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楔叶铁线蕨的离体快繁



全 文 :植物生理学通讯 第41卷 第4期,2005年8月 499
楔叶铁线蕨的离体快繁
曾宋君 陈之林 段俊*
中国科学院华南植物园,广州 510650
In vitro Propagation of Adiantum raddianum Presl.
ZENG Song-Jun, CHEN Zhi-Lin, DUAN Jun*
South China Botanical Garden, Chinese Academy of Sciences, Guangzhou 510650, China
收稿 2004-11-29 修定   2005-02-16
资助  广东省高新技术成果孵化项目(97FF11)。
*通讯作者(E-mail: duanj@scib.ac.cn, Tel: 020-37252978)。
1 植物名称 楔叶铁线蕨(Adiantum raddianum
Presl.)。
2 材料类别 叶背成熟孢子。
3 培养条件 诱导孢子萌发培养基:(1)1/2MS;(2)
1/2MS+2 g·L-1 活性炭。原叶体增殖培养基:(3)
MS+6-BA 2.0 mg·L-1(单位下同)+NAA 0.5;(4)
MS+6-BA 1.0+NAA 0.2。孢子体形成和丛生芽增
殖培养基:(5)MS+6-BA 0.5+NAA 0.1;(6)MS+6-
BA 0.2+NAA 0.2。生根培养基:(7)1/2MS+NAA
0.5;(8)1/2MS+IBA 0.5。以上培养基均含30 g·L-1
蔗糖和 0.7% 琼脂,pH 5.5~5.8。培养温度为
(25±2)℃,光照度1 500~2 000 lx,光照时间12
h ·d -1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获取 剪取已成熟、饱满且假囊群
盖未开裂的孢子叶为外植体,在超净工作台上用
75% 酒精浸泡 30 s,再用 0.1% 升汞浸泡 3 min,
无菌水冲洗 5 次后,切成 1~2 cm 的方块,叶面
朝下接种到孢子萌发培养基(1)、(2)上。
4.2 孢子体萌发 经10~25 d的培养,培养基(1)、
(2)中能见到由孢子萌发而来的松软的丝状体;再
过 10~25 d,形成类似于兰花原球茎的绿色的小
球。小球能在培养基上迅速增殖,其中(2)的萌发
速度比(1)快。在相同的培养基上继代,均可见到
体积较大的心形的原叶体形成。
4.3 原叶体的增殖 将孢子萌发而来的原叶体接种
到原叶体增殖培养基(3)、(4)上,原叶体能进行快
速增殖,(3)的增殖速度比(4)快。多次继代后,
能形成大量的原叶体,随着继代代数的增加,培
养基(4)中有少量丝状的孢子体形成。
4.4 孢子体的形成和增殖 将继代的原叶体接种到
孢子体形成和丛生芽增殖培养基(5)、(6)上,30 d
左右,大部分原叶体形成具有茎叶的针状的孢子
体。在(6)中形成孢子体的速度比(5)快,(5)中在
形成孢子体的同时,原叶体能继续增殖。随着继
代的增加,在(6 )中,孢子体能大量繁殖。
4.5 生根与移栽 将已分化出茎、叶的丛生小苗切
断成小团后转入生根培养基中培养30 d可生根出
瓶,生根率达 100%。在广州地区,铁线蕨的出
瓶宜选择 10 月份到翌年 4 月份这段气温凉爽时
期。此时气温介于 10~30℃,移栽成活率高。夏
季高温对铁线蕨生长有一定的影响。铁线蕨瓶苗
出瓶可不经炼苗,直接从培养瓶中取出成团的生
根苗,洗去附于根上的琼脂,在 0.1% 的高锰酸
钾水溶液中浸泡3~5 min 后用椰糠种植。种植前
先将椰糠用水浇透,小苗种好后再浇透定根水,
放在覆盖有 95% 遮阳网的塑料大棚内养护。定植
初期应注意喷雾保湿和保温,1 周后小苗可定根
生长,成活率在 95% 以上。2 周后可用 0.1% 的
尿素水肥给小苗施肥,每周 1 次。3 个月后再分
株上盆种植,3 ~ 4 株一盆。
5 意义与进展 楔叶铁线蕨为铁线蕨科铁线蕨属的
多年生常绿草本植物,原产巴西,我国江南地区
也有分布。株形小巧,叶形飘逸,叶柄如铁线,
十分幽雅,是蕨类植物中最具观赏价值的小型室
内盆栽植物之一,是插花的良好衬材和干花材
料,深受人们喜爱。传统的繁殖方法以分株繁殖
和自然播种为主。分株繁殖速度慢,根茎易老
化,造成植株过高,退化,观赏价值下降;自
然播种发芽率低。采用无菌播种和组织培养技术
可极大地提高繁殖系数,并保持品种观赏特性。
楔叶铁线蕨的离体培养尚未见报道。