全 文 ：木荷皂甙对稻瘟病菌细胞形态及
生理生化指标的影响
易摇 磊摇 霍光华鄢摇 韩启灿摇 叶亚建摇 詹五根
渊江西农业大学生物科学与工程学院袁 南昌市生物资源保护和利用重点实验室袁 南昌 猿猿园园源缘冤
摘要院 为开发新型木荷皂甙杀稻瘟剂袁分别采用菌丝生长速率法尧显微观察尧电导法和比色法研究
木荷活性皂甙对稻瘟病菌 酝葬早灶葬责燥则贼澡藻 燥则赠扎葬藻 渊匀藻遭藻则贼冤 月葬则则援的活性袁以及对病原细胞形态及其胞
外生理生化成分含量的影响遥 结果显示院木荷皂甙 酝圆陨郧砸缘 抗稻瘟病菌的 耘悦缘园为 员远援 源员 滋早 辕 皂蕴尧耘悦怨园为 苑远援 员远 滋早 辕 皂蕴曰其 耘悦缘园和 耘悦怨园处理稻瘟病菌菌丝体 圆源 澡后袁可导致菌丝断裂尧细胞肿胀曰处理
去壁的原生质体 圆 澡即可导致其变型尧粘连尧破裂袁引起病原菌菌丝细胞内含物大量渗漏曰处理 圆 澡
后的可溶性蛋白渗漏量和可溶性总糖分别较对照高 员园 倍和 猿园 耀 远园 倍袁且处理液的电导率升高尧几
丁质酶活性增强尧胞壁几丁质组成成分 晕 原乙酰葡萄糖胺脱落遥 研究表明袁木荷皂甙抗稻瘟病菌不仅
导致膜通透性增大尧完整性丧失袁而且还间接引起细胞壁降解袁加速了稻瘟病菌细胞的凋亡遥
关键词院 木荷皂甙曰 稻瘟病菌曰 菌丝体曰 作用方式
耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 泽葬责燥灶蚤灶泽 枣则燥皂 杂糟澡蚤皂葬 泽怎责藻则遭葬 燥灶 糟藻造造 皂燥则责澡燥造燥早赠袁 责澡赠泽蚤燥造燥早蚤糟葬造
葬灶凿 遭蚤燥糟澡藻皂蚤糟葬造 蚤灶凿蚤糟藻泽 燥枣 酝葬早灶葬责燥则贼澡藻 燥则赠扎葬藻
再蚤 蕴藻蚤摇 匀怎燥 郧怎葬灶早澡怎葬鄢摇 匀葬灶 匝蚤糟葬灶摇 再藻 再葬躁蚤葬灶摇 在澡葬灶 宰怎早藻灶
渊运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 月蚤燥则藻泽燥怎则糟藻 孕则燥贼藻糟贼蚤燥灶 葬灶凿 哉贼蚤造蚤扎葬贼蚤燥灶 燥枣 晕葬灶糟澡葬灶早袁 悦燥造造藻早藻 燥枣 月蚤燥泽糟蚤藻灶糟藻 葬灶凿 耘灶早蚤灶藻藻则蚤灶早袁
允蚤葬灶早曾蚤 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 晕葬灶糟澡葬灶早 猿猿园园源缘袁 允蚤葬灶早曾蚤 孕则燥增蚤灶糟藻袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 栽燥 凿藻增藻造燥责 葬 灶藻憎 葬早藻灶贼 葬早葬蚤灶泽贼 贼澡藻 则蚤糟藻 遭造葬泽贼 憎蚤贼澡 泽葬责燥灶蚤灶泽 枣则燥皂 杂糟澡蚤皂葬 泽怎责藻则遭葬 郧葬则凿灶 藻贼
悦澡葬皂责袁 贼澡藻 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 燥枣 泽葬责燥灶蚤灶泽 枣则燥皂 杂援 泽怎责藻则遭葬 葬早葬蚤灶泽贼 酝葬早灶葬责燥则贼澡藻 燥则赠扎葬藻 渊 匀藻遭藻则贼冤 月葬则则援 袁 贼澡藻蚤则
