全 文 :植物保护学报 Journal of Plant Protection, 2016, 43(4): 677 - 682 DOI: 10 13802 / j. cnki. zwbhxb. 2016 04 022
基金项目:国家现代农业产业技术体系(CARS⁃04)
∗通讯作者(Author for correspondence), E⁃mail: sss⁃63@ 263. net
收稿日期: 2014 - 12 - 22
精异丙甲草胺苗前封闭处理对大豆苗期生长
及其生理生化指标的影响
朱诗禹1 崔 娟1 徐 伟1 史树森1∗ 张文芳2 李 淮3
(1.吉林农业大学农学院, 大豆区域技术创新中心, 长春 130118; 2.长春市朝阳区农业局, 长春 130012;
3.长春市朝阳区农业技术推广总站, 长春 130012)
摘要: 为明确精异丙甲草胺苗前封闭处理对大豆苗期生长及其生理生化指标的影响,通过室内试
验,测定大豆幼苗在不同浓度精异丙甲草胺处理后 28 d的相关农艺性状及各生理生化指标。 结果
表明,1 224 g ( a. i. ) / hm2 精异丙甲草胺处理对大豆生长的促进效果最好,可使植株显著增高
27 06% ,根显著增长 10 53% ,茎叶鲜重显著增加 35 62% 、干重显著增加 33 33% ,根系鲜重显著
增加 70 45% 。 大豆叶片叶绿素含量随药剂浓度的增加而降低,但在 383 ~ 1 530 g (a. i. ) / hm2 内
与对照无显著差异;各药剂处理浓度均可增强大豆叶片过氧化物酶活性,其中 3 060 g (a. i. ) / hm2
处理最高,比对照显著增强 32 10% ;在 765、1 224 g (a. i. ) / hm2 浓度下均可增强过氧化氢酶和超
氧化物歧化酶的活性,1 224 g (a. i. ) / hm2 处理时分别比对照提高 20 72%和 2 88% 。 表明精异丙
甲草胺苗前封闭处理在一定使用浓度范围内对大豆苗期植株生长有显著促进作用,对其叶绿素合
成无显著影响,可有效提高抗氧化酶活性,是一种对大豆田环境友好且安全性高的除草剂。
关键词: 大豆; 精异丙甲草胺; 抗氧化酶; 叶绿素; 生长促进
Effects of the treatment with S⁃metolachlor before seedling emergence on the
soybean growth and physiological and biochemical indexes
Zhu Shiyu1 Cui Juan1 Xu Wei1 Shi Shusen1∗ Zhang Wenfang2 Li Huai3
(1. Innovation Center of Soybean Region Technology, College of Agriculture, Jilin Agricultural University, Changchun 130118,
Jilin Province, China; 2. Chaoyang District Agricultural Bureau of Changchun City, Changchun 130012, Jilin Province, China;
3. Chaoyang District Agricultural Technology Extension Station of Changchun City, Changchun 130012, Jilin Province, China)
Abstract: To determine the effects of the treatment with S⁃metolachlor before seedling emergence on the
soybean growth and biochemical mechanism, the soil was treated with S⁃metolachlor at seven
concentrations, and the agronomic characters and physiological and biochemical indexes were measured
28 days after various treatments. The results showed that 1 224 g ( a. i. ) / hm2 had the best promoting
effect, which significantly increased the height of plants, length of roots, stem⁃leaf fresh weight, dried
weight and root fresh weight by 27 06% , 10 53% , 35 62% , 33 33% and 70 45% compared to the
CK, respectively. The leaf chlorophyll content decreased with the increase of S⁃metolachlor
concentration, but there was no significant difference in leaf chlorophyll content between the concentration
range of 383 - 1 530 g ( a. i. ) / hm2 and the CK. All treatments with different concentrations could
enhance the activity of peroxidase in soybean leaves. At the concentration of 3 060 g (a. i. ) / hm2, the
peroxidase activity was the highest, which increased by 32 10% compared with the CK. At the
concentrations of 765 g (a. i. ) / hm2 and 1 224 g ( a. i. ) / hm2, the catalase and superoxide dismutase
activity significantly increased. At the concentration of 1 224 g (a. i. ) / hm2, the catalase and superoxide
dismutase activity increased by 20 72% and 2 88% compared with the CK, respectively. These results
indicated that the treatment of S⁃metolachlor with a certain range of concentrations before seedling
emergence significantly promoted the soybean seedling growth, and could effectively improve the
antioxidant enzyme activities, but it had no significant effect on the synthesis of chlorophyll.
