全 文 ：植物生理学报 Plant Physiology Journal 2015, 51 (12): 2143~2151　　doi: 10.13592/j.cnki.ppj.2015.0532 2143
收稿 2015-10-08　　修定 2015-11-05
资助 国家自然科学基金(31200520和31570691)和国家大学生创
新创业训练计划(201410307030)。
* 通讯作者(E-mail: zhuangjing@njau.edu.cn; Tel: 025-
84395182)。
茶树中两个HSF转录因子基因分离与温度胁迫响应的比较分析
熊洋洋2, 顾雅琦2, 刘志薇1, 李彤1, 吴致君1, 庄静1,*
南京农业大学1园艺学院, 茶叶科学研究所, 2生命科学学院, 南京210095
摘要: 以茶树品种‘迎霜’为实验材料, 从中分离获得2个编码HSF转录因子的基因。进化分析显示, 这2个转录因子分别属于
HSF转录因子家族的A5和A4亚族, 分别命名为CsHsfA5和CsHsfA4。序列分析显示, CsHsfA5和CsHsfA4的开放阅读框分别
为1 440和1 224 bp, 分别编码479和407个氨基酸, 均含有HSF转录因子保守结合域。CsHsfA5和CsHsfA4均属于亲水性蛋白,
具有3个α-螺旋和4个β-折叠的三级结构。实时定量PCR表明, CsHsfA5和CsHsfA4基因在不同温度胁迫下均能在3个不同茶
树品种‘迎霜’、‘安吉白茶’和‘云南十里香’中诱导表达, 且表达量呈现差异。
关键词: 茶树; HSF转录因子; 进化分析; 温度胁迫; 基因表达分析
Isolation and Expression Profiles Analysis of Two HSF Transcription Factor
Genes under Temperature Stress in Camellia sinensis
XIONG Yang-Yang2, GU Ya-Qi2, LIU Zhi-Wei1, LI Tong1, WU Zhi-Jun1, ZHUANG Jing1,*
1Tea Research Institute, College of Horticulture, 2College of Life Sciences, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China
Abstract: In this study, two genes, encoding heat shock factor (HSF), were cloned from tea plant cultivar
‘Yingshuang’. Phylogenetic analysis showed that the two HSFs respectively belong to A5 and A4 subfamily of
HSF transcription factor family, and then named them as CsHsfA5 and CsHsfA4, respectively. The full-length
of the open reading frame of CsHsfA5 was 1 440 bp, which encoded 479 amino acids. The full-length of the
open reading frame of CsHsfA4 was 1 224 bp, which encoded 407 amino acids. The CsHsfA5 and CsHsfA4
were hydrophilic proteins. The three-dimensional structures of CsHsfA5 and CsHsfA4 were identical in the
DNA binding domain, which had 3 α-helix and 4 β-strands. Quantitative real-time PCR analysis of the expres-
sion profiles showed that the CsHsfA5 and CsHsfA4 genes could be induced by low or high temperature treat-
ments. The expression levels of CsHsfA5 and CsHsfA4 genes exhibited difference among three tea plant culti-
vars ‘Yingshuang’, ‘Anjibaicha’, and ‘Yunnanshilixiang’.