藻枣枣藻糟贼泽 燥灶 糟藻造造 皂燥则责澡燥造燥早赠 燥枣 贼澡藻 责葬贼澡燥早藻灶 葬灶凿 糟燥灶贼藻灶贼 糟澡葬灶早藻 蚤灶 蚤贼泽 藻曾贼则葬糟藻造造怎造葬则 责澡赠泽蚤燥造燥早蚤糟葬造 葬灶凿 遭蚤燥鄄
糟澡藻皂蚤糟葬造 糟燥皂责燥灶藻灶贼泽 憎藻则藻 燥遭泽藻则增藻凿 怎泽蚤灶早 贼澡藻 皂赠糟藻造蚤葬造 早则燥憎贼澡 则葬贼藻 皂藻贼澡燥凿袁 皂蚤糟则燥泽糟燥责蚤糟 燥遭泽藻则增葬贼蚤燥灶袁 贼澡藻
糟燥灶凿怎糟贼葬灶糟藻 皂藻贼澡燥凿 葬灶凿 糟燥造燥则蚤皂藻贼则赠袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 耘悦缘园 葬灶凿 耘悦怨园 燥枣 泽葬责燥灶蚤灶泽枣则燥皂 杂援 泽怎责藻则遭葬 葬早葬蚤灶泽贼 酝援 燥则赠扎葬藻 憎藻则藻 员远援 源员 滋早 辕 皂蕴 葬灶凿 苑远援 员远 滋早 辕 皂蕴袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援 云则葬糟贼怎则藻 葬灶凿 糟藻造造
泽憎藻造造蚤灶早 燥枣 澡赠责澡葬藻 憎藻则藻 糟葬怎泽藻凿 遭赠 贼则藻葬贼皂藻灶贼 憎蚤贼澡 泽葬责燥灶蚤灶泽 枣则燥皂 杂援 泽怎责藻则遭葬 枣燥则 圆源 澡援 灾葬则蚤葬灶贼袁 葬凿澡藻泽蚤燥灶
葬灶凿 糟则葬糟噪 燥枣 责则燥贼燥责造葬泽贼泽 憎藻则藻 责则燥凿怎糟藻凿 憎澡藻灶 贼则藻葬贼藻凿 枣燥则 圆 澡援 栽澡藻则藻 憎藻则藻 葬 造燥贼 燥枣 造藻葬噪葬早藻 蚤灶糟造怎泽蚤燥灶泽 枣则燥皂
贼则藻葬贼藻凿 澡赠责澡葬造 糟藻造造 燥枣 责葬贼澡燥早藻灶 泽怎糟澡 葬泽 贼藻灶枣燥造凿 责则燥贼藻蚤灶 造藻葬噪葬早藻 葬灶凿 贼澡蚤则贼赠 贼燥 泽蚤曾贼赠 贼蚤皂藻泽 泽燥造怎遭造藻 泽怎早葬则 糟燥皂鄄
责葬则藻凿 贼燥 糟燥灶贼则燥造 葬造燥灶早 憎蚤贼澡 藻造藻增葬贼燥则赠 藻曾贼则葬糟藻造造怎造葬则 糟燥灶凿怎糟贼蚤增蚤贼赠袁 藻灶澡葬灶糟藻凿 糟澡蚤贼蚤灶葬泽藻 葬糟贼蚤增蚤贼赠 葬灶凿 葬遭泽糟蚤泽泽蚤燥灶
燥枣 晕鄄葬糟藻贼赠造 早造怎糟燥泽葬皂蚤灶藻 枣则燥皂 糟澡蚤贼蚤灶 燥灶 糟藻造造 憎葬造造援 陨贼 蚤泽 糟燥灶糟造怎凿藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 葬糟贼蚤燥灶 燥枣 泽葬责燥灶蚤灶泽 枣则燥皂 杂援 泽怎责藻则鄄
遭葬 贼燥 酝援 燥则赠扎葬藻 灶燥贼 燥灶造赠 造藻葬凿泽 贼燥 蚤灶糟则藻葬泽藻凿 皂藻皂遭则葬灶藻 责藻则皂藻葬遭蚤造蚤贼赠 葬灶凿 造燥泽泽 燥枣 皂藻皂遭则葬灶藻 蚤灶贼藻早则蚤贼赠袁 遭怎贼 葬造鄄