S⁃metolachlor is recommended to use in the soybean fields for its environment⁃friendliness and high
security.
Key words: soybean; S⁃metolachlor; the antioxidant enzyme; chlorophyll; growth promotion
大豆是重要的粮油作物,也是食用蛋白和饲料
蛋白质的主要来源,目前全世界大豆种植面积已超
过 1 67 亿 hm2。 化学除草是现代农业生产中控制
农田杂草危害最简单且有效的措施 (温银元等,
2012),而化学农药对作物光合作用、活性氧代谢、
根系活力、体内酶活性及主要营养物质和生长调节
物质含量等都存在一定的影响(刘井兰等,2006)。
如 Miteva et al. (2005)发现用草甘膦处理豌豆和小
麦后可诱导植株产生氧化胁迫,表现为 H2O2 和丙
二醛含量升高;Ferreira et al. (2010)采用乳氟禾草
灵处理大豆后所产生的 NO会对大豆产生明显的胁
迫;王艳艳(2014)研究表明,嗪草酮药害导致大豆
叶片叶绿素含量下降、丙二醛积累增加、叶片抗氧化
系统遭到破坏等。
精异丙甲草胺(S⁃metolachlor)商品名为 96%金
都尔乳油,是异丙甲草胺的 S活性异构体,其活性是
异丙甲草胺的 1 4 ~ 1 6 倍,是一种对环境更加友
好、潜在风险更低的改良除草剂,目前已广泛用于玉
米、棉花、花生及大豆等作物的禾本科杂草防治(O′⁃
Connell et al. , 1998; 曹鹏英等, 2007; 贺敏等,
2011)。 李霞等(2006)采用 96%精异丙甲草胺乳油
防除大豆、玉米田杂草效果理想,未发现药害症状,
大豆、玉米生产正常;田丰等(2010)研究表明,直播
油菜时采用精异丙甲草胺进行芽前除草处理,油菜
产量比对照显著提高了 25 8% 。
目前国内外对精异丙甲草胺的研究主要集中在
其土壤吸附(Aslam et al. ,2013;Otero et al. ,2014)
和淋溶(Marín⁃Benito et al. ,2014)等环境行为、毒性
(周明等,2009;王彦华等,2012)、残留(宋国春等,
2008;张玉婷等, 2008 ) 及生产应用 (黄春艳等,
2014)等方面,并取得了相应的研究成果,但其对作
物本身生理生化的影响研究鲜有报道。 笔者在生产
实践中发现该除草剂对大豆幼苗生长有一定的促进
作用,且迄今未见精异丙甲草胺对其生长发育及抗
氧化酶影响的相关报道。 为明确精异丙甲草胺对农
作物影响的作用机理,本试验研究了 96%精异丙甲
草胺乳油处理下大豆幼苗生长及其相关生理生化特
性的变化,拟明确精异丙甲草胺对作物本身的影响,
以期为更安全合理地在田间使用精异丙甲草胺防除
杂草提供科学理论依据。
1 材料与方法
1 1 材料
供试药剂及大豆:96%精异丙甲草胺(S⁃metola⁃
chlor)乳油,先正达(中国)投资有限公司。 大豆品
种为吉农 14,由吉林农业大学大豆区域技术创新中
心提供。
仪器:TU⁃1810 紫外可见光分光光度计,北京普
析通用仪器有限公司;RXZ⁃300B 智能人工气候箱,
宁波东南仪器有限公司;AL⁃204 电子天平,梅特
勒 -托利多仪器上海有限公司。
1 2 方法
1 2 1 大豆幼苗施药处理
本试验采用盆栽法进行。 精异丙甲草胺按有效
成分含量设计 6 个浓度梯度:383、765、1 224、1 530、
3 060、6 120 g (a. i. ) / hm2,另设清水空白对照,共 7
个处理。 选取直径为 19 5 cm 的花盆播种吉农 14,
播种后 4 d进行苗前土壤封闭处理,每盆喷施处理
