全 文 ：植物生理学报 Plant Physiology Journal 2014, 50 (7): 995~1001　　doi: 10.13592/j.cnki.ppj.2014.0009 995
收稿 2014-02-24　　修定 2014-06-04
资助 国家“863”项目 (2011AA100201)和国家“973”项目
(2012CB114501)。
* 通讯作者(E-mail: wanghongzhi@baafs.net.cn; Tel: 010-
51503257)。
毛白杨PtoNAC157基因的克隆与表达分析
张杰伟, 陈亚娟, 丁莉萍, 朱丹, 苗傲雪, 魏建华, 王宏芝*
北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心, 农业基因资源与生物技术北京市重点实验室, 北京100097
摘要: NAC是植物特有的一类转录因子, 在植物生长发育和抗逆过程中有重要作用。本研究从毛白杨中克隆出一个NAC转
录因子基因, 并根据同源性分析将其命名为PtoNAC157, 开放阅读框为942 bp, 能编码一个由313个氨基酸残基组成的蛋白
质, 预测蛋白分子量为35.5 kDa, 等电点为7.22。氨基酸同源性分析显示, 该蛋白N-端具有保守的NAC结构域。实时荧光定
量PCR结果表明: PtoNAC157在毛白杨幼根、茎和叶中均有表达, 在茎中的表达量最高。PtoNAC157响应低温、NaCl (300
mmol·L-1)、干旱和ABA (200 μmol·L-1)胁迫。由此推测该基因在林木次生生长及响应胁迫信号转导过程中发挥作用。
关键词: 毛白杨; PtoNAC157; 次生生长; 胁迫
Molecular Cloning and Expression Analysis of PtoNAC157 from Populus tomentosa
ZHANG Jie-Wei, CHEN Ya-Juan, DING Li-Ping, ZHU Dan, MIAO Ao-Xue, WEI Jian-Hua, WANG Hong-Zhi*
Beijing Agro-Biotechnology Research Center, Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences, Beijing Key Laboratory of
Agricultural Genetic Resources and Biotechnology, Beijing 100097, China
Abstract: NAC family genes encode plant-specific transcription factors that play important roles in plant de-
velopment regulation and various stresses. In the present study, we isolated and characterized a gene from
6-month-old Populus tomentosa, which had significant homology to PtrNAC157 from P. trichocarpa. The gene
was designated as PtoNAC157. The gene encoded a 313-amino-acid polypeptide with a predicted molecular
mass of 35.5 kDa and isoelectric point of 7.22. Multiple sequence alignments showed that PtoNAC157 con-
tained the highly conservative NAC domain that was located in the N-terminal region. PtoNAC157 was most
abundantly expressed in stem with secondary growth. Moreover, the transcript expression of PtoNAC157 was
induced by cold, dehydration, abscisic acid (ABA) and NaCl stresses. These results suggest that PtoNAC157
might play important roles in secondary xylem development and stress signal transduction in P. tomentosa.
Key words: poplar (Populus tomentosa); PtoNAC157; secondary growth; stress
NAC是植物中特有且广泛存在的一类转录因
子。Souer等(1996)从矮牵牛中克隆出一个NAM
(no apical meristem)基因, 随后在拟南芥中分离出
ATAF1/2和CUC2 (cup-shaped cotyledon)基因, 蛋白
序列分析显示其N-端都包含有NAM类似结构域,
而所有具有该结构域的蛋白质均归属于NAC转录
因子家族。全基因组分析表明 , 水稻和拟南芥