泽燥 蚤灶糟则藻葬泽藻泽 糟澡蚤贼蚤灶葬泽藻 葬糟贼蚤增蚤贼赠袁 糟藻造造 憎葬造造 凿藻早则葬凿葬贼蚤燥灶袁 葬灶凿 枣怎则贼澡藻则 葬糟糟藻造藻则葬贼藻泽 澡赠责澡葬 葬责燥责贼燥泽蚤泽 燥枣 酝援 燥则赠扎葬藻援
基金项目院 国家自然科学基金渊猿员园远园圆缘园袁 圆员圆远远园员园冤袁江西省自然科学基金渊圆园员猿圆月粤月圆园源园圆愿冤袁江西省研究生创新专项资助项目
摇 摇 摇 摇 渊再悦圆园员员鄄杂园远源冤
作者简介院 易磊袁男袁员怨愿苑年生袁硕士研究生袁研究方向为天然产物抑菌活性袁 耘鄄皂葬蚤造院 赠蚤造藻蚤员猿员园岳 择择援 糟燥皂
鄢通讯作者渊粤怎贼澡燥则 枣燥则 糟燥则则藻泽责燥灶凿藻灶糟藻冤袁 耘鄄皂葬蚤造院 澡早澡猿愿员猿愿怨怨岳 泽燥澡怎援 糟燥皂
收稿日期院 圆园员猿 原 园员 原 员猿
第 源园 卷摇 第 缘 期
圆园员猿 年摇 员园 月
植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报
粤悦栽粤 孕匀再栽韵孕匀再蕴粤悦陨悦粤 杂陨晕陨悦粤
灾燥造援 源园摇 晕燥援 缘
韵糟贼援 摇 圆园员猿
摇 摇 运藻赠 憎燥则凿泽院 杂糟澡蚤皂葬 泽怎责藻则遭葬 泽葬责燥灶蚤灶曰 酝葬早灶葬责燥则贼澡藻 燥则赠扎葬藻曰 澡赠责澡葬曰 葬糟贼蚤燥灶 皂燥凿藻
摇 摇 稻瘟病是由稻瘟病菌 酝葬早灶葬责燥则贼澡藻 燥则赠扎葬藻 渊匀藻鄄
遭藻则贼冤 月葬则则援引起的水稻灾难性的病害遥 该病潜伏期
长尧发病部位多尧分布广泛尧危害严重遥 一般导致水
稻减产 员园豫 耀 圆园豫 袁严重时可达 源园豫 耀 缘园豫 袁甚至
绝收遥 目前袁防治稻瘟病主要依靠选育抗性品种和
使用化学农药遥 然而袁所育抗性品种往往连续种植
圆 耀 猿 个季节便失去抗性袁水肥管理不当也会使抗性
品种变成易感品种袁且抗性品种存在稻米品质低下
等问题咱员 原 圆暂 遥 生产上使用的化学农药三环唑易残留
于环境中袁长期使用富士一号已导致稻瘟病菌产生耐
药性咱猿 原 源暂 遥 因此袁从植物中获得结构新颖尧作用方式
独特的活性天然产物袁从而开发出高效尧环境相容的
杀稻瘟剂具有重要意义遥
本课题组从百余种植物中筛选到抗稻瘟病菌的
木荷 杂糟澡蚤皂葬 泽怎责藻则遭葬 郧葬则凿灶 藻贼 悦澡葬皂责材料咱缘暂 袁分离鉴
定出抗稻瘟病菌的活性成分要要要木荷三萜皂甙咱远暂 遥
皂甙在植物界广泛分布袁有植物防御素渊责澡赠贼燥葬灶贼蚤鄄
糟蚤责蚤灶泽冤之称袁但抗菌活性差异悬殊遥 据研究报道袁细
花葱 粤造造蚤怎皂 皂蚤灶怎贼蚤枣造燥则怎皂 中的 源 种甾体皂甙抗立枯
丝核病菌 砸澡蚤扎燥糟贼燥灶蚤葬 泽燥造葬灶蚤的有效浓度在 员园 滋早 辕 皂蕴
左右袁而对其它病原真菌几乎无抗菌效果咱苑暂 曰奎藜
悦澡藻灶燥责燥凿蚤怎皂 择怎蚤灶燥葬中有 愿苑 种三萜类皂甙袁其皂甙
抽提物没有抗葡萄灰霉病菌 月燥贼则赠蚤泽 糟蚤灶藻则藻葬 活性袁经
碱热解后袁缘 皂早 辕 皂蕴 浓度能完全抑制该菌分生孢子
萌发咱愿暂 曰疣黄芪 粤泽贼则葬早葬造怎泽 增藻则则怎糟燥泽怎泽 中含 员 耀 远 种皂
