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铁线蕨的组织培养及植株再生



全 文 :植物生理学通讯 第 40卷 第 5期,2004年 10月 575
铁线蕨的组织培养及植株再生
彭晓明 曾宋君*
中国科学院华南植物研究所华南植物园,广州 510520
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Adiantum capillus-veneris
PENG Xiao-Ming, ZENG Song-Jun*
Botanical Garden, South China Institute of Botany, Chinese Academy of Sciences, Guangzhou 510520
收稿 2003-10-08 修定   2004-03-22
资助  广东省高新技术成果孵化项目(97FF11)。
* 通讯作者(E-mail:zengsongjun@scib.ac.cn, Tel: 020-
37252978)。
1 植物名称 铁线蕨(Adiantum capillus-veneris)。
2 材料类别 茎尖。
3 培养条件 (1)愈伤组织诱导培养基:MS+6-BA
2.0 mg·L-1(单位下同) ;(2)愈伤组织继代增殖培养
基:MS+6-BA 1.0;(3)愈伤组织分化培养基:1/2MS+
6-BA 0.5;(4)再生植株壮苗培养基:1/2MS+
6-BA 0.1;(5)生根培养基:1/2MS+NAA 0.5。 以
上培养基均含蔗糖30 g·L-1、琼脂0.7%,pH 5.5~
5.8。培养温度(25±2)℃,光照度1 500~2 000 lx,
光照 12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获取 取铁线蕨盆栽植株土中冒出
尚未能展开形成叶的幼嫩茎尖为外植体,用自来
水洗净后,在超净工作台上用75%酒精浸泡30 s,
再用 0.1% 升汞浸泡3 min,无菌水冲洗3次。第
二次用 0.1% 升汞浸泡 2 min,无菌水冲洗 5 次。
将表面消毒的外植体茎尖接种到愈伤组织诱导培养
基 上 。
4.2 愈伤组织诱导与增殖 茎尖在愈伤组织诱导培
养基上,在光照条件下,经 60 d 培养,开始出
现绿色细小晶体状愈伤组织。继续培养 10 d 后,
将诱导分化出的愈伤组织转到愈伤组织继代增殖培
养基中培养,生成的愈伤组织结构致密,生长速
度较缓慢。初期每60 d继代 1次,每继代1次愈
伤组织块体积扩大约 1 倍。随着继代代数的增
加,增殖速度逐渐加快,愈伤组织的颜色也由绿
色转为墨绿色。继代 5 代后,愈伤组织体积增殖
1 倍,平均时间缩短为 45 d 左右。
4.3 愈伤组织分化 取继代后的愈伤组织块接种到
愈伤组织分化培养基上,在同样条件下培养,30 d
后在愈伤组织块上逐渐长出灰绿色的丝状体,继
续培养后形成绿色细长丛生状丝状体。切取丛生
状丝状体转到再生植株壮苗培养基上,10 d后丝
状体慢慢长出茎和小叶,形成丛生小苗(图 1)。
4.4 生根与移栽 将分化出茎、叶的丛生小苗转入
生根培养基中培养 30 d 可生根出瓶,生根率达
100 %。在广州地区,铁线蕨的出瓶宜选择天气
凉爽的 10月份至翌年 4月份。此时气温介于 10~
30℃之间,移栽成活率高。夏季高温对铁线蕨的
生长有一定的影响。铁线蕨瓶苗出瓶可不经炼
苗,直接从培养瓶中取出生根苗,洗净附着的培
养基,在0.1%的高锰酸钾水溶液中浸泡3~5 min
后,用椰糠种植。种植前先将椰糠用水浇透,小
苗种好后再浇透定根水,放在覆盖有 95% 遮阳网
的塑料大棚内养护。定植初期,注意喷雾保湿,
1 周后小苗可定根生长。成活率 95% 以上。2 周
后可用 0.1% 的尿素水肥给小苗施肥,每周 1 次,
养护 1 个半月可上盆种植。
5 意义与进展 铁线蕨姿态文静、幽雅,株形、叶
形优美,是蕨类植物中最具观赏价值的小型室内
盆栽植物,深受人们的喜爱。传统的繁殖方法主
要以分株繁殖为主,繁殖速度慢,根茎易老化,
造成植株过高,退化,观赏价值下降。用组织
培养技术可极大地提高繁殖系数,恢复品种观赏
特性,是一条值得考虑的途径。以铁线蕨幼嫩茎
尖诱导愈伤组织和植株再生尚未见报道。
图1 铁线蕨的丛生小苗