全 文 ：植物生理学通讯 第 43卷 第 5期，2007年 10月876
蝴蝶兰花梗节间切段的类原球茎诱导与增殖
苏家乐 1，陈尚平 1，汤久顺 2，何小弟 2,*，李晓刚 1，姜维华 2
1 江苏省农业科学院园艺研究所，南京 210014；2 扬州大学农学院，江苏扬州 225009
提要：采用不同基本培养基和生长调节物质浓度组合，诱导蝴蝶兰花梗节间切段形成类原球茎和增殖的结果表明，花梗
可见后 10 d的切段诱导效果较好，较适宜的培养基为N6+5.0 mg·L-1 6-BA +0.2 mg·L-1 KT + 2 mg·L-1活性炭。活性炭控制
外植体褐化的效果明显优于维生素C。类原球茎增殖的适宜培养基为1/3MS+0.3 mg·L-1 TDZ +0.2 mg·L-1 NAA+2 g·L-1活性炭。
关键词：蝴蝶兰; 类原球茎; 诱导; 增殖
Protocorm-like Body Induction and Propagation of Phalaenopsis by Using the
Cutting Segment of Lower-stem-knot as Explants
SU Jia-Le1, CHEN Shang-Ping1, TANG Jiu-Shun2, HE Xiao-Di2,*, LI Xiao-Gang1, JIANG Wei-Hua2
1Institute of Horticulture, Jiangsu Academy of Agricultural Science, Nanjing 210014, China; 2College of Agriculture, Yangzhou
University, Yangzhou, Jiangsu 225009, China
Abstract: The cutting segment of lower-stem-knot of the Phalaenopsis was used as explant to study PLB
(protocorm-like body) induction and propagation by different basic medium formula with growth regulation
substance. The result showed that the induction effect was the best at 10 d among cutting section of flowers-
stem-knot from different growth phase, N6 medium supplemented with 6-BA 5.0 mg·L-1+KT 0.2 mg·L-1+AC 2
g·L-1 was the optimum medium for PLB induction, and AC could keep less browning than Vitamin C. 1/3MS
medium supplemented with TDZ 0.3 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1+ AC 2 g·L-1 was the optimum medium for propa-
gation of PLB.
Key words: Phalaenopsis schilleriana; protocorm-like body; induction; propagation
收稿 2007-06-28 修定 2007-09-14
基助 江苏省农业三项工程项目[SX(2 006)11 8]。
* 通讯作者(E-mail：he8068@163.com；Tel：0514-7979395)。
蝴蝶兰(Phalaenopsis sp.)属热带气生兰，多
产亚洲，其花型似蝴蝶，色泽丰富，花期长达
1~2 个月，在洋兰中素有“洋兰皇后”的美称
(刘晓荣等 2005)。生产用的蝴蝶兰优良品种多
为杂交一代，种子繁殖会发生种性分离现象，
因此只能用无性繁殖方法繁殖。蝴蝶兰单茎气
生，多数品种不发生分株，茎为短缩鳞球，难
于用常规无性繁殖方法繁殖，组织培养是建立
蝴蝶兰快速繁殖无性系的手段之一。近几年来
关于蝴蝶兰组织培养的报道较多，外植体多取
用花梗芽(张元国等 2004)，而以花梗节间切段
培养繁殖的报道尚少见。花梗节间切段诱导频
率明显高于其他外植体(鲁雪华等 2002)，用花
梗节间切段诱导类原球茎有明显的优势，能在
较短的时间内形成类原球茎， 提高诱导率，有
较大的生产应用价值。
本文以蝴蝶兰花梗为外植体，探讨不同培养
条件对其类原球茎诱导和增殖的影响，以期建立
高效的花梗再生和增殖体系，为生产服务。
材料与方法
材料为江苏省农科院智能温室内种植的银斑
蝴蝶兰(Phalaenopsis schilleriana)。花梗来自当年
生花茎。按照花梗的幼嫩程度分成 5个处理，分
别采用花梗可见后 10、20、30、40和 50 d的花
梗。取顶端下第 2 节花梗节间的切段用于试
验。
从母体切下的花梗切割成 3~5 cm长的切段，
用流水冲洗干净，在超净台上，先用 70% 酒精
浸泡 20 s，再用 0.1% HgCl2水溶液浸泡 6 min，
无菌水冲洗 5次，茎段两端各剪去 0.5 cm后接种。
诱导类原球茎的试验：设有基本培养基N6加
植物生理学通讯 第 43卷 第 5期，2007年 10月 877
入浓度分别为 1.0、5.0、10.0 mg·L-1 的 6-BA和
浓度为 0.2 mg·L-1的KT的处理。最初 30 d于暗