Key words: Camellia sinensis; HSF transcription factor; phylogenetic analysis; temperature stress; gene ex-
pression profiles
在生长、发育、进化的过程中, 植物会形成
复杂交错的信号转导网络。转录因子是一种具有
特殊结构、行使调控基因表达功能的蛋白质分子,
也称为反式作用因子。转录因子在参与植物体内
与生长发育相关的信号转导途径的同时, 还能由
外界胁迫刺激而被激活, 从而在信号转导途径中
发挥巨大的作用(Baniwal等2004; Zhuang等2014)。
在调控逆境胁迫过程中, 转录因子具有多重作用,
可以作为调控基因表达的分子开关, 也可以作为
逆境信号传递的节点, 从而实现调节逆境应答基
因的时序性(Licausi等2013)。热激转录因子(heat
shock factor, HSF)可以与热激元件(heat shock element,
HSE)的反向重复序列区域结合, 从而诱导热激蛋
白(heat shock proteins, HSPs)发生转录, 是植物遇到
高低温胁迫时产生调节作用的重要转录因子之
一。热激蛋白可以作为分子伴侣, 从而与其他相
关蛋白共同作用, 减少温度胁迫对植物造成的伤
害(Wang等2004; Sangster和Queitsch 2005; Huang
等2015)。根据结构域的不同, HSF可以分为A、
B、C三个族, A和B族又分别分为9个(A1~A9)和4
个(B1~B4)亚族。其中在拟南芥的HsfA4和HsfA5
中, 均含有DBD (DNA-binding domain)、OD/HR-
A/B (oligomerization domain/heptads repeat of hydro-
植物生理学报2144
phobic amino acid residues)、NLS (nuclear localiza-
tion signal)、AHA (activator motif)等保守结构单元
(Nover等2001; Scharf等2012)。
茶是一种重要的非酒精类饮品, 具有非常高
的经济价值(陆建良2008)。我国是茶树的起源地,
但是茶树在我国的种植区域主要以南方为主, 其
中温度是一个重要的限制环境因素(蒋跃林和李倬
2000; 王德芳和郑志勇2011)。另外, 茶产区的温度
条件对茶树生长和茶叶生产也有非常大的影响,
例如夏季的高温和春季的‘倒春寒’, 经常给茶叶
生产造成巨大的损失(刘志薇等2014)。在分子生
物学不断发展的大背景下, 对于茶树对高低温等
非生物胁迫的研究目前正由生理生化角度向功能
基因方向发展。因此, 开展茶树中对非生物胁迫
有着重要调控作用的转录因子相关研究有重要的
意义。
茶树主要分布在热带和亚热带, 喜欢温暖湿润
气候, 平均气温10 ℃以上时芽开始萌动, 生长最适
温度为20~25 ℃, 不同品种的茶树对非生物胁迫的
抗性有较大差异(林金科等2000)。‘云南十里香’作
为云南的地方优良品种, 抗寒抗旱; ‘安吉白茶’产于
浙江安吉, 对低温敏感, 是一个突变品种; ‘迎霜’春
季发芽较早, 秋冬季休眠较迟, 即使遇到霜降也能
抽发, 具有较好的抗低温能力(刘志薇等2014)。
本实验首先利用本课题组茶树‘迎霜’转录组
相关信息(Wu等2014), 检索获得2个编码茶树HSF
转录因子的基因序列, 然后通过RT-PCR的方法克
隆获得茶树中HSF转录因子基因CsHsfA5和CsHsfA4,
并对其进行了较为全面的生物信息学分析。为了
进一步研究上述2个茶树CsHsfA5和CsHsfA4基因
对温度响应的差异, 我们选取了3种不同的茶树材
料‘云南十里香’、‘迎春’和‘安吉白茶’, 开展了高
温、低温胁迫处理下表达量的检测和分析。上述
结果为进一步研究茶树HSF家族转录因子在温度
胁迫下的响应机制提供了基础。
材料与方法
1 茶树试材和温度胁迫处理
以本实验室种植的茶树[Camellia sinensis (L.)
O. Kuntze]品种‘迎霜’ (‘Yingshuang’)二年生扦插幼
苗为试验材料, 种植于南京农业大学茶叶科学研
究所实验用地。选茶树‘迎霜’健康植株, 取幼嫩叶
片, 提取总RNA并合成cDNA, 用于茶树中2个HSF
类转录因子基因CsHsfA5和CsHsfA4克隆。
选取茶树材料‘迎霜’、‘安吉白茶’ (‘Anjibaicha’)、
‘云南十里香’ (‘Yunnanshilixiang’ )的二年生健康植
株分别进行低温和高温胁迫处理。处理在光照培
养箱里进行, 温度分别设置为38和4 ℃, 湿度为
75%, 处理时间分别为1、4、8和24 h, 以未处理的
茶树植株作为对照。取3种未处理或处理过的茶
