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火焰兰的种子培养和试管育苗



全 文 :植物生理学通讯 第 41卷 第 2期,2005年 4月 195
火焰兰的种子培养和试管育苗
陈之林 曾宋君 黄向力 段俊*
中国科学院华南植物园,广州 510650
In vitro Seed Germination and Seedling Growth of Renanthera coccinea
CHEN Zhi-Lin, ZENG Song-Jun, HUANG Xiang-Li, DUAN Jun*
South China Botanical Garden, Chinese Academy of Sciences, Guangzhou 510650
收稿 2004-05-26 修定   2004-08-10
资助  中国科学院知识创新工程重要方向项目(kscx2-sw-
3 1 9 )、中国科学院华南植物所所长基金前沿项目
(20023301)、广州市科技计划项目(2004J1-C0201)。
*通讯作者(E-mail: duanj@scib.ac.cn, Tel:020-
37252867)。
1 植物名称 火焰兰(Renanthera coccinea)。
2 材料类别 种子。
3 培养条件 种子萌发培养基:(1)VW;(2)VW+
100 mL·L-1 椰子乳;(3)KC;(4)KC+100 mL·L-1 椰
子乳(5)1/2MS;(6)MS。生根育苗培养基:(7)3 g·L-1
花宝 1 号(美国 Haponex 公司产品,N∶P∶K=7∶
6∶19)+2 g·L-1蛋白胨+2 g·L-1活性炭+0.5 mg·L-1
NAA+0.2 mg·L-1 6-BA;(8)1 g·L-1 花宝1号 +1 g·L-1
花宝 2 号(N∶P∶K=20∶20∶20)+2 g·L-1 蛋白
胨+2 g·L-1活性炭+0.5 mg·L-1 NAA+0.2 mg·L-1
6-BA。以上培养基均附加 1.5% 蔗糖、0.6% 琼
脂,pH 5.2~5.4。培养温度为(25±2)℃,光照度
1 500~2 000 lx,光照时间12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 材料的无菌处理 人工授粉100、160 d的荚果
经自来水洗净后,用70% 的酒精表面消毒30 s,
再以 0.1% 的升汞溶液消毒 15 min,最后用无菌
水冲洗 5 次。将洗净的荚果置灭菌滤纸上吸干水
分,用解剖刀切开荚果,将种子散落到培养基上。
4.2 种子萌发 发育100 d的种子接种到萌发培养
基上,没有萌发纪录,显微观察发现种子还未发
育成球形胚。发育160 d 的种子分别接种到培养
基(1)~(6)上,暗培养2周后,可见白色原球茎突
破种皮,转入光下培养,1 周后原球茎转绿,6
周后原球茎上端出芽。培养基(1)、(3)、(5)上的
萌发率相差不大,都在 40% 左右,但培养 4 周后
发现部分原球茎褐死;培养基(2)、(4)上萌发率达
50% 以上。培养基(1)、(3)、(5)上萌发速度和生
长速度快。以培养基(2)效果最好,表明椰子乳对
种子萌发有促进作用,VW 培养基较 KC 培养基更
适于火焰兰种子生长。培养基( 6 )上萌发率不足
20%,说明高盐培养基不适合。
4.3 继代增殖和生根培养 将初代培养的原球茎和
芽分别在培养基(1)~(5)上继代增殖培养,培养基
(1)、(3)、(5)上原球茎形成植株,不能增殖;(2)
和(4)上原球茎能够增殖, (2)的增殖效果最好,
30 d左右能继代1次。一般认为,椰子乳中含有
大量的天然生长促进物质,如生长素和细胞分裂
素,也许是原球茎增殖的主要因素。但初步做了
几种 6-BA 和 NAA 配比的诱导试验,结果并不理
想,对此,我们将进行更深入的研究。将较大
的无根苗转入生根育苗培养基(7)、(8)上培养,生
根率达100%。植株生长旺盛,8周后形成4~6 cm
高的小苗。在培养基(7)上比(8)上根系发达,但
植株较小,因而生产中采用(8)作为生根壮苗培养
基为宜。
4.4 移栽 将培养瓶置于温棚中炼苗2周后,从培
养瓶中取出生根苗,洗净附着的培养基,将白水
苔用1 000倍多菌灵溶液浸泡1 h,挤干水分,包
裹出瓶苗根部,种植于直径 5 cm 的小盆中。注
意保持适宜湿度,置于阴凉通风处栽培,期间不
要浇水,有利于新根生长和防止病害发生。2 周
后移入温棚栽培,进行正常水、肥、药管理。
成活率可达 9 5 % 以上。
5 意义与进展 火焰兰原产我国云南、海南等地区,
附生于树上,花序自叶腋长出,着花多达数十
朵,花色火红,极为艳丽,具有非常高的观赏
价值。而其种子需与真菌共生才能萌发,在野外
萌发率极低。人工栽培中虽然可以用常规的扦插
等常规无性繁殖方法增殖,但增殖率很低,发展
其试管育苗技术可以大大提高其增殖速度,对保
护这一物种具有重大的意义,且也有利于开发这
一优秀的观赏热带兰。火焰兰的种子离体快繁未
见报道。