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野生山丹的组织培养和快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第41卷 第5期,2005年10月 641
野生山丹的组织培养和快速繁殖
刘冬云* 梁海永 史宝胜 张彦广 杨敏生
河北农业大学园林与旅游学院,河北保定071000
Tissue Culture and Rapid Propagation of Lilium pumilum DC.
LIU Dong-Yun*, LIANG Hai-Yong, SHI Bao-Sheng, ZHANG Yan-Guang, YANG Min-Sheng
College of Gardens and Tourism, Hebei Agricultural University, Baoding, Hebei 071000, China
收稿 2004-10-25 修定   2005-03-16
资助  河北省林业局项目(0209218)。
*E-mail: liudongyun0505@163.com,Tel: 0312-7528767
1 植物名称 山丹(Lilium pumilum DC.),别名细叶
百 合 。
2 材料类别 鳞片。
3 培养条件 (1)诱导培养基:MS+6-BA 2.0 mg·L-1
(单位下同)+NAA 0.1;(2)增殖培养基:MS+6-BA
1.0+NAA 0.1;(3)壮苗培养基:MS+6-BA 1.0+
PP333 4.0;(4)生根培养基:1/2MS+IBA 0.5。以
上培养基均附加 0.6% 琼脂、3% 蔗糖、0.1% 肌
醇,pH 5.8。培养温度为(25±2)℃,光照度为
1 500~2 000 lx,光照时间12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 外植体的处理 取山丹鳞茎为外植体,在流水
条件下将外植体的泥土冲洗干净,将鳞片一片片
剥下,经洗涤剂浸泡 10 min,用自来水冲洗干
净,在无菌的超净工作台上,用75% 的酒精处理
30 s,再用 0.1% 升汞灭菌 20 min,最后用无菌
水淋洗 4~6 次。用无菌滤纸吸干表面的水分,用
解剖刀将鳞片切割为0.5 cm×0.5 cm大小的方块,
接种至诱导培养基上。
4.2 不定芽的诱导 外植体鳞片接种后的2~3 d内,
大部分鳞片切块由白色变为淡紫红色。7 d左右,
多数鳞片又逐渐转变为淡绿色,而没有变色的鳞
片极少分化小鳞茎。20 d左右,鳞片腹面生理学
基部出现白色球状突起,再过 7 d 左右,球状突
起长出不定芽,不定芽逐渐形成小鳞茎。
4.3 增殖培养 将诱导出的不定芽切成单株,转接
到增殖培养基(2)。培养 30 d 左右,从转接小鳞
茎基部形成新的不定芽,并长成新的小鳞茎。月
增殖速度为 4.43 倍。
4.4 壮苗培养 增殖培养得到的小鳞茎较小,平均
重0.13 g。将增殖后的小鳞茎切成单株,转接到
壮苗培养基(3),培养40 d左右,平均增重 2.05 g。
4.5 生根培养及移栽 将壮苗后的山丹小鳞茎切下,
转入生根培养基,4 d 左右即可生根,生根率达
100%。根粗壮,平均每个小鳞茎生根 8.8 条,平
均根长为2.9 cm,苗长势较好。进行1周左右的
闭瓶炼苗,再进行 2~3 d 的开瓶炼苗,然后转入
荫棚栽植。移栽时,小心倒出试管苗,用清水冲
洗根部残留培养基,然后栽入泥炭土中。基质用
1∶500 的 50% 多菌灵可湿性粉剂拌匀至潮湿状
态,上盆后的小苗喷 1∶1 000 的 50% 多菌灵可
湿性粉剂防病,以后每周喷 1 次,连续喷 4 ~ 5
次。保持苗床温度为 22~28℃,空气相对湿度为
85%~90%,基质湿度 30%~40%。移栽成活率达
96. 7 %,植株长势良好。
5 意义与进展 山丹属百合科百合属多年生球根花
卉,其株形秀丽,花色鲜艳,最适宜成片种植
于疏林下、草坪边,可用于花坛、花境,还可
盆栽观赏或作切花用。山丹适应性强,有较强的
抗寒、抗旱及抗病能力,是北方难得的绿化、美
化材料[1]。从现有资料看,有关山丹的研究多集
中在分类学和杂交育种工作上[2],繁殖主要采用
播种法及鳞片扦插法[3,4],但繁殖数量有限。本文
所用山丹为野生型,采自河北易县山区。组织培
养可以迅速扩大繁殖,结果已开始用于生产,但尚
未进入规模化。野生山丹的组培繁殖尚未见报道。
参考文献
1 龙雅宜, 张金政,张兰年. 百合——球根花卉之王. 北京: 金
盾出版社, 1999: 1~6
2 黄济明. 百合的组织培养和试管内诱发多倍体试验. 园艺学
报, 1983,10(2): 125~128
3 Chojnowski M. Germination of Lilium pumilum seeds. Acta
Hortic,1996, 325: 235~238
4 杨利平, 孙晓玉, 卞慧媛等. 细叶百合无性繁殖条件的选择.
植物研究, 2001,21(3): 398~402