药液 20 mL,每个浓度处理 3 次重复。 待大豆幼苗
长到第 2 复叶期时测定其各项生理生化指标。
1 2 2 大豆幼苗农艺性状及干物质的测定
待大豆出苗后观察其生长情况,每盆定植 3 株
并及时清除杂草,药后 28 d 测定相关农艺性状,测
量幼苗株高和根长,并称量茎叶鲜重和根鲜重,将称
量后的各部分置于 105℃烘箱中杀青 30 min 后,在
80℃下烘至恒重并称重,每处理 3 次重复。
1 2 3 大豆叶片生理生化指标的测定
取大豆叶片测定其过氧化氢酶 ( catalase,
876 植 物 保 护 学 报 43 卷
CAT)、 超氧化物歧化酶 ( superoxide dismutase,
SOD)、过氧化物酶(peroxidase,POD)的活性及叶绿
素含量。 SOD 活性测定采用氮蓝四唑(NBT)光化
还原法,以抑制 NBT光化还原的 50%为 1 个酶活力
单位(U / g FW);POD活性测定采用愈创木酚法,以
每分钟内 A470变化 0 01 为 1 个酶活力单位(U / g
FW);CAT 活性测定采用紫外吸收法,以 1 min 内
A240减少 0 1 的酶量为 1 个酶活力单位(U / g FW);
叶绿素含量采用乙醇 ∶ 丙酮 = 1 ∶ 1(v ∶ v)混合液浸
提法测定,测定叶片在波长 663 nm 和 645 nm 时的
吸光度,叶绿素含量 =叶绿素浓度 ×提取液体积 /样
品鲜重(张治安和陈展宇,2008)。
1 3 数据分析
数据采用 DPS 13 5 软件进行单因素方差分析,
并应用 Duncan氏新复极差法对处理间的差异显著
性进行检验。
2 结果与分析
2 1 精异丙甲草胺土壤封闭处理对大豆生长的影响
精异丙甲草胺在一定的浓度范围内对大豆幼苗
生长有显著促进作用(表 1)。 大豆幼苗的各项生长
指标均随精异丙甲草胺浓度的增大而明显增加,当
达到一定量时又有所减少,呈先升高再降低的趋势,
根部干物质积累与其它指标变化趋势略有差异。 精
异丙甲草胺浓度为 383 ~ 1 530 g (a. i. ) / hm2 时,大
豆幼苗的株高、根长、茎叶鲜重、茎叶干重、根鲜重均
显著高于对照,1 224 g (a. i. ) / hm2 处理中,与对照
相比植株显著增高 27 06% ,根显著增长 10 53% ,
茎叶鲜重显著增加 35 62% 、 干重 显 著 增 加
33 33% ,根系鲜重显著增加 70 45% 、干重增加
6 67% ;6 120 g ( a. i. ) / hm2 处理下大豆根鲜重及
茎叶干重指标则显著低于对照。
表 1 精异丙甲草胺苗前封闭处理对大豆幼苗生长的影响
Table 1 Effects of S⁃metolachlor treatment before seedling emergence on the growth of soybean seedlings
精异丙甲草胺
S⁃metolachlor
(g (a. i) . / hm2)
株高
Plant height
(cm)
根长
Root length
(cm)
鲜重 Fresh weight (g) 干重 Dry weight (g)
茎叶 Stem⁃leaf 根 Root 茎叶 Stem⁃leaf 根 Root
383 11 98 ± 0 10 c 20 63 ± 0 46 d 3 82 ± 0 02 c 1 33 ± 0 03 bc 0 82 ± 0 02 b 0 17 ± 0 01 a
765 13 29 ± 0 25 ab 21 71 ± 0 08 bc 4 25 ± 0 03 a 1 39 ± 0 01 b 0 83 ± 0 03 b 0 16 ± 0 01 a