树幼嫩叶片组织提取RNA并反转录成cDNA, 用于
实时荧光定量PCR。
2 茶树叶片总RNA提取及cDNA合成
本实验中茶树的RNA使用北京华越洋公司的
Quick RNA Isolation Kit完成, 提取的茶树RNA样
品浓度使用微量紫外检测仪NanoDrop进行测定。
茶树材料提取的RNA质量使用1.2%琼脂糖凝胶电
泳检测。利用大连TaKaRa公司的 Prime Script RT
Reagent Kit试剂盒将RNA反转录成cDNA。
3 茶树CsHsfA5和CsHsfA4基因的克隆
根据本实验室‘迎霜’转录组数据(Wu等2014),
通过序列检索获得2个编码茶树HSF转录因子的基
因, 结合序列设计2对引物用于基因克隆。克隆引
物分别为ZJR290: 5′-ATGGACGTAGCTTCCG-
GAGGA-3′、ZJR291: 5′-AAGAGTAAGATGATC-
CATGTT-3′和ZJR292: 5′-ATGATGGATGAAACT-
CAATGC-3′、ZJR293: 5′-AGTTCTCTCTGC-
TGGAGTAAG-3′。以茶树‘迎霜’叶片的cDNA为
模板进行CsHsfA5和CsHsfA4基因的PCR扩增。扩
增体系为: ddH2O 7 μL、Ex Taq Mixture 10 μL、
Primer1 1 μL、Primer2 1 μL、Template cDNA
1 μL。反应条件为: 94 ℃ 5 min; 94 ℃ 30 s, 55 ℃
30 s, 72 ℃ 1 min, 30个循环; 72 ℃ 10 min。将PCR
产物电泳分离、凝胶回收后, 连接到大连TaKaRa
公司的pMD18-T载体上, 转化至大肠杆菌DH5α,
进行质粒酶切、鉴定、测序。序列测定由南京金
斯瑞生物科技有限公司完成。
4 序列分析
本文涉及的相关核苷酸和氨基酸序列分析比
对使用N C B I网站相关程序完成。使用软件
DNAMAN 6.0完成氨基酸序列多重比对和蛋白质
亲疏水性的分析。本文相关序列的氨基酸组成和
熊洋洋等: 茶树中两个HSF转录因子基因分离与温度胁迫响应的比较分析 2145
理化性质由序列处理在线工具包(SMS) (http://
www.bio-soft.net/sms)和ExPASy ProtParam (http://
web.expasy.org/protparam)等相关网站程序分析。
茶树HSF转录因子分子系统发育进化树的构建及
其报告图形的生成均使用MEGA 5软件完成。利
用SWISS-MODEL软件建立了茶树HSF转录因子
的蛋白质空间结构模型, 并在MSViewer软件上编
辑生成分析图形。茶树中HSF转录因子基因荧光
定量PCR数据的分析和图表的绘制由Origin 6.0软
件完成。
5 茶树CsHsfA5和CsHsfA4基因对温度胁迫响应的
表达
使用TaKaRa公司的SYBR Premix Ex Taq试剂
盒, 利用iQ™5 software和iQ™5 Real-time PCR System
完成茶树CsHsfA5和CsHsfA4基因的荧光定量PCR。
茶树actin基因作为内参基因, 与目标基因CsHsfA5
和CsHsfA4同时进行扩增。扩增程序为95 ℃ 5
min; 95 ℃ 5 s, 55 ℃ 30 s, 65 ℃10 s, 40个循环。荧光
定量PCR使用的引物分别为CsHsfA5F1: 5′-CACT-
GGCATCTTCGCTGT-3′、CsHsfA5R1: 5′-ATTG-
G T G C T T C T T G T G A G G A - 3 ′ ; C s H s f A 4 F 1 :
5′-CAACTGGGGTCAACGATGTG-3′、CsHsfA4R1:
5′-GTAATTCACACTCCTCGCATCC-3′; CSactinF1:
5′-CCATCACCAGAATCCAAGAC-3′、CSactinR1:
5′-GAACCCGAAGGCGAATAGG-3′。各CT值相对
定量参照基因的ΔΔCT法, 表达水平等于2-ΔΔCT, ΔCT=
CT,目标基因–CT,actin (Livak和Schmittgen 2001)。
实验结果
1 茶树CsHsfA5和CsHsfA4基因的克隆
以‘迎霜’叶片的cDNA为模板, 分别以ZJR-
290、ZJR291和ZJR292、ZJR293引物进行PCR片
段扩增, 分别获得2条特异的扩增片段。经过克
隆、序列测定与分析, 结果表明, CsHsfA5基因含
有1 440 bp的开放阅读框, 编码479个氨基酸; CsHs-
fA4基因含有1 224 bp的开放阅读框, 编码407个氨
基酸。此外, CsHsfA5和CsHsfA4推导的氨基酸序
列均含有DBD、OD/HR-A/B、NLS和AHA等HSF