甙袁仅 圆 种有抗葡萄灰霉病活性袁并且其乙酰化能增
强其活性咱怨暂 曰燕麦 粤增藻灶葬 泽葬贼蚤增葬根中含有 源 种三萜皂
甙袁其中 粤鄄员 含量高尧抗稻瘟病菌活性强咱员园暂 遥 由于
天然皂甙的分离尧合成相当困难袁关于皂甙生物评价
的文献仅集中在抗癌尧溶血等方面袁而有关植物病理
的报道较少咱员员暂 遥 目前皂甙对细胞的作用机制已有
两种假说院一是认为皂甙与细胞脂膜相互作用袁同膜
上的胆甾醇结合生成不溶性复合物袁导致膜孔形成尧
细胞渗透遥 二是认为皂甙与水通道渊 葬择怎葬责燥则蚤灶冤相
互作用袁引起水转运进入细胞袁诱导红细胞溶血遥 近
年来研究显示袁羽扇豆烷型皂苷抗癌是经线粒体途
径诱导癌细胞凋亡咱员员暂 遥 而有关天然皂甙的抗真菌
作用方式和机制的研究报道较少袁为此袁本研究从稻
瘟病菌细胞形态学和生理生化水平探索木荷皂甙抗
稻瘟病菌的作用方式袁以期为开发新型木荷皂甙杀
稻瘟剂提供理论依据遥
员 材料与方法
员援 员 材料
木荷皂甙院将干燥的木荷叶粉碎后过 圆园 目筛袁
以 员 颐 员园 的 愿园豫乙醇溶液室温浸提袁抽滤液真空浓
缩袁依次用氯仿尧水饱和正丁醇溶液萃取袁取正丁醇
萃取液依次经过大孔树脂柱层析尧硅胶柱层析尧砸孕鄄
员愿 柱层析尧氯仿 原甲醇 原水或甲醇 原水梯度洗脱袁
并逐级进行抗稻瘟病菌活性跟踪袁获得具抗稻瘟病
菌活性的木荷皂甙 酝圆陨郧砸缘咱员圆暂 袁其皂甙是 圆员袁圆圆 原
二 原 韵 原当归酰基 原 砸员 原玉蕊醇 原 猿 原 韵 原 茁 原 阅 原
吡喃葡萄糖基 原 渊员寅圆冤 原 茁 原 阅 原吡喃半乳糖基 原
渊员寅圆冤 原 咱琢 原 蕴 原吡喃鼠李糖基 原 渊员寅源冤暂 原 茁 原
阅 原吡喃葡萄糖酸甙渊圆员袁圆圆鄄凿蚤鄄韵鄄葬灶早藻造燥赠造鄄砸员鄄遭葬则则蚤早鄄藻灶燥造鄄猿鄄韵鄄喳茁鄄阅鄄早造怎糟燥责赠则葬灶燥泽赠造鄄渊员寅圆冤鄄茁鄄阅鄄早葬造葬糟贼燥责赠鄄
则葬灶燥泽赠造鄄渊员寅圆冤鄄咱琢鄄蕴鄄则澡葬皂灶燥责赠则葬灶燥泽赠造鄄渊员寅源冤暂札鄄茁鄄
阅鄄早造怎糟怎则燥灶燥责赠则葬灶燥泽蚤凿藻冤和 圆员袁圆圆 原二 原 韵 原当归酰基
原砸员 原玉蕊醇 原猿 原韵 原 茁 原 阅 原吡喃葡萄糖基 原 渊员寅圆冤鄄 茁鄄阅鄄吡喃木糖基 原 渊员寅圆冤 原 咱琢 原 蕴 原吡喃鼠李糖
基 原 渊员寅源冤暂 原 茁 原 阅 原吡喃葡萄糖酸甙渊圆员袁圆圆鄄凿蚤鄄韵鄄
葬灶早藻造燥赠造鄄砸员鄄遭葬则则蚤早藻灶燥造鄄猿鄄韵鄄喳 茁鄄阅鄄早造怎糟燥责赠则葬灶燥泽赠造鄄渊 员 寅圆冤鄄茁鄄阅鄄曾赠造燥责赠则葬灶燥泽赠造鄄渊员 寅圆冤鄄咱 琢鄄蕴鄄则澡葬皂灶燥责赠则葬灶燥泽赠造鄄
渊员寅源冤暂札鄄茁鄄阅鄄 早造怎糟怎则燥灶燥责赠则葬灶燥泽蚤凿藻冤咱远暂 遥
供试菌株院稻瘟病菌 酝葬早灶葬责燥则贼澡藻 燥则赠扎葬藻渊晕燥援 园怨扎鄄
怨猿鄄员冤袁江西省农业科学院植物保护研究所提供遥
试剂院二甲基亚砜渊阅酝杂韵冤袁美国 杂蚤早皂葬鄄粤造凿则蚤糟澡
