全 文 ：植物保护学报 允燥怎则灶葬造 燥枣 孕造葬灶贼 孕则燥贼藻糟贼蚤燥灶袁 圆园员缘袁 源圆渊员冤院 怨怨 原 员园缘 阅韵陨院 员园郾 员猿愿园圆 辕 躁援 糟灶噪蚤援 扎憎遭澡曾遭援 圆园员缘郾 园员郾 园员缘
基金项目院 国家野十二五冶科技支撑计划渊圆园员员月粤耘园远月园源冤
鄢通讯作者渊粤怎贼澡燥则 枣燥则 糟燥则则藻泽责燥灶凿藻灶糟藻冤袁 耘鄄皂葬蚤造院 赠怎澡怎葬澡怎葬岳 择凿蚤燥援 葬糟援 糟灶袁 栽藻造院 园缘猿圆鄄愿圆愿怨愿苑园苑
收稿日期院 圆园员源 原 园圆 原 员远
白色霞水母刺细胞毒素抗烟草花叶病毒活性
冯金华员 摇 王程栋猿 摇 刘红英员 摇 邢荣娥圆 摇 于华华圆鄢
渊员援 河北农业大学海洋学院袁 秦皇岛 园远远园园猿曰 圆援 中国科学院海洋研究所袁 山东 青岛 圆远远园苑员曰
猿援 中国农业科学院烟草研究所袁 山东 青岛 圆远远员园员冤
摘要院 为探索从水母毒素中获取抗植物病毒物质的应用前景袁采用半叶枯斑法尧整株法和漂浮叶圆
片法袁对白色霞水母 悦赠葬灶藻葬 灶燥扎葬噪蚤蚤 运蚤泽澡蚤灶燥怎赠藻刺细胞毒素的抗烟草花叶病毒渊栽燥遭葬糟糟燥 皂燥泽葬蚤糟 增蚤则怎泽袁
栽酝灾冤活性进行了检测遥 结果表明袁白色霞水母刺细胞毒素对 栽酝灾具有很强的直接钝化作用袁枯斑
抑制率随钝化时间的延长而增大遥 园郾 怨怨 皂早 辕 皂蕴 毒素体外钝化 栽酝灾 猿园 皂蚤灶袁枯斑抑制率达
怨愿郾 愿缘豫 袁将 栽酝灾与 园郾 愿园 皂早 辕 皂蕴毒素体外混合后立即接种袁枯斑抑制率仍达 愿怨郾 缘苑豫 曰圆园 耀 苑园 益之
间袁毒素对 栽酝灾的钝化作用随温度升高而降低袁但又表现出一定的高温耐受性袁苑园 益下处理 猿园
皂蚤灶袁员郾 猿猿 皂早 辕 皂蕴毒素对枯斑的抑制率为 远员郾 苑猿豫 遥 毒素对病毒初侵染有一定的预防作用袁并可抑
制 栽酝灾 的增殖曰员郾 怨猿 皂早 辕 皂蕴 毒素处理接种 栽酝灾 的叶圆片 圆 凿 后袁对 栽酝灾 的增殖抑制率为
源怨郾 源员豫 曰但该毒素对 栽酝灾所致病害的治疗效果不明显遥 该毒素还具有较强的蛋白水解酶活性袁可
能与其抗 栽酝灾活性相关遥 表明白色霞水母刺细胞毒素抗 栽酝灾 作用明显袁其抗植物病毒活性值得
深入研究遥
关键词院 水母曰 毒素曰 烟草花叶病毒曰 钝化
栽澡藻 葬灶贼蚤鄄栽燥遭葬糟糟燥 皂燥泽葬蚤糟 增蚤则怎泽 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 贼澡藻 灶藻皂葬贼燥糟赠泽贼 增藻灶燥皂 枣则燥皂 贼澡藻
躁藻造造赠枣蚤泽澡 悦赠葬灶藻葬 灶燥扎葬噪蚤蚤 运蚤泽澡蚤灶燥怎赠藻
云藻灶早 允蚤灶澡怎葬员 摇 宰葬灶早 悦澡藻灶早凿燥灶早猿 摇 蕴蚤怎 匀燥灶早赠蚤灶早员 摇 载蚤灶早 砸燥灶早藻圆 摇 再怎 匀怎葬澡怎葬圆鄢
渊员援 悦燥造造藻早藻 燥枣 韵糟藻葬灶袁 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠 燥枣 匀藻遭藻蚤袁 匝蚤灶澡怎葬灶早凿葬燥 园远远园园猿袁 匀藻遭藻蚤 孕则燥增蚤灶糟藻袁 悦澡蚤灶葬曰
圆援 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 韵糟藻葬灶燥造燥早赠袁 悦澡蚤灶藻泽藻 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 匝蚤灶早凿葬燥 圆远远园苑员袁 杂澡葬灶凿燥灶早 孕则燥增蚤灶糟藻袁 悦澡蚤灶葬曰
猿援 栽燥遭葬糟糟燥 砸藻泽藻葬则糟澡 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 悦澡蚤灶藻泽藻 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 匝蚤灶早凿葬燥 圆远远员园员袁 杂澡葬灶凿燥灶早 孕则燥增蚤灶糟藻袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 陨灶 燥则凿藻则 贼燥 枣蚤灶凿 葬 灶藻憎 责造葬灶贼 增蚤则怎泽 蚤灶澡蚤遭蚤贼燥则 枣则燥皂 灶葬贼蚤增藻 泽燥怎则糟藻泽袁 葬灶凿 贼燥 藻曾责造燥则藻 贼澡藻 葬责责造蚤糟葬贼蚤燥灶
增葬造怎藻 燥枣 贼澡藻 皂葬则蚤灶藻 灶葬贼怎则葬造 责则燥凿怎糟贼袁 躁藻造造赠枣蚤泽澡 增藻灶燥皂泽袁 贼澡藻 葬灶贼蚤鄄栽燥遭葬糟糟燥 皂燥泽葬蚤糟 增蚤则怎泽 渊栽酝灾冤 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣
贼澡藻 灶藻皂葬贼燥糟赠泽贼 增藻灶燥皂 燥枣 贼澡藻 躁藻造造赠枣蚤泽澡 悦赠葬灶藻葬 灶燥扎葬噪蚤蚤 运蚤泽澡蚤灶燥怎赠藻 憎葬泽 贼藻泽贼藻凿 遭赠 怎泽蚤灶早 澡葬造枣鄄造藻葬枣袁 憎澡燥造藻鄄造藻葬凿
葬灶凿 造藻葬枣鄄凿蚤泽糟 皂藻贼澡燥凿泽援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 增藻灶燥皂 糟燥怎造凿 泽贼则燥灶早造赠 蚤灶葬糟贼蚤增葬贼藻 栽酝灾 蚤灶 增蚤贼则燥袁 葬灶凿 澡葬泽
葬 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 责燥泽蚤贼蚤增藻 糟燥则则藻造葬贼蚤燥灶 遭藻贼憎藻藻灶 贼澡藻 葬灶贼蚤鄄增蚤则怎泽 糟葬责葬糟蚤贼赠 葬灶凿 贼澡藻 凿怎则葬贼蚤燥灶 燥枣 蚤灶糟怎遭葬贼蚤燥灶 责藻则蚤燥凿 燥枣