NAC转录因子家族中分别有至少151和117个成员
(Nuruzzaman等2010), 毛果杨中至少有163个成员
(Hu等2010), 而在大豆中至少有152个成员(Le等
2011)。NAC基因家族成员众多且功能各不相同, 不
仅参与植物生长发育(侧根形成、胚发育和细胞次
生壁合成等)过程, 而且在生物胁迫(病原菌、昆虫
和机械损伤等)和非生物胁迫(高盐、干旱和低温
等)过程中也起着重要作用(Huang等2013; Valdivia
等2013; Zhu等2012; 李鹏等2010; Souer等1996)。
目前, 已有多个NAC基因从玉米、小麦、大
豆和番茄等多种植物中克隆出来(Huang等2013)。
拟南芥AtNAP的2个插入失活突变体均表现出叶片
衰老延迟, 而其回复突变体叶片正常衰老, 超量表
达AtNAP导致植株早熟性衰老, 表明AtNAP在植物
叶片衰老过程中起作用(Guo和Gan 2006)。Zhong
等(2010)研究发现, 毛果杨NAC转录因子WNDs
(wood-associated NAC domain transcription factors)
基因PtrWND2B和PtrWND6B是木材形成转录调控
网络的主开关基因, 协同调控下游转录因子和细
胞壁合成基因的表达, 能够恢复拟南芥次生细胞
植物生理学报996
壁合成调控网络主开关基因snd1和nst1双突变体
的次生壁缺陷表型。毛果杨NAC转录因子Ptr-
NAC150、PtrNAC156和PtrNAC157能够激活纤维
素、半纤维素和木质素的生物合成基因, 从而在
木材次生细胞壁生物合成过程中发挥作用(Zhong
等2011)。拟南芥NTL4是连接活性氧(reactive oxy-
gen species, ROS)合成和干旱诱导下叶片衰老的分
子开关, 干旱胁迫下NTL4过量表达的转基因拟南
芥叶片中ROS含量增加, 叶片衰老加速且对干旱胁
迫超敏, 而ntl4突变体叶片中ROS含量降低, 叶片
衰老延缓且抗旱能力显著提高(Lee等2012)。Zhu
等(2012)研究发现, 过量表达葡萄VpNAC1的转基
因烟草提高了对白粉病菌和烟草黑胫病菌的抵抗
能力。
杨树是世界中纬度平原地区栽培最为广泛的
树种之一 , 广泛用于园林绿化、生态保护、建
材、造纸及生物质能源等领域(陈仲等2013)。因
其基因组相对较小, 已成为研究木本植物的模式
植物(Tuskan等2006)。我国杨树人工林总面积达
700多万公顷, 居世界首位。了解杨树NAC基因在
不同逆境因子中的作用, 对林木抗逆分子辅助育
种具有非常重要的意义。本研究利用从毛白杨中
克隆到的一个NAC基因, 根据其与毛果杨中NACs
的同源性, 命名为PtoNAC157, 分析了其编码的蛋
白质序列、结构、进化关系及其在不同组织中的
表达模式, 研究了其在脱落酸(abscisic acid, ABA)、
低温、干旱和高盐胁迫下处理不同时间的表达情
况, 旨在为深入研究PtoNAC157在毛白杨中的生物
学功能提供依据。
材料与方法
1 试验材料
供试材料为生长于北京市农林科学院温室的
苗龄6个月的塔形毛白杨‘北京01’ (Populus tomen-
tosa Carr. cv. ‘BJHR01’)幼苗。
TOP10感受态细胞由农业基因资源与生物技
术北京市重点实验室制备并于–80 ℃保存。植物
总RNA提取试剂盒和植物基因组DNA提取试剂盒
均购自天根生化科技(北京)有限公司; 反转录试剂
盒购自美国Invitrogen公司; Phusion DNA聚合酶购
自美国Thermo公司; T4连接酶、pGEM-T Easy载体
和DNA回收试剂盒购自美国Promega公司; SYB
Green I荧光定量PCR试剂盒购自宝生物工程(大
连)有限公司(TaKaRa); 引物合成和测序委托北京
英杰生命科技有限公司完成。
2 毛白杨PtoNAC157基因的克隆
选取毛白杨幼苗的主根、茎和叶片, 液氮速
冻后, 采用天根生化科技(北京)有限公司植物总
RNA提取试剂盒提取总RNA。按照Invitrogen公司
反转录试剂盒合成cDNA。参考毛果杨PtrNAC157
(JGI登录号: 758848)的全序列, 在编码区设计上游
引物PtoNAC157-F (5-CATATGACATGGTG-
CAATAATAACTCAG-3)和下游引物PtoNAC157-B
(5-ACTAGTTCACTGCTTTCTCTGAAGCTTTC-3),
PCR扩增编码区。PCR反应体系为毛白杨cDNA
2.0 μL、10 μmol·L-1上下游引物各1.0 μL、2 U·μL-1
Phusion DNA聚合酶0.2 μL、2.5 mmol·L-1 dNTPs
1.6 μL、5×Phusion HF缓冲液4.0 μL、ddH2O 10.2
μL, 共20 μL。反应条件为: 94 ℃预变性5 min; 94 ℃
30 s, 58 ℃ 30 s, 72 ℃ 1 min, 30个循环; 72 ℃总延
伸10 min。PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳检测,
回收目的片段并连接到pGEM T-Easy载体后转化
大肠杆菌TOP10, 选择阳性克隆进行测序。
3 毛白杨PtoNAC157的生物信息学分析
从毛果杨基因组文库(http://genome.jgi-psf.