中培养。培养基中加入维生素C (VC) (0、20 mg·L-1)
和活性炭(AC) (0、2 g·L-1)，60 d后统计数据。
类原球茎增殖试验有选用 N6、MS、1/3MS
(大量元素减至 1/3)、花宝 1号(Hyponex 1) 4种
基本培养基。生长调节物质有浓度分别为 0.1、
0.3、0.5 mg·L-1的苯基噻二唑脲(TDZ)，和浓度
分别为 0.1、0.2、0.3 mg·L-1的 NAA。所有培
养基均加 2%蔗糖、6.8%琼脂粉和 2%活性炭，
pH 5.2~5.4，培养温度为(26±2) ℃，光照强度为
30~40 µmol·m-2·s-1，每天连续光照 12 h。2个月
后统计类原球茎的增殖量和增殖倍数(刘真华等
2005)。
结果与讨论
1 花梗节间幼嫩程度对类原球茎诱导率的影响
从表 1可见，在 N6培养基上，不同幼嫩程
度的类原球茎分化率有较大差异，花梗越幼嫩，
诱导率越高，以花梗生长时间为 10 d的诱导率最
高(达 30%)，20 d的次之(25%)，30 d以后的仅
为 4%，50 d的则不能诱导出类原球茎。类原球
茎的生长也是越是幼嫩花梗诱导的类原球茎生长情
况越好，30 d后，虽有少量萌动，但褐化严重，
长出的植株不健壮。
BA浓度的增加而增大，6-BA的浓度大于 5 mg·L-1
时，诱导率下降，这可能是 6-BA促进组织褐化
(李冬杰等 2005)，尤其是高量 6-BA会使组织严重
褐化之果；从类原球茎生长情况来看，加活性炭
和 VC的外植体褐化均减弱，活性炭的效果优于
V C。
表 1 花梗生长时间对类原球茎诱导率的影响
Table 1 Effects of the pedicel growth time on induction rate
of protocorm-like body (PLB)
花梗生长时间 /d 诱导率 /% 类原球茎生长情况
1 0 3 0 生长较快
2 0 2 5 生长良好，轻度褐化
3 0 4 少量萌动发育，褐化严重
4 0 6 褐化严重，生长缓慢
5 0 0 失绿坏死
2 不同生长调节物质对类原球茎诱导的影响
取花梗可见后第10天的幼嫩花梗节间段切成
1.0~2.0 mm薄片，迅速接种于N6培养基中的结果
(表 2)表明，类原球茎诱导率在一定范围内随着 6-
表 2 不同生长调节物质对类原球茎诱导的影响
Table 2 Effects of different growth regulation substances on
protocorm-like body formation from the cutting segment of
lower-stem-knot of Phalaenopsis
6-BA/ 维生素 C/ 活性炭 / 诱导率 /% 类原球茎
mg·L-1 mg·L-1 g·L-1 生长情况
1.0 0 0 0 变褐坏死
1.0 2 0 0 0 失绿坏死
1.0 0 2 0 不萌动
5.0 0 0 9 褐化严重
5.0 2 0 0 2 2 生长良好，
稍有褐化情况
5.0 0 2 2 5 生长良好
10.0 0 0 0 失绿坏死
10.0 2 0 0 1 0 少量萌动
10.0 0 2 1 5 生长缓慢
图 1 不同培养基对类类原球茎增殖的影响
Fig.1 Effects of different media on propagation of PLB
3 不同培养基和生长调节物质对类原球茎增殖的
影响
图 1和图2显示：(1)类原球茎在1/3MS培养基
中的增殖系数最高为 4.40，N6培养基次之，增殖
系数为 3.88，MS仅为 2.20，增殖系数最差的为花
宝 1号培养基，仅为 1.60。削减大量元素的用量，
即降低无机盐的浓度有利于 PLB的增殖(刘晓燕等
2005)，这可能是低盐可降低组织褐化(谭文澄和戴
植物生理学通讯 第 43卷 第 5期，2007年 10月878
策刚 1997)，从而有利于类原球茎增殖之果。
图 2 生长调节物质组合对原球茎增殖的影响
Fig.2 Effects of gowth regulation substance combinations on
propagation of PLB
(2)在 1/3MS+150 mg·L-1 椰乳基本培养基中分
别附加浓度为 0.1、0.3和 0.5 mg·L-1 TDZ的，加
入的NAA浓度增加，类原球茎的增殖系数呈增长
趋势；浓度分别为 0.1、0.2、0.3 mg·L-1 NAA中，
类原球茎增殖系数均呈先高后低的趋势，以加 0.3
mg·L-1 TDZ的类原球茎系数为最高，最高达 6.3
(图 2 )。
参考文献
李冬杰, 张进献, 魏景芳, 李世杰(2005). 培养基和培养条件与红
豆杉细胞培养中褐化的关系. 植物生理学通讯, 41 (1): 96~
9 8
鲁雪华, 郭文杰, 徐立晖, 林新华(2002). 蝴蝶兰花梗节间段培养
繁殖的初步研究. 园艺学报, 29 (5): 491~49
刘晓荣, 王碧青, 朱根发, 程智慧(2005). 影响蝴蝶兰生长发育的
环境因子及花期调控研究进展. 西北农业学报, 14 (4): 81~
8 5
刘真华, 葛红, 郭绍霞, 刘洪涛, 曹灿景, 周玉杰, 李秋香 (2005).
蝴蝶兰组织培养中的褐化控制研究. 园艺学报, 32 (4): 732~
734
谭文澄, 戴策刚(1997). 观赏植物组织培养技术. 北京: 中国林业
出版社, 150~156, 234~241
张元国, 刁家连, 刘玉娥, 李芳, 包艳存, 刁希强 (2004). 蝴蝶兰花
梗腋芽组培再生技术体系的研究. 山东农业科学, (6): 3~5