
0127 g ,培养时间超过 20 h 进入菌体稳定期后 ,菌体量
虽有增长但产酶能力有所下降 ,可能原因是由于培养基
中各种产物积累过多 ,菌体老化使 GAD 的生成能力下
降。因此诱变菌株的发酵产酶培养时间选择为 20 h。
图 8 　发酵培养时间对菌株产酶的产菌量的影响
Fig. 8 　Effect of fermention time on GAD production
and E. coli weight
3 　结 　论
大肠杆菌 GAD 形成可以通过诱变来打破其正常
的调控机制 ,从而提高 GAD 产量 ,为 GAD 高产提供了
一条简单有效的途径。通过 NTG、UV 复合处理 ,以 L2
谷氨酸为筛选剂、溴甲酚绿 (pH318～514)为指示剂 ,经
纸层析检测鉴定 ,通过 Berthelot 显色法测定表征酶活
性的菌体转化液 OD630值筛选 ,从出发菌株普通大肠杆
菌成功选育出了高产 GAD 菌株。本试验对诱变筛选
方法、菌体产量与酶产量关系、诱导剂 L2谷氨酸、葡萄
糖、钾镁 2 种金属离子对产酶的作用作了较为详细的
研究 ,结果表明 ,菌龄 9 h ,015 %NTG处理 30 min ,UV
处理 35 s ,选择平板上出现整体纯绿色异常菌落。对
产酶发酵培养基中诱导剂L2谷氨酸、葡萄糖、钾镁 2 种
金属离子的单因素变动和正交优化及菌株发酵产酶条
件试验 ,产酶培养基优化组成为 :牛肉浸膏 5 gΠL ,蛋白
胨 10 gΠL ,氯化钠 3 gΠL ,磷酸二氢钾 2 gΠL ,硫酸镁 017
gΠL ,L2谷氨酸 015 gΠL ,葡萄糖 115 gΠL。在培养温度
37 ℃时最佳培养条件是 :pH618 ,培养时间 20 h ,接种菌
龄 20 h。经过多次传代稳定后 ,在产酶发酵培养基条
件下诱变菌株 GAD 酶比活性为 545112 U ,为出发菌株
245519 U 的 2122 倍。在整体优化培养条件下诱变菌
株 OD630值为 11892 ,酶比活性为 679017 U ,为出发菌株
酶产量的 2176 倍。
参考文献 :
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化及部分酶学性质[J ] . 无锡轻工业大学学报 , 2004 , 23 (3) : 81
- 83 (下转第 811 页)
397　5 期 E. coli 谷氨酸脱羧酶高产菌株选育及发酵条件研究
累计示范推广种植面积 1018 万 hm2 ,为该地区的粮食
生产做出了贡献。此外 ,谷子秸秆提供了优质饲草 ,对
发展黄土高原畜牧业有积极作用。
3 　结语
辐射诱变育种技术是一项非常成熟的育种技术 ,
截止 2007 年 ,我国采用辐射诱变技术已在 45 种植物
上育成品种 700 多个 ,超过世界各国诱变育成品种总
数的 1Π4[9 ] 。我们在 20 多年的育种实践中 ,利用60 Coγ
射线辐射诱变育成了高产优质抗病的谷子新品种辐谷
1 号、2 号、3 号、4 号、6 号和辐谷 7 号共 6 个品种 ,均通
过陕西省农作物品种审定委员会审定 ;育成牧草品种
2 个 ,即西辐小冠花和彭阳早熟沙打旺 ,均通过全国牧
草品种审定委员会审定 ;其中 ,谷子品种辐谷 3 号和辐
谷 4 号分别获中国科学院 1990 年、1997 年度科技进步
3 等奖 ;牧草品种西辐小冠花获中国科学院 1993 年度
科技进步 3 等奖。以上成果的取得充分说明了辐射诱
变育种是一种非常有效的育种方法 ,可提高诱变效率 ,
缩短育种周期[10 ,11 ] 。如果辐射与其他技术相结合 ,其
育种效果更佳。
参考文献 :
[ 1 ] 　山西省农业科学院. 中国谷子栽培学[M] . 北京 :中国农业出版
社 , 1987 : 10 - 11
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