org/Poptr1_1/ Poptr1_1.home.html)获取毛果杨基因
序列。用NCBI在线BLAST工具(http:// www.ncbi.
nlm.nih.gov)对全长cDNA序列进行序列比对分
析。用ExPASy (http://web.expasy.org)网站上的
Compute pI/Mw预测蛋白的分子量和等电点。用
DNAMAN和Clustal W软件进行同源序列比对, 采
用MEGA 4.0软件中的邻接法(neighbor-joining)构
建进化树, 通过Bootstrap作置信度检验, 次数为
1 000次。用Pfam数据库(http://pfam.sanger.ac.uk)分
析PtoNAC157蛋白质序列的保守结构域。利用在
线软件NetPhos 2.0 (http://www.cbs.dtu.dk/services/
NetPhos/)、ProtScale (http://web.expasy.org/prots-
cale/)、TMpred (http://embnet.vital-it.ch/software/
TMPRED_form.html)、SignalP 4.1 (http://www.cbs.
dtu.dk/services/SignalP/)、SOPMA (http://npsa-pbil.
ibcp.fr/cgi-bin/npsa_automat.pl?page=npsa_sopma.
html)、SWISS-MODEL (http://www.swissmodel.
张杰伟等: 毛白杨PtoNAC157基因的克隆与表达分析 997
expasy.org/)和TargetP 1.1 (http://www.cbs.dtu.dk/
services/TargetP/)分别对蛋白质的磷酸化位点、疏
水性、跨膜结构域、信号肽、二级结构、三维结
构和亚细胞定位进行分析。
4 实时荧光定量PCR表达分析
提取毛白杨的幼根、茎(将茎杆的树皮剥掉,
刮取次生木质部)和成熟叶中的RNA, 反转录成
cDNA, 实时荧光定量PCR检测PtoNAC157在毛白
杨不同组织中表达水平。毛白杨分别进行NaCl
(300 mmol·L-1)、ABA (200 μmol·L-1)、干旱和低温
(4 ℃)处理(Chen等2009), 每个处理设3次重复, 每
次取5株, 分别在处理0、1、3、6、12和24 h取成
熟叶片提取RNA, 反转录成cDNA, 实时荧光定量
PCR检测PtoNAC157的表达水平。
根据PtoNAC157序列设计基因特异引物
PtoNAC157 qRT-F (5-TAATTTGCCGGGACTAC-
CAG-3)和PtoNAC157 qRT-B (5-ATTTGGCCATC-
GTTGCTTAC-3)。根据内参基因Actin9设计特异
引物PtoACT9-F (5-TTGCTGACCGTATGAG-
CAAG-3)和PtoACT9-R (5-AATCCACATCTGCT-
GGAAGG-3)。分别选取毛白杨不同组织和胁迫
处理的叶片cDNA为模板, 在ABI公司StepOne-
PlusTM荧光定量PCR仪中进行实时定量反应。每
个实验设3次重复。方法参照TaKaRa公司荧光定
量试剂盒说明书, 反应体系为20 μL。PCR反应条
件如下: 95 ℃预变性30 s; 95 ℃变性5 s, 60 ℃退火
延伸1 min, 共40个循环。根据每个反应得到相应
的CT值, 用2
-ΔΔCT法计算该基因表达差异。
实验结果
1 PtoNAC157基因的克隆及序列分析
将毛白杨幼苗的总RNA反转录为cDNA并以
此为模板进行PCR扩增后, 用1%琼脂糖凝胶电泳
检测, 在950 bp处出现一条特异的条带(图1), 与预
期的目标条带大小一致。测序结果显示: 目标条
带包含942 bp开放读码框, 编码313个氨基酸, 预测
蛋白分子量为35.5 kDa, 等电点为7.22。同毛果杨
PtrNAC157序列编码区相比, 在核苷酸水平上相似
性为98.21%, 氨基酸水平上相似性为96.17%。因
此, 该基因命名为PtoNAC157, 其GenBank序列号
为KJ027314。
2 PtoNAC157蛋白的结构及分子进化分析
采用Pfam软件预测PtoNAC157蛋白保守结构
域的结果显示, 第62~202位氨基酸之间含有NAM
保守结构域(图2), 属于NAC转录因子家族。Prot-
Scale预测结果表明, PtoNAC157蛋白为不含信号肽
的亲水性膜外蛋白, 定位于叶绿体、线粒体或分泌
到胞外的可能性均较小。PtoNAC157的二级结构
包含19.81%的α-螺旋、3.51%的β-折叠、21.41%的
延伸链及55.27%的无规则卷曲。PtoNAC157的三
级结构与水稻OsNAC1蛋白具有很高的相似度, 表
明其可能与OsNAC1有类似的生物学功能。
为进一步研究PtoNAC157与其他植物NACs
之间的进化关系, 从GenBank中选取毛果杨、矮牵
牛和拟南芥中已报道的NACs和PtoNAC157作为分
