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杜衡的组织培养



全 文 :植物生理学通讯 第 40 卷 第 4期,2004 年 8 月454
杜衡的组织培养
李洪林 龙云铭 杨波*
中国科学院武汉植物研究所武汉植物园,武汉 430074
Tissue Culture of Asarum forbesii
LI Hong-Lin, LONG Yun-Ming, YANG Bo*
Wuhan Botanical Garden, Wuhan Institute of Botany, Chinese Academy of Sciences, Wuhan 430074
收稿 2003-07-15 修定   2003-10-08
  * 通讯作者(E-mail:yangbo@rose.whiob.ac.cn, Tel: 027-
87510054)。
1 植物名称 杜衡(Asarum forbesii)。
2 材料类别 幼嫩顶芽或侧芽。
3 培养条件 基本培养基为MS。(1)芽增殖培养基:
MS+6-BA 5.0 mg·L-1(单位下同)+NAA 0.1+GA3 5.0;
(2)壮苗培养基:MS+6-BA 2.0+NAA 0.1;(3)生根
培养基:1/2 MS+NAA 0.5。以上培养基中蔗糖
浓度(1)和(2)为3.0%,(3)为2.0%;琼脂7.0 g·L-1,
pH 5.4~5.6。培养温度为(25±2)℃,连续光照12
h·d-1,光照度 2 000 lx。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 剪取带腋芽的茎段或顶芽,
用毛刷蘸少许洗衣粉将其表面刷洗干净,再用自
来水漂洗 3~5 次,置超净工作台上,于无菌条件
下先用75%酒精浸泡30 s,再用0.1%升汞浸泡12
min,无菌水冲洗 3 次,每次 3~5 min,无菌滤
纸吸干表面水分。将带有1~2个节的茎段接种到培
养基(1)中,培养20~30 d后,在节间长出丛生芽。
4.2 快速增殖 将获得的无菌丛生芽切开(1丛2~4
个芽),转接入培养基(1)中继代培养,经过30~40 d,
可长出10个以上的丛生芽。反复分切丛生芽,在
培养基(1)中进行增殖培养,可以获得大量的丛生
芽 。
4.3 壮苗 将增殖的丛生芽接入到培养基(2),丛生
芽可逐渐长大,30 d 时可转入生根培养。
4.4 生根和移栽 将带2~3片叶的无根苗切下,接
入培养基(3)中培养。20 d左右开始长出不定根,
30 d左右生根率达到99%(图 1)。根的数量较少,
平均每株苗 2.7 条根,但根十分粗壮。
移栽前将瓶盖打开,室温下炼苗 1~2 d 后,
取出试管苗,洗去其根部培养基,移栽到事先准
备好的苗床上(泥炭)。环境温度保持20~25℃,湿
度 85%~90%,适当遮荫,成活率可达 99% 以上。
4~5 周后即可带土移栽。
5 意义与进展 杜衡属马兜铃科细辛属多年生草本
植物,是名贵的中草药。具有散风逐寒、消痰
行水、活血平喘、定痛等功效,还可治风寒感
冒、痰饮喘咳、水肿、风湿、跌打损伤、头
疼、龋齿痛、痧气腹痛等。其主要药用成分是
黄樟醚(safrole)和少量的丁香浊酚(eugend)。杜衡
的繁殖一般用分蔸和种子播种两种方法。前法速
度太慢,所需的母株材料较多;后法则后代性状
易分离,不能保持母株的优良特性,不能符合杜
衡的中药材生产管理规范(good agricultural practice,
GAP)。杜衡的组培快繁能够在短时间内获得大量
的种苗,把握杜衡 G A P 的源头。杜衡的组织培
养尚未见报道。
图1 杜衡的生根苗