全 文 ：植物生理学通讯 第 40 卷 第 3期，2004 年 6 月 345
多齿蹄盖蕨孢子的离体培养
王新华* 赵恒田
中国科学院东北地理与农业生态研究所， 哈尔滨 150040
In vitro Culture of Spores of Athyrium multidentatum
WANG Xin-Hua*, ZHAO Heng-Tian
Northeast Institute of Geography and Agricultural Ecology, Chinese Academy of Sciences, Harbin 150040
收稿 2003-07-24 修定 　 2003-10-08
资助　 黑龙江省自然科学基金项目(C0223)和黑龙江省科技攻关
计划项目(GB03B304)。
* E-mail：xhwangs@163.com,xhwangs@hotmail.com;
Tel: 0451-86603753
1 植物名称 多齿蹄盖蕨(Athyrium multidentatum)别
名猴腿儿、猴腿菜、紫茎菜、猴腿蹄盖蕨。
2 材料类别 成熟的多齿蹄盖蕨孢子。
3 培养条件 (1)播种培养基：1/2MS+6-BA 0.5
mg·L-1(单位下同)+NAA 0.1+0~3 g·L-1 活性炭；(2)
原叶体增殖培养基：1/2M S+ 6 - BA 0 . 5+ N A A
0 . 1 ~ 0 . 5；(3 )孢子体诱导培养基：1 / 2 M S + G A 3
10~20+NAA 0.1~0.5；(4)孢子体继代培养基：
1/2MS+NAA 0.1~1；(5)生根培养基 1/2MS+NAA
0~0.5。以上培养基均附加3%蔗糖、0.65%琼脂，
pH 5.5~5.8。培养温度20~28℃，光照时间8~10
h·d-1，光照度1 500~2 000 lx。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 将成熟的孢子包在滤纸内，
用70% 酒精浸泡30 s，无菌水冲洗3~5 次，再用
0.1% 升汞液消毒5 min，无菌水冲洗3~5 次，备
用。
4.2 孢子接种及原叶体生长 将无菌的孢子分散于
适量无菌水中，用滴管吸取孢子水溶液，将孢子
溶液滴在培养基(1)上。每次吸孢子溶液时要先将
溶液混合均匀，每瓶滴 3~5 滴。20~30 d 后，在
培养基上可见绿色小点，表明孢子已经萌发。20
d 左右可见心形原叶体。在加入活性炭的培养基
中，孢子萌发及原叶体生长速度比不含碳的培养
基上生长的快，且长势好，颜色浓绿。
4.3 原叶体增殖与继代培养 孢子萌发后1个月，
可进行继代培养。将原叶体移到培养基(2)上，即
可得到大量的配子体，30 d 可增殖 15~20 倍。
4.4 孢子体诱导与增殖 原叶体叶片长到3 mm左右
时，将其转移到培养基(3)上培养，20 d后可见有
孢子体形成。为了得到更多的孢子体，可将其转
移到培养基(4)上进行继代培养，每株孢子体均可
大量增殖。未分化的原叶体可继续在培养基(3)上
培养，一段时间后仍可形成孢子体。在孢子体诱
导过程中，要注意经常向培养基中喷水，可以促
进孢子体形成。
4.5 生根培养与移栽 将孢子体转移到培养基(5)
上，30 d 左右即可见有根长出，生根率可达90%
以上。待孢子体长到 3 cm 左右、根长到 2 cm 左
右时，即可将其移到栽培基质中进行驯化。移栽
时将试管苗根部培养基洗净，移植到经高温消毒
的松针土和细沙混合(1∶1)的基质上，覆上薄膜
保湿，湿度保持在90% 以上，放到荫凉处。10 d
后可去掉薄膜，但仍要遮荫保湿，不可放在强光
下。移栽成活率可达 9 0 % 左右。
5 意义与进展 多齿蹄盖蕨属蕨类，蹄盖蕨科蹄
盖蕨属低等植物。生长于海拔300~400 m 的针阔
混交林中较潮湿的林下、林缘及草地上。我国东
北、华北等地广有分布。拳状嫩叶可食，5~6 月
间采集没有展开的叶和幼茎，其营养成分十分丰
富，且具有保健功能，产品可加工成盐渍、干
制品等，是深受人们喜爱的绿色保健食品，同时
也是出口创汇的主要野生蔬菜之一。近年来，由
于过度采集，资源遭到破坏，产量锐减，传统
的根茎繁殖方法繁殖系数低、不便运输，且挖掘
根茎，地表植被破坏，造成水土流失。采用孢
子培养方法既不破坏资源，又利于其大量繁殖，
为保护种质资源和大规模栽培利用提供了一条可能
的途径。多齿蹄盖蕨孢子的组织培养尚未见报
道。