栽酝灾 憎蚤贼澡 贼澡藻 增藻灶燥皂援 栽澡藻 蚤灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 则葬贼藻 葬早葬蚤灶泽贼 栽酝灾 憎葬泽 怎责 贼燥 怨愿郾 愿缘豫 憎澡藻灶 贼澡藻 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 燥枣 贼澡藻
增藻灶燥皂 憎葬泽 园郾 怨怨 皂早 辕 皂蕴援 匀燥憎藻增藻则袁 憎澡藻灶 栽酝灾 憎葬泽 蚤灶燥糟怎造葬贼藻凿 蚤皂皂藻凿蚤葬贼藻造赠 葬枣贼藻则 皂蚤曾藻凿 贼燥早藻贼澡藻则 憎蚤贼澡 贼澡藻
增藻灶燥皂袁 贼澡藻 增藻灶燥皂 泽贼蚤造造 泽澡燥憎藻凿 葬灶 蚤灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 则葬贼藻 燥枣 愿怨郾 缘苑豫 葬早葬蚤灶泽贼 栽酝灾 葬贼 园郾 愿园 皂早 辕 皂蕴援 栽澡藻 葬灶贼蚤鄄
栽酝灾 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 贼澡藻 增藻灶燥皂 憎葬泽 泽藻灶泽蚤贼蚤增藻 贼燥 贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 糟澡葬灶早藻泽 遭藻贼憎藻藻灶 圆园 益 葬灶凿 苑园 益袁 遭怎贼 蚤贼
藻曾澡蚤遭蚤贼藻凿 贼澡藻则皂葬造 泽贼葬遭蚤造蚤贼赠 贼燥 葬 糟藻则贼葬蚤灶 藻曾贼藻灶贼 葬贼 贼澡藻 泽葬皂藻 贼蚤皂藻援 宰澡藻灶 蚤灶糟怎遭葬贼藻凿 葬贼 苑园 益 枣燥则 猿园 皂蚤灶袁 贼澡藻
增藻灶燥皂爷泽 蚤灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 则葬贼藻 葬早葬蚤灶泽贼 栽酝灾 则藻葬糟澡藻凿 远员郾 苑猿豫 葬贼 葬 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 燥枣 员郾 猿猿 皂早 辕 皂蕴援 栽澡藻 增藻灶燥皂
澡葬凿 葬 糟藻则贼葬蚤灶 责则藻增藻灶贼蚤增藻 藻枣枣藻糟贼 燥灶 栽酝灾 蚤灶枣藻糟贼蚤燥灶 葬灶凿 蚤贼 糟燥怎造凿 葬造泽燥 蚤灶澡蚤遭蚤贼 贼澡藻 则藻责造蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 栽酝灾袁 憎蚤贼澡 葬灶
蚤灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 则葬贼藻 燥枣 皂燥则藻 贼澡葬灶 源怨郾 源员豫 葬贼 员郾 怨猿 皂早 辕 皂蕴援 月怎贼 贼澡藻 凿蚤泽藻葬泽藻 泽赠皂责贼燥皂泽 糟葬怎泽藻凿 遭赠 栽酝灾 糟燥怎造凿
灶燥贼 遭藻 葬造造藻增蚤葬贼藻凿 憎澡藻灶 泽责则葬赠藻凿 憎蚤贼澡 贼澡藻 增藻灶燥皂援 栽澡藻 增藻灶燥皂 糟燥灶贼葬蚤灶藻凿 责则燥贼藻葬泽藻 葬糟贼蚤增蚤贼赠援 栽澡藻泽藻
糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽 澡蚤早澡造蚤早澡贼 贼澡藻 灶藻藻凿 枣燥则 枣怎则贼澡藻则 则藻泽藻葬则糟澡 燥灶 贼澡藻 葬灶贼蚤鄄栽酝灾 贼燥曾蚤灶泽 蚤灶 躁藻造造赠枣蚤泽澡 灶藻皂葬贼燥糟赠泽贼
增藻灶燥皂援
运藻赠 憎燥则凿泽院 躁藻造造赠枣蚤泽澡曰 增藻灶燥皂曰 栽燥遭葬糟糟燥 皂燥泽葬蚤糟 增蚤则怎泽曰 蚤灶葬糟贼蚤增葬贼蚤燥灶
摇 摇 植物病毒病和类病毒是农业生产上的第 圆 大类
重要病害遥 烟草花叶病毒 渊 栽燥遭葬糟糟燥 皂燥泽葬蚤糟 增蚤则怎泽袁
栽酝灾冤是最常见的植物病毒种类袁为烟草花叶病毒
属 栽燥遭葬皂燥增蚤则怎泽的模式种袁寄主范围广泛袁能够侵染
十字花科尧茄科尧豆科等 猿愿 科 圆远愿 种植物遥 烟草花
叶病田间株发病率一般为 缘豫 耀 圆园豫 袁早期发病损
失可达 缘园豫 耀苑园豫 袁严重田块甚至绝收渊吴艳兵等袁
圆园园愿冤遥 目前袁国内外所应用的烟草花叶病的化学
防治剂主要有天然抗病毒剂和合成抗病毒剂 圆 大类
渊砸燥遭蚤灶泽 藻贼 葬造援 袁员怨远远曰酝蚤泽葬贼燥 藻贼 葬造援 袁员怨远苑冤袁但抗植物
病毒制剂对植物病毒病的控制效果一般低于 远园豫 袁
且不稳定袁无法满足农业的需求渊杨崇实等袁圆园园愿冤遥
圆园 世纪之后袁植物病毒病防治研究的重点已经转移
到天然抗植物病毒活性物质的筛选袁并从植物尧动
物尧微生物中筛选到多种天然抗植物病毒活性物质
渊吴艳兵等袁圆园园愿冤袁为植物病毒天然抑制剂的开发
以及利用天然抑制剂有效成分结构作为先导化合物
进行仿生合成新型药剂提供了基础遥 但目前袁抗植
物病毒天然物质筛选仍多以陆地生物为主袁尤其是
中草药袁筛选的面较窄遥
有研究表明袁海洋生物由于其种群的多样性及
其生存环境的复杂性袁体内存在大量与陆地生物不
同的尧化学结构新颖且生物活性强烈尧与受体作用具
有高选择性和高亲和性等特点的海洋生物活性物
质袁为药物先导化合物和新药研究与开发提供了大
量的模式结构和药物前体 渊覃骊兰和郝二伟袁
圆园园愿冤遥 其中从海洋次生代谢产物中已筛选出一批
抗病毒活性物质袁用于人体抗艾滋病毒尧流感病毒尧
白血病病毒等的研究和治疗渊辛现良等袁圆园园园曰梅雪
婷等袁圆园园猿曰阅燥灶蚤葬 驭 匀葬皂葬灶灶袁圆园园猿冤遥 而从海洋生物
中筛选抗植物病毒活性物质的研究非常有限遥 据报
道袁从海洋被囊动物 耘怎凿蚤泽贼燥皂葬 燥造蚤增葬糟藻怎皂 中分离到
的蕈状海鞘素渊藻怎凿蚤泽贼燥皂蚤灶冤类生物碱对 阅晕粤病毒及
砸晕粤病毒都有活性 渊董肖椿等袁 圆园园猿 冤曰王杰等
渊圆园员员冤研究发现海带多糖具有诱导烟草体内防御