1 224 13 71 ± 0 25 a 23 40 ± 0 17 a 4 15 ± 0 04 b 1 50 ± 0 02 a 0 88 ± 0 06 a 0 16 ± 0 02 a
1 530 12 93 ± 0 20 b 21 95 ± 0 19 b 4 07 ± 0 04 b 1 30 ± 0 03 c 0 79 ± 0 01 b 0 15 ± 0 01 ab
3 060 11 81 ± 0 48 c 21 54 ± 0 38 bc 3 87 ± 0 02 c 0 97 ± 0 04 d 0 68 ± 0 04 c 0 13 ± 0 01 bc
6 120 11 42 ± 0 30 c 20 49 ± 0 11 d 3 39 ± 0 06 d 0 78 ± 0 03 f 0 57 ± 0 01 d 0 10 ± 0 01 d
0(CK) 10 79 ± 0 40 d 21 17 ± 0 78 cd 3 06 ± 0 07 e 0 88 ± 0 06 e 0 66 ± 0 01 c 0 15 ± 0 01 ab
表中数据为平均数 ±标准差。 同列不同小写字母表示经 Duncan氏新复极差法检验在 P < 0 05 水平差异显著。 Data are
mean ± SD. Different letters in the same column indicate significant difference at P < 0 05 level by Duncan’s new multiple range test.
2 2 精异丙甲草胺对大豆抗氧化酶活性的影响
精异丙甲草胺可有效提高大豆苗期 3 种抗氧化
酶的活性,随着药剂浓度的增大抗氧化酶活性增强,
但当达到一定值时又有所降低(表 2)。 精异丙甲草
胺各浓度处理对 POD 活性提高均有促进作用,在
1 224 ~ 3 060 g (a. i. ) / hm2 范围其活性显著高于对
照,当浓度为 3 060 g (a. i. ) / hm2 时 POD活性达到
最高,比对照显著增强 32 10% 。 765 g (a. i. ) / hm2
和 1 224 g (a. i. ) / hm2 精异丙甲草胺对大豆植株的
CAT和 SOD活性均具有促进作用,1 224 g (a. i. ) /
hm2 时 CAT 活性比对照显著提高 20 72% 、SOD 活
性比对照提高 2 88% ;当大于 3 060 g (a. i. ) / hm2
时,CAT 和 SOD 活性则显著低于对照。 可见,大豆
植株 3 种抗氧化酶对精异丙甲草胺的应激反应及敏
感性有所不同,在本试验条件下,CAT 最为敏感,在
765 g (a. i. ) / hm2 时就显著高于对照;SOD 和 POD
次之,但 SOD在 1 224 g (a. i. ) / hm2 时即达到最大
值,而 POD 在 3 060 g ( a. i. ) / hm2 时才达到最
大值。
2 3 精异丙甲草胺对大豆叶绿素含量的影响
施用精异丙甲草胺后大豆幼苗的叶绿素含量均
低于对照,在 383 ~ 1 530 g (a. i. ) / hm2 范围内,随
着有效成分含量的增加,叶绿素含量逐渐降低,但各
处理与对照间差异不显著,大于 3 060 g (a. i. ) / hm2
时大豆叶片的叶绿素含量显著低于对照,此浓度处
理下对大豆叶绿素含量抑制率为 7 17% (图 1)。
精异丙甲草胺在较高浓度时对大豆叶片叶绿素的合
成有明显抑制作用。
9764 期 朱诗禹等: 精异丙甲草胺苗前封闭处理对大豆苗期生长及其生理生化指标的影响
表 2 精异丙甲草胺苗前封闭处理对大豆叶片抗氧化酶活性的影响
