全 文 ：收稿日期:2008-05-23
基金项目:国家重点基础研究发展规划项目(2006CB504100＆1998051113);国家自然科学基金项目(39825126)
作者简介:李霞(1977-), 女 (汉族), 山西晋中人 , 博士研究生 , E-mail:happybety.lx@163.com;崔承彬(1956 -),
男 ,吉林通化人 ,教授 ,博士生导师 , Tel:(010)66932693, E-mail:cuicb@sohu.com, cuicb@126.com。
文章编号:1005-0108(2009)02-0130-05
五柱五桠果的化学成分及其体外抗肿瘤抗缺氧活性
李 霞 1 ,李长伟 1 ,崔承彬1 ,李明明 2 ,范 明2
(1.军事医学科学院 毒物药物研究所 ,北京 100850;2.军事医学科学院 基础医学研究所 , 北京 100850)
摘　要:目的 研究五柱五桠果的化学成分及其抗肿瘤抗缺氧活性。方法 利用各种色谱技术分离化学成分 ,
根据理化性质与光谱数据鉴定结构 ,利用 MTT法测试抗肿瘤活性。结果 从五柱五桠果果实中分离鉴定了白
桦酸(1)、白桦醇(2)、羽扇豆醇(3)、谷甾醇(4)、没食子酸(5)、没食子酸乙酯(6)、原儿茶酸(7)、原儿茶酸甲
酯(8)。化合物 1、2、 3、5和 6对 K562细胞增殖有抑制活性 ,其中 1、 2、5的作用较强 , IC50分别为 31 μg·mL-1、
29 μg·mL-1、23μg·mL-1;3和 6次之 ,在 100μg·mL-1浓度下增殖抑制率分别为 26.1 %和 31.3%。化合物
5和 6在无细胞毒的浓度下对 ECV304细胞的缺氧损伤有保护作用。结论 化合物 1 ～ 8系首次从该植物分离
得到 , 其中 1、 2、3、5和 6为该植物生物活性成分的首例报道。
关键词:分离鉴定;三萜;酚酸;抗肿瘤活性;抗缺氧活性;五柱五桠果
中图分类号:R914　　　文献标志码:A
ChemicalconstituentsofDileniakerriandtheiractivities
onantitumorandanti-hypoxiainvitro
LIXia1 , LIChang-wei1 , CUICheng-bin1 , LIMing-ming2 , FANMing2
(1.BeijingInstituteofPharmacologyandToxicology, Beijing100850, China;
2.BeijingInstituteofBasicMedicalSciences, Beijing100850, China)
Abstract:AimToinvestigatechemicalconstituentsofDileniakerriandevaluatetheirantitumorandanti-
hypoxiaactivities.MethodsChemicalconstituentswereisolatedbycombinationofvariouscolumnandthin-
layerchromatographyandthecompoundsobtainedwereidentifiedbyspectroscopicmethods.Theantitumor
andanti-hypoxiaactivitieswereassayedbytheMTTmethodusingK562 andanoxicECV304 celsrespec-
tively.ResultsCompounds1-8 wereisolatedfromthefruitsofDileniakerriandtheywereidentifiedas
betulinicacid(1), betulinol(2), lupeol(3), β-sitosterol(4), galicacid(5), ethylgalate(6), protocatechuic
acid(7)andprotocatechuicacidmethylester(8), respectively.Compounds1, 2, 3 , 5and6inhibitedthepro-
liferationofK562celswithIC50 valuesof31 μg·mL-1(1), 29 μg·mL-1(2)and23 μg·mL-1 (5), and
inhibitionratesof26.1 %(3)and31.3 %(6)at100 μg·mL-1 , respectively.Compounds5 and6 also
showedtheanti-hypoxiaeffectattheconcentration(50μg·mL-1)withnocytotoxicityonanoxicECV304
cels.ConclusionCompounds1-8wereisolatedfromDileniakerriforthefirsttime.Compounds1, 2, 3, 5
and6 providethefirstexampleofbioactiveconstituentsofD.kerri.
