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Triterpenic Acids from Spermacoce latifolia

阔叶丰花草的三萜酸类化学成分研究



全 文 :阔叶丰花草(Spermacoce latifolia Aubl.)为茜草
科(Rubiaceae)丰花草属多年生草本植物,原产南美
洲,现广泛分布于热带和亚热带地区。据文献报道,
阔叶丰花草根的汁液可用于治疗疟疾[1–2]。目前,人
们已从丰花草属植物中分离得到了 60 多种化学成
分,包括生物碱类、环烯醚萜类、黄酮类、萜类及酚
酸类,部分化合物具有显著的生物活性[3–5]。但迄今
为止,仅 Kohei 等报道了阔叶丰花草中的 7 个环烯
醚萜苷和 1 个二萜[6]。为了进一步揭示阔叶丰花草
的生物活性化学物质基础,为阔叶丰花草的开发利
用开辟新途径,我们对该植物的化学成分进行了深
入研究,从其醇提物中分离鉴定了 7 个三萜类化合
物。本文报道这些化合物的分离鉴定及其抑菌活性。
1 材料和方法
1.1 材料
阔叶丰花草(Spermacoce latifolia Aubl.)全株于
热带亚热带植物学报 2015, 23(4): 463 ~ 468
Journal of Tropical and Subtropical Botany
收稿日期: 2014–11–17    接受日期: 2014–12–30
基金项目: 国家自然科学基金项目(30970453,31270406); 中国科学院植物资源保护与持续利用重点实验室项目(KSCX2-EW-J-28, Y39000AF03)资助
作者简介: 罗应(1985~ ),男,在读博士研究生,主要研究方向为天然产物化学。E-mail: luoyingps@163.com
* 通信作者 Corresponding author. E-mail: jwtan@scbg.ac.cn
阔叶丰花草的三萜酸类化学成分研究
罗应1,2, 徐巧林3, 董丽梅1,2, 周忠玉1, 谭建文1*
(1. 中国科学院华南植物园,中国科学院植物资源保护与可持续利用重点实验室,广州 510650; 2. 中国科学院大学,北京 100049; 3. 广东省林
业科学研究院,广州 510520)
摘要: 为了解阔叶丰花草(Spermacoce latifolia)的化学成分,从其全株乙醇提取物中分离得到 7 个三萜类化合物,经过波谱分析,
他们的结构鉴定为:熊果酸 (1)、mesembryanthemoidigenic acid (2)、3β,6β-dihydroxy-olean-12-ene-28-oic acid (3)、scutellaric
acid (4)、arjunic acid (5)、29-hydroxyhederagenin (6)和 3β,6β,23-trihydroxy-olean-12-en-28-oic acid (7)。抗菌活性测试结果表明
化合物 1、3、4 和 7 对部分测试菌株具有显著的抑制作用。
关键词: 阔叶丰花草; 化学成分; 三萜; 抗菌活性
doi: 10.11926/j.issn.1005–3395.2015.04.015
Triterpenic Acids from Spermacoce latifolia
LUO Ying1,2, XU Qiao-lin3, DONG Li-mei1,2, ZHOU Zhong-yu1, TAN Jian-wen1*
(1. Key Laboratory of Plant Resources Conservation anbd Sustainable Utilization, South China Botanical Garden, Chinese Academy of Sciences,
Guangzhou 510650, China; 2. University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China; 3. Guangdong Academy of Forestry, Guangzhou
510520, China)
Abstract: In order to understand the chemical constituents of Spermacoce latifolia, seven compounds were
isolated from its whole plant. On the basis of spectral data, they were identified as ursolic acid (1),
mesembryanthemoidigenic acid (2), 3β,6β-dihydroxy-olean-12-ene-28-oic acid (3), scutellaric acid (4), arjunic
acid (5), 29-hydroxyhederagenin (6) and 3β,6β,23-trihydroxy-olean-12-en-28-oic acid (7). Compounds 1, 3, 4 and
7 showed significant inhibitory activity toward parts of the assayed bacterial strains.