酶活性提高尧诱导植物产生抗 栽酝灾活性的作用曰蕴蚤怎
藻贼 葬造援 渊圆园园缘冤从海藻孔石莼中提取到分子量为 猿远
噪阅的抗 栽酝灾活性蛋白袁对心叶烟上的 栽酝灾 侵染抑
制率达 愿缘郾 员远豫 曰商文静等渊圆园园苑冤通过酶法降解壳
聚糖制备的壳寡糖袁经检测发现对植物病毒病有诱
抗效果遥 因此袁加强海洋生物抗植物病毒活性物质
的筛选袁在丰富天然抗植物病毒资源尧无公害农药开
发等方面具有重要意义遥
水母是海洋无脊椎浮游动物袁其触手及口周围
分布有大量刺细胞遥 有毒水母的刺细胞能释放毒
液袁毒液中含有多种结构新颖尧生物活性多样的肽类
毒性成分遥 白色霞水母 悦赠葬灶藻葬 灶燥扎葬噪蚤蚤 运蚤泽澡蚤灶燥怎赠藻
是一种大型蜇人水母袁在我国东海尧黄海和渤海广泛
分布袁由于其刺细胞毒素的毒性作用袁人体被其蜇伤
会引发如皮肤红斑尧丘疱疹尧糜烂等局部中毒症状袁
甚至出现肌肉痉挛尧呼吸困难尧咳粘液样痰等全身症
状渊秦示德和李明袁员怨愿愿冤遥 研究表明其刺细胞毒素
具有溶血活性尧磷脂酶 粤圆 活性及致死毒性和神经毒
性等渊云藻灶早 藻贼 葬造援 袁圆园员园葬曰圆园员园遭曰李荣锋等袁圆园员员冤遥
为探索水母毒素在抗植物病毒病方面的应用前景袁
筛选更有效的天然植物病毒抑制剂袁本研究首次分
离并提取了白色霞水母刺细胞毒素袁检测了其对
栽酝灾的体外钝化作用尧初侵染预防作用尧增殖抑制
作用及治疗效果袁对其抗植物病毒活性进行初探袁为
进一步开发其生防潜力提供依据遥
员 材料与方法
员郾 员 材料
供试材料院白色霞水母 悦援 灶燥扎葬噪蚤蚤 于 圆园员园 年 愿
月采自青岛第一海水浴场附近遥 触手从水母伞盖处
人工切除后袁立即于 原 圆园 益冷冻保存袁备用遥 供试
烟草品种为三生烟 晕蚤糟燥贼蚤葬灶葬 贼葬遭葬糟怎皂 增葬则援 泽葬皂泽怎灶
晕晕袁由中国农业科学院烟草研究所提供遥
试剂与仪器院试验所用试剂均为分析纯遥 郧蕴鄄
圆园月鄄域高速冷冻离心机袁上海安亭科学仪器厂曰 酝蚤灶蚤
月藻葬凿遭藻葬贼藻则珠磨机 猿员员园月载耘哉砸袁上海上碧实验仪器有
限公司曰载杂在鄄郧 光学显微镜袁重庆光学仪器厂曰苑圆圆杂
紫外可见分光光度计袁上海精密科学仪器有限公司曰
酝运猿酶联仪袁上海雨晨生物技术有限公司遥
园园员 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源圆 卷
员郾 圆 方法
员郾 圆郾 员 刺细胞毒素的制备
刺细胞的制备院分离制备刺细胞时袁冷冻触手用
无菌海水 源 益浸泡渊增 颐 增 越 员 颐 源冤袁每 圆源 澡 换一次新
鲜海水袁保留沉淀袁期间可用玻璃棒轻轻搅拌几次遥
源 凿 后 缘源 滋皂 滤筛过滤袁去除未溶解的触手组织和
较大的组织碎片袁滤液离心袁收集沉淀遥 沉淀用
园郾 怨豫 晕葬悦造溶液悬浮袁员猿 园园园 则 辕 皂蚤灶 离心 员缘 皂蚤灶袁去
掉上清液袁通过显微镜观察袁用小勺轻轻将沉淀上层
的破碎的刺细胞和小的组织碎片去除袁底层沉淀重
新用 园郾 怨豫 晕葬悦造溶液悬浮袁员猿 园园园 则 辕 皂蚤灶离心袁显微
镜观察沉淀中刺细胞含量达 怨园豫以上时袁将沉淀收
集袁冷冻干燥袁即为水母刺细胞样品袁 原 愿园 益保存袁
备用遥
刺细胞毒素的提取院用珠磨机破碎刺细胞遥 破
碎管中加入 员 辕 圆 体积的 园郾 缘 皂皂 玻璃珠袁再加入冷
冻干燥的刺细胞和 栽则蚤泽鄄匀悦造 缓冲液渊缘园 皂皂燥造 辕 蕴袁责匀
苑郾 愿冤袁源 远园园 则 辕 皂蚤灶 震荡破碎袁每次 员 皂蚤灶袁共 源 耀 缘
次袁每破碎 员 次冰水预冷 员 皂蚤灶遥 破碎液 员猿 园园园 则 辕
皂蚤灶冷冻离心 员缘 皂蚤灶袁上清液即为白色霞水母刺细
胞毒素 渊 悦赠葬灶藻葬 灶燥扎葬噪蚤蚤 灶藻皂葬贼燥糟赠泽贼 增藻灶燥皂袁 悦晕灾冤袁
原愿园 益保存备用遥
蛋白质含量的测定院以牛血清白蛋白作标准袁用
月则葬凿枣燥则凿渊员怨苑远冤方法计算 悦晕灾中总蛋白的浓度遥
员郾 圆郾 圆 烟草花叶病毒的制备
采用 郧燥燥凿蚤灶早 驭 匀藻遭藻则贼渊员怨远苑冤方法制备遥 取温
室活体保存的 栽酝灾 感染的烟草病叶袁去除主脉袁与
园郾 缘 皂燥造 辕 蕴 责匀 苑郾 圆 的磷酸缓冲液渊含 员豫 圆鄄巯基乙
醇冤员 颐 员渊增 颐 增冤混合袁冰浴匀浆袁纱布过滤袁向滤液中
加入 愿 皂蕴正丁醇 辕 员园园 皂蕴滤液袁搅拌 员缘 皂蚤灶袁员园 园园园
则 辕 皂蚤灶冷冻离心 猿园 皂蚤灶袁收集上清液遥 员园园 皂蕴 上清
液中加入 源郾 园 早 孕耘郧渊远园园园冤袁待溶解后在 员园 园园园 则 辕
皂蚤灶离心 员缘 皂蚤灶袁去除上清液袁将底层球状物重新悬
浮于 圆园 皂蕴 园郾 园员 皂燥造 辕 蕴 磷酸缓冲液渊 责匀 苑郾 圆冤中袁
员园 园园园 则 辕 皂蚤灶离心 员缘 皂蚤灶袁得 栽酝灾 的制备液袁 原 愿园
益保存遥 使用紫外可见分光光度仪袁分别用去离子
水尧园郾 园员 皂燥造 辕 蕴 责匀 苑郾 圆 的磷酸缓冲液作空白校正袁
经 圆园园 耀 猿缘园 灶皂紫外扫描测定提纯病毒的紫外吸收
广谱袁确定其纯度及浓度遥
员郾 圆郾 猿 悦晕灾抗病毒活性测定
悦晕灾对 栽酝灾 的体外钝化作用院采用半叶枯斑
法袁剪取健康尧部位一致的三生烟叶片遥 用 园郾 园员
皂燥造 辕 蕴 责匀 苑郾 圆 的磷酸缓冲液稀释 栽酝灾的制备液袁得
浓度为 圆园 滋早 辕 蕴的 栽酝灾稀释液遥 采用逐步稀释法袁
用 缘园 皂皂燥造 辕 蕴尧责匀 苑郾 愿 的 栽则蚤泽鄄匀悦造 缓冲液与蛋白浓
度为 圆郾 远缘 皂早 辕 皂蕴 的 悦晕灾 按不同比例混合袁获得
悦晕灾梯度浓度溶液遥 各浓度 悦晕灾 溶液分别与等体
