全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第6期,2006年12月 1131
滇杨的组织培养和植株再生
张春霞 樊军锋* 黄建 高建社
西北农林科技大学林学院,陕西杨凌 712100
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Populus yunnanensis Dode
ZHANG Chun-Xia, FAN Jun-Feng*, HUANG Jian, GAO Jian-She
College of Forestry, Northwest A & F University, Yangling, Shaanxi 712100, China
1 植物名称 滇杨(Populus yunnanensis Dode),别
名云南白杨。
2 材料类别 叶柄。
3 培养条件 不定芽诱导培养基:(1) 1/2MS+苯基
噻二唑基脲(TDZ) 0.005 mg·L-1 (单位下同)+NAA
0.01;继代增殖培养基:(2) 1/2MS+TDZ 0.001+NAA
0.01;生根培养基:(3) 1/2MS+NAA 0.01。上述
培养基中均加20 g·L-1蔗糖和 4.5 g·L-1琼脂粉,
pH 5.8。培养温度为(25±1)℃,光照时间16 h·d-1,
光强约 40 mmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 初春,从云南植物园采集二
年生滇杨枝条,将枝条在室温下水培 1 个多月后
长出新叶。取新生叶柄,于自来水下冲洗 2 h,
放入无菌三角瓶内,加入稀释 20 倍的 84 消毒液
(有效氯含量大于5.5%)振荡 8 min,无菌水冲洗
3遍,再加70%酒精消毒40 s,之后加0.1% HgCl2
消毒5 min,最后用无菌水冲洗6遍(每次1 min),
即得无菌材料。
4.2 不定芽的诱导 将无菌叶柄切成0.8~1.0 cm的
小段,接入培养基(1)中,1周后叶柄两端开始膨
大,10 d 后有绿色芽点产生,生长至 30 d 时长
出丛生苗,平均可伸长至0.8 cm (图 1)。
4.3 芽的增殖培养 30 d后,将培养基(1)中长出的
丛生不定芽转入培养基(2)中,可以继续增殖。
4.4 生根培养 将长至3 cm左右的不定芽从外植体
上切下,转入生根培养基(3)中,15 d时平均每苗
可长出3~4 条根,长约2.5 cm,生根率达100%。
4.5 试管苗移栽 将高4~5 cm的试管苗去掉瓶口封
口膜,放在组培室中锻炼 3 d 后,小心去除根上
培养基并用无菌水冲洗干净,移栽到培养基质(草
木灰: 珍珠岩 = 1 :1 ) 中,空气相对湿度保持在
70%~80%,温度 26℃。移栽30 d 的成活率在90%
以 上 。
5 意义与进展 滇杨属杨柳科杨属,是我国西南地
区特有的一种乡土树种,也是全国乃至世界少有
的分布于低纬度高海拔地区的宝贵杨树资源,具
有速生、耐寒、抗叶锈病和叶斑病等优良特性。
滇杨的开发和利用不仅可为我国杨树育种提供新的
基因资源,还可为我国高原地区的造林绿化提供
一个好的树种。滇杨仅分布于云南等西南地区,
建立滇杨的高效组织培养再生体系,对其种质资
源的收集和保存、工厂化育苗及杂交育种都有一
定的意义。目前,国内已有杨树组织培养和快速
繁殖的报道(康冰等2004;李红等2003;易丽娟
等 2004),而滇杨的组织培养和快速繁殖尚无报
道。
参考文献
康冰, 王关平, 陈彦生(2004). 速生欧美黑杨愈伤组织诱导及植株
再生. 植物生理学通讯, 40 (5): 582
李红, 王关林, 李洪艳, 刘秀梅(2004). 美洲黑杨的组织培养及快
速繁殖. 植物生理学通讯, 40 (6): 708
易丽娟, 曾幼玲, 吕艳, 梅新娣, 张富春(2004). 中林美荷杨叶柄的
组织培养及植株再生. 植物生理学通讯, 40 (5): 576
图1 滇杨叶柄诱导丛生芽
收稿 2006-07-17 修定 2006-09-28
资助 陕西省科技厅项目(2003K02-G8)。
*通讯作者(E-mail: fanjf@public.xa.sn.cn, Tel: 029-87036339)。