转录因子A亚族的保守结构单元(图1)。
2 茶树转录因子CsHsfA5和CsHsfA4序列比对和
进化树分析
利用BLAST-Conserved Domains Search对茶
树CsHsfA5和CsHsfA4转录因子进行保守域预测。
结果显示, 茶树CsHsfA5和CsHsfA4转录因子分别
在11~104和14~106个氨基酸位点之间含有HSF保
守结合域, 表明该2个转录因子属于HSF家族(图
2-A)。此外, CsHsfA5和CsHsfA4的结合域与其他
植物HSFA5、HSFA4亚族转录因子的结合域高度
相似(图2-B)。
为了进一步分析茶树CsHsfA5、CsHsfA4转
录因子和植物中HSF家族相关转录因子之间的进
化关系, 将茶树的CsHsfA5、CsHsfA4转录因子与
拟南芥(Arabidopsis thaliana)、毛果杨(Populus
trichocarpa)、可可(Theobroma cacao)的HSF家族
转录因子构建进化树。结果表明: 茶树CsHsfA5转
录因子在进化关系上属于HSF家族转录因子中A5
亚族; 茶树CsHsfA4转录因子在进化关系上属于
HSF家族转录因子中A4亚族(图3)。
3 茶树CsHsfA5和CsHsfA4转录因子氨基酸的组
成及理化性质分析
选取拟南芥、毛果杨、可可和水稻的HsfA4
和HsfA5亚族的转录因子, 与茶树CsHsfA5和CsHs-
fA4转录因子的氨基酸组成及理化性质进行了比
较分析(表1)。由表1可见, 各植物HsfA5的氨基酸
残基数和相对分子量大于HsfA4。理论等电点(pI)
差异较小, 变化范围为4.98~6.16。碱性氨基酸和
酸性氨基酸的含量差异不大, 分别为13%~15%和
13%~16%。芳香族氨基酸和脂肪族氨基酸的平均
含量分别为7%和17%, 后者明显大于前者。蛋白
质可溶性预测中总平均疏水特性在–0.645~–1.007
之间。
4 茶树CsHsfA5和CsHsfA4转录因子氨基酸序列
疏水/亲水性质分析
对茶树中CsHsfA5和CsHsfA4转录因子进行
疏、亲水性分析, 结果如图4显示。在CsHsfA5中,
疏水性最强的位点是479位的亮氨酸(Leu), 亲水性
最强的是459位的谷氨酰胺(Gln)。在CsHsfA4中,
疏水性最强的是197位的亮氨酸(Leu), 亲水性最强
的是208位的精氨酸(Arg)。总的看来, 大部分氨基
酸属于亲水性氨基酸, 茶树CsHsfA5和CsHsfA4转
录因子属于亲水性蛋白。
5 茶树CsHsfA5和CsHsfA4转录因子三级结构的
预测与分析
利用SWISS-MODEL在线软件, 以人(Homo
植物生理学报2146
sapiens)的热激转录因子1 (HSF1)的A链(PDB ID:
2LDU)为模板, 对茶树CsHsfA5和CsHsfA4转录因
子的三级结构进行了分析。结果发现, CsHsfA5和
CsHsfA4的三级结构模型相似, 均包含3个α螺旋和
4个β折叠的典型HSF蛋白结构, 在α螺旋有2个氨基
酸差异位点(图5)。
6 茶树CsHsfA5和CsHsfA4基因在不同茶树品种、
不同温度胁迫下的表达分析
通过实时定量PCR方法分别检测本文克隆的
茶树HSF家族转录因子基因CsHsfA5和CsHsfA4在
‘云南十里香’、‘安吉白茶’和‘迎霜’中不同温度处
理下的表达情况。在茶树材料‘云南十里香’中,
图1 茶树CsHsfA5 (A)和CsHsfA4 (B)基因的核苷酸序列及其编码的氨基酸序列
Fig.1 The sequences of CsHsfA5 (A) and CsHsfA4 (B) cDNA and deduced amino acid sequences from C. sinensis
熊洋洋等: 茶树中两个HSF转录因子基因分离与温度胁迫响应的比较分析 2147
图3 茶树CsHsfA5和CsHsfA4转录因子的进化分析
Fig.3 Phylogenetic analysis of the CsHsfA5 and CsHsfA4 transcription factors from C. sinensis
图2 茶树CsHsfA5和CsHsfA4转录因子保守域(A)及与其他物种氨基酸序列(B)的多重比对
Fig.2 The conserver domain of CsHsfA5 and CsHsfA4 transcription factors (A) and alignment of amino acid sequences (B) from
C. sinensis and other different plants
Cs: 茶树; At: 拟南芥; Pt: 毛果杨; Os: 水稻; Tc: 可可。
植物生理学报2148
表1 不同植物中HSF家族转录因子氨基酸组成成分及理化性质分析