悦燥援 蕴蕴悦 公司曰溶壁酶袁广东碧德生物技术有限公司曰
无水乙醇渊粤砸冤袁天津市永大化学试剂有限公司曰考马
斯亮兰 郧鄄圆缘园袁美国 月陨韵鄄砸粤阅 蕴葬遭燥则葬贼燥则蚤藻泽 公司曰三羟
甲基氨基甲烷渊栽则蚤泽冤袁北京鼎国生物技术有限责任
公司曰其它试剂均为分析纯遥 韵酝 缓冲液院将 员源源 早
酝早杂韵源和员 援 源 圆 早 晕葬圆 匀孕韵源溶于员 蕴蒸馏水中 袁 责匀
缘援 愿袁混匀备用咱员猿暂 曰细胞器分离缓冲液渊杂栽悦冤院将 怨员 早
山梨醇尧缘园 皂蕴 责匀 愿援 园 的 栽则蚤泽鄄匀悦造尧苑援 猿缘 早 悦葬悦造圆窑
圆匀圆韵混匀定容于 员 蕴 蒸馏水中咱怨暂 曰山梨醇缓冲液院怨 员 早山梨醇溶于员 蕴蒸馏水中袁 园 援 圆圆 滋皂薄膜过滤
灭菌咱员猿暂 遥
培养基院完全液体培养基 渊 悦酝冤院 运晕韵猿 猿 早尧运匀圆孕韵源 员 早尧酝早杂韵源窑苑匀圆韵 园援 缘 早尧蛋白胨 员园 早尧酵母粉缘 早尧葡萄糖 圆园 早尧蒸馏水 员 园园园 皂蕴袁责匀 远援 缘 耀 远援 愿袁员圆员
益灭菌 圆园 皂蚤灶曰马铃薯葡萄糖琼脂培养基渊孕阅粤冤曰马
员缘源缘 期 易摇 磊等院木荷皂甙对稻瘟病菌细胞形态及生理生化指标的影响
铃薯葡萄糖培养液渊孕阅冤遥
仪器院杂匀孕鄄圆缘园云耘型恒温摇床袁上海三生科学仪
器有限公司曰再酝 猿园 高压蒸汽灭菌锅袁上海医用核子
仪器厂曰杂宰鄄悦允鄄圆郧型超净工作台袁苏州净化有限公
司曰月孕圆员园园 电子分析天平袁德国 杂葬则贼燥则蚤怎泽公司曰阅在云鄄
远园缘园 型真空干燥箱袁上海一恒科学仪器有限公司曰
栽郧员远鄄宰杂台式高速离心机袁上海卢湘离心机仪器有
限公司曰晕陨运韵晕 耘员园园 数码光学显微镜袁尼康映像仪
器销售中国有限公司曰雷磁 阅阅杂鄄猿园苑粤 型电导率仪袁
北京西化仪器有限公司遥
员援 圆 方法
员援 圆援 员 木荷皂甙抗稻瘟病菌活性测定
含药培养基配置院称取木荷皂甙 酝圆陨郧砸缘 圆园 皂早
左右溶解于 源园 皂蕴 孕阅培养基中袁采用 圆 倍稀释法配
置系列浓度为缘员缘 援 园园尧圆缘苑 援 缘园尧员圆愿 援 苑缘 尧远源 援 猿愿 尧
猿圆援 员怨尧员远援 园怨尧愿援 园缘 滋早 辕 皂蕴 的含药培养基各 圆园 皂蕴袁
以不含药的 圆园 皂蕴 孕阅培养基为空白对照袁每个培养
基中加 园援 源 早琼脂袁灭菌备用遥
毒力方程制作院采用菌丝生长速率法袁将各 圆园
皂蕴的培养基对号倒入直径为 怨 糟皂 的平皿中袁待其
凝固袁用打孔器沿菌落边缘打取直径 远援 缘园 皂皂尧菌龄
一致的菌块袁在含药培养基及对照中接入 猿 个菌块袁
圆愿 益培养 员园愿 澡后用游标卡尺十字交叉法测量菌落
直径渊皂皂冤袁计算其抑菌率遥 抑菌率渊豫 冤 越 渊空白菌
落直径 原含药菌落直径冤 辕 渊空白菌落直径 原接入菌
块直径冤 伊 员园园遥
摇 摇 利用 阅孕杂 苑援 园缘 软件进行数据处理袁将抑菌率转
换成抑制概率值作为纵坐标渊再冤尧木荷皂甙 酝圆陨郧砸缘
