全 文 :植物生理学通讯 第 40 卷 第 2期,2004 年 4 月 207
收稿 2003-06-27 修定 2003-09-08
资助 广东省高新技术成果孵化项目(97FF11)。
* 通讯作者(E-mail:zengsongjun@scib.ac.cn, Tel:020-
37252978)。
五桠果的组织培养和快速繁殖
陈国华 曾宋君*
中国科学院华南植物研究所华南植物园,广州 510520
Tissue Culture and Rapid Propagation of Dillenia indica
CHEN Guo-Hua, ZENG Song-Jun*
Botanical Garden, South China Institute of Botany, Chinese Academy of Sciences, Guangzhou 510520
1 植物名称 五桠果(Dillenia indica)。
2 材料类别 实生苗茎尖。
3 培养条件 无菌播种培养基:(1)MS+6-BA 0.2 mg.
L-1(单位下同); (2)MS+NAA 0.01;(3)MS。不定
芽诱导及增殖培养基:(4)MS+6-BA 2.0+NAA 0.2+
椰子汁10 mL.L-1; (5) MS+6-BA 1.0+NAA 0.1+椰子
汁10 mL.L-1; (6) MS+6-BA 0.5+NAA 0.1+椰子汁
10 mL.L-1。 壮苗培养基:(7)MS+6-BA 0.3+NAA
0.01+椰子汁 10 ml.L-1。生根培养基:(8)MS+NAA
0.2+IBA 2.0;(9)MS+NAA 0.1+IBA 0.1;(10)
MS+IBA 0.5。以上培养基均含30 g.L-1 蔗糖、琼
脂6.7 g.L-1,pH 5.5~5.8。培养温度(28±2)℃,
光照度1 500~2 000 lx,光照12 h.d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌播种 将未被虫蛀吃的已成熟果实中的种
子取出后用清水洗净果肉,放在 70% 酒精中浸泡
30s,再用0.1%的升汞溶液消毒10 min, 无菌水
冲洗4~5次,分别接种到无菌播种培养基(1)~(3)
中,20 d 左右均能发芽。发芽后,实生苗在(1)
中的生长速度快于(2)、(3)。
4.2 不定芽的诱导 无菌播种后40 d左右,实生苗
高2~3 cm,取其顶芽转移到不定芽诱导及增殖培
养基(4)~(6)中,均有不定芽形成。其中(4)中30
d 左右时,在切口处形成2~3个不定芽和少量愈
伤组织;(5)中 40 d左右形成1~2不定芽;(6)中
45 d 左右才有少量不定芽形成。
4.3 继代培养 将初代培养的材料在相同培养基上
继代培养。培养基(4)中的不定芽能形成较多的丛
生芽和少量的愈伤组织,不定芽繁殖系数 4~5,
但会出现玻璃化现象,愈伤组织能进行增殖;(5)
和(6)上的不定芽能正常增殖,但增殖倍率不同,
(5)中的繁殖系数为3~4,(6)中的为 2~3。
4.4 壮苗培养 在继代增殖中,由于形成的丛生芽
较密集,弱小,在生根前需要一个壮苗培养过
程。将继代培养的丛生不定芽转移到培养基(7)
中,30 d 左右能形成 2~3 cm 的丛生小苗。
4.5 生根培养 将壮苗培养基中丛生芽切成单株后
转入生根培养基(8)~(10)中,生根率相差极大。
(8)的效果最好,40 d 内生根率达100%,每株有
4~5条根,根长2~3 cm;(9)中无根生成;(10)
中生根率 40% 左右,根 2~3 条,但出根后根生
长慢,上面布满大量黑点。
4.6 移栽 当生根培养30 d时,苗高3~4 cm,在
自然光照下再炼苗10 d后可出瓶。移栽时用镊子
把试管苗从培养瓶中取出,洗掉根部培养基,栽
入由沙和泥炭土各半混合成的基质中。由于其叶
片较大,易失水,特别要注意保湿、遮荫和保
温。精心管理下,成活率可达 9 0 % 。
5 意义与进展 五桠果又称第伦桃,属五桠果科
五桠果属常绿乔木。其树姿优美,叶色青绿,花
和果俱美,为热带和亚热带地区的庭园名贵观赏
树种。其常规繁殖用播种法、圈枝法和高空压条
法。但种子成熟前易被虫蛀吃,种子少,成熟
种子的发芽率也较低;扦插繁殖极难生根;圈枝
和高空压条法繁殖速度慢。我们通过组织培养技
术已获得了大量的试管苗。五桠果的离体快繁国
内外未见报道。