Table 1 Composition and physical and chemical characterization of amino acid sequences of HSF transcription factors among
different plants
来源植物 转录因子 登录号
氨基酸 相对 理论 碱性氨基 酸性氨基 芳香族氨基 脂肪族氨基 总平均
残基数目 分子量 等电点 酸比例/% 酸比例/% 酸比例/% 酸比例/% 疏水性
茶树 CsHsfA5 479 53676.4 5.76 14 14 8 16 –0.756
茶树 CsHsfA4 407 46420.4 4.98 13 15 7 19 –0.774
拟南芥 AtHsfA4a At4g18880 401 46244.6 5.33 15 16 7 17 –0.876
拟南芥 AtHsfA4c At5g45710 345 39647.7 5.61 15 15 7 17 –1.007
毛果杨 PtHsfA4a Pt004G062300.1 407 46642.0 5.14 14 15 7 16 –0.843
毛果杨 PtHsfA4b Pt011G071700.1 406 46266.6 5.23 13 14 8 17 –0.793
毛果杨 PtHsfA4c Pt014G027100.1 443 50781.7 5.82 15 14 8 17 –0.806
可可 TcHsfA4a Thecc1EG001784t1 447 51145.0 5.96 15 13 9 17 –0.748
可可 TcHsfA4b Thecc1EG029630t1 405 45729.7 5.07 13 15 7 16 –0.760
水稻 OsHsfA4a Os01g54550.1 440 49387.3 5.26 15 16 7 15 –0.901
水稻 OsHsfA4b Os05g45410.1 459 51163.8 5.14 13 15 7 17 –0.645
拟南芥 AtHsfA5 At4g13980 466 52355.1 6.16 15 14 7 16 –0.835
毛果杨 PtHsfA5a Pt001G320900.1 490 54702.6 5.77 14 13 7 18 –0.770
毛果杨 PtHsfA5b Pt017G059600.1 485 54386.3 5.68 13 13 7 17 –0.752
可可 TcHsfA5 Thecc1EG020222t1 490 55349.0 5.40 14 15 7 16 –0.888
水稻 OsHsfA5 Os02g29340.1 475 52884.6 5.30 14 15 7 14 –0.739
图4 茶树CsHsfA5和CsHsfA4氨基酸序列亲水(A)和疏水(B)性质分析
Fig.4 Analysis of hydrophobicity (A) and hydrophilicity (B) of CsHsfA5 and CsHsfA4
黑线代表CsHsfA5; 蓝线代表CsHsfA4。
熊洋洋等: 茶树中两个HSF转录因子基因分离与温度胁迫响应的比较分析 2149
CsHsfA5和CsHsfA4基因的表达水平在高温和低温
处理后, 均表现为升高, 其中CsHsfA4基因的升高
达100倍以上。茶树材料‘安吉白茶’中, CsHsfA5基
因在高温处理后的表达会产生波动, 在低温处理
后的表达呈现逐渐减少; CsHsfA4基因在高温处理
后的表达量会明显升高, 最高达到200倍, 在低温
处理下表达量增加的幅度相对要小。茶树材料‘迎
霜’中, CsHsfA5基因在高温和低温处理下, 其表达
量在前期变化很小, 处理24 h时表达量增加明显;
CsHsfA4基因在高温下和低温处理下, 其表达量均
呈现先减少后升高的趋势。上述结果表明, 同属
于HSF转录因子家族的CsHsfA5和CsHsfA4基因在
高温和低温胁迫下的表达量呈现不同的变化, 在
不同茶树材料间的表达量也不一样。
讨　　论
我国绝大多数的茶树生存于户外开放环境,
直接面临气候变化, 季节交替或地域差别产生的
高温或低温胁迫给茶树造成较大的伤害, 最终对
茶叶的产量和质量造成较大的影响(王守生1995;
杨亚军等2005; Li等2010; 朱政等2011; Das等
2012)。高等植物中热激转录因子HSF参与植物对
热激响应的调控。HSF转录因子通过对热激蛋白
HSP调控, 在信号转导途径下游可以传递热胁迫信
号(Baniwal等2004; Scharf等2012)。热激转录因子
在植物温度胁迫中的响应一直是植物非生物胁迫
研究的重要方面之一。
本文通过RT-PCR的方法, 从茶树‘迎霜’中克
隆获得2个编码HSF转录因子的基因CsHsfA5和