Keywords:isolationandidentification;triterpene;phenolic;antitumoractivity;anti-hypoxiaactivity;Dilenia
kerri
第 19 卷　第 2期
2009年 4月　总 88期
中 国 药 物 化 学 杂 志
ChineseJournalofMedicinalChemistry
Vol.19　No.2　p.130
Apr.2009 Sum 88
　　五柱五桠果 DileniakerriCraib.系五桠果科
(Dileniaceae)五桠果属 [ 1]植物 ,其果实的含水乙
醇提取物有较强的细胞凋亡诱导和细胞周期 G2/
M期抑制活性 [ 2 -3] ,但该植物化学成分及其生物
活性未见文献报道。鉴于此 ,本文作者对其果实
化学成分进行了研究 , 从中分离鉴定了白桦酸
(1)、白桦醇(2)、羽扇豆醇(3)、谷甾醇(4)、没食
子酸(5)、没食子酸乙酯(6)、原儿茶酸(7)、原儿
茶酸甲酯(8)等 8个化合物 ,并对 1 ～ 8的抗肿瘤
活性和 4 ～ 8的抗缺氧活性进行了初步测试评价 。
1　仪器与材料
熔点用北京天地宇科技有限责任公司 X-4
型精密显微熔点测定仪测定 ,温度未校正。质谱
用美国 AB公司 API-3000质谱仪测定 。 NMR
用日本电子 JNM-GX400核磁共振仪测定 ,以内
标 TMS为基准标定化学位移 。薄层色谱采用烟
台市化学工业研究所产硅胶 GF254薄层板
(20cm×10 cm×0.25 mm)或薄层硅胶 GF254
(青岛海洋化工集团公司)自制板 (2.5 cm×
7.5cm或 20 cm×20 cm),斑点采用 254 nm或
365nm紫外线照射 ,以体积分数 10%硫酸水溶液
或硫酸铈钼酸铵试剂喷洒加热或喷洒三氯化铁试
剂显色检测 。柱色谱采用 40 ～ 50 μm硅胶 60H
(青岛海洋化工集团公司)、71 ～ 154 μm聚酰胺
(浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂)、Sephadex
LH-20(Pharmacia)等填料。抗肿瘤与抗缺氧活
性采用美国 MD公司 Versamax型酶标仪测试。
五柱五桠果果实于 1998年 8 ～ 9月间采自云
南勐腊地区 ,由沈阳药科大学孙启时教授采集并
鉴定种属。原植物标本现存于沈阳药科大学。
2　提取分离
将五柱五桠果干燥果实 5 kg粉碎后用体积
分数为 85%的乙醇室温浸提 ,每次用 50 L浸泡
7 d,共提 3次 ,合并浸提液 ,减压浓缩至不含乙醇
(约 4L),依次用同体积氯仿 、乙酸乙酯 、正丁醇
各萃取 4次 ,得到氯仿萃取物(146 g)、乙酸乙酯
萃取物(45 g)、正丁醇萃取物(405 g)及水层残留
物 。鉴于 4个萃取物中只有氯仿和乙酸乙酯萃取
物有抗肿瘤活性(100μg·mL-1对 K562细胞的抑
制率分别为 38.5%和 29.3%),本文对这两个萃
取物进行了进一步分离。
2.1　氯仿萃取物的分离
氯仿萃取物(60 g)用氯仿溶解并加适量硅
胶吸附干燥 , 干法上减压硅胶柱 ,用石油醚 (bp
60 ～ 90℃)-氯仿-甲醇混合溶剂梯度洗脱 ,结合薄
层检测结果合并浓缩洗脱液 ,得到 6个组分:Fr-1
(2g)、Fr-2(19.4g)、Fr-3(14.5g)、Fr-4(3.1 g)、
Fr-5(10.4 g)、Fr-6(2.1 g)。
Fr-2(19.4 g)用适量氯仿溶解 ,加适量硅胶
吸附干燥 ,干法上减压硅胶柱 ,用石油醚(bp60 ～
90℃)-氯仿混合溶剂梯度洗脱 ,结合薄层检测结