析群体, 利用MEGA 4.0软件构建系统进化树。在
进化树中PtoNAC157与PtrNAC157、PtrNAC154
和PtrNAC156均高度同源, 且与PtrNAC150处于同
一分支(图3)。
3 PtoNAC157的组织特异表达
采用实时荧光定量PCR分析PtoNAC157基因
在毛白杨不同组织中的表达水平, 结果表明, Pto-
NAC157在幼根、茎和叶片中均有表达, 其中在茎
中表达最高, 约为幼根中的8倍, 叶片的2倍(图4)。
4 PtoNAC157在不同胁迫下的差异表达
用实时荧光定量PCR检测不同胁迫条件下
图1 PtoNAC157 cDNA的PCR产物电泳图
Fig.1 Electropherogram of PCR products
of PtoNAC157 cDNA
M: DNA Marker; 1: PtoNAC157 cDNA扩增产物。
植物生理学报998
图2 PtoNAC157推导的N-端氨基酸序列与其他植物NACs的多重比对
Fig.2 Comparison of deduced N-terminal amino acid sequence of PtoNAC157 with the counterparts of other plant NACs
A~E为5个保守的亚结构域。
PtoNAC157在转录水平上的变化。结果显示, 经
300 mmol·L-1 NaCl处理后, PtoNAC157出现明显上
调趋势: 处理1 h后约为未处理时的4倍; 处理3 h后
达到峰值, 约为未处理的20倍, 随后表达水平有所
降低, 但仍明显高于对照; 处理6和12 h后, 均约为
未处理的8倍; 处理24 h后约为未处理时的7倍(图
5-A)。200 μmol·L-1 ABA处理3 h后, PtoNAC157表
达出现上调; 在处理6 h后达到最高, 约为未处理的
5倍; 处理12 h后为未处理的4倍; 在处理24 h后出
现下调, 与未处理时持平(图5-B)。PtoNAC157表
达量在干旱处理1和3 h后没有明显变化, 随处理时
间的延长表达增强, 在处理12和24 h后达到最高值,
均约为未处理的9倍(图5-C)。PtoNAC157的表达
变化与低温处理时间没有明显关系, 处理1~24 h的
张杰伟等: 毛白杨PtoNAC157基因的克隆与表达分析 999
表达量均约为未处理时的2.5倍(图5-D)。由此可
见, 在不同胁迫条件下, PtoNAC157表达量有不同
程度的变化, 尤其是NaCl处理后, PtoNAC157表达
量随时间的变化出现明显上调且最高值为未处理
时的20倍, 表明PtoNAC157响应了低温、干旱、
ABA和高盐胁迫, 推测该基因在响应胁迫信号转
导时起作用。
讨　　论
NAC 转录因子为植物特有, 是迄今为止发现
的最大的转录因子家族之一, 具有多种生物功能,
广泛分布于陆生植物。该家族转录因子的N-端具
有保守的NAC结构域, C-端是具有转录激活功能
且高度变异的调控区。本研究中PtoNAC157蛋白
NAC结构域包含5个保守的亚结构域A、B、C、D
和E (图2), 其中, A、C和D 三个亚结构域在不同的
物种间高度保守; 这与Ooka等(2003)的研究结果
一致。
进化分析表明, 木本植物中毛白杨与毛果杨的
同源关系较近, 而草本植物中矮牵牛和拟南芥的同
源关系较近。PtoNAC157与PtrNAC157、PtrNAC154
和PtrNAC156的蛋白同源性分别为96.17%、66.56%
和63.76%。Zhong等 (2011)的研究表明 , P t r-
NAC154、PtrNAC156和PtrNAC150在杨树次生细
胞壁的形成过程中起作用, 暗示PtoNAC157可能在
毛白杨的次生生长中发挥作用。茎的发育直接体
现了林木植物的次生生长与发育 , 本研究中
PtoNAC157在毛白杨茎中表达量最高, 约为幼根的
8倍(图4), 结合同源进化分析, 推测其可能在林木
次生生长中起关键作用。
Yang等(2011)从耐盐番茄栽培种中发现2个盐
诱导的基因SlNAC1和SlNAM1, 组织表达谱分析显
示SlNAC1主要在根、花和未成熟的果实中表达,
图4 PtoNAC157基因在毛白杨不同组织器官中的差异表达
Fig.4 Differential expression of PtoNAC157
gene in different organs
采用实时荧光定量PCR检测PtoNAC157基因的表达水平, 以
毛白杨PtoACT9作为内参基因。**P<0.01, n=3。
图3 PtoNAC157系统进化分析
Fig.3 Phylogenetic tree analysis of PtoNAC157
植物生理学报1000
图5 PtoNAC157基因响应低温、干旱、ABA和NaCl胁迫的表达
Fig.5 Expression of the PtoNAC157 gene in response to cold, dehydration, ABA and NaCl stresses