积 栽酝灾稀释液混合袁使病毒最终质量浓度为 员园 滋早 辕
蕴袁混合液中 悦晕灾 的蛋白浓度分别为 员郾 猿猿尧园郾 怨怨尧
园郾 远远尧园郾 猿猿尧园郾 员苑 皂早 辕 皂蕴遥 混合钝化 猿园 皂蚤灶后袁以半
叶法摩擦接种叶片袁左半叶接种毒素与病毒的混合
液 缘园 滋蕴袁右半叶以 栽则蚤泽鄄匀悦造 缓冲液与等体积 栽酝灾
混合液作对照接种 缘园 滋蕴袁每个处理接种 猿 个叶片袁
重复 源 次遥 将各组叶片放在铺有湿润纱布的白瓷盘
中按顺序放好袁盖上保鲜膜袁置于 圆圆 耀 圆缘 益人工气
候箱中培养遥 接种 猿 凿 后袁记录处理和对照的枯斑
数袁并计算枯斑抑制率袁以平均抑制率进行评价遥 枯
斑抑制率 越 渊对照枯斑数 原处理枯斑数冤 辕对照枯斑
数 伊员园园豫 遥
悦晕灾与 栽酝灾 体外混合时间对 悦晕灾 钝化 栽酝灾
效果的影响院采用半叶枯斑法遥 将 园郾 愿园尧园郾 员猿 皂早 辕
皂蕴 悦晕灾溶液分别与 栽酝灾等体积混合袁病毒最终质
量浓度为 员园 滋早 辕 蕴袁混合钝化时间设置 猿 个处理袁即
混合后 园尧员园尧猿园 皂蚤灶遥 钝化后采用摩擦接种的方法袁
猿 凿后统计枯斑数目袁计算抑制率袁以平均抑制率评
价混合时间对 悦晕灾对 栽酝灾钝化作用的影响遥
温度对 悦晕灾 体外钝化 栽酝灾 效果的影响院将蛋
白浓度为 圆郾 远缘 皂早 辕 皂蕴的 悦晕灾样品袁分别在 圆园尧源园尧
缘园尧远园尧苑园尧愿园 益恒温水浴中预处理 猿园 皂蚤灶袁冷却至
室温遥 与 栽酝灾等体积体外混合袁病毒最终质量浓度
为 员园 滋早 辕 蕴袁混合钝化 猿园 皂蚤灶后袁采用摩擦接种的方
法袁猿 凿 后统计枯斑数目袁计算抑制率同上袁以平均
抑制率评价 悦晕灾体外钝化 栽酝灾活性的热稳定性遥
悦晕灾对 栽酝灾初侵染的抑制作用院剪取健康尧部
位一致的三生烟叶片袁接种前将 缘园 滋蕴 园郾 怨怨 皂早 辕 皂蕴
悦晕灾毒素样品用涂布法处理三生烟左半叶袁右半叶
用等体积 缘园 皂皂燥造 辕 蕴尧责匀 苑郾 愿 的 栽则蚤泽鄄匀悦造 缓冲液处
理袁员 澡后用 员园 滋早 辕 蕴 栽酝灾 提取液摩擦接种整个叶
片袁每处理接种 愿 个叶片袁重复 源 次遥 猿 凿 后统计枯
斑数目袁计算抑制率遥
悦晕灾抑制 栽酝灾增殖作用的测定院采用叶碟法遥
在生长健康的三生烟叶片上接种 栽酝灾袁远 澡 后采取
相同叶位的叶片袁用打孔器从叶肉部分渊避开叶脉冤
取直径约为 员缘 皂皂的圆片袁分别漂浮于 员郾 怨猿尧员郾 缘源尧
园郾 怨远尧园郾 源愿尧园郾 猿圆 皂早 辕 皂蕴 悦晕灾溶液和 缘园 皂皂燥造 辕 蕴尧责匀
苑郾 愿 的 栽则蚤泽鄄匀悦造缓冲液中作为处理和阳性对照袁同
时设不接种病毒的健康叶圆片为阴性对照袁每处理
远 个圆片袁源愿 澡后将圆片用碳酸盐包被袁间接 耘蕴陨杂粤
员园员员 期 冯金华等院 白色霞水母刺细胞毒素抗烟草花叶病毒活性
法检测 阅渊源园缘 灶皂冤值袁计算抑制率遥
悦晕灾对 栽酝灾 感染的治疗效果测定院选健康的
三生烟叶片袁每半叶接种浓度为 远郾 园 滋早 辕 蕴 病毒袁圆源
澡 后袁喷施蛋白浓度为 猿郾 圆员 皂早 辕 皂蕴 的 悦晕灾 毒素溶
液袁以喷施 缘园 皂皂燥造 辕 蕴尧责匀 苑郾 愿 栽则蚤泽鄄匀悦造 缓冲液为对
照遥 每处理接种 缘 株袁重复 源 次袁猿 凿 后统计枯斑数
目袁计算抑制率遥
员郾 圆郾 源 悦晕灾蛋白水解酶活性的测定
采用酪蛋白平板法测定遥 用 园郾 员 皂燥造 辕 蕴尧 责匀
苑郾 圆 的磷酸缓冲液配制 员园 皂早 辕 皂蕴 酪蛋白溶液和
圆豫琼脂溶液袁控制温度在 愿园 耀 愿缘 益 袁将 圆 种溶液
混合使酪蛋白的终浓度为 缘 皂早 辕 皂蕴袁搅拌均匀袁趁
热倒入培养皿中渊苑 糟皂 伊 怨 糟皂冤袁每个平板等量加
入 圆园 皂蕴袁将气泡赶至边缘袁室温下凝固遥 用直径
猿 皂皂 打孔器打孔袁每个培养基打 源 个孔袁每个孔
内加入 源园 滋蕴 不同浓度的样品袁对照组用 缘园
皂皂燥造 辕 蕴尧责匀 苑郾 愿 的 栽则蚤泽鄄匀悦造 缓冲液遥 置于恒温培
养箱中 猿苑 益保温 员圆 澡袁小心取出琼脂板袁考马斯
亮蓝 砸圆缘园 染液染色 圆 澡袁用蒸馏水漂洗数次袁直到
溶解透明圈清晰袁酪蛋白被水解后袁点样孔周围显
示透明圈袁其余部分为蓝色遥 测量溶圈垂直直径袁
计算溶圈面积袁最后换算成 皂皂圆 辕 皂早遥
员郾 猿 数据分析
采用 耘曾糟藻造 圆园园猿 和 杂孕杂杂 员苑郾 园 统计软件进行数
据分析袁应用 择检验法进行差异显著性检验遥
圆 结果与分析
圆郾 员 悦晕灾对 栽酝灾的体外钝化作用
与 栽酝灾体外混合 猿园 皂蚤灶 后袁各浓度 悦晕灾 样品
对 栽酝灾都表现出明显的体外钝化作用袁且随着毒素
浓度的增加袁钝化作用增强遥 毒素蛋白浓度为 园郾 怨怨
皂早 辕 皂蕴时袁抑制率最高可达 怨愿郾 愿缘豫 曰即使浓度为
园郾 员苑 皂早 辕 皂蕴 时袁悦晕灾 对 栽酝灾 的抑制率最低袁但仍
可达到 远员郾 员源豫 渊图 员冤遥
浓度为 园郾 愿园 皂早 辕 皂蕴和 园郾 员猿 皂早 辕 皂蕴的 悦晕灾 样
品对 栽酝灾均表现出很强的抑制作用袁且随着体外混
合时间的延长袁抑制率增大袁但即使将二者混合后立
即接种袁悦晕灾对 栽酝灾的抑制作用仍然非常明显袁与
混合 员园尧猿园 皂蚤灶后接种相比无显著差异遥 栽酝灾与浓
度为 园郾 愿园 皂早 辕 皂蕴的 悦晕灾 等体积混合后立即接种袁
抑制率为 愿怨郾 缘苑豫 曰混合 猿园 皂蚤灶后接种袁抑制率稍有
提高袁为 怨圆郾 猿远豫 渊图 圆冤遥
图 员 不同浓度白色霞水母刺细胞毒素溶液对烟草花叶病毒的体外钝化作用