Key words: Spermacoce latifolia; Chemical constituent; Triterpenoids; Antibacterial activity
464 第23卷热带亚热带植物学报
2012 年 9 月采自中国科学院华南植物园,经该园邢
福武研究员鉴定为阔叶丰花草(Spermacoce latifolia
Aubl.)。标本存放于中国科学院华南植物园生物有
机化学实验室。
金 黄 色 葡 萄 球 菌(Staphyloccocus aureus)
CMCC26003、 蜡 样 芽 孢 杆 菌(Bacillus cereus)
CMCC63302、枯草芽孢杆菌(B. subtilis) CMCC63501、
大肠杆菌(Escherich coli) CMCC44102、鼠伤寒沙门
氏菌(Salmonella typhimurium) CMCC44102 和痢疾
志贺氏菌(Shigella dysenteriae) CMCC51252 购买于
广州微生物研究所。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)
由中国科学院华南植物园魏孝义研究员课题组提
供。
1.2 仪器
ESI-MS 用 API 2000 LC/MS/MS (美国 Applied
Biosystems 公 司);1H NMR 和 13C NMR 用 Bruker
DRX-500 型超导核磁共振仪测定(瑞士 Bruker 公
司),以四甲基硅烷(TMS)为内标。 减压浓缩系统采
用日本东京理化公司 N-1000 旋转蒸发仪、CCA-
1110 循环式冷却箱和 SB-1000 电热恒温水浴锅;中
压半制备采用上海利穗科技有限公司的 Dr Flash-S
分离纯化系统。柱色谱正相层析硅胶为青岛海洋
化工有限公司产品(80~100 目,200~300 目);反相
层析硅胶 YMC ODS-A (50 μm)为日本 YMC 公司
生产;薄层色谱正相硅胶板(HFGF254)为山东烟台
江友硅胶开发有限公司产品;凝胶 Sephadex LH-20
为瑞典 Amersham Biosciences 公司产品。DMSO、
甲醇为分析纯(天津富宇试剂公司);氘代试剂为
Sigma 公司产品。牛肉膏、蛋白胨、MnSO4 等生化
试剂购自广州海波生物技术有限公司。刃天青和
硫酸卡那霉素均购买于 Sigma 公司。
1.3 提取和分离
干燥的阔叶丰花草全株 15.0 kg,粉碎后于室温
用 95% 乙醇提取,提取液合并后减压浓缩得无醇
浸膏。浸膏加水混悬,依次用石油醚、乙酸乙酯和
正丁醇萃取,得石油醚部分(1.0 kg)、乙酸乙酯部分
(606.4 g)和正丁醇部分(576.2 g)。
石油醚部分经正相硅胶柱层析(200~300 目),
以 石 油 醚-丙 酮(100:0~0:100, V/V)梯 度 洗 脱,经
TLC 薄层层析检测合并主点相同的流分,共得到 9
个组分(E1~E9)。E6 (15.0 g)经 MCI 柱除去色素,得
到甲醇洗脱部分 E6-1。E6-1 (9.0 g)依次通过反相中
压柱层析分离纯化,甲醇 / 水(30:70~100:0)为流动
相梯度洗脱、Sephadex LH-20 凝胶柱以甲醇洗脱
和正相硅胶层析柱(200~300 目)分离纯化,以氯仿-
甲醇(100:1)恒定梯度洗脱,得到化合物 1 (50.0 mg)
和 2 (6.4 mg)。
图 1 化合物 1~7 的结构
Fig. 1 Chemical structures of compounds 1–7
第4期 465
乙 酸 乙 酯 部 分(606.4 g)经 正 相 硅 胶 柱 层 析
(200~300 目),以 氯 仿-甲 醇(100:1~0:100)梯 度 洗
脱,经 TLC 薄层层析检测合并主点相同的流分,得
到 F1~F9 共 9 个组分。F5 (10.0 g)继续经反相中压
柱层析分离纯化,甲醇 / 水(30:70~100:0)为流动
相梯度洗脱,TLC 薄层检测合并主点相同的流分,
得到 6 个亚组分(F5-1~F5-6)。F5-4 (6.0 g)经 Sephadex
LH-20 凝胶柱以甲醇洗脱,再经正相硅胶层析柱
(200~300 目)分 离 纯 化,以 氯 仿-甲 醇(50:1)恒 定
梯度洗脱,得到化合物 3 (12.6 mg)、4 (6.6 mg)、5
(14.0 mg)和 7 (10.0 mg)。F5-5 (1.0 g)经 Sephadex
LH-20 凝胶柱以甲醇洗脱,得到化合物 6 (8.0 mg)。