CsHsfA4, 都含有HSF保守域。通过对氨基酸序列
的分析, 得到这二者的三级结构、无序化程度, 以
及该蛋白的疏水性等理化性质。这些氨基酸位点
和空间结构的差异可能是造成这2个同属于HSF家
族的转录因子在不同茶树和不同温度胁迫下响应
不同的原因之一(Liu等2006; Jin等2010; Xiong等
2013; 黄蔚等2014)。
高等植物中, HSF家族转录因子对温度胁迫的
调控研究较多。Ma等(2014)研究发现不同大白菜
品种中, 对高温和低温的胁迫响应表现不同。同
样, Huang等(2015)研究也证实, 胡萝卜中属于同一
亚族的HSF家族转录因子成员, 对高温和低温的胁
迫也表现出较大的差异。为进一步明确CsHsfA5和
CsHsfA4基因在高温和低温胁迫下的表达情况, 本
文对地域来源、特性差异较大的3个茶树品种‘迎
霜’、‘安吉白茶’、‘云南十里香’的温度胁迫响应
进行了分析。结果表明, CsHsfA5和CsHsfA4基因对
高温和低温胁迫都有响应, 而且响应呈现的差异
趋势较大。本文揭示了茶树中HSF转录因子的结
构和功能, 以及HSF转录因子对温度胁迫的不同响
应, 研究结果对进一步阐述茶树在温度逆境下的
调控机制提供借鉴, 也为进一步综合改良茶树的
抗温度胁迫能力提供了一定的理论依据。
图5 茶树CsHsfA5和CsHsfA4蛋白的三维结构预测
Fig.5 The three-dimension structures of CsHsfA5 and CsHsfA4 transcription factors from C. sinensis
植物生理学报2150
参考文献
黄蔚, 王枫, 谭国飞, 徐志胜, 李梦瑶, 熊爱生(2014). 胡萝卜AP2/
ERF-B1亚族两个转录因子基因的克隆及其非生物胁迫响应
分析. 植物生理学报, 50 (8): 1184~1194
蒋跃林, 李倬(2000). 我国茶树栽培界限的气候划分. 生态农业研
究, 8 (1): 87~90
林金科, 赖明志, 詹梓金(2000). 茶树叶片净光合速率对生态因子的
响应. 生态学报, 20 (3): 404~408
刘志薇, 熊洋洋, 李彤, 严雅君, 韩洪润, 吴致君, 庄静(2014). 茶树中
两个ERF类转录因子的分离及不同茶树中温度胁迫的响应分
析. 植物生理学报, 50 (12): 1821~1832
陆建良(2008). 茶汤蛋白对茶饮料冷后浑形成的影响[博士论文].
杭州: 浙江大学
王德芳, 郑志勇(2011). 北京地区温室茶树引种栽培生态因子调控
研究. 中国农学通报, 27 (4): 66~71
图6 不同品种茶树CsHsfA5和CsHsfA4基因在高低温处理下的表达情况
Fig.6 Expression profiles analysis of the CsHsfA5 and CsHsfA4 genes under high and low temperature treatments in
different C. sinensis cultivars
A和B: ‘云南十里香’, C和D: ‘安吉白茶’, E和F: ‘迎霜’; A、C和E为CsHsfA5基因, B、D和F为CsHsfA4基因; 同一温度柱形上不同小写
字母表示在0.05水平上差异显著。
熊洋洋等: 茶树中两个HSF转录因子基因分离与温度胁迫响应的比较分析 2151
王守生(1995). 茶树游离脯氨酸含量及水分胁迫对其影响. 茶叶, 21
(1): 22~25
杨亚军, 郑雷英, 王新超(2005). 低温对茶树叶片膜脂脂肪酸和蛋白
质的影响. 亚热带植物科学, 34 (1): 5~9
朱政, 蒋家月, 江昌俊, 李雯(2011). 低温胁迫对茶树叶片SOD, 可
溶性蛋白和可溶性糖含量的影响. 安徽农业大学学报, 38 (1):
24~26
Baniwal SK, Bharti K, Chan KY, Fauth M, Ganguli A, Kotak S, Mish-
ra SK, Nover L, Port M, Scharf KD et al (2004). Heat stress re-
sponse in plants: a complex game with chaperones and more than
twenty heat stress transcription factors. J Biosci, 29 (4): 471~487
Das A, Das S, Mondal TK (2012). Identification of differentially ex-
pressed gene profiles in young roots of tea [Camellia sinensis (L.)