云蚤早援 员 陨灶葬糟贼蚤增葬贼蚤燥灶 贼燥 栽燥遭葬糟糟燥 皂燥泽葬蚤糟 增蚤则怎泽 蚤灶 增蚤贼则燥 遭赠 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶泽 燥枣 悦赠葬灶藻葬 灶燥扎葬噪蚤蚤 灶藻皂葬贼燥糟赠泽贼 增藻灶燥皂
图中数据为平均数 依标准差遥 不同大尧小写字母分别表示经 择 检验法检验在 孕 约 园郾 园员 和 孕 约 园郾 园缘 水平上差异显著遥
阅葬贼葬 蚤灶 贼澡藻 枣蚤早怎则藻 葬则藻 皂藻葬灶 依 杂阅援 阅蚤枣枣藻则藻灶贼 怎责责藻则糟葬泽藻 葬灶凿 造燥憎藻则糟葬泽藻 造藻贼贼藻则泽 燥灶 贼澡藻 遭葬则泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 孕 约 园郾 园员
葬灶凿 孕 约 园郾 园缘 造藻增藻造泽 遭赠 择 贼藻泽贼袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援
摇
摇 摇 将蛋白浓度为 圆郾 远缘 皂早 辕 皂蕴的 悦晕灾预置不同温
度下 猿园 皂蚤灶袁其抗 栽酝灾 活性受到不同程度的影响遥
圆园尧源园尧远园尧苑园尧愿园 益处理后袁毒素对 栽酝灾 的抑制率
分 别 为 怨怨郾 源园豫 尧 苑怨郾 猿怨豫 尧 远怨郾 缘愿豫 尧 远愿郾 源园豫 尧
远员郾 苑猿豫和 圆源郾 圆远豫 袁随着处理温度的升高袁抑制率
逐渐降低遥 将 悦晕灾 样品在 圆园 益放置 猿园 皂蚤灶袁其对
栽酝灾的抑制作用仍能很好地保持袁且极显著高于其
它温度处理曰当温度升高到 苑园 益时袁抑制率降低了
猿苑郾 远苑豫 袁但还具有明显抑制作用遥 只有当温度升高
到 愿园 益袁抑制率才明显降低袁且极显著低于其余温
圆园员 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源圆 卷
图 圆 钝化时间对白色霞水母刺细胞毒素抑制烟草花叶病毒活性的影响
云蚤早援 圆 栽澡藻 蚤灶枣造怎藻灶糟藻泽 燥枣 皂蚤曾蚤灶早 贼蚤皂藻 燥灶 蚤灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 燥枣 栽燥遭葬糟糟燥 皂燥泽葬蚤糟 增蚤则怎泽 遭赠 悦赠葬灶藻葬 灶燥扎葬噪蚤蚤 灶藻皂葬贼燥糟赠泽贼 增藻灶燥皂
图中数据为平均数 依标准差遥 不同大尧小写字母分别表示经 择 检验法检验在 孕 约 园郾 园员 和 孕 约 园郾 园缘 水平上差异显著遥
阅葬贼葬 蚤灶 贼澡藻 枣蚤早怎则藻 葬则藻 皂藻葬灶 依 杂阅援 阅蚤枣枣藻则藻灶贼 怎责责藻则糟葬泽藻 葬灶凿 造燥憎藻则糟葬泽藻 造藻贼贼藻则泽 燥灶 贼澡藻 遭葬则泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 孕 约 园郾 园员
葬灶凿 孕 约 园郾 园缘 造藻增藻造泽 遭赠 择 贼藻泽贼袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援
摇
度处理袁但仍表现出微弱的抑制作用遥 源园尧远园尧苑园 益
这 猿 个温度处理间无显著差异袁但均与 圆园尧愿园 益处
理间差异极显著遥
图 猿 白色霞水母刺细胞毒素的酪蛋白水解活性
云蚤早援 猿 栽澡藻 澡赠凿则燥造赠泽蚤泽 藻枣枣藻糟贼 燥枣 悦赠葬灶藻葬 灶燥扎葬噪蚤蚤 灶藻皂葬贼燥糟赠泽贼 增藻灶燥皂 燥灶 糟葬泽藻蚤灶
圆郾 圆 悦晕灾对 栽酝灾初侵染的预防作用
悦晕灾对 栽酝灾 的初侵染也具有一定抑制作用遥
缘园 滋蕴 园郾 怨怨 皂早 辕 皂蕴 悦晕灾对 栽酝灾初侵染的抑制率为
源怨郾 缘圆豫 遥 而与等体积 栽酝灾 体外混合 猿园 皂蚤灶 后袁对
栽酝灾的抑制率为 怨愿郾 愿缘豫 遥 与对 栽酝灾 的体外钝化
作用相比袁毒素对初侵染的抑制作用稍弱袁但抑制效
果也非常明显遥 表明 悦晕灾对 栽酝灾的初侵染具有一
定的预防作用遥
圆郾 猿 悦晕灾对 栽酝灾增殖的抑制作用
悦晕灾对病毒增殖的影响测定表明袁样品对 栽酝灾
在烟草叶片中的增殖具有一定抑制作用遥 处理 圆 凿
时袁蛋白浓度为 员郾 怨猿 皂早 辕 皂蕴 的 悦晕灾 样品袁对 栽酝灾
增殖的抑制率可达 源怨郾 源员豫 曰随着蛋白浓度的降低
抑制效果减弱袁浓度为 园郾 猿圆 皂早 辕 皂蕴 时抑制率仅
为 圆源郾 圆远豫 遥
圆郾 源 悦晕灾对 栽酝灾感染的治疗作用
观察发现袁接种 栽酝灾尧不喷毒素的对照组植株
全部出现典型的花叶症状曰喷施毒素的处理组也都
出现了花叶症状袁但程度比对照组略轻袁表明 悦晕灾
的治疗效果不明显袁员郾 远员 皂早 辕 皂蕴 毒素对 栽酝灾 所致
花叶的疗效仅为 远郾 远缘豫 遥
圆郾 缘 悦晕灾的蛋白水解酶活性
酪蛋白平板法检测 悦晕灾 的蛋白水解酶活性结
果显示袁在样品平板上出现明显透明圈袁说明 悦晕灾
能够降解酪蛋白袁具有蛋白水解酶活性遥 随着 悦晕灾
蛋白浓度的增大袁在酪蛋白平板上产生的透明圈直
径变大遥 蛋白浓度为 园郾 圆远尧园郾 缘员尧园郾 远愿尧员郾 园圆 皂早 辕 皂蕴
的 悦晕灾 样品袁产生透明圈的直径分别为 愿郾 员园尧
员员郾 圆园尧员圆郾 园园尧员远郾 员园 皂皂渊图 猿冤遥 白色霞水母刺细胞
不同蛋白浓度的毒素其酶活力无显著差异袁平均酶
活力为 员怨郾 远源 伊 员园猿 皂皂圆 辕 皂早遥
猿园员员 期 冯金华等院 白色霞水母刺细胞毒素抗烟草花叶病毒活性
猿 讨论
本研究表明袁白色霞水母毒素对 栽酝灾有较强的
直接钝化作用袁且对 栽酝灾 的作用是一个快速过程袁
即使与 栽酝灾 混合后立即接种袁悦晕灾 也表现出很强