质量浓度转换成对数值为横坐标渊 曾冤进行线性回
归袁获得毒力方程袁并计算 耘悦缘园及 耘悦怨园值咱员源 原 员缘暂 遥
员援 圆援 圆 菌丝体和原生质体形态变化的显微观察
菌丝体染色观察院将稻瘟病菌接入 悦酝 培养液
中袁培养 猿 凿制得菌悬液袁分别加入木荷皂甙 酝郧陨砸缘
溶液至 耘悦缘园尧耘悦怨园浓度袁以同体积无菌水为对照袁于
处理后 圆源尧源愿尧苑圆 澡 取样遥 菌丝涂片袁室温下自然干
燥袁立即番红染色袁显微镜下观察咱员远暂 遥
菌丝原生质体制备及显微观察院将菌悬液接种
至装有新鲜 悦酝培养液的培养皿中袁猿园 益黑暗培养
员 凿遥 无菌纱布过滤收集菌丝袁依次用无菌水尧韵酝 缓
冲液冲洗袁菌丝体加入含有 员园 皂早 辕 皂蕴 裂解酶的 圆
皂蕴 韵酝缓冲液中袁圆园园 则 辕 皂蚤灶尧猿圆 益下振动培养 源 澡
后袁立即加入 圆 皂蕴 山梨醇缓冲液袁猿 园园园 则 辕 皂蚤灶 离心
员园 皂蚤灶曰沉淀物用 员园 皂蕴 杂栽悦 缓冲液洗涤 圆 次后袁再
次悬浮于 员 皂蕴 杂栽悦 缓冲液中咱员远暂 遥 用 园援 员豫的 阅酝鄄
杂韵配制木荷皂甙 酝圆陨郧砸缘 的 耘悦缘园浓度的水溶液袁用
移液枪吸取稻瘟病菌原生质体悬液于含皂甙水溶液
的离心管中袁并以含 园援 员豫无菌水的 阅酝杂韵 作空白
对照遥 在 圆愿 益的恒温培养箱分别培养 园尧圆尧源尧远 澡袁
取样尧制片袁观察其作用效果遥
员援 圆援 猿 菌丝胞外生理生化成分的测定
菌丝的处理院取 圆 皂蕴 培养 猿 凿 的稻瘟病菌 悦酝
菌悬液袁分别加入 耘悦缘园尧耘悦怨园尧圆 倍 耘悦怨园浓度的木荷
皂甙 酝圆陨郧砸缘尧等量无菌水渊对照冤中袁分别在处理后
园 耀 远尧园 耀 愿尧园 耀 员园尧园 耀 源园尧园 耀 苑圆 澡 时间段内取样袁离
心制得上清液袁待用遥
电导率测定院取培养 猿 凿 的稻瘟病菌菌丝体袁过
滤收集袁并用二次蒸馏水洗涤数遍袁称取菌丝湿重 员
早于 员缘 皂蕴 离心管中袁加入终浓度分别为 耘悦缘园尧耘悦怨园
的木荷皂甙 酝圆陨郧砸缘 溶液袁采用电导率仪分别于处
理后 园尧 园援 缘尧员尧圆尧猿尧远尧怨 澡 测定各处理液的电导率袁
空白对照为同浓度的菌丝悬浊液遥
胞外可溶性蛋白含量测定院采用考马斯亮兰 郧鄄
圆缘园 染色法咱员苑暂 遥 取洁净的试管袁加入菌丝处理上清
液 员园园 滋蕴袁用蒸馏水定容至 员 皂蕴袁再加入 缘 皂蕴 考马
斯亮兰 郧鄄圆缘园 溶液袁静置 缘 皂蚤灶袁用 栽则蚤泽鄄匀悦造缓冲液调
零袁于波长 缘怨缘 灶皂下测 韵阅 值遥 同时以 园 耀 员园园尧园 耀
员 园园园 滋早 辕 皂蕴牛血清蛋白溶液代替菌丝处理液制得
标准曲线院再韵阅缘怨缘 越 园援 园园远缘曾 垣 园援 园怨员源渊砸圆 越 园援 怨怨怨猿冤袁
再爷韵阅缘怨缘 越 猿援 员远园园曾 原 园援 园猿源园袁渊砸圆 越 园援 怨怨愿园冤袁根据 韵阅
值换算菌丝处理液中蛋白的含量渊滋早冤 咱员愿暂 遥