1.4 结构鉴定
熊果酸 (Ursolic acid,1)   白 色 粉 末;[α]25D
+58.5 (c 0.24, 甲醇); IRKBrmax νcm
–1: 3430 (羟基), 1694
(羰基), 1454 (苯基), 1380 (甲基); ESI-MS m/z: 479
[M + Na]+, 455 [M – H]–, 248 (100), 203 (50), 133
(50), 推测分子式为 C30H48O3;
1H NMR (500 MHz,
C5D5N): δ 5.25 (1H, t, J = 3.5 Hz, H-12), 3.49 (1H, m,
H-3), 2.66 (1H, d, J = 11.4 Hz, H-18), 1.27 (3H, s),
1.26 (3H, s), 1.06 (3H, s), 1.05 (3H, s), 1.03 (3H, d,
J = 6.5 Hz, H-30), 0.98 (3H, d, J = 6.3 Hz, H-29), 0.92
(3H, s); 13C NMR (125 MHz, C5D5N): δ 39.6 (CH2,
C-1), 28.6 (CH2, C-2), 78.7 (CH, C-3), 39.9 (C, C-4),
56.3 (CH, C-5), 19.3 (CH2, C-6), 34.1 (CH2, C-7),
40.5 (C, C-8), 48.6 (CH, C-9), 37.8 (C, C-10), 24.2
(CH2, C-11), 126.2 (CH, C-12), 139.8 (C, C-13), 43.0
(C, C-14), 29.2 (CH2, C-15), 25.4 (CH2, C-16), 48.6
(C, C-17), 54.1 (CH, C-18), 40.0 (CH, C-19), 39.3
(CH, C-20), 31.6 (CH2, C-21), 38.0 (CH2, C-22), 29.3
(CH3, C-23), 16.2 (CH3, C-24), 17.1 (CH3, C-25), 18.0
(CH3, C-26), 24.4 (CH3, C-27), 180.5 (C, C-28), 18.1
(CH3, C-29), 22.0 (CH3, C-30)。光谱数据与文献[7]报
道基本一致,故确定该化合物为熊果酸(ursolic acid)。
Mesembryanthemoidigenic acid (2)   白 色
粉 末;[α]25D +70.5 (c 0.28, 甲 醇); IR
KBr
max νcm
–1: 3425
(羟基), 1695 (羰基), 1450 (苯基), 1385 (甲基); ESI-
MS m/z: 495 [M + Na]+, 471 [M – H]–, 264 (48), 233
(100), 207 (23), 201(46), 推 测 分 子 式 为 C30H48O4;
1H NMR (500 MHz, CD3OD): δ 5.25 (1H, t, J = 3.5 Hz,
H-12), 3.19 (2H, s, H-29), 3.15 (1H, dd, J = 11.4,
4.7 Hz, H-3), 2.88 (1H, dd, J = 13.0, 4.7 Hz, H-18),
1.17 (3H, s), 0.97 (3H, s), 0.94 (3H, s), 0.93 (3H,
s), 0.82 (3H, s), 0.78 (3H, s); 13C NMR (125 MHz,
CD3OD): δ 38.5 (CH2, C-1), 27.6 (CH2, C-2), 79.7
(CH, C-3), 38.9 (C, C-4), 56.7 (CH, C-5), 18.3 (CH2,
C-6), 32.9 (CH2, C-7), 39.8 (C, C-8), 46.5 (CH, C-9),
36.8 (C, C-10), 23.2 (CH2, C-11), 123.7 (CH, C-12),
145.2 (C, C-13), 42.7 (C, C-14), 28.7 (CH2, C-15),
24.0 (CH2, C-16), 47.6 (C, C-17), 40.6 (CH, C-18),
40.3 (CH2, C-19), 35.5 (C, C-20), 29.6 (CH2, C-21),
38.0 (CH2, C-22), 28.3 (CH3, C-23), 16.3 (CH3, C-24),