O. Kuntze] subjected to drought stress using suppression sub-
tractive hybridization. Plant Mol Biol Rep, 30 (5): 1088~1101
Huang Y, Li MY, Wang F, Xu ZS, Huang W, Wang GL, Ma J, Xiong
AS (2015). Heat shock factors in carrot: genome-wide identifi-
cation, classification, and expression profiles response to abiotic
stress. Mol Biol Rep, 42 (5): 893~905
Jin XF, Zhu B, Peng RH, Jiang HH, Chen JM, Zhuang J, Zhang J,
Yao QH, Xiong AS (2010). Optimizing the binding activity of
the AP2/ERF transcription factor with the GCC box element
from Brassica napus by directed evolution. BMB Rep, 43 (8):
567~572
Li XW, Feng ZG, Yang HM, Zhu XP, Liu J, Yuan HY (2010). A novel
cold-regulated gene from Camellia sinensis, CsCOR1, enhances
salt- and dehydration-tolerance in tobacco. Biochem Biophys
Res Commun, 394 (2): 354~359
Licausi F, Ohme-Takagi M, Perata P (2013). APETALA/Ethylene
Responsive Factor (AP2/ERF) transcription factors: mediators of
stress responses and developmental programs. New Phytol, 199
(3): 639~649
Livak KJ, Schmittgen TD (2001). Analysis of relative gene expression
data using real-time quantitative PCR and the 2−ΔΔCT method.
Methods, 25 (4): 402~408
Liu Y, Zhao TJ, Liu JM, Liu WQ, Liu Q, Yan YB, Zhou HM (2006).
The conserved Ala37 in the ERF/AP2 domain is essential for
binding with the DRE element and the GCC box. FEBS Lett,
580 (5): 1303~1308
Ma J, Xu ZS, Wang F, Tan GF, Li MY, Xiong AS (2014). Ge-
nome-wide analysis of HSF family transcription factors and their
responses to abiotic stresses in two Chinese cabbage varieties.
Acta Physiol Plant, 36 (2): 513~523
Nover L, Bharti K, Doring P, Mishra SK, Ganguli A, Scharf KD
(2001). Arabidopsis and the heat stress transcription factor
world: how many heat stress transcription factors do we need?
Cell Stress Chaperon, 6 (3): 177~189
Sangster TA, Queitsch C (2005). The HSP90 chaperone complex, an
emerging force in plant development and phenotypic plasticity.
Curr Opin Plant Biol, 8 (1): 86~92
Scharf KD, Berberich T, Ebersberger I, Nover L (2012). The plant
heat stress transcription factor (Hsf) family: structure, function
and evolution. Biochim Biophys Acta, 1819 (2): 104~119
Wang WX, Vinocur B, Shoseyov O, Altman A (2004). Role of plant
heat-shock proteins and molecular chaperones in the abiotic
stress response. Trends Plant Sci, 9 (5): 244~252
Wu ZJ, Li X-H, Liu ZW, Xu ZS, Zhuang J (2014). De novo assembly
and transcriptome characterization: novel insights into catechins
biosynthesis in Camellia sinensis. BMC Plant Biol, 14: 277
Xiong AS, Jiang HH, Zhuang J, Peng RH, Jin XF, Zhu B, Wang F,
Zhang J, Yao QH (2013). Expression and function of a modified
AP2/ERF transcription factor from Brassica napus enhances
cold tolerance in transgenic Arabidopsis. Mol Biotechnol, 53 (2):
198~206
Zhuang J, Zhang J, Hou XL, Wang F, Xiong AS (2014). Transcriptom-
ic, proteomic, metabolomic and functional genomic approaches
for the study of abiotic stress in vegetable crops. Crit Rev Plant
Sci, 33 (2-3): 225~237