的钝化能力遥 病毒抑制剂对 栽酝灾 的直接钝化机理
包括降解或聚集病毒外壳蛋白渊砸藻蚤灶藻则燥 驭 月藻葬糟澡赠袁
员怨愿远曰王伟伟等袁圆园园愿冤尧降解病毒核酸 渊 云则藻灶糟澡 藻贼
葬造援 袁员怨怨员冤尧破坏 栽酝灾粒体的完整性渊江山等袁员怨怨远冤
等遥 栽酝灾的外壳蛋白可特异性的结合到光合系统
域渊孕杂域冤上袁破坏叶绿体结构和功能袁对引起植株
花叶起决定性的作用渊砸藻蚤灶藻则燥 驭 月藻葬糟澡赠袁员怨愿远冤遥 王
伟伟等渊圆园园愿冤尝试利用碱性蛋白酶水解植物病毒
外壳蛋白来防治植物病毒病袁发现枯草芽胞杆菌
月葬糟蚤造造怎泽 泽怎遭贼蚤造蚤泽 宰鄄匝载鄄员 产生的碱性蛋白酶在较低浓
度下对 栽酝灾有明显的体外钝化作用遥 悦晕灾 对 栽酝灾
的体外钝化作用是一个非常快速的过程袁所以 悦晕灾
在烟草花叶病毒上的作用位点可能为其外壳蛋白曰
悦晕灾具有明显的蛋白水解酶活性袁酶的作用有可能
使病毒粒体的外壳蛋白受到破坏袁而发生钝化遥
国内外研究表明袁水母毒素中的主要活性成分
为蛋白质袁蛋白质在较高温度下易变性袁生物活性降
低遥 本试验探讨了不同温度下白色霞水母毒素对
栽酝灾钝化作用的影响袁结果表明温度升高袁毒素对
栽酝灾的抑制率降低袁说明毒素中抗 栽酝灾 成分可能
是蛋白质遥 但毒素中抗 栽酝灾 成分又同时表现出较
强的温度耐受性袁苑园 益时毒素对 栽酝灾 的抑制率仍
达 缘园豫以上袁升温至 愿园 益时抑制率才快速下降遥
多种蛋白类天然抗植物病毒物质表现出对高温的耐
受性袁如花脸蘑 蕴藻责蚤泽贼葬 泽燥则凿蚤凿葬 蛋白在 缘园 益加热 猿园
皂蚤灶后对 栽酝灾 侵染抑制率仍可达 远远郾 猿豫 渊马凤金
等袁圆园园怨冤曰枯草芽胞杆菌 宰鄄匝载鄄员 产生的抗 栽酝灾碱
性蛋白酶在 缘园 益保温 猿园 皂蚤灶以上时剩余酶活力仍
能保持 缘园豫以上渊王伟伟等袁圆园园愿冤遥 这种高温耐受
性对活性蛋白抗病毒活性的深入研究和开发提供了
有利条件遥
白色霞水母毒素对 栽酝灾 的初侵染具有一定的
预防作用袁对 栽酝灾 的增殖具有明显抑制作用袁但是
一旦病毒侵入寄主体内大量增殖袁症状表达袁该毒素
对 栽酝灾几乎没有治疗效果遥 可能是由于毒素中的
抗病毒成分为蛋白类尧蛋白质等生物大分子袁在叶片
表面不易被寄主吸收袁所以白色霞水母毒素对抑制
烟草花叶病毒的症状表达效果比较差遥 本研究表明
海洋生物毒素要白色霞水母毒素袁含有一种或几种
对温度具有较高耐受性的抗植物病毒物质袁可能为
蛋白质袁且可能与毒素中的蛋白水解酶有关曰毒素中
的抗病毒成分能对 栽酝灾快速有效的钝化袁并具有一
定的预防 栽酝灾 初侵染和抑制其增殖的效果遥 但本
试验对白色霞水母毒素抗 栽酝灾 的作用机制未作深
入研究袁因此袁还需对该毒素中抗 栽酝灾 成分及其对
病毒粒子结构的影响及作用位点等进行探讨袁掌握
其抗病毒机制袁为其进一步的开发利用提供基础
依据遥
参 考 文 献 渊砸藻枣藻则藻灶糟藻泽冤
月则葬凿枣燥则凿 酝酝援 员怨苑远援 粤 则葬责蚤凿 葬灶凿 泽藻灶泽蚤贼蚤增藻 皂藻贼澡燥凿 枣燥则 贼澡藻 择怎葬灶贼蚤贼葬鄄
贼蚤燥灶 燥枣 皂蚤糟则燥早则葬皂 择怎葬灶贼蚤贼蚤藻泽 燥枣 责则燥贼藻蚤灶泽 怎贼蚤造蚤扎蚤灶早 贼澡藻 责则蚤灶糟蚤责造藻 燥枣
责则燥贼藻蚤灶 凿赠藻 遭蚤灶凿蚤灶早援 粤灶葬造赠贼蚤糟葬造 月蚤燥糟澡藻皂蚤泽贼则赠袁 苑圆渊员 辕 圆冤院 圆源愿 原
圆缘源
阅燥灶早 载悦袁 酝蚤葬燥 再孕袁 蕴蚤灶 在郧袁 再怎 云袁 宰藻灶 砸援 圆园园猿援 粤凿增葬灶糟藻泽 蚤灶
泽贼怎凿蚤藻泽 燥灶 藻怎凿蚤泽贼燥皂蚤灶 皂葬则蚤灶藻 葬造噪葬造燥蚤凿泽援 粤糟贼葬 孕澡葬则皂葬糟藻怎贼蚤糟葬
杂蚤灶蚤糟葬袁 猿愿渊员冤院 愿苑远 原 愿愿园 渊 蚤灶 悦澡蚤灶藻泽藻冤 咱董肖椿袁 缪宇平袁
林志刚袁 余凡袁 闻韧援 圆园园猿援 耘怎凿蚤泽贼燥皂蚤灶 类海洋生物碱的研
究进展援 药学学报袁 猿愿渊员冤院 愿苑远 原 愿愿园暂
阅燥灶蚤葬 酝袁 匀葬皂葬灶灶 酝栽援 圆园园猿援 酝葬则蚤灶藻 灶葬贼怎则葬造 责则燥凿怎糟贼泽 葬灶凿 贼澡藻蚤则 责燥鄄
贼藻灶贼蚤葬造 葬责责造蚤糟葬贼蚤燥灶泽 葬泽 葬灶贼蚤鄄蚤灶枣藻糟贼蚤增藻 葬早藻灶贼泽援 栽澡藻 蕴葬灶糟藻贼 陨灶枣藻糟鄄
贼蚤燥怎泽 阅蚤泽藻葬泽藻泽袁 猿渊远冤院 猿猿愿 原 猿源愿
云藻灶早 允匀袁 再怎 匀匀袁 蕴蚤 悦孕袁 载蚤灶早 砸耘袁 蕴蚤怎 杂袁 宰葬灶早 蕴袁 悦葬蚤 杂月袁 蕴蚤
孕悦援 圆园员园葬援 陨泽燥造葬贼蚤燥灶 葬灶凿 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤扎葬贼蚤燥灶 燥枣 造藻贼澡葬造 责则燥贼藻蚤灶泽 蚤灶
灶藻皂葬贼燥糟赠泽贼 增藻灶燥皂 燥枣 贼澡藻 躁藻造造赠枣蚤泽澡 悦赠葬灶藻葬 灶燥扎葬噪蚤蚤 运蚤泽澡蚤灶燥怎赠藻援
栽燥曾蚤糟燥灶袁 缘缘渊员冤院 员员愿 原 员圆缘
云藻灶早 允匀袁 再怎 匀匀袁 载蚤灶早 砸耘袁 蕴蚤怎 杂袁 宰葬灶早 蕴袁 悦葬蚤 杂月袁 蕴蚤 孕悦援
圆园员园遭援 孕葬则贼蚤葬造 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤扎葬贼蚤燥灶 燥枣 贼澡藻 澡藻皂燥造赠贼蚤糟 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 贼澡藻
灶藻皂葬贼燥糟赠泽贼 增藻灶燥皂 枣则燥皂 贼澡藻 躁藻造造赠枣蚤泽澡 悦赠葬灶藻葬 灶燥扎葬噪蚤蚤 运蚤泽澡蚤灶燥怎赠藻援
栽燥曾蚤糟燥造燥早赠 蚤灶 灾蚤贼则燥袁 圆源渊远冤院 员苑缘园 原 员苑缘远