实时荧光定量PCR检测PtoNAC157基因的表达水平, 以PtoACT9作为内参基因, 以每个组的处理前样品作为对照。*P<0.05, **P<0.01,
n=3。
而SlNAM1在花和成熟的果实中高水平表达。Sl-
NAC1和SlNAM1均受盐胁迫诱导且在耐盐品种和
敏盐品种中的表达谱不同, 推测其可能在番茄抗
逆中发挥作用。菊花DgNAC1响应干旱、高盐、
低温和ABA胁迫, DgNAC1过量表达的转基因烟草
能够表现出对高盐胁迫的明显耐受(Liu等2011)。
大豆GmNAC11和GmNAC20在干旱、高盐、低温
和ABA处理时表达均上调, 其过表达转基因株系
通过调控DREBs和其他胁迫相关基因来调控侧根
发育, 从而提高植株对高盐和低温胁迫的耐受力
(Hao等2011)。基因表达谱分析表明, 小麦TaNAC2
响应干旱、高盐、低温和ABA胁迫, 在拟南芥中
过量表达能够增强植物对干旱、高盐和低温胁迫
的耐受力(Mao等2012)。另外, 水稻OsNAC1蛋白
同样能够提高植物对高盐和干旱胁迫的耐受能力
(Saad等2013)。本研究中的PtoNAC157与TaNAC2
相似, 也能响应低温、干旱、ABA和高盐胁迫;
SWISS-MODEL软件分析显示, PtoNAC157蛋白与
OsNAC1蛋白具有很高的相似度, 推测PtoNAC157
在高盐胁迫时起作用。
毛白杨PtoNAC157可能参与了林木次生生长
及对高盐胁迫的响应, 但其在毛白杨中的具体作
用机制还不明晰, 须深入研究PtoNAC157与其他转
录因子及调控蛋白质之间的相互作用, 从而阐明
PtoNAC157在毛白杨中的生物学功能及其调控机
制, 为下一步研究该基因在林木生长发育及其在
非生物胁迫调控中的作用提供理论依据。
参考文献
陈仲, 王佳, 安新民(2013). 毛果杨PtrAP1-2基因启动子的克隆及其
瞬时表达分析. 植物生理学报, 49 (6): 591~597
李鹏, 黄耿青, 李学宝(2010). 植物NAC转录因子. 植物生理学通讯,
46 (3): 294~300
Chen J, Xia X, Yin W (2009). Expression profiling and functional
characterization of a DREB2-type gene from Populus euphrati-
ca. Biochem Biophys Res Commun, 378 (3): 483~487
Guo Y, Gan S (2006). AtNAP, a NAC family transcription factor, has
an important role in leaf senescence. Plant J, 46 (4): 601~612
Hao YJ, Wei W, Song QX, Chen HW, Zhang YQ, Wang F, Zou HF,
Lei G, Tian AG, Zhang WK et al (2011). Soybean NAC tran-
scription factors promote abiotic stress tolerance and lateral root
formation in transgenic plants. Plant J, 68 (2): 302~313
Hu R, Qi G, Kong Y, Kong D, Gao Q, Zhou G (2010). Comprehen-
sive analysis of NAC domain transcription factor gene family in
Populus trichocarpa. BMC Plant Biol, 10 (1): 145~178
Huang W, Miao M, Kud J, Niu X, Ouyang B, Zhang J, Ye Z, Kuhl JC,
Liu Y, Xiao F (2013). SlNAC1, a stress-related transcription fac-
tor, is fine-tuned on both the transcriptional and the post-transla-
tional level. New Phytol, 197 (4): 1214~1224
张杰伟等: 毛白杨PtoNAC157基因的克隆与表达分析 1001
Le DT, Nishiyama R, Watanabe Y, Mochida K, Yamaguchi-Shinozaki
K, Shinozaki K, Tran LSP (2011). Genome-wide survey and ex-
pression analysis of the plant-specific NAC transcription factor
family in soybean during development and dehydration stress.