15.9 (CH3, C-25), 17.7 (CH3, C-26), 25.4 (CH3, C-27),
181.9 (C, C-28), 74.4 (CH2, C-29), 19.5 (CH3, C-30)。
光谱数据与文献[8]报道一致,故确定该化合物为
mesembryanthemoidigenic acid。
3β,6β-Dihydroxy-olean-12-ene-28-oic acid (3)
  白色粉末;[α]25D +52.8 (c 1.0, 甲醇); IR
KBr
max νcm
–1:
3428 (羟基), 1696 (羰基), 1452 (苯基), 1382 (甲基);
ESI-MS m/z: 495 [M + Na]+, 471 [M – H]–, 362 (12),
248 (100), 203 (90), 推 测 分 子 式 为 C30H48O4;
1H
NMR (500 MHz, CD3OD): δ 5.30 (1H, t, J = 3.6 Hz,
H-12), 4.51 (1H, br s, H-6), 3.10 (1H, dd, J = 11.6,
4.1 Hz, H-3), 2.89 (1H, dd, J = 13.7, 4.2 Hz, H-18),
1.32 (3H, s), 1.18 (3H, s), 1.15 (3H, s), 1.11 (3H, s),
1.06 (3H, s), 0.96 (3H, s), 0.93 (3H, s); 13C NMR
(125 MHz, CD3OD): δ 42.0 (CH2, C-1), 28.1 (CH2,
C-2), 80.1 (CH, C-3), 40.1 (C, C-4), 57.1 (CH, C-5),
68.7 (CH, C-6), 41.6 (CH2, C-7), 40.7 (C, C-8), 49.4
(CH, C-9), 37.7 (C, C-10), 24.5 (CH2, C-11), 123.9
(CH, C-12), 144.5 (C, C-13), 43.4 (C, C-14), 28.7
(CH2, C-15), 24.0 (CH2, C-16), 47.7 (C, C-17), 40.6
(CH, C-18), 47.3 (CH2, C-19), 30.5 (C, C-20), 33.6
(CH2, C-21), 32.0 (CH2, C-22), 28.3 (CH3, C-23),
17.6 (CH3, C-24), 17.3 (CH3, C-25), 18.8 (CH3, C-26),
26.4 (CH3, C-27), 181.9 (C, C-28), 23.9 (CH3, C-29),
31.8 (CH3, C-30)。光谱数据与文献[9]报道一致,故
确定该化合物为 3β,6β-dihydroxy-olean-12-ene-28-
oic acid。
Scutellaric acid (4)   白 色 粉 末;[α]25D +35.8
(c 1.0, 甲醇); IRKBrmax νcm
–1: 3400 (羟基), 1690 (羰基),
1450 (苯 基), 1386 (甲 基); ESI-MS m/z: 495 [M +
Na]+, 471 [M – H]–, 248 (100), 233 (10), 203 (89), 133
(10), 推 测 分 子 式 为 C30H48O4;
1H NMR (500 MHz,
CD3OD): δ 5.26 (1H, t, J = 3.6 Hz, H-12), 3.63 (1H, m,
罗应等:阔叶丰花草的三萜酸类化学成分研究
466 第23卷热带亚热带植物学报
H-3), 3.70, 3.44, (each 1H, d, J = 11.0 Hz, H-23), 2.87
(1H, dd, J = 13.8, 4.2 Hz, H-18), 1.15 (3H, s), 1.10
(3H, s), 1.06 (3H, s), 0.93 (3H, s), 0.87 (3H, s), 0.72
(3H, s); 13C NMR (125 MHz, CD3OD): δ 33.2 (CH2,
C-1), 26.1 (CH2, C-2), 73.9 (CH, C-3), 40.6 (C, C-4),
43.5 (CH, C-5), 18.7 (CH2, C-6), 33.6 (CH2, C-7),
39.7 (C, C-8), 49.4 (CH, C-9), 37.7 (C, C-10), 23.5