云则藻灶糟澡 悦允袁 耘造凿藻则 酝袁 蕴藻早早藻贼贼 云袁 陨遭则葬澡蚤皂 砸运袁 栽燥憎藻则泽 郧匀晕援 员怨怨员援
云造葬增燥灶燥蚤凿 蚤灶澡蚤遭蚤贼 蚤灶枣藻糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 贼燥遭葬糟糟燥 皂燥泽葬蚤糟 增蚤则怎泽援 悦葬灶葬凿蚤葬灶
允燥怎则灶葬造 燥枣 孕造葬灶贼 孕葬贼澡燥造燥早赠袁 员猿渊员冤院 员 原 远
郧燥燥凿蚤灶早 郧灾 允则援 袁 匀藻遭藻则贼 栽栽援 员怨远苑援 粤 泽蚤皂责造藻 贼藻糟澡灶蚤择怎藻 枣燥则 责怎则蚤枣蚤糟葬鄄
贼蚤燥灶 燥枣 贼燥遭葬糟糟燥 皂燥泽葬蚤糟 增蚤则怎泽 蚤灶 造葬则早藻 择怎葬灶贼蚤贼蚤藻泽援 孕澡赠贼燥责葬贼澡燥造燥早赠袁
缘苑渊员员冤院 员圆愿缘
允蚤葬灶早 杂袁 郧怎燥 载蕴袁 匀葬灶 载蕴援 员怨怨远援 陨灶枣造怎藻灶糟藻 燥枣 泽燥皂藻 葬灶贼蚤责澡赠贼燥增蚤则葬造
泽怎遭泽贼葬灶糟藻泽 燥灶 贼澡藻 责燥造赠皂藻则蚤扎葬贼蚤燥灶 渊 蚤灶 增蚤贼则燥冤 燥枣 糟燥葬贼 责则燥贼藻蚤灶 燥枣
栽燥遭葬糟糟燥 皂燥泽葬蚤糟 增蚤则怎泽 渊栽酝灾冤援 灾蚤则燥造燥早蚤糟葬 杂蚤灶蚤糟葬袁 员员渊员冤院 苑苑 原
苑怨 渊蚤灶 悦澡蚤灶藻泽藻冤 咱江山袁 郭雪柳袁 韩熹莱援 员怨怨远援 一些抗植
物病毒剂对烟草花叶病毒衣壳蛋白体外蛋白聚合过程的影
响援 中国病毒学袁 员员渊员冤院 苑苑 原 苑怨暂
蕴蚤 砸云袁 再怎 匀匀袁 云藻灶早 允匀袁 蕴蚤 孕悦援 圆园员员援 耘枣枣藻糟贼 燥枣 贼澡藻 责则燥贼藻葬泽藻 蚤灶鄄
澡蚤遭蚤贼燥则泽 燥灶 贼澡藻 澡藻皂燥造赠贼蚤糟 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 躁藻造造赠枣蚤泽澡 灶藻皂葬贼燥糟赠泽贼 增藻灶燥皂援
悦澡蚤灶藻泽藻 允燥怎则灶葬造 燥枣 酝葬则蚤灶藻 阅则怎早泽袁 猿园 渊圆冤院 猿怨 原 源猿 渊 蚤灶 悦澡蚤鄄
灶藻泽藻冤 咱李荣锋袁 于华华袁 冯金华袁 李鹏程援 圆园员员援 蛋白酶抑
制剂对霞水母毒素溶血活性的影响援 中国海洋药物袁 猿园
渊圆冤院 猿怨 原 源猿暂
源园员 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源圆 卷
蕴蚤怎 在再袁 载蚤藻 蕴再袁 宰怎 在允袁 蕴蚤灶 匝再袁 载蚤藻 蕴匀援 圆园园缘援 孕怎则蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 葬灶凿
糟澡葬则葬糟贼藻则蚤扎葬贼蚤燥灶 燥枣 葬灶 葬灶贼蚤鄄栽酝灾 责则燥贼藻蚤灶 枣则燥皂 葬 皂葬则蚤灶 葬造早葬藻 哉造增葬
责藻则贼怎泽葬援 粤糟贼葬 孕澡赠贼燥责葬贼澡燥造燥早蚤糟葬 杂蚤灶蚤糟葬袁 猿缘渊猿冤院 圆缘远 原 圆远员
酝葬 云允袁 再葬灶 允再袁 再葬灶 匀袁 在澡葬灶早 蕴再袁 蕴蚤 载匀援 圆园园怨援 杂贼怎凿赠 燥灶 贼澡藻 葬糟鄄
贼蚤增蚤贼赠 燥枣 葬灶贼蚤鄄贼燥遭葬糟糟燥 皂燥泽葬蚤糟 增蚤则怎泽 燥枣 糟则怎凿藻 责则燥贼藻蚤灶 枣则燥皂 蕴藻责蚤泽贼葬
泽燥则凿蚤凿葬援 允燥怎则灶葬造 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠 燥枣 匀藻遭藻蚤袁 猿圆 渊远冤院
怨圆 原 怨远 渊蚤灶 悦澡蚤灶藻泽藻冤 咱马凤金袁 燕继晔袁 严红袁 张丽叶袁 李
兴红援 圆园园怨援 花脸蘑渊蕴藻责蚤泽贼葬 泽燥则凿蚤凿葬冤蛋白粗提液抗烟草花
叶病毒活性研究援 河北农业大学学报袁 猿圆渊远冤院 怨圆 原 怨远暂
酝藻蚤 载栽袁 载怎 阅匀袁 载怎 杂月援 圆园园猿援 栽澡藻 遭葬糟贼藻则蚤燥泽贼葬贼蚤糟 葬灶凿 葬灶贼蚤鄄蚤灶枣造怎藻灶鄄
扎葬 增蚤则怎泽 藻枣枣藻糟贼泽 燥枣 皂葬则蚤灶藻 葬糟贼蚤增藻 皂葬贼藻则蚤葬造 悦韵猿 援 粤糟贼葬 杂糟蚤藻灶贼蚤葬则怎皂
晕葬贼怎则葬造蚤怎皂 哉灶蚤增藻则泽蚤贼葬贼蚤泽 杂怎灶赠葬贼泽藻灶蚤袁 源圆渊缘冤院 远苑 原 远怨 渊 蚤灶 悦澡蚤鄄
灶藻泽藻冤 咱梅雪婷袁 许东晖袁 许实波援 圆园园猿援 海洋活性物质 悦韵猿
抑菌及抗流感病毒的作用援 中山大学学报渊自然科学版冤袁
源圆渊缘冤院 远苑 原 远怨暂
酝蚤泽葬贼燥 栽袁 匀怎葬灶早 运栽袁 运葬贼葬早蚤则蚤 酝袁 哉藻凿葬 酝袁 云怎噪葬贼泽怎 杂援 员怨远苑援 月蚤鄄
澡燥则燥皂赠糟蚤灶袁 灶藻憎 葬灶贼蚤鄄责造葬灶贼鄄增蚤则葬造 葬灶贼蚤遭蚤燥贼蚤糟泽援 栽澡藻 允燥怎则灶葬造 燥枣 粤灶鄄
贼蚤遭蚤燥贼蚤糟泽袁 圆园渊缘冤院 圆缘源 原 圆远园
匝蚤灶 蕴蕴袁 匀葬燥 耘宰援 圆园园愿援 韵增藻则增蚤藻憎 燥枣 贼澡藻 蚤灶增藻泽贼蚤早葬贼蚤燥灶 燥灶 皂葬则蚤灶藻 造蚤枣藻
则藻泽燥怎则糟藻泽 枣燥则 凿则怎早泽援 允燥怎则灶葬造 燥枣 蕴蚤葬燥灶蚤灶早 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠 燥枣 栽则葬凿蚤贼蚤燥灶葬造
悦澡蚤灶藻泽藻 酝藻凿蚤糟蚤灶藻袁 员园渊怨冤院 源圆 原 源缘 渊蚤灶 悦澡蚤灶藻泽藻冤 咱覃骊兰袁郝
二伟援 圆园园愿援 海洋生物资源药用研究概述援 辽宁中医药大学
学报袁 员园渊怨冤院 源圆 原 源缘暂
匝蚤灶 杂阅袁 蕴蚤 酝援 员怨愿愿援 悦赠葬灶藻葬 灶燥扎葬噪蚤蚤 凿藻则皂葬贼蚤贼蚤泽援 粤糟贼葬 粤糟葬凿藻皂蚤葬藻