DNA Res, 18 (4): 263~276
Lee S, Seo PJ, Lee HJ, Park CM (2012). A NAC transcription factor
NTL4 promotes reactive oxygen species production during
drought-induced leaf senescence in Arabidopsis. Plant J, 70 (5):
831~844
Liu QL, Xu KD, Zhao LJ, Pan YZ, Jiang BB, Zhang HQ, Liu GL
(2011). Overexpression of a novel chrysanthemum NAC tran-
scription factor gene enhances salt tolerance in tobacco. Biotech-
nol Lett, 33 (10): 2073~2082
Mao X, Zhang H, Qian X, Li A, Zhao G, Jing R (2012). TaNAC2, a
NAC-type wheat transcription factor conferring enhanced multiple
abiotic stress tolerances in Arabidopsis. J Exp Bot, 63 (8): 1~14
Nuruzzaman M, Manimekalai R, Sharoni AM, Satoh K, Kondoh H,
Ooka H, Kikuchi S (2010). Genome-wide analysis of NAC tran-
scription factor family in rice. Gene, 465 (1): 30~44
Ooka H, Satoh K, Doi K, Nagata T, Otomo Y, Murakami K, Matsub-
ara K, Osato N, Kawai J, Carninci P et al (2003). Comprehensive
analysis of NAC family genes in Oryza sativa and Arabidopsis
thaliana. DNA Res, 10 (6): 239~247
Saad AS, Li X, Li HP, Huang T, Gao CS, Guo MW, Cheng W, Zhao
GY, Liao YC (2013). A rice stress-responsive NAC gene enhanc-
es tolerance of transgenic wheat to drought and salt stresses.
Plant Sci, 203: 33~40
Souer E, van Houwelingen A, Kloos D, Mol J, Koes R (1996). The no
apical meristem gene of petunia is required for pattern formation
in embryos and flowers and is expressed at meristem and primor-
dia boundaries. Cell, 85 (2): 159~170
Tuskan GA, Difazio S, Jansson S, Bohlmann J, Grigoriev I, Hellsten
U, Putnam N, Ralph S, Rombauts S, Salamov A et al (2006).
The genome of black cottonwood, Populus trichocarpa (Torr. &
Gray). Science, 313 (5793): 1596~1604
Valdivia ER, Herrera MT, Gianzo C, Fidalgo J, Revilla G, Zarra I,
Sampedro J (2013). Regulation of secondary wall synthesis and
cell death by NAC transcription factors in the monocot Brachy-
podium distachyon. J Exp Bot, 64 (5): 1333~1343
Yang R, Deng C, Ouyang B, Ye Z (2011). Molecular analysis of two
salt-responsive NAC-family genes and their expression analysis
in tomato. Mol Biol Rep, 38 (2): 857~863
Zhong R, Lee C, Ye ZH (2010). Functional characterization of poplar
wood-associated NAC domain transcription factors. Plant Physi-
ol, 152 (2): 1044~1055
Zhong R, McCarthy RL, Lee C, Ye ZH (2011). Dissection of the
transcriptional program regulating secondary wall biosynthe-
sis during wood formation in poplar. Plant Physiol, 157 (3):
1452~1468
Zhu Z, Shi J, He M, Cao J, Wang Y (2012). Isolation and functional
characterization of a transcription factor VpNAC1 from Chinese
wild Vitis pseudoreticulata. Biotechnol Lett, 34 (7): 1335~1342