胞外可溶性糖含量测定院采用 猿袁缘 原二硝基水
杨酸渊阅晕杂冤法袁向洁净的离心管中加入各处理菌丝
的上清液 圆园园 滋蕴袁加入 源园园 滋蕴 阅晕杂袁沸水浴 缘 皂蚤灶遥
取出立即放入冷水浴中袁冷至室温袁蒸馏水定容至
圆援 缘 皂蕴袁混匀遥 用 栽则蚤泽鄄匀悦造 缓冲液调零袁于波长 缘源园
灶皂下测 韵阅 值遥 同时制作 园 耀 员 园园园尧 园 耀 圆 园园园 滋早 辕
皂蕴葡萄糖标准曲线分别为院 再韵阅缘源园 越 园 援 园园园远 曾 原园 援 园园怨猿渊砸圆越 园援 怨怨缘苑冤袁 再爷韵阅缘源园越 员援 远缘苑怨曾 垣 园援 园缘员园渊砸圆 越 园援 怨怨远园冤袁根据 韵阅值换算葡萄糖含量渊滋早冤遥
晕 原乙酰葡萄糖胺测定院向洁净的具塞刻度试
管中加入各处理菌丝的上清液袁再加入 园援 愿 皂燥造 辕 蕴
硼酸钾 园援 缘 皂蕴袁沸水浴 猿 皂蚤灶袁冷却袁加 猿 皂蕴质量分
数为 员豫的对二甲氨基苯甲醛渊阅酝粤月冤袁猿远 益保温
圆园 皂蚤灶袁 冷却袁 于波长缘源源 灶皂处测定韵阅值遥制得
园 耀 猿园园 滋早 辕 皂蕴 晕 原乙酰葡萄糖胺系列浓度溶液袁同
法测定韵阅值袁获得标准曲线院再韵阅缘源源 越 园 援 园园源源 曾 垣
圆缘源 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源园 卷
园援 园员愿员渊砸圆 越 园援 怨怨怨苑冤袁根据 韵阅 值换算 晕 原乙酰葡
萄糖胺的含量渊滋早冤遥
几丁质酶活性测定院向洁净的试管中加入各处
理菌丝的上清液 园援 远 皂蕴渊对照先煮沸 缘 皂蚤灶 灭活袁冷
却冤袁加入胶状几丁质 园援 远 皂蕴袁猿苑 益保温 员 澡袁煮沸 缘
皂蚤灶灭活袁缘 园园园 则 辕 皂蚤灶离心 员园 皂蚤灶袁取上清液 园援 远 皂蕴袁
加 园援 愿 皂燥造 辕 蕴 硼酸钾溶液 园援 猿 皂蕴袁沸水浴 猿 皂蚤灶袁冷
却袁加 员豫的 阅酝粤月 圆援 缘 皂蕴 袁猿远益保温 圆园 皂蚤灶袁冷却袁
于波长 缘源源 灶皂处测定 韵阅 值遥 以反应前后灭活 韵阅
值之差表示几丁质酶活性咱员怨暂 遥
圆 结果与分析
圆援 员 木荷皂甙的 耘悦缘园和 耘悦怨园
木荷皂甙 酝郧陨砸缘 表现出较强的抗稻瘟病菌作
用渊图 员冤袁其毒力方程为院再 越 圆援 远远猿猿 垣 员援 怨圆圆愿曾袁相
关系数为 园援 怨怨苑园遥 据此可计算出其 耘悦缘园为 员远援 源员滋早 辕 皂蕴尧耘悦怨园为 苑远援 员远 滋早 辕 皂蕴袁怨缘豫 置信区分别为员圆援 愿怨 耀 员愿援 圆缘 滋早 辕 皂蕴和 缘远援 源远 耀 员园怨援 员苑 滋早 辕 皂蕴遥
图 员 木荷皂甙酝郧陨砸缘 抗稻瘟病菌的活性
云蚤早援 员 栽澡藻 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 泽葬责燥灶蚤灶 酝郧陨砸缘 枣则燥皂 杂糟澡蚤皂葬 泽怎责藻则遭葬 则藻泽蚤泽贼蚤灶早 酝葬早灶葬责燥则贼澡藻 燥则赠扎葬藻