果合并浓缩洗脱液 , 得到 5 个组分:Fr-2-1
(2.3g)、Fr-2-2(4.6 g)、Fr-2-3(2.7 g)、Fr-2-4
(1.5g)、Fr-2-5(1.8 g)。组分 Fr-2-4(1.5 g)用
适量氯仿-甲醇(体积比为 1∶1)溶解 ,上 Sephadex
LH-20柱 ,用相同溶液洗脱并根据薄层检测结果
收集合并含化合物 3的组分 ,从氯仿 -甲醇中重结
晶得到化合物 3(23 mg)。
Fr-3(14.5 g)用适量氯仿 -甲醇(体积比为
2∶1)溶解 ,上 SephadexLH-20柱 ,用相同溶液洗
脱并根据薄层检测结果合并浓缩 ,按洗脱先后顺
序得 6个组分:Fr-3-1(2g)、Fr-3-2(2.1g)、Fr-3-3
(3 g)、Fr-3-4(2.5 g)、 Fr-3-5(2.8 g)、 Fr-3-6
(1.3 g)。组分 Fr-3-1(2g)在室温放置过程中从
氯仿-甲醇混合液中析出结晶 ,过滤粗结晶 ,从氯
仿 -甲醇中重结晶得到化合物 4(30 mg)。组分
Fr-3-3(3 g)用适量氯仿溶解并加 12 g硅胶吸附
干燥 ,湿法上硅胶常压柱 ,氯仿-甲醇混合溶剂梯
度洗脱 ,结合薄层检测结果合并浓缩洗脱液 ,得到
5个组分:Fr-3-3-1(119mg)、Fr-3-3-2(2.1g)、Fr-
3-3-3(53 mg)、 Fr-3-3-4 (44 mg)和 Fr-3-3-5
(352mg)。 Fr-3-3-1(119 mg)用适量氯仿溶解
131
第 2期 李 霞等:五柱五桠果的化学成分及其体外抗肿瘤抗缺氧活性
并加 1 g硅胶吸附干燥 ,湿法上硅胶常压柱 ,用石
油醚(bp60 ～ 90 ℃)-氯仿 -乙酸乙酯(体积比为
15∶3∶1)单一混合溶剂洗脱 ,经薄层检测收集含
化合物 2的组分 ,减压浓缩并经甲醇重结晶得化
合物 2(28 mg)。 Fr-3-3-2(2.1g)用适量氯仿-甲
醇(体积比为 1∶1)溶解 ,上 SephadexLH-20柱 ,
用相同溶液洗脱并根据薄层检测结果合并浓缩 ,
按洗脱先后顺序分 为 5 个组分:Fr-3-3-2-1
(260 mg)、 Fr-3-3-2-2 (1.3 g)、 Fr-3-3-2-3
(150mg)、 Fr-3-3-2-4 (170 mg)和 Fr-3-3-2-5
(60mg)。 Fr-3-3-2-3(150mg)用同一根 Sephadex
LH-20柱同法再次色谱分离 ,收集含化合物 1的组
分 ,在氯仿-甲醇中重结晶 ,得到化合物 1(25mg)。
Fr-4(3.1 g)用适量氯仿 -甲醇 (体积比为
1∶1)溶解 ,上 SephadexLH-20柱 ,用相同溶液洗
脱并根据薄层检测结果合并浓缩 ,按洗脱先后顺
序分 为 4 个组 分:Fr-4-1 (270 mg)、 Fr-4-2
(2.5g)、 Fr-4-3(129 mg)和 Fr-4-4(38 mg)。组
分 Fr-4-2(2.5g)用适量氯仿溶解 ,加 7.5g硅胶吸
附干燥 ,干法上减压硅胶柱 ,用氯仿-甲醇混合溶剂
梯度洗脱 ,收集洗脱液并根据薄层检测结果合并浓
缩 , 得到 4个组分:Fr-4-2-1(334 mg)、Fr-4-2-2
(370mg)、Fr-4-2-3(617 mg)和 Fr-4-2-4(1.1 g)。
组分 Fr-4-2-2 (370 mg)经硅胶制备薄层色谱和
SephadexLH-20柱色谱分离 ,收集含化合物 8的组
分 ,从甲醇中重结晶得到化合物 8(12mg)。
2.2　乙酸乙酯萃取物的分离
乙酸乙酯萃取物(40 g)用适量甲醇溶解并加
