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‘砀山酥梨’的组织培养和脱毒快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第5期,2006年10月900
收稿 2006-02-16 修定  2006-04-28
资助 安徽省教育厅“十五”学术带头人基金( 2 0 0 2 )。
* 通讯作者(E-mail: cypnfnge@mail.hf.ah.cn, Tel: 0551-
2823795-3129)。
‘砀山酥梨’的组织培养和脱毒快速繁殖
金青 蔡永萍*
安徽农业大学生命科学学院,安徽合肥 230036
Tissue Culture and Rapid Propagation of Pyrus bretschneideri Rehd.
JIN Qing, CAI Yong-Ping*
College of Life Science, Anhui Agricultural University, Hefei, Anhui 230036, China
1 植物名称 白梨品种‘砀山酥梨’(Pyrus bretsch-
neideri Rehd.)。
2 材料类别 茎 尖 。
3 培养条件 分化培养基:(1)改良 MS+6-BA 2.0
mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.5+0.5% 活性炭(AC); 丛
生芽诱导培养基:(2) MS+NAA 0.5+6-BA 0.5、
1.0、1.5、2.0、3.0;增殖继代培养基:(3) MS+6-
BA 1.0+ GA3 1.0+NAA 0.2、0.5、1.0、1.5、2.0;
生根培养基:(4) A S H + 间苯三酚(PG ) 8 0 +
IBA 1.0+ NAA 0.5,(5) ASH+IBA 1.0+NAA 0.5。
上述培养基均附加30 g·L-1蔗糖、8 g·L-1琼脂,生
根培养基附加20 g·L-1蔗糖、6 g·L-1琼脂,pH 5.8。
培养温度(25±2)℃,光照12 h·d-1,光照强度40~60
mmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌体系的建立和脱毒芽的诱导 春季,取旺
盛生长的新梢芽,剥去外层鳞片,在超净工作台
上用 70% 酒精浸 30 s,无菌水冲洗 3 次,再放
入0.1% HgCl2 消毒 6~10 min,用无菌水冲洗5~6
次,切取 0.5~1 mm 带 1~2 个叶原基的茎尖,接
种于培养基(1)上。待茎尖变绿,逐渐膨大,长
成试管苗,将其放入(38±1)℃培养箱。热处理35 d
后,第2次切取苗尖0.3~0.5 mm接种于培养基(1)
上,待脱毒芽变绿膨大,转入培养基(2)上。40 d
后,从芽基部长出丛生芽。附加2.0 mg·L-1 6-BA
的培养基中有效芽数高达6~8个,过高6-BA浓度
的有效芽数反而减少。
4.2 增殖与继代培养 将丛生芽切成单芽,接种于
培养基(3)上。附加1.5 mg·L-1 NAA 培养基的脱毒
芽梢高度最大且生长健壮;过高的 NAA 浓度抑制
芽梢生长,附加 GA3 有利于芽梢的伸长和叶面积
扩大。新梢腋芽最佳继代时间为 40~45 d。
4.3 生根与移栽 将连续继代4~5次、2.0~2.5 cm
长的壮苗,转接到培养基(4)和(5)上,暗培养7 d
后,转入不加任何激素的同类培养基上,光照下
诱导生根。二步生根法比直接生根法生根效果
好,7~10 d 后开始生根,30 d 后即长出 4~8 条
1.5~2.5 cm 的根,生根率达 85% 以上;而培养
基(5)上极难生根。移栽前,先开瓶炼苗1周,取
出植株洗净后,移栽到装有沙和腐质土(3:1)混合
基质的容器内,适当遮荫,保持环境湿度,温
度 18~22℃,用 1/4MS 无机盐营养液浇灌,每周
喷1次 0.1% 的多菌灵。30 d 后即可移栽到大田,
成活率 7 0 % 以上。
5 意义与进展 ‘砀山酥梨’是安徽省特有的白色
梨品种,汁多味甜、酥脆爽口,为人们所喜食。
它的晚熟品种耐贮运,可以季产年销,周年供应
市场。由于其在长期无性繁殖中感染并积累了多
种病毒,严重影响梨果的产量和质量,目前病毒
病害还无法用药剂进行有效防治。本文中采用茎
尖脱病毒技术可以培育脱病毒苗,周年进行,对
保持其原有的优良特性可能有一定的参考价值。
‘砀山酥梨’的组织培养和脱病毒快速繁殖未见
报 道 。
植物组织培养简报 Brief Communications of Plant Tissue Culture