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乐昌含笑的离体快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 41卷 第 1期,2005年 2月 67
乐昌含笑的离体快速繁殖
蒋泽平* 王国良 梁珍海 吴刚
江苏省林业科学研究院,南京 211153
In vitro Rapid Propagation of Michelia chapensis
JIANG Ze-Ping* , WANG Guo-Liang, LIANG Zhen-Hai, WU Gang
Jiangsu Academy of Forestry, Nanjing 211153
收稿 2004-05-26 修定   2004-08-09
* E-mail:zpjiang1288@hotmail.com, Tel: 025-
52745600×8041
1 植物名称 乐昌含笑(Michelia chapensis)幼、成
年母树。
2 材料类别 带腋芽的茎段。
3 培养条件 (1)启动培养基:改良MS+6-BA 2.5
mg·L-1(单位下同)+TDZ 0.1+IAA 0.25;(2)分化培
养基和继代培养基:改良MS+6-BA 2.0+TDZ 0.05+
IAA 0.2; (3)壮苗培养基:改良MS+6-BA 1.0+TDZ
0.05+IAA 0.25。上述培养基均添加3%蔗糖、0.7%
卡拉胶。 (4)生根培养基:改良MS+IBA 0.5+NAA
0.3,添加2%蔗糖、0.7%卡拉胶。培养基pH 5.6~
6.2。培养温度(27±2)℃,光照度2 000 lx,光照
时间12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 外植体来源 有两种类型的外植体:一种是一年
生幼苗上采集的腋芽茎段,另一种是从成年大树
上采取的腋芽茎段。
4.2 启动培养 取带腋芽的茎段,剪去叶片,留叶
柄基部,用少许洗衣粉溶液轻轻刷干净枝条,用
自来水冲洗 30 min。在超净台上,以 70% 的酒
精溶液浸30~60 s,再用 0.1%升汞溶液消毒后用
无菌水冲洗 5 ~ 6 次,将茎段接种在启动培养基
上。结果一年生幼苗上采取的腋芽茎段消毒 6~8
min,存活率高,污染率低;成年母树消毒 8~10
min,成活率高。两种类型无菌茎段在启动培养
基中,幼苗上取材的腋芽茎段,15 d 左右腋芽开
始萌动,35 d 长成 1.5~2.0 cm 高、数量较多的
嫩梢;成年母树取材的腋芽茎段,20 d 腋芽开始
萌动,40~45 d 后长成 1.5 cm 高、数量较少的嫩
梢。
4.3 诱导分化培养 切取启动培养萌动的嫩梢,转
入分化培养基中。幼苗外植体类型的嫩梢35~40 d
增殖倍数 3.5,分化频率高达 80%;而成年母树
外植体类型的嫩梢40~45 d增殖倍数2.8,分化频
率 4 0 % 。由此可见,成年母树腋芽茎段为外植
体,分化难,增殖周期长,增殖系数小。
4.4 壮苗培养 选取继代培养的嫩梢,在壮苗培养
基上生长 45 d,芽苗粗壮,叶片浓绿,叶形正
常,生长高度 3.0 cm。
4.5 生根及移栽 将高为3.0 cm 的嫩梢,转到生根
培养基,幼苗外植体类型经10~15 d 培养,长出
根正常,侧根多,生根率达 8 0 % ;而成年母树
外植体类型经 15~20 d 培养,少数生根,绝大
部分根系生长不良,侧根少,生根率达 30%。将
根系生长正常的试管小苗,移栽在砻糠灰、黄心
土(体积比为 3∶2)混合的基质中,第一次浇透
水,用薄膜覆盖保湿,置于 23~28℃的智能温室
中,遮荫。3~4 周后,移栽成活,成活率 75%。
5 意义与进展 乐昌含笑又名景列含笑,为南方的
兰花,是含笑属中较为耐寒的常绿树种。其树形
壮丽,枝叶稠密,花黄色带绿,芳香优美,观
赏价值高,苏、浙、沪等长江三角洲地区常作
优良绿化观赏树种栽培。乐昌含笑多用种子育
苗,种子量少、价高,发芽率较低,且易产生
变异。选择性状优良的母树,采用组培方法可能
有助于规模化培养,保持其原来性状,并获得整
齐一致的优质种苗。乐昌含笑的组培快繁未见报
道。