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大花萱草新品种‘奶油卷’的组织培养和生产应用



全 文 :植物生理学通讯 第43卷 第1期,2007年2月 129
大花萱草新品种‘奶油卷’的组织培养和生产应用
张伟丽1,2,*,金欣庆1
1 南京大学生命科学学院生物医药国家重点实验室,南京 210093;2 仲恺农业技术学院生命科学学院,广州 510225
Tissure Culture and Application of Hemerocallis middendorfii Trautv. et Mey.
cv. Betty wods
ZHANG Wei-Li1,2,*, JIN Xin-Qing1
1State Key Laboratory of Pharmaceutical Biotechnology, College of Life Sciences, Nanjing University, Nanjing 210093, China;
2School of Life Sciences, Zhongkai University of Agriculture and Technology, Guangzhou 510225, China
收稿 2006-11-20 修定  2007-01-10
资助 江苏省博士后基金(0208003402)。
*E-mail:zhangweili7218@163.com;Tel:020-
89003167
1 植物名称 大 花 萱 草 新 品 种 ‘ 奶 油 卷 ’
(Hemerocallis middendorfii Trautv. et Mey. cv. Betty
wods)。
2 材料类别 花托、花茎和花瓣
3 培养条件 愈伤组织、不定芽诱导及增殖培养
基:(1) MS+6-BA 2.5 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.2;
(2) MS+6-BA 2.0+NAA 0.2;(3) MS+6-BA 1.5+NAA
0.2;(4) MS+2,4-D 1.0+6-BA 0.5。生根培养基:
(5) 1/2MS+NAA 0.1;(6) 1/2MS+NAA 0.2;(7) 1/2MS+
IBA 0.1;(8) 1/2MS+IBA 0.2。以上培养基均附加
0.65% 琼脂、3% 蔗糖,pH 5.8。生根培养基以
1/2MS 为基本培养基并加入1 g·L-1活性炭。培养
温度(22±2) ℃,光照12 h·d-1,光照强度30~40
mmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的准备 植株盛花期时,从植株上切
取长 5~7 cm 的花蕾及花茎部分,流水冲洗 30
min,用毛刷轻轻刷去植株表面及叶片间的泥土,
削去叶片和瑕疵,保留约3 cm长花蕾及花茎,培
养皿中晾干备用。用 75% 酒精浸泡 30 s,用无
菌水漂洗后再放入0.1% HgCl2 (0.02%吐温)中浸泡
5 min,用无菌水漂洗3次后,放入无菌的培养皿
中用灭菌的滤纸吸干水分,分别切取花瓣、花
托、花茎各部位并将之横切成0.5 mm的薄片,放
入培养基。在人工控制条件的培养室内培养,先
暗培养 7 d,培养条件同上。
4.2 不同外植体的诱导效果 不同外植体的诱导结
果不同:花托的诱导率最高,达到 8 5 % 以上;
而花茎接入培养基后体积膨大但无愈伤组织生成,
培养约 20 d,部分开始变褐;花瓣虽膨大变形,
但也无愈伤组织生成,培养 7~10 d 后死亡。因
此,选用花托为外植体继续培养。
4.3 愈伤组织与芽诱导培养 将花托的切片接入诱
导培养基(1)~(4)上。接种15 d左右,(1)~(3)的花
托切片膨大并逐渐增大增厚,在切口与培养基接
触处有浅黄绿色和黄绿色的瘤状突起愈伤组织生成
(图1); 培养30 d,(2)、(3)的愈伤组织上出现密集
的绿色芽点;培养40 d,(2)、(3)的芽点逐渐变成
芽丛,培养基(1)上的芽畸形,叶色稍黄,不健
壮。培养基(2)和(3)的效果佳,愈伤组织紧实呈
浅黄绿色,新生的芽点多,并且芽绿,生长健
壮,叶色绿。此时将愈伤组织切块在培养基(2)和
(3)上继代增殖,增殖系数可达到4~5 (图 2)。而
培养基(4)上的愈伤组织表面发白、松散,培养50
d 时生成少量畸形芽。
4.4 生根培养 将高度约2 cm的无根再生苗从愈伤
组织上切下来,移入生根培养基(5)~(8)中。(6)、
(8)的生根效果最好,10 d 开始有白色的细根生
成,20~25 d 的生根率达 90% 以上(图 3),每棵
幼苗上平均有 4~6 条根,最高可达 12 条。当根
长至 4~6 cm、苗高 4~8 cm 时,即可进行炼苗
与移栽。
4.5 炼苗与移栽 敞开试管苗瓶口,在培养室中炼
苗3~5 d 后,取出组培苗并用流动水洗净根系上
的培养基,移入事先喷洒过0.2%农药达克宁的混
合基质(沙:新型栽培基质:椰糠=1:1:1)中,新型栽
植物生理学通讯 第43卷 第1期,2007年2月130
入的新品种(图5),其独特的花形及颜色在市场上
深受欢迎。大花萱草结实率低,一般采用分蘖等
无性繁殖方式增殖,繁殖率低。1 株萱草每年仅
可繁殖 4~5 株,不能适应市场商品化生产的需求
(王晓娟等2003)。以花托进行组培快繁,不影响
母本植株的正常生长,可以克服以茎尖为外植体
会毁坏母本的不足。采用本文方式,大花萱草
‘奶油卷’已进入工厂化育苗阶段,并已进行规
模化生产和推广应用。通过与南京大渊生物有限
公 司 的 合 作 , 快 繁 组 培 苗 已 达 到 每 年 约
50 000 株,按每株芽苗1.0~1.2 元计算,每年效
益达到 5~6 万元,今后还将根据市场需求逐年扩
大规模。目前,我们在南京繁殖,主要在江苏
省境内推广。
图1 大花萱草‘奶油卷’的愈伤组织诱导
培基质为镇江大宇生态肥厂生产。放入培养箱中
培养(图4),温度为25 ℃,平均光照强度为35~40
mmol·m-2·s-1,光照 12 h·d-1。每隔 2 d 浇水 1次,
15 d后再移入花盆或大田中生长。移栽成活率达
到 9 0 % 以上。
5 意义与进展 大花萱草是百合科萱草属的多年生
宿根草本植物,色彩华丽,叶似兰草、花如百
合。一般在夏季(6~8 月份)开花,历时月余。在
美国,大花萱草花色品种繁多,有淡黄、金黄、
鹅黄、浅红、大红、深红等颜色,更有粉白相
间和红黄相间的复色。近几年,我国陆续从国外
引进大花萱草新品种满足市场需求( 王汉海等
2002),重瓣黄色的大花萱草‘奶油卷’是刚引
图2 大花萱草‘奶油卷’的继代增殖培养
图 3 大花萱草‘奶油卷’的生根培养
图 4 大花萱草‘奶油卷’炼苗后的预生长
图 5 大花萱草‘奶油卷’的单朵花
参考文献
王汉海, 程贯召, 杜延飞(2002). 大花萱草新品种“金娃娃”的
组织培养和快速繁殖. 植物生理学通讯, 38 (5): 458
王晓娟, 金樑, 陈家宽(2003). 萱草的组织培养与快速繁殖. 植物
生理学通讯, 39 (3): 234