60 g聚酰胺吸附干燥 ,干法上聚酰胺减压柱 ,用
乙酸乙酯-甲醇混合溶剂梯度洗脱 ,根据薄层检测
结果合并浓缩洗脱液 , 共得到 8个组分:Fr-1
(2.33 g)、 Fr-2(0.53 g)、 Fr-3(7.3 g)、 Fr-4
(2.7g)、Fr-5(3.7 g)、Fr-6(4.7 g)、Fr-7(2.1g)
和 Fr-8(1.2g)。
Fr-3(7.30 g)用适量甲醇溶解并加 15 g聚
酰胺吸附干燥 ,湿法上常压聚酰胺柱 ,用氯仿-甲
醇混合溶剂梯度洗脱 , 得到 6个组分:Fr-3-1
(1.3g)、Fr-3-2(1.9 g)、Fr-3-3(700 mg)、Fr-3-4
(670mg)、Fr-3-5(570 mg)和 Fr-3-6(1.9 g)。
组分 Fr-3-3(700 mg)用适量甲醇溶解并加
2 g聚酰胺吸附干燥 ,湿法上聚酰胺常压柱 ,用乙
酸乙酯 -甲醇混合溶剂洗脱 ,根据薄层检测结果合
并浓缩 洗脱 液 , 得 到含 化合 物 7 的组 分
(103mg), 该组分经硅胶薄层色谱 、Sephadex
LH-20柱色谱分离以及重结晶得到化合物 7
(30mg)。
组分 Fr-3-5(570 mg)用适量氯仿-甲醇溶
解 ,上 SephadexLH-20柱 ,用相同溶液洗脱 ,根据
薄层检测结果合并浓缩洗脱液 ,按洗脱先后顺序
得到 5 个组分:Fr-3-5-1 (107 mg)、 Fr-3-5-2
(90mg)、Fr-3-5-3(116 mg)、Fr-3-5-4(150 mg)
和 Fr-3-5-5(87 mg)。组分 Fr-3-5-4(150 mg)上
SephadexLH-20柱 ,收集合并含化合物 6的组分 ,
经甲醇重结晶得化合物 6(23 mg)。
组分 Fr-3-6(1.9 g)用适量氯仿-甲醇溶解 ,
上 SephadexLH-20柱 ,用相同溶液洗脱并根据薄
层检测结果合并浓缩 ,按洗脱先后顺序分为 2个
组分:Fr-3-6-1(1 g)和 Fr-3-6-2(0.9 g)。组分
Fr-3-6-2再经 SephadexLH-20柱分离 ,收集含化
合物 5的组分 ,甲醇重结晶得化合物 5(40mg)。
3　结构鉴定
化合物 1:白色针状结晶 (氯仿 -甲醇), mp
280 ～ 282 ℃, 正离子 ESI-MSm/z:479 [ M +
Na] +、495[ M+K] +;负离子 ESI-MSm/z:455
[ M-H] -。 1H-NMR(C5D5N, 400 MHz)δ:4.93
(1H, brs, Hb-29)、4.76(1H, brs, Ha-29)、 3.53
(1H, m, H-5)、3.45(1H, t, J=15.2 Hz, H-3)、
1.78(3H, s, 23-CH3)、1.22(3H, s, 24-CH3)、1.05
(3H, s, 30-CH3)、1.04(3H, s, 26-CH3)、1.00(3H,
s, 25-CH3 )、 0.80(3H, s, 27-CH3 )。 13 C-NMR
(C5D5N, 100 MHz)δ:178.9(C-28)、 151.3(C-
20)、110.0(C-29)、78.1(C-3)、56.7(C-17)、55.9
(C-5)、 50.9(C-9)、 49.8(C-19)、 47.8(C-18)、
42.9(C-14)、 41.1(C-8)、 39.6(C-4)、 39.3(C-
1)、38.6(C-13)、37.6(C-22)、37.5(C-10)、34.8
(C-7)、32.9(C-16)、31.2(C-15)、30.0(C-21)、