Table 2 Effects of S⁃metolachlor treatment before seedling emergence on the antioxidant enzymes activity of soybean leaves U / g FW
精异丙甲草胺
S⁃metolachlor (g (a. i. ) / hm2)
超氧化物歧化酶活性
SOD activity
过氧化物酶活性
POD activity
过氧化氢酶活性
CAT activity
383 706. 12 ± 9. 29 abc 24. 40 ± 2. 70 c 14. 38 ± 1. 38 b
765 715. 34 ± 3. 67 ab 26. 20 ± 1. 56 bc 17. 67 ± 0. 85 a
1 224 722. 81 ± 15. 81 a 28. 00 ± 1. 81 b 18. 06 ± 0. 83 a
1 530 694. 18 ± 10. 65 cd 29. 60 ± 2. 76 ab 13. 29 ± 0. 81 bc
3 060 683. 09 ± 9. 69 d 32. 10 ± 2. 07 a 12. 36 ± 0. 79 c
6 120 677. 10 ± 8. 71 d 28. 60 ± 1. 07 ab 11. 94 ± 1. 57 c
0(CK) 702. 59 ± 11. 31 bc 24. 30 ± 0. 87 c 14. 96 ± 0. 40 b
表中数据为平均数 ±标准差。 同列不同小写字母表示经 Duncan氏新复极差法检验在 P < 0. 05 水平差异显著。 Data are
mean ± SD. Different letters in the same column indicate significant difference at P < 0 05 level by Duncan’s new multiple range test.
图 1 精异丙甲草胺苗前封闭处理对大豆幼苗叶片
叶绿素含量的影响
Fig. 1 Effects of S⁃metolachlor treatment before seedling
emergence on the chlorophyll content of soybean leaves
图中数据为平均数 ±标准差。 柱上不同字母表示
经 Duncan氏新复极差法检验在 P < 0 05 水平差异显著。
Data are mean ± SD. Different letters on the bars indicate
significant difference at P < 0 05 level by Duncan’ s new
multiple range test.
3 讨论
除草剂在正常用量下一般不会对适用作物造
成药害,但可对其生长、生理产生影响(韩玉军和
赵长山,2008)。 如低剂量的莠去津可促进水稻生
长,但当超过其安全极限浓度时会抑制水稻生长,
抑制程度随着莠去津含量的增加而加重(范润珍
等,1998);低剂量的嗪草酮可使大豆株高、茎粗、
总叶片数及植株干重均高于对照,而高剂量的嗪
草酮则会抑制大豆生长(王艳艳,2014)。 本试验
结果显示,随着精异丙甲草胺有效成分含量的增
加,施药后 28 d大豆植株的株高、根长、茎叶鲜重、
茎叶干重、根鲜重均有一定程度提高,其中 1 224 g
(a. i. ) / hm2 处理对大豆各项农艺性状指标的提高
程度达最大值,随后逐渐降低,这与上述莠去津对
水稻、嗪草酮对大豆的研究结果相似。 表明使用
精异丙甲草胺进行大豆苗前土壤封闭处理,在一
定用量范围内,不仅对大豆无药害,而且能够显著
促进大豆幼苗的生长,对大豆表现出良好的安全
性和环境友好性。
除草剂可对作物产生胁迫作用,影响植物体