(CH2, C-11), 122.8 (CH, C-12), 144.5 (C, C-13), 42.4
(C, C-14), 28.7 (CH2, C-15), 24.0 (CH2, C-16), 47.7
(C, C-17), 42.1 (CH, C-18), 46.3 (CH2, C-19), 31.5 (C,
C-20), 34.2 (CH2, C-21), 33.1 (CH2, C-22), 68.3 (CH2,
C-23), 18.6 (CH3, C-24), 15.3 (CH3, C-25), 17.8 (CH3,
C-26), 26.4 (CH3, C-27), 181.7 (C, C-28), 23.9 (CH3,
C-29), 33.8 (CH3, C-30)。光谱数据与文献[10]报道
一致,故确定该化合物为 scutellaric acid。
Arjunic acid (5)   白 色 粉 末;[α]25D +28.8 (c
2.0, 甲 醇); IRKBrmax νcm
–1: 3427 (羟 基), 1695 (羰 基),
1459 (苯基), 1386 (甲基); ESI-MS m/z: 511 [M + Na]+,
487 [M – H]–, 453 (100), 435 (7), 425 (7), 407 (53), 推
测分子式为 C30H48O5;
1H NMR (500 MHz, CD3OD):
δ 5.31 (1H, t, J = 3.6 Hz, H-12), 3.62 (1H, m, H-2),
3.24 (1H, d, J = 3.7 Hz, H-19), 3.05 (1H, d, J = 3.7 Hz,
H-18), 2.90 (1H, d, J = 9.6 Hz, H-3), 1.31 (3H, s), 1.03
(3H, s), 1.00 (3H, s), 0.96 (3H, s), 0.93 (3H, s), 0.84
(3H, s), 0.76 (3H, s); 13C NMR (125 MHz, CD3OD):
δ 48.2 (CH2, C-1), 69.6 (CH, C-2), 84.9 (CH, C-3),
40.6 (C, C-4), 57.0 (CH, C-5), 19.7 (CH2, C-6), 34.0
(CH2, C-7), 40.9 (C, C-8), 49.4 (CH, C-9), 39.7 (C,
C-10), 25.1 (CH2, C-11), 124.8 (CH, C-12), 144.9 (C,
C-13), 42.7 (C, C-14), 29.7 (CH2, C-15), 28.6 (CH2,
C-16), 46.7 (C, C-17), 45.1 (CH, C-18), 82.3 (CH,
C-19), 36.2 (C, C-20), 29.5 (CH2, C-21), 34.1 (CH2,
C-22), 29.3 (CH3, C-23), 17.5 (CH3, C-24), 17.1 (CH3,
C-25), 17.8 (CH3, C-26), 25.4 (CH3, C-27), 181.7 (C,
C-28), 25.2 (CH3, C-29), 28.8 (CH3, C-30)。光谱数
据与文献[11]报道一致,故确定该化合物为 arjunic
acid。
29-Hydroxyhederagenin (6)   白 色 粉 末;
[α]25D +26.0 (c 0.1, 甲 醇); IR
KBr
max νcm
–1: 3410 (羟 基),
1694 (羰基), 1455 (苯基), 1386 (甲基); ESI-MS m/z:
511 [M + Na]+, 487 [M – H]–, 264 (67), 248 (47), 233
(100), 推测分子式为 C30H48O5;
1H NMR (500 MHz,
CD3OD): δ 5.26 (1H, t, J = 3.5 Hz, H-12), 3.60 (1H,
dd, J = 11.9, 4.2 Hz, H-3), 3.53, 3.33, (each 1H, d, J =
11.0 Hz, H-23), 3.19 (2H, s, H-29), 2.88 (1H, dd, J =
13.9, 4.3 Hz, H-18), 1.19 (3H, s), 0.98 (3H, s), 0.93
(3H, s), 0.82 (3H, s), 0.70 (3H, s); 13C NMR (125 MHz,