28.7(C-23)、28.3(C-2)、 26.1(C-12)、21.2(C-
11)、19.4(C-30)、18.8(C-6)、16.4(C-24)、16.4
(C-25)、16.4(C-26)、14.9(C-27)。以上数据与
白桦酸 [ 4] (betulinicacid)的文献数据相符 ,故鉴
定 1为白桦酸。
化合物 2:白色针状结晶(甲醇), mp262 ～
265℃,负离子 ESI-MSm/z:477[ M+Cl] -。 1H-
NMR(CDCl3 , 400 MHz)δ:4.61(1H, d, J=
2.0Hz, Hb-29)、4.51(1H, d, J=2.0 Hz, Ha-29)、
3.73(1H, d, J=10.8 Hz, Hb-28)、 3.26(1H, d,
J=11.2 Hz, Ha-28)、 3.13(1H, dd, J=11.2,
132
中 国 药 物 化 学 杂 志 第 19卷　
5.2Hz, H-3)、1.61(3H, s, 30-CH3)、0.95(3H, s,
27-CH3)、0.91(3H, s, 26-CH3)、 0.90(3H, s, 25-
CH3)、 0.75(3H, s, 24-CH3 )、 0.69(3H, s, 23-
CH3)。 13C-NMR(CDCl3 , 100 MHz)δ:151.5(C-
20)、109.7(C-29)、78.9(C-3)、60.5(C-28)、55.2
(C-5)、 50.3(C-9)、 48.7(C-19)、 47.7(C-17)、
47.7(C-18)、42.7(C-14)、 40.8(C-8)、38.8(C-
4)、38.6(C-1)、37.2(C-10)、37.1(C-13)、 34.2
(C-7)、33.9(C-22)、29.7(C-21)、29.4(C-16)、
28.0(C-23)、27.3(C-2)、 27.0(C-15)、25.1(C-
12)、20.8(C-11)、19.0(C-30)、18.2(C-6)、16.1
(C-25)、15.9(C-26)、15.3(C-24)、14.7(C-27)。
以上数据与白桦醇 [ 5] (betulinol)的文献数据一
致 ,故鉴定 2为白桦醇 。
化合物 3:白色粉末 , mp262 ～ 265℃,正离子
ESI-MSm/z:427[ M+H] +、 466[ M+K] +。 1H-
NMR(CDCl3 , 400 MHz)δ:4.68(1H, d, J=
2.2Hz, Hb-29)、 4.57(1H, dd, J=2.2, 1.4 Hz,
Ha-29)、3.19(1H, dd, J=11.2, 5.0 Hz, H-3)、
1.68(3H, s, 30-CH3)、1.03(3H, s, 26-CH3)、0.98
(3H, s, 23-CH3)、0.97(3H, s, 27-CH3)、0.83(3H,
s, 25-CH3)、0.79(3H, s, 28-CH3)、0.76(3H, s, 24-
CH3)。 13C-NMR(CDCl3 , 100 MHz)δ:151.0(C-
20)、109.3(C-29)、79.0(C-3)、55.3(C-5)、50.4
(C-9)、48.3(C-18)、48.0(C-19)、43.0(C-17)、
42.8(C-14)、40.8(C-8)、 40.0(C-22)、38.8(C-
4)、38.7(C-1)、38.0(C-13)、37.2(C-10)、 35.6
(C-16)、34.3(C-7)、29.8(C-21)、28.0(C-23)、
27.4(C-2)、27.4(C-15)、 25.1(C-12)、20.9(C-
