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卡特兰无菌播种与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 46卷 第 3期, 2010年 3月 259
收稿 2010-01-26 修定  2010-02-25
资助 北京市园林绿化局计划项目(Y1H H2009003 04)。
* 通讯作者(E-mail: wangyan@caf.ac.cn; Tel: 010-62888963)。
卡特兰无菌播种与快速繁殖
郑宝强, 王雁 *, 彭镇华
中国林业科学研究院林业研究所, 国家林业局林木培育重点实验室, 北京 100091
Asepsis Sowing and in vitro Propagation of Brassolaeliocattleya Sung Ya Green
ZHENG Bao-Qiang, WANG Yan*, PENG Zhen-Hua
Key Laboratory of Tree Breeding and Cultivation, State Forestry Administration, Research Institute of Forestry, Chinese Academy
of Forestry, Beijing 100091, China
1 植物名称 卡特兰杂交种(Brassolaeliocattleya
Sung Ya Green ‘Green World’)。
2 材料类别 人工自花授粉后 90、120、150、180
和 210 d的种子。
3 培养条件 种子萌发培养基: (1) KC; (2) MS; (3)
1/2MS。原球茎诱导、增殖和分化培养基: (4) l/2MS+
NAA 0.2 mg·L-1(单位下同); (5) l/2MS+NAA 0.4; (6)
l/2MS+6-BA 0.5+NAA 0.2; (7) 1/2MS+6-BA 1.0+NAA
0.2。以上培养基均添加 0.5 g·L-1活性炭。壮苗及
生根培养基: (8) 1/2MS+IBA 0.2+1 g·L-1活性炭。
以上培养基均添加2.0%蔗糖和0.8%琼脂, pH 5.8。培
养温度为(25±2)℃。光照强度为 60 μmol·m-2·s-1, 光
照时间为 12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 材料的无菌处理 将未开裂的荚果经自来水洗
净后, 置于 10%次氯酸钠溶液中消毒 20 min, 用
75%的酒精表面消毒 3 min, 直接在酒精灯上灼烧
去除荚果表面酒精。用解剖刀切开荚果, 将种子接
种到培养基(1)~(3)上。
4.2 种子萌发发育 授粉后 90 d和 120 d的种子都
粘连在一起, 不能进行有效分离, 其中授粉后 90 d
的种子不能萌发, 授粉后 120 d的种子在播种 65 d
后可以看到原球茎生成。授粉150 d后的种子在播
种 30 d后生成绿色原球茎, 授粉后 180 d和 210 d
的种子在播种 15 d后生成绿色原球茎。3种播种
培养基萌发效果相差不大, 萌发3个月后进行继代
培养, 其中培养基(1)根系最长, 但叶片瘦小, 叶色
呈暗绿色(图1-a); 培养基(2)叶片较宽, 但叶片和根
系较少, 形成较多丛生芽苗(图1-b); 培养基(3)有较
多的根系和叶片, 叶色正常, 生长最好(图 1-c)。
4.3 原球茎诱导、增殖与分化 切取原球茎以及无
菌苗的假鳞茎接种到培养基 (4)~(7)中培养, 培养
基(4)的原球茎诱导率为34.2%; 培养基(5)不易诱导
出原球茎, 容易出芽; 在培养基(6)上培养 l0 d后原
球茎开始萌动, 诱导率达 70%以上, 50 d后明显增
殖, 增殖系数一般在 15~20。继续培养, 80%以上
形成的原球茎聚集体可以陆续分化出小苗(图2), 原
球茎聚集体(图 3)可继续用于继代培养。培养基
(7)增殖系数也能达到15~20, 但形成的原球茎聚集
体不易分化小苗。
图 2 卡特兰的诱导分化
图 1 卡特兰的萌发
植物生理学通讯 第 46卷 第 3期, 2010年 3月260
有 “热带兰之王 ”之称, 哥伦比亚、巴西和哥斯达
黎加等国都以卡特兰为国花。卡特兰原生种作为
CITES (濒危物种国际贸易公约)的保护物种, 严禁
贸易, 目前在国内还没有发现有栽培或研究卡特兰
的原生种。卡特兰属与其近缘属间杂交种都统称
为卡特兰。Brassolaeliocattleya Sung Ya Green
‘Green World’为白拉索兰属(Brassavola)、蕾丽兰
属(Laelia)和卡特兰属 3属的一个杂交种。我国大
陆自上世纪70年代引进卡特兰以来, 栽培规模一直
呈上升趋势, 其盆花与切花生产具有广阔的前景。
用卡特兰茎尖作外植体的组培快繁技术已经较为成
熟(Kusumoto 1979; 丁兰等 2001, 2003; 鲁雪华等
2004), 但无菌播种技术却少有报道。卡特兰具有
种子小、数量多、容易获得等优点, 较适合无菌
播种, 短期内可得到大量的实生苗, 因此可作为杂
交育种实生选育的手段。一般认为, 未成熟的种子
比成熟的种子更容易萌发, 采摘果荚的时间应达到
种子 1/3~1/2的成熟度(曹孜义和刘国民 1996)。本
文中卡特兰成熟种子更容易萌发, 虽然在KC、MS
和1/2MS培养基中萌发效果相差不大, 但在继代培
养过程中, 1/2MS表现最佳。
参考文献
曹孜义, 刘国民(1996). 实用植物组织培养技术教程. 兰州: 甘肃
科学技术出版社, 33, 183
丁兰, 梁桂霞, 傅华龙(2001). 卡特丽亚兰的组织培养与快速繁
殖的研究. 四川大学学报(自然科学版), 38 (1): 106~110
丁兰, 刘国安, 傅华龙(2003). 卡特丽亚兰试管苗工厂化生产过
程中幼苗增殖与生长特性的研究四川大学学报(自然科学
版), 40 (4): 763~766
鲁雪华, 徐立晖, 郭文杰, 林新华(2004). 卡特丽亚兰的组织培养.
江西农业大学学报, 26 (2): 242~245
Kusumoto M (1979). Effects of combination of growth regulators,
and of organic supplements on the growth of Cattleya plant-
lets cultured in vitro. J Jpn Soc Hort Sci, 47 (4): 492~501
4.4 生根培养与移栽 将分化出的不定芽切下, 转入
培养基(8)中培养, 20 d后开始生根, 40 d后根诱导
达 90%以上, 平均根数 3~4条(图 4)。当苗高 5 cm
左右时进行移栽, 经炼苗后, 洗净苗根部的培养基,
再经 1 000倍的多菌灵溶液浸泡 0.5 h后, 定植于
水苔为基质的穴盘中, 经常喷水, 保持温度 18~25
℃, 空气湿度 70%~90%, 光照为 50%~60%的自然
光, 1个月后移栽成活率达 85%以上(图 5)。
图 5 卡特兰的大规模生产
图 3 卡特兰的原球茎聚集体
图 4 卡特兰的生根和壮苗
5 意义与进展 卡特兰为兰科卡特兰属(Cattleya)植
物, 原产于美洲热带和亚热带, 其花色五彩斑斓, 花
型硕大多姿, 颜色丰富多彩(图 6), 气息芬芳可人,
图 6 卡特兰的花