全 文 ：利用小种特异分子标记分析 圆园园怨要圆园员园年云南省
小麦条锈病菌群体结构
粤灶葬造赠泽蚤泽 责燥责怎造葬贼蚤燥灶 泽贼则怎糟贼怎则藻 燥枣 孕怎糟糟蚤灶蚤葬 泽贼则蚤蚤枣燥则皂蚤泽 枣援 泽责援 贼则蚤贼蚤糟蚤 怎泽蚤灶早
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刘摇 林摇 兰茗清摇 杨摇 静摇 张摇 波摇 李摇 菊摇 李成云鄢
渊云南农业大学袁 农业生物多样性与病虫害控制教育部重点实验室袁 昆明 远缘园圆园员冤
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摇 摇 由小麦条锈菌 孕怎糟糟蚤灶蚤葬 泽贼则蚤蚤枣燥则皂蚤泽 枣援 泽责援 贼则蚤贼蚤糟蚤 侵
染引起的小麦条锈病是一种可以借助气流进行远距
离传播的病害袁具有发生面积广尧流行频率高尧危害
严重等特点遥 该病害一直威胁着我国西北尧华北尧黄
淮和西南等地冬春麦区小麦生产咱员 原 猿暂 遥 由于该病菌
毒性变异频繁袁易产生新的毒性小种袁常常引起小麦
条锈病的周期性流行遥 因此袁了解条锈菌群体结构
组成及变异情况袁对于制定有效的条锈病防治措施
具有重要意义遥
基于鉴别寄主鉴定及监测小麦条锈病菌的生理
小种组成操作繁琐尧费时费力尧难以同时完成大量菌
源检测等弊端袁研究人员相继开发了一些检测条中
圆怨 号咱源暂 尧条中 猿员 号咱缘暂 尧条中 猿圆 号咱远暂和条中 猿猿 号咱苑暂
生理小种的 杂悦粤砸检测标记遥 为控制小麦条锈病的
发生与流行袁本试验利用已报道的 猿 对小麦条锈病
菌生理小种特异的 杂悦粤砸 标记袁检测了 圆园园怨要圆园员园
年云南省小麦主产区小麦条锈病菌的生理小种组成
情况遥
员 材料与方法
员援 员 材料
样品院选取从云南省德宏尧大理尧易门尧临沧尧保
山尧玉溪等地田间自然发病株采集的小麦条锈病菌
标样 猿远圆 份袁从中挑选条锈菌夏孢子堆清晰饱满尧病
斑面积较大的罹病叶片袁用吸水纸将各叶片样品单
独分离包装后袁将叶片尽量风干袁实验室提取 阅晕粤袁
如不能立即提取 阅晕粤袁则置于 原圆园 益下保存遥
引物院真菌核糖体 则阅晕粤鄄陨栽杂 引物咱愿暂 和条中
圆怨咱源暂 尧条中 猿员咱缘暂和条中 猿圆咱远暂猿 个生理小种特异分子
标记遥
员援 圆 方法
小麦条锈病菌的基因组 阅晕粤 用 悦栽粤月 法进行
提取袁用 园援 愿豫的琼脂糖凝胶在 愿园 灾下电泳 员 澡检测
阅晕粤质量袁并估测其浓度遥 将提取的模板 阅晕粤 稀
释为 缘园 灶早 辕 滋蕴遥
孕悦砸反应体系为 圆缘 滋蕴袁包括 员园 伊反应缓冲液
圆援 缘 滋蕴尧 圆缘 皂皂燥造 辕 蕴 酝早悦造圆 员援 源 滋蕴尧 员园 皂皂燥造 辕 蕴 凿晕栽孕圆援 园 滋蕴尧缘园 灶早 辕 滋蕴 模板 阅晕粤 员 滋蕴尧员园 灶早 辕 滋蕴 引物 圆
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应均设 凿凿匀圆韵阴性对照遥 反应程序院怨缘 益 圆援 缘 皂蚤灶袁员 个循环曰怨缘 益 园援 缘 皂蚤灶袁缘园 耀 远园 益 员 皂蚤灶袁 苑圆 益 员
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滋蕴与 猿 滋蕴含有花青素的上样缓冲液充分混合袁经
员援 缘豫的琼脂糖凝胶在 员圆园 灾下电泳 源缘 皂蚤灶 后袁用凝
胶成像系统进行拍照及带型分析遥
圆 结果与分析
猿远圆 份样品中有 圆怨圆 份样品检测到 陨栽杂序列袁其
中大理的 缘员 份样品中有 源愿 份尧保山的 员远圆 份样品
中有 员园苑 份尧玉溪的 愿苑 份样品中有 苑缘 份尧临沧的全