11)、19.3(C-30)、18.3(C-6)、18.0(C-28)、16.1
(C-25)、16.0(C-26)、15.4(C-24)、14.5(C-27)。
以上数据与羽扇豆醇 [ 6] (lupeol)的文献数据相
符 ,故鉴定 3为羽扇豆醇。
化合物 4:白色针状结晶 (氯仿 -甲醇), mp
137 ～ 138 ℃。 1H-NMR(CDCl3 , 400 MHz)δ:
5.35(1H, d, J=4.0 Hz, H-6)、 3.53(1H, m, H-
3)、2.50 ～ 1.10(m)、 1.01(3H, s, CH3)、 0.92
(3H, d, J=6.4 Hz, CH3)、0.84(3H, m, CH3)、
0.82(3H, m, CH3 )、 0.80(3H, m, CH3 )、 0.68
(3H, s, CH3)。 13 C-NMR(CDCl3 , 100 MHz)δ:
140.7、121.7、71.8、56.7、56.0、50.1、45.7、42.2、
42.2、 39.7、 37.2、 36.5、 36.1、 33.9、 31.8、 31.8、
31.6、 29.0、 28.2、 26.0、 24.3、 23.0、 21.0、 19.8、
19.4、19.0、18.7、12.0、11.8。以上数据与 β-谷甾
醇 [ 7] (β-sitosterol)的文献数据一致 ,故鉴定 4为
β-谷甾醇 。
化合物 5:无色片状晶体(甲醇), mp236 ～
238℃。与 FeCl3试剂反应呈深蓝色。负离子
ESI-MSm/z:169[ M-H] -、205[ M+Cl] -。 1H-
NMR(CD3OD, 400MHz)δ:7.05(2H, s, H-2 , 6)。
13C-NMR(CD3OD, 100 MHz)δ:170.3(C=O)、
146.1(C-3, 5)、 139.3(C-4)、121.8(C-1)、110.0
(C-2, 6)。上述数据与没食子酸 [ 8] (galicacid)
的文献数据相符 ,故鉴定 5为没食子酸。
化合物 6:白色针状结晶(甲醇), mp136 ～
138℃。正离子 ESI-MSm/z:221[ M+Na] +;负
离子 ESI-MSm/z:197 [ M -H] -。 1H-NMR
(CD3OD, 400 MHz)δ:7.02(2H, s, H-2, 6)、4.24
(2H, q, J=7.2 Hz, OCH2 )、 1.32(3H, t, J=
7.2Hz, CH3)。 13C-NMR(CD3OD, 100 MHz)δ:
168.6(C=O)、146.5(C-3)、146.5(C-5)、139.7
(C-4)、121.7(C-1)、110.0(C-2)、110.0(C-6)、
61.7(-OCH2)、14.7(-CH3)。以上数据与没食子
酸乙酯 [ 8] (ethylgalate)的文献数据一致 ,故鉴定
6为没食子酸乙酯。
化合物 7:白色针状结晶(甲醇), mp202 ～
205℃。薄层斑点与溴酚蓝试剂反应呈黄色 ,提
示结构中存在羧基;与 FeCl3试剂反应阳性 ,示有
酚羟基 。正离子 ESI-MSm/z:177[ M+Na] +;负
离子 ESI-MSm/z:153[ M-H] -、189[ M+Cl] -。
1H-NMR(CD3OD, 400 MHz)δ:7.44(1H, brs, H-
2)、 7.43(1H, dd, J=7.6, 2.4 Hz, H-6)、 6.80
(1H, d, J=7.6 Hz, H-5)。 13 C-NMR(CD3OD,
