全 文 ：植物生理学通讯 第 40 卷 第 2期，2004 年 4 月 197
澳洲青苹茎尖培养与快速繁殖
张志勤* 张铮 王喆之
陕西师范大学生命科学学院, 西安 710062
Stem Tip Culture and Rapid Propagation of Malus pumila ‘Granny Smith’
ZHANG Zhi-Qin*, ZHANG Zheng, WANG Zhe-Zhi
College of Life Sciences, Shaanxi Normal University, Xi’an 710062
收稿 2003-03-31 修定　 2003-06-30
* E-mail:zhangzhq5555@yahoo.com.cn, Tel:029-5308451
1 植物名称 苹果(Malus pumila)品种澳洲青苹。
2 材料类别 茎尖。
3 培养条件 以MS为基本培养基。(1)起始培养基：
MS+6-BA 0.3 mg.L-1(单位下同)+ NAA 0.1+3%蔗糖；
(2)增殖培养基：MS+6-BA 0.5+NAA 0.1+3% 白砂
糖；(3)生根培养基：1/2MS+IBA 0.7+NAA 0.1+PP333
1.0+2% 白砂糖。以上培养基均加入琼脂 6 g.L-1，
pH 5.8，在 121℃、0.11 MPa 灭菌 25 min。培
养温度20~27℃，光照12 h.d-1，光照度2 000 lx。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 取大田栽培的盛果期优良单
株的无病虫害健壮营养枝为母本，温室保湿沙
培，选择萌发的腋芽和顶芽长约1.5 cm的新梢为
外植体。先去掉已展开幼叶，流水冲洗 1~2 h，
再在超净台无菌条件下，70% 酒精处理15~30 s，
无菌水冲洗 2~3 次，0.1% HgCl2 表面消毒 6~8
min，无菌水冲洗 4~5 次。最后将材料移至垫有
滤纸的培养皿中，吸干表面水分，解剖镜下剥取
茎尖，接种于1/2MS0 培养基上。每12~24 h转接
1 次，连续 3~5 次至不再褐化后，转接到起始培
养基(1)上。接种1周后茎尖萌发生长，5周可长
到 5 cm 高、带 4~6 片叶的单茎小苗，此时可进
行腋芽增殖。
4.2 腋芽增殖 将经初始培养或增殖培养的试管
苗剪切成带 1~2 片叶的茎段，接种到培养基(2)
上。培养35 d左右，每个茎段的腋芽又可萌发长
成主茎5~7 cm 高、具 5~8 片叶，侧茎2~4 个 2~4
cm 高、具 3~4 片叶的多茎小苗。这样的小苗又
可进行下一代增殖。每一个初始培养的茎尖以繁
殖15~20 代为好。按照这种方法可大量繁殖组培
苗，每35 d繁殖系数达8.3以上。培养条件如前。
4.3 扩繁生根与炼苗 无菌条件下将经增殖后欲生
根的组培苗的上部茎段切成1.5~2 cm长、带 1~2
片叶的茎段，接种到培养基(3)上，18~22℃条件
下暗培养 7 d。然后转接到 1/2 MS0 上，移至温
室或大棚，在自然光下进行长苗、生根、炼苗，
温度21~32℃，自然光的光照度5 000~25 000 lx，
光照时间9~11 h.d-1。经18~22 d即可产生4~7条
0.5 cm以上根，生根率86.44 %。闭盖培养炼苗
20~25 d，待具 5片以上完全叶、苗高4 cm以上，
便可开盖炼苗5~10 d。炼苗时培养瓶加0.5~1.0 cm
深自来水防污、保湿。
4.4 移栽 选择气候温和的春秋季、冬季在大棚或
温室进行移栽。以营养土(蛭石、腐殖土、田园
土以 2∶1∶1 混合)为基质，50% 多菌灵或敌可
松 500 倍液处理，用 NAA 50+50% 多菌灵可湿性
粉剂1.25 g.L-1 + 细土100 g.L-1溶液浸渍1~2 h。
移栽容器为塑料钵或苗床，移栽时浇足水，覆塑
料膜保湿70% 以上，7 d 后逐渐通风至完全揭膜。
期间喷洒营养液及 1 000 倍 50% 多菌灵液，成活
率可达 85.07%。
5 意义与进展 澳洲青苹是加工、鲜食兼用的优
良品种。经过多年栽培，适应我国西部的生态条
件，不仅可作为老园更新品种，还可用作退耕还
林树种。近年来澳洲青苹的栽培面积正在迅速扩
大，茎尖组培育苗不仅繁殖系数高、成苗快且基
因型稳定一致，故种苗整齐、一致、质量好。
本文用自然光下培苗与炼苗同步进行的快速成苗
法，建立了两步成苗、两步生根、一次移栽的
组培快繁体系，减少了工序，节省了能源，降
低了成本，并实现了工厂化生产。