内的多种生理过程且破坏其活性氧代谢的动态平
衡。 当除草剂进入到大豆植株组织后,短期内产
生较多的超氧自由基威胁到细胞安全时,就会诱
导植物细胞合成更多的 SOD,引起大豆叶片 SOD
活性上升,SOD 活性的增加会导致 H2O2 含量增
加,从而激活 H2O2 清除酶(Gill & Tuteja,2010),
CAT和 POD分别通过不同的反应途径将 H2O2 转
化为 H2O 和 O2,以抑制活性氧对脂膜的过氧化作
用,从而提高植物对逆境的耐受能力 (何冰等,
2003)。 在本试验中,精异丙甲草胺可有效提高大
豆叶片细胞中 SOD、CAT和 POD的活性,且随着除
草剂浓度的升高呈先上升后下降的趋势;在 765 g
(a. i. ) / hm2 和 1 224 g ( a. i. ) / hm2 浓度下,大豆
幼苗 3 种抗氧化酶的活性均高于对照,且 CAT 和
SOD 活性在 1 224 g (a. i. ) / hm2 时达到最大值,而
POD活性以 3 060 g ( a. i. ) / hm2 处理的增加效果
最显著,表明大豆幼苗可通过提高自身抗氧化酶
活性来适应精异丙甲草胺胁迫;而使用量在 3 060
g (a. i. ) / hm2 和 6 120 g ( a. i. ) / hm2 时,其 SOD、
CAT和 POD活性则显著低于对照,可能因为所设
置的这 2 种浓度超过了大豆的应激限度,致使大
豆叶片中大量的 H2O2 积累,从而抑制了抗氧化酶
的活性,甚至导致植株的抗氧化能力遭到破坏。
温银元等(2012)研究发现,采用不同浓度的扑草
净处理远志幼苗时,随扑草净浓度增大,SOD、POD
及 CAT活性先上升后下降;彭俊等 (2013)施用
086 植 物 保 护 学 报 43 卷
48%灭草松水剂和 10%草甘膦水剂后 9 d,藨草体
内 SOD、POD及 CAT活性显著高于对照,均与本试
验结论相似。 而刘欢等(2015)发现燕麦叶片中
POD、SOD及 CAT 的活性随着精异丙甲草胺浓度
的升高呈显著下降趋势;孔治有等(2013)研究表
明,大豆叶片 SOD和 POD 活性随着扑草净浓度的
增加显著降低,随着异丙隆浓度增加 SOD 活性先
轻微上升后略有降低、POD 活性先略降低后轻微
上升。 上述各试验研究结果的不同可能是由于除
草剂的种类、剂量及不同植物本身防御系统的差
异所致。
叶绿素是植物进行光合作用时吸收和传递光
能的主要物质,其含量可直接反映植物生长状况
和光合能力。 Muller et al. (2008)研究表明,除草
剂可引起小麦叶片光合色素含量降低;Kielak et
al. (2011)采用草甘膦处理浮萍后可诱导植株产
生氧化胁迫,导致叶绿素水平下降;赵长山等
(2009)发现施用莎稗磷 5 ~ 15 d 后水稻的叶绿素
含量均低于对照,且随着施药量的增加逐渐下降。
在本试验中,采用 383 ~ 1 530 g ( a. i. ) / hm2 精异
丙甲草胺处理大豆叶片后,其叶绿素含量虽低于
对照,但差异不显著;而在 3 060 g ( a. i. ) / hm2 和
6 120 g (a. i. ) / hm2 处理下,精异丙甲草胺对大豆
叶片叶绿素合成具有显著抑制作用。 除草剂引起
植物叶绿素降低可能是破坏了作物细胞膜的完整
性,导致活性氧积累,叶绿体结构受损加快,叶绿
素含量显著降低(彭俊等,2013;钱兰娟等,2014)。
致谢:吉林农业大学农学院植物保护专业 2011 级潘艳、唐禹
佳、钱亚泽、尹晓龙等同学参加部分调查工作,特此致谢!
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(责任编辑:李美娟)
286 植 物 保 护 学 报 43 卷