100MHz)δ:170.4(C=O)、151.6(C-4)、146.1
(C-3)、124.0(C-1)、123.2(C-6)、117.8(C-2)、
115.8(C-5)。以上数据与原儿茶酸 [ 9] (protocate-
chuicacid)的文献数据一致 ,故鉴定 7为原儿
茶酸。
化合物 8:无色片状结晶(甲醇), mp183 ～
185℃。薄层斑点与溴酚蓝试剂反应呈黄色 ,提
示结构中存在羧基;与 FeCl3试剂反应阳性 ,示有
酚羟基 。正离子 ESI-MSm/z:191[ M+Na] +;负
离子 ESI-MSm/z:167[ M-H] -、203[ M+Cl] -。
1H-NMR(CD3OD, 400 MHz)δ:7.56(1H, brs, H-
2)、 7.54(1H, dd, J=8.4, 2.0 Hz, H-6)、 6.82
(1H, d, J=8.4 Hz, H-5)、3.88(3H, s, OCH3)。
13C-NMR(CD3OD, 100 MHz)δ:170.5(C=O)、
133
第 2期 李 霞等:五柱五桠果的化学成分及其体外抗肿瘤抗缺氧活性
151.9(C-4)、148.1(C-3)、124.7(C-1)、123.2(C-
6)、115.2(C-2)、113.3(C-5)、55.8(OCH3)。以
上数据与原儿茶酸甲酯 [ 10] (protocatechuicacid
methylester)的文献数据相符 ,故鉴定 8为原儿
茶酸甲酯。
4　生物活性测试
抗肿瘤活性采用文献 [ 11]所述 MTT法 ,用
人慢性髓性白血病 K562细胞进行测试 。抗缺氧
活性按文献 [ 12]所述 MTT法 ,采用人脐带静脉
内皮 ECV304细胞缺氧损伤模型测试。
抗肿瘤活性测试结果表明:化合物 1、2、3、5
和 6有抑制 K562细胞增殖的作用 。其中 1、2、5
作用较强 , IC50分别为 31、29、23 μg·mL-1;3和 6
次之 ,在 100 μg·mL-1浓度下对 K562细胞增殖
的抑制率分别为 26.1%和 31.3%。而化合物 4、7
和 8在测试浓度范围内未检测到有抗肿瘤活性 。
利用 ECV304细胞缺氧损伤模型 ,测试了化
合物 4 ～ 8的体外抗缺氧活性 ,结果表明化合物 5
和 6对 ECV304细胞的缺氧损伤有保护作用。这
两个化合物在无细胞毒作用的 50 μg·mL-1浓度
下使 ECV304细胞的存活率分别达 (39.6 ±
0.5)%(5)和(60.2±0.8)%(6),而缺氧损伤组
的存活率仅为(22.6±0.1)%,与缺氧损伤组统
计比较均有显著性差异(P<0.001)。
5　结论
本文在确定氯仿和乙酸乙酯萃取物具有抗肿
瘤活性的基础上 ,从五柱五桠果果实的两个活性
部位分离鉴定了 8个化合物 ,并通过活性测试初
步证明 1、2、3、5和 6为抗肿瘤活性成分 。其中白
桦酸(1)含量较高 ,虽然精制获取的纯品数量较
少 ,但从 60g氯仿萃取物中得到粗品 2.8g,收率
达 0.14%,活性测试结果也与文献 [ 13]中白桦酸
抑制黑色素瘤细胞的活性吻合 ,表明 1为五柱五
桠果果实的主要抗肿瘤活性成分 。此外 ,在体外
抗缺氧活性测试中 , 5和 6还显示出对 ECV304
细胞缺氧损伤的保护作用 。本文报道的化合物
6 ～ 8为首次从该属植物分离得到 ,其余均为首次
从该植物分离得到 ,其中 1、2、3、5和 6为该植物
生物活性成分的首例报道 。
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中 国 药 物 化 学 杂 志 第 19卷