CD3OD): δ 38.2 (CH2, C-1), 26.1 (CH2, C-2), 75.3
(CH, C-3), 40.6 (C, C-4), 49.5 (CH, C-5), 18.7 (CH2,
C-6), 32.6 (CH2, C-7), 39.7 (C, C-8), 47.4 (CH, C-9),
36.7 (C, C-10), 22.8 (CH2, C-11), 122.8 (CH, C-12),
144.5 (C, C-13), 41.4 (C, C-14), 27.7 (CH2, C-15),
23.2 (CH2, C-16), 47.7 (C, C-17), 40.7 (CH, C-18),
40.7 (CH2, C-19), 35.6 (C, C-20), 28.8 (CH2, C-21),
32.1 (CH2, C-22), 68.3 (CH2, C-23), 11.6 (CH3, C-24),
15.3 (CH3, C-25), 16.8 (CH3, C-26), 25.4 (CH3, C-27),
182.7 (C, C-28), 73.4 (CH2, C-29), 18.8 (CH3, C-30)。
光谱数据与文献[12]报道一致,故确定该化合物为
29-hydroxyhederagenin。
3β,6β,23-Trihydroxy-olean-12-en-28-oic acid
(7)  白色粉末;[α]25D +20.3 (c 1.5, 甲醇); IR
KBr
max νcm
–1:
3440 (羟基), 1695 (羰基), 1450 (苯基), 1386 (甲基);
ESI-MS m/z: 511 [M + Na]+, 487 [M – H]–, 288 (40),
248 (100), 203 (60), 推 测 分 子 式 为 C30H48O5;
1H
NMR (500 MHz, CD3OD): δ 5.29 (1H, t, J = 3.6 Hz,
H-12), 4.39 (1H, br s, H-6), 3.56 (1H, m, H-3), 3.60,
3.47, (each 1H, d, J = 11.0 Hz, H-23), 2.87 (1H, dd, J =
13.7, 3.9 Hz, H-18), 1.33 (3H, s), 1.14 (3H, s), 1.10
(3H, s), 1.06 (3H, s), 0.96 (3H, s), 0.91 (3H, s); 13C
NMR (125 MHz, CD3OD): δ 41.2 (CH2, C-1), 28.1
(CH2, C-2), 73.5 (CH, C-3), 44.0 (C, C-4), 49.5 (CH,
C-5), 68.6 (CH, C-6), 41.0 (CH2, C-7), 39.3 (C, C-8),
48.7 (CH, C-9), 36.9 (C, C-10), 23.7 (CH2, C-11),
122.8 (CH, C-12), 144.5 (C, C-13), 42.4 (C, C-14),
28.7 (CH2, C-15), 24.0 (CH2, C-16), 46.7 (C, C-17),
42.1 (CH, C-18), 46.3 (CH2, C-19), 31.0 (C, C-20),
34.2 (CH2, C-21), 33.1 (CH2, C-22), 66.7 (CH2, C-23),
14.6 (CH3, C-24), 17.5 (CH3, C-25), 18.8 (CH3, C-26),
26.4 (CH3, C-27), 181.9 (C, C-28), 23.7 (CH3, C-29),
33.2 (CH3, C-30)。光谱数据与文献[13]报道一致,
故确定该化合物为 3β,6β,23-trihydroxy-olean-12-en-
28-oic acid。
2 抗菌活性
采用刃天青显色法[14]对化合物 1~7 进行人体
第4期 467
病原菌的最低抑菌浓度(MIC)测定 , 包括金黄色葡
萄球菌、耐药性金黄色葡萄球菌(MRSA)、蜡样芽
孢杆菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏
菌、痢疾志贺氏菌。使用 96 孔板稀释,可以在同
一时间测定不同化合物对不同菌种的 MIC。先将
100 μL 100 μg mL–1 的指示剂溶液(刃天青)放置到
无菌的 96 孔板上的第 11 列板孔里;约 7.5 mL 的
