全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第4期,2006年8月688
九节茶的组织培养和快速繁殖
朱淑颖1,2 曾宋君1 段俊1 梁承邺1 陆颂规3 张明永1,*
1 中国科学院华南植物园,广州 510650;2 中国科学院研究生院,北京100039;3 广州敬修堂(药业)股份有限公司,广
州510130
Tissue Culture and Rapid Propagation of Sarcandra glabra (Thunb.) Nakai
ZHU Shu-Ying1,2, ZENG Song-Jun1, DUAN Jun1, LIANG Cheng-Ye1, LU Song-Gui3, ZHANG Ming-Yong1,*
1South China Botanical Garden, Chinese Academy of Sciences, Guangzhou 510650, China; 2Graduate University of Chinese
Academy of Sciences, Beijing 100039, China; 3Guangzhou Jing Xiu Tang Pharmaceutical Company Limited, Guangzhou 510130,
China
收稿 2006-02-09 修定 2006-04-03
资助 广州敬修堂(药业)股份有限公司项目和广东省自然科学
基金(031262)。
* 通讯作者(E-mail: zhangmy2005@yahoo.com.cn,
Tel: 020-37252891)。
1 植物名称 九节茶[Sarcandra glabra (Thunb.)
N a k a i ],又名草珊瑚、肿节风、接骨莲。
2 材料类别 带节茎段。
3 培养条件 丛生芽诱导及增殖培养基:(1) MS+
6-BA 2.0 mg·L-1 (单位下同); (2) MS+6-BA 4.0;(3)
MS+6-BA 2.0+NAA 0.5;(4) MS+6-BA 4.0+NAA 0.5;
(5) MS+6-BA 1.0;(6) MS+6-BA 1.0+NAA 0.2;
(7) MS+6-BA 2.0+NAA 0.2;(8) MS+6-BA 4.0+
NAA 0.2。生根培养基:(9) 1/2MS;(10) 1/2MS+
NAA 0.5;(11) MS;(12) MS+NAA 0.5。以上培
养基均含30 g·L-1蔗糖、7.0 g·L-1琼脂,pH 5.7~5.9。
培养温度(25±2)℃,光强30~40 µmol·m-2·s-1,光照
时间12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 取植株枝条,洗净去叶,用
75% 酒精擦拭。剪取 2 cm 左右的带节茎段,75%
酒精浸泡 30 s,无菌水冲洗 3~4 次,0.1% 升汞
溶液(每升加 6~7滴吐温-80)消毒20 min,无菌水
冲洗3~4 次,接种到培养基(1)~(4)中。
4.2 丛生芽的诱导 培养10 d后,培养基(1)、(2)中
的腋芽开始萌动,(3)、(4)的无变化。30 d 时,
(1)、(2)中的腋芽不同程度伸长,边缘产生新的小
丛芽;(3)、(4)中的外植体保持绿色,且膨大。
75 d 时,(1)、(2)中的丛生芽叶片展开,生长良
好;(3)、(4)中的外植体长根,未见芽产生。
4.3 增殖培养 将丛芽分割接种到培养基(1)、(2)、
(5)~(8)中。继代培养35~40 d,增殖系数是培养
基(8)>(1)、(2)、(5)>(6)、(7),其中(8)的增殖系
数达4以上。(6)、(7)中丛生芽较粗壮,主芽高度
明显增加,但是增殖系数为 2~3。培养基(1)、
(2)、(5)中的增殖系数高于前者,但芽较瘦弱。
4.4 生根培养 切取高2 cm左右的单芽,转入生根
培养基(9)~(12)上,均能形成完整植株。其中培
养基(9)、(11)约 14 d即长出细长的正常根,生根
率100%,且苗长高,而(9)中的苗比(11)更粗壮,
长根数更多。(10)、(12)中苗约18 d开始长不正常
根,不增长株高,苗较瘦小。
4.5 炼苗移栽 生根培养23 d左右的苗,在自然光
照下炼苗 4~5 d 后出瓶。取出试管苗,洗掉根部
培养基,栽入由泥炭土和河沙(1:1)混合成的基质
中。注意浇水、遮荫、保温,培养基(9)、(11)
中的生根苗成活率达 90% 以上,(10)、(12)中的较
低。
5 意义与进展 九节茶为金粟兰科草珊瑚属多年生
常绿草本或亚灌木植物,具有清热解毒、祛风活
血、抗菌消炎等作用,是一种药理作用广泛、毒
性低的优良中药材。人工栽培中常用的扦插和播
种繁殖的速度慢、增殖率低,无法满足生产需
求。随着以九节茶为原料的新产品的不断开发,
对九节茶原料的需求量越来越大,无限制地采挖
使野生资源遭到严重破坏。九节茶组织培养和快
速繁殖的成功,为保护和持续利用其野生资源提
供了有力的技术保障,也可对实现该中药材 GAP
规范化管理起到积极的指导作用。九节茶的离体
快速繁殖尚未见报道。