部 圆圆 份样品以及德宏州的全部 源园 份样品均检测到
陨栽杂序列遥
基金项目院 公益性行业渊农业冤科研专项渊圆园园怨园猿园猿缘鄄园苑冤袁云南省自然科学基金重点项目渊圆园园怨悦悦园园源冤
作者简介院 刘林袁女袁员怨愿园年生袁讲师袁研究方向为分子植物病理袁 耘鄄皂葬蚤造院 造蚤怎造蚤灶远园猿圆岳 员远猿援 糟燥皂
鄢通讯作者渊粤怎贼澡燥则 枣燥则 糟燥则则藻泽责燥灶凿藻灶糟藻冤袁 耘鄄皂葬蚤造院 造蚤援 糟澡藻灶早赠怎灶岳 早皂葬蚤造援 糟燥皂
收稿日期院 圆园员圆 原 园愿 原 园猿
第 源园 卷摇 第 员 期
圆园员猿 年摇 圆 月
植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报
粤悦栽粤 孕匀再栽韵孕匀再蕴粤悦陨悦粤 杂陨晕陨悦粤
灾燥造援 源园摇 晕燥援 员
云藻遭援 摇 圆园员猿
摇 摇 采自云南省大理尧保山尧德宏尧玉溪和临沧等地
区的 圆怨圆 份小麦条锈病样品中均能检测到条中 猿圆
号尧条中 猿员 号或条中 圆怨 号小种的特异性条带遥 如
在大理的 源愿 份样品中均检测到了条中 猿圆 号小种袁
条中 圆怨 号小种最少袁仅有 源 份袁占该地区样品总数
的 愿援 猿豫 遥 在保山的样品中袁检测到的条中 猿圆 号小
种也最多袁共 怨源 份袁占该地区样品总数的 愿苑援 怨豫 曰
条中 圆怨 号小种的检出率次之袁为 源猿援 怨豫 曰条中 猿员
号小种的检出率最低袁仅为 远援 缘豫 遥 虽然 缘 个小麦
主产区检测到的生理小种的组成情况各不相同袁但
从整体看袁条中 猿圆 为云南省 圆园园怨要圆园员园 年间的优
势小种袁其数量达到了 圆圆源 份袁占总数的 苑远援 苑豫 曰其
次是条中 圆怨袁共 员远源 份袁占总数的 缘远援 圆豫 曰条中 猿员
最少袁有 怨远 份袁占总数的 猿圆援 怨豫 遥
猿 讨论
小麦条锈菌具有体积小尧繁殖快尧群体大尧毒性
变异频率高等特点袁严重影响和制约着小麦条锈病
的防治袁因此需长期监测小麦条锈菌的生理小种组
成情况遥 本试验利用特异的小种分子标记检测
圆园园怨要圆园员园 年云南省的小麦条锈病菌袁条中 猿圆 为
优势小种袁这与我国小麦条锈病菌生理小种的主要
流行趋势基本一致遥 生理小种检测和预测的准确性
取决于生理小种分子标记的特异性袁开发和设计能
够检测小麦条锈病菌生理小种的特异分子标记是通
过分子手段快速检测病菌生理小种组成的前提遥 长
期准确尧有效地监测小麦条锈病菌的生理小种组成袁
并将其与来年小麦条锈病菌优势种群的预测相结
合袁将有效预防和控制小麦锈病的流行遥 因此袁利用
特异的小种分子标记分析小麦条锈病菌的生理小种
组成袁可在较短的时间内进行较大群体分析袁既省时
又省力袁值得进一步探索遥
摇 摇 本试验中发现单份小麦条锈病菌样品中能够检
测到多个生理小种袁这可能是用于分子检测的小麦
条锈病菌未进行单孢分离袁而直接用罹小麦条锈病
的小麦叶片进行 阅晕粤 提取所致遥 若通过分子手段
检测经单孢分离后扩繁的条锈菌袁或采用常规的鉴
别寄主法进行鉴定袁难免会遗漏一些生理小种遥 因
此袁作者认为多个生理小种能够同时侵染同一小麦
叶片袁且小麦条锈病菌的高度易变性也较容易导致
在同一叶片或同一病斑上分离到多个生理小种遥
参 考 文 献渊砸藻枣藻则藻灶糟藻泽冤
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咱愿暂 陈剑山袁郑服丛援 陨栽杂 序列分析在真菌分类鉴定中的应用援
安徽农业科学袁 圆园园苑袁 猿缘渊员猿冤院猿苑愿缘 原 猿苑愿远袁猿苑怨圆
渊责任编辑院谢小帆冤
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