指示剂溶液与 5 mL 的待测菌溶液(106 CFU mL–1)
混合;接着转移 100 μL 到第 1 至第 10 列以及第 12
列所有测试孔中;将 100 μL 待测样品溶液(1 mg mL–1)
加入到第一列板孔中,再从第一列取出 100 μL 溶
液转移到第二列,接下几列用同样的方法(倍增稀
释)到第 10 列,再从第 10 列取出 100 μL 弃掉以保
证每一列孔中的溶液均为 100 μL。最后,将加好样
品的孔板放入到恒温培养箱,于 37℃培养 5~6 h,
直到孔板的颜色变成生长色:粉红色。检测活性标
准:若颜色无变化仍为蓝色表示有活性,颜色从蓝
色变为粉红色,表示无抑菌活性;发生颜色变化的
最低稀释浓度被认为是待测化合物的最低抑菌浓
度(MIC)。在一个 96 孔板,可同时测定 6 个样品以
及 1 个阳性对照和 1 个阴性对照。每个处理重复 3
次,硫酸卡那霉素作为阳性对照。
从表 1 可见,化合物 1 和 7 对 MRSA 有显著的
抑制作用,MIC 值分别为 7.8 μg mL–1 和 31.2 μg mL–1,
而阳性对照硫酸卡那霉素对 MRSA 的 MIC 值为
125 μg mL–1。化合物 1, 3 和 7 对金黄色葡萄球菌
的 MIC 分别为 7.8、3.9 和 15.6 μg mL–1,对蜡样芽
孢杆菌的 MIC 分别为 31.2、15.6 和 15.6 μg mL–1),
对枯草芽孢杆菌的 MIC 均为 31.2 μg mL–1,表明均有
抑制活性。化合物 4 对枯草芽孢杆菌有较好的抑制
作用,MIC 值为 7.8 μg mL–1。此外,化合物 1 还对
痢疾志贺氏菌有抑制活性,MIC 值为 15.6 μg mL–1。
化合物 2、5 和 6 对上述 7 株供试菌没有抑制活性
(MIC>200 μg mL–1)。
表 1 化合物 1~7 对细菌的最低抑菌浓度(μg mL–1)
Table 1 MIC values (μg mL–1) of compounds 1–7 against seven bacterial strains
菌株 Strain
化合物 Compound 硫酸卡那霉素
Kalaycin sulfate1 2 3 4 5 6 7
金黄色葡萄球菌 Staphyloccocus aureus 7.8 >200 31.2 >200 >200 >200 31.2 0.9
MRSA 7.8 >200 >200 >200 >200 >200 31.2 125
蜡样芽孢杆菌 Bacillus cereus 3.9 >200 15.6 >200 >200 >200 31.2 0.9
枯草芽孢杆菌 Bacillus subtilis 15.6 >200 15.6 7.8 >200 >200 31.2 0.9
大肠杆菌 Escherich coli >200 >200 >200 >200 >200 >200 >200 0.9
鼠伤寒沙门氏菌 Salmonella typhimurium >200 >200 >200 >200 >200 >200 >200 0.9
痢疾志贺氏菌 Shigella dysenteriae 15.6 >200 >200 >200 >200 >200 >200 0.9
3 结果和讨论
本研究从阔叶丰花草的乙醇提取物中分离
鉴定出 7 个三萜类化合物,分别为:熊果酸 (1)、
mesembryanthemoidigenic acid (2)、3β,6β-dihydroxy-
olean-12-ene-28-oic acid (3)、 scutellaric acid (4)、
arjunic acid (5)、 29-hydroxyhederagenin (6)和
3β,6β,23-trihydroxy-olean-12-en-28-oic acid (7)。 化
合物 1~7 均为首次从该植物中分离得到。
利用刃天青染色法,我们对化合物 1~7 进行
了体外抗菌活性实验,结果表明,化合物 1 和 7 对
MRSA 的抑制作用显著强于阳性对照硫酸卡那霉
素。化合物 1、3 和 7 对金黄色葡萄球菌、蜡样芽
孢杆菌和枯草芽孢杆菌均有抑制活性,而化合物 4
仅对枯草芽孢杆菌有较好的抑制作用。另外,化合
物 1 对痢疾志贺氏菌也具有抑制活性。
本研究结果表明,阔叶丰花草中含有丰富的三
萜酸类化学成分。活性分析试验进一步揭示,这些
三萜类成分在抑菌方面具有潜在重要的价值用途,
它们可能为阔叶丰花草的主要活性成分之一。
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