酝藻凿蚤糟蚤灶葬藻 匝蚤灶早凿葬燥 哉灶蚤增藻则泽蚤贼葬贼蚤泽袁 圆源 渊源冤院 猿园园 渊 蚤灶 悦澡蚤灶藻泽藻冤
咱秦示德袁 李明援 员怨愿愿援 霞水母皮炎援 青岛医学院学报袁 圆源
渊源冤院 猿园园暂
砸藻蚤灶藻则燥 粤袁 月藻葬糟澡赠 砸晕援 员怨愿远援 粤泽泽燥糟蚤葬贼蚤燥灶 燥枣 栽酝灾 糟燥葬贼 责则燥贼藻蚤灶 憎蚤贼澡
糟澡造燥则燥责造葬泽贼 皂藻皂遭则葬灶藻泽 蚤灶 增蚤则怎泽鄄蚤灶枣藻糟贼藻凿 造藻葬增藻泽援 孕造葬灶贼 酝燥造藻糟怎造葬则
月蚤燥造燥早赠袁 远渊远冤院 圆怨员 原 猿园员
砸燥遭蚤灶泽 砸运袁 栽燥憎灶泽藻灶凿 蕴月袁 悦葬泽泽蚤凿赠 云袁 郧藻则泽贼藻则 允云袁 蕴藻憎蚤泽 粤云袁 酝蚤造造藻则
砸蕴援 员怨远远援 杂贼则怎糟贼怎则藻 燥枣 贼澡藻 灶怎糟造藻燥泽蚤凿藻 葬灶贼蚤遭蚤燥贼蚤糟泽 枣燥则皂赠糟蚤灶袁
枣燥则皂赠藻蚤灶 月 葬灶凿 造葬怎则怎泽蚤灶援 允燥怎则灶葬造 燥枣 匀藻贼藻则燥糟赠糟造蚤糟 悦澡藻皂蚤泽贼则赠袁 猿
渊员冤院 员员园 原 员员源
杂澡葬灶早 宰允袁 宰怎 再云袁 在澡葬燥 载酝袁 阅怎 再郧袁 杂澡葬灶早 匀杂援 圆园园苑援 哉造贼则葬鄄
泽贼则怎糟贼怎则藻 燥枣 蚤灶凿怎糟藻凿 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 燥枣 贼燥遭葬糟糟燥 贼燥 栽燥遭葬糟糟燥 皂燥泽葬蚤糟 增蚤鄄
则怎泽 遭赠 糟澡蚤贼燥鄄燥造蚤早燥泽葬糟糟澡葬则蚤凿藻泽援 粤糟贼葬 孕澡赠贼燥责葬贼澡燥造燥早蚤糟葬 杂蚤灶蚤糟葬袁 猿苑
渊员冤院 缘远 原 远员 渊蚤灶 悦澡蚤灶藻泽藻冤 咱商文静袁 吴云峰袁 赵小明袁杜昱
光袁商鸿生援 圆园园苑援 壳寡糖诱导烟草抗烟草花叶病毒的超微
结构研究援 植物病理学报袁 猿苑渊员冤院 缘远 原 远员暂
宰葬灶早 允袁 宰葬灶早 运再袁 在澡葬灶早 匝袁 在澡怎 再运袁 允蚤葬灶早 蕴蕴援 圆园员员援 陨灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶
燥枣 造葬皂蚤灶葬则蚤灶 葬早葬蚤灶泽贼 栽酝灾 葬灶凿 藻枣枣藻糟贼 燥灶 责则燥贼藻糟贼蚤增藻 藻灶扎赠皂藻泽 蚤灶 贼燥鄄
遭葬糟糟燥援 允燥怎则灶葬造 燥枣 孕造葬灶贼 孕则燥贼藻糟贼蚤燥灶袁 猿愿渊远冤院 缘猿圆 原 缘猿愿 渊蚤灶 悦澡蚤鄄
灶藻泽藻冤 咱王杰袁 王开运袁 张骞袁 朱玉坤袁 姜莉莉援 圆园员员援 海带
多糖对烟草花叶病毒的抑制作用及其对烟草酶活性的影
响援 植物保护学报袁 猿愿渊远冤院 缘猿圆 原 缘猿愿暂
宰葬灶早 宰宰袁 郧怎燥 在月袁 粤灶 阅砸袁 酝怎 载匝袁 在澡葬灶早 匝云援 圆园园愿援 栽澡藻 葬灶贼蚤鄄
栽酝灾 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 葬灶凿 责则燥责藻则贼蚤藻泽 燥枣 葬造噪葬造蚤灶藻 责则燥贼藻葬泽藻 枣则燥皂 月葬糟蚤造造怎泽
泽怎遭贼蚤造蚤泽 宰鄄匝载鄄员援 粤糟贼葬 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬藻 月燥则藻葬造蚤鄄燥糟糟蚤凿藻灶贼葬造蚤泽 杂蚤灶蚤糟葬袁
员苑渊缘冤院 员愿苑 原 员怨圆 渊蚤灶 悦澡蚤灶藻泽藻冤 咱王伟伟袁 郭志波袁 安德荣袁
慕小倩袁 张勤福援 圆园园愿援 枯草芽孢杆菌宰鄄匝载鄄员碱性蛋白酶
的性质及其抗烟草花叶病毒活性初步研究援 西北农业学报袁
员苑渊缘冤院 员愿苑 原 员怨圆暂
宰怎 再月袁 再葬灶 在酝袁 载蚤藻 蕴再袁 蕴蚤灶 匝再袁 载蚤藻 蕴匀援 圆园园愿援 砸藻糟藻灶贼 凿藻增藻造鄄
燥责皂藻灶贼 蚤灶 则藻泽藻葬则糟澡 燥枣 灶葬贼怎则葬造 葬灶贼蚤鄄栽酝灾 遭蚤早 皂燥造藻糟怎造葬则 泽怎遭鄄
泽贼葬灶糟藻泽援 酝蚤糟则燥遭蚤燥造燥早赠袁 猿缘渊苑冤院 员园怨远 原 员员园员 渊蚤灶 悦澡蚤灶藻泽藻冤 咱吴
艳兵袁 颜振敏袁 谢荔岩袁 林奇英袁 谢联辉援 圆园园愿援 天然抗烟
草花叶病毒大分子物质研究进展援 微生物学通报袁 猿缘渊苑冤院
员园怨远 原 员员园员暂
载蚤灶 载蕴袁 郧藻灶早 酝再袁 蕴蚤 郧蕴袁 郧怎葬灶 匀杂袁 蕴蚤 在蕴援 圆园园园援 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 皂葬鄄
则蚤灶藻 责燥造赠泽葬糟糟澡葬则蚤凿藻 怨员员 燥灶 匀陨灾鄄员 责则燥造蚤枣藻则葬贼蚤燥灶 蚤灶 增蚤贼则燥援 悦澡蚤灶藻泽藻
允燥怎则灶葬造 燥枣 酝葬则蚤灶藻 阅则怎早泽袁 渊猿冤院 愿 原 员员 渊蚤灶 悦澡蚤灶藻泽藻冤 咱辛现良袁
耿美玉袁 李桂玲袁 管华诗袁 李泽琳援 圆园园园援 海洋硫酸多糖
怨员员体外对 匀陨灾鄄员 作用的研究援 中国海洋药物袁 渊猿冤院 愿 原
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再葬灶早 悦杂袁 宰葬灶早 再袁 蕴蚤怎 郧悦援 圆园园愿援 栽澡藻 葬凿增葬灶糟藻泽 蚤灶 贼澡藻 责则藻增藻灶贼蚤燥灶
葬灶凿 贼则藻葬贼皂藻灶贼 葬早藻灶贼泽 枣燥则 责造葬灶贼 增蚤则怎泽 葬灶凿 蚤贼泽 澡葬则皂造藻泽泽 葬责责造蚤糟葬贼蚤燥灶
责则燥泽责藻糟贼援 孕藻泽贼蚤糟蚤凿藻 酝葬则噪藻贼 晕藻憎泽袁 渊愿冤院 源 原 远 渊 蚤灶 悦澡蚤灶藻泽藻冤
咱杨崇实袁 王勇袁 刘耕春援 圆园园愿援 防治植物病毒制剂进展及
其无害化应用前景援 农药市场信息袁 渊愿冤院 源 原 远暂
渊责任编辑院李美娟冤
缘园员员 期 冯金华等院 白色霞水母刺细胞毒素抗烟草花叶病毒活性