摇 摇 葬尧遭尧糟尧凿尧藻尧枣尧早分别是 缘员缘援 园园尧圆缘苑援 缘园尧员圆愿援 苑缘尧远源援 猿愿尧猿圆援 员怨尧员远援 园怨尧愿援 园缘 滋早 辕 皂蕴浓度的 酝圆陨郧砸缘 培养 员园愿 澡的抑菌圈曰澡为空白对
照的抑菌圈遥 葬袁 遭袁 糟袁 凿袁 藻袁 枣袁 早院 陨灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 扎燥灶藻泽 憎澡藻灶 贼则藻葬贼藻凿 憎蚤贼澡 缘员缘援 园园袁 圆缘苑援 缘园袁 员圆愿援 苑缘袁 远源援 猿愿袁 猿圆援 员怨袁 员远援 园怨袁 愿援 园缘 滋早 辕 皂蕴 燥枣
酝圆陨郧砸缘 葬贼 员园愿 澡曰 澡院 蚤灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 扎燥灶藻 燥枣 贼澡藻 糟燥灶贼则燥造 葬贼 员园愿 澡援
圆援 圆 对稻瘟病菌菌丝形态的影响
木荷皂甙 酝圆陨郧砸缘 导致稻瘟病菌菌丝形态结构
发生显著变化遥 酝圆陨郧砸缘 在 耘悦缘园尧耘悦怨园浓度下袁作用圆源 澡后均可引起菌丝断裂尧纠结和膨肿等现象遥 随
着浓度的升高和时间的延长袁菌丝受损加重袁并且细
胞壁呈现不规则形态袁厚薄不一和局部破裂渊图 圆冤遥
圆援 猿 对稻瘟病菌原生质体形态的影响
随着 酝圆陨郧砸缘 作用时间的延长袁空白对照的原
生质体从球型变成椭球型袁而 酝圆陨郧砸缘 处理初时的
原生质体形态无变化袁圆 澡 时原生质体由球型变成
了蝌蚪型袁源 澡 时原生质粘连明显袁远 澡 时多原生质
粘连成团袁出现不规则型单原生质体渊图 猿冤遥
圆援 源 对稻瘟病菌培养液电导率的影响
木荷皂甙 酝圆陨郧砸缘 处理 园 耀 园援 缘 澡 后袁对照和各
处理菌丝培养液的电导率呈快速上升趋势袁处理培
养液的电导率涨幅明显高于对照袁并呈量效关系曰在
园援 缘 耀 猿 澡 时袁酝圆陨郧砸缘 耘悦怨园浓度的电导率值增加仍
较快速袁而 耘悦缘园浓度和对照的电导率变化趋于平
缓曰猿 澡后袁对照和各处理培养液的电导率均趋于平
缓渊图 源冤遥
圆援 缘 对稻瘟病菌细胞可溶性蛋白和糖渗漏的影响
园 耀 圆 澡袁对照菌丝可溶性蛋白渗漏量较少袁而处
理的菌丝渗漏量是对照的 员园 倍左右曰圆 耀 源 澡 时袁对
照渗漏量增加近 源 倍袁而处理样品也有类似趋势袁只
是渗漏量增加较少曰源 耀 愿 澡袁对照尧耘悦缘园和 耘悦怨园浓
度处理的渗漏量增加较少袁而圆倍耘悦怨园浓度处理
的渗漏量在源 耀 远 澡增加较快 袁远 耀 愿 澡趋于平缓
渊表 员冤遥
园 耀 圆 澡袁对照病原菌丝培养液中可溶性糖略有
降低袁而木荷皂甙 酝圆陨郧砸缘 处理的病原菌丝培养液
中可溶性糖迅速增加袁达到初始的 猿园 耀 远园 倍曰圆 耀 愿
澡袁对照菌丝培养液和处理菌丝培养液的可溶性糖含
量变化趋于平缓袁但前者消耗降低袁后者渗漏增加的
趋势基本未变渊表 员冤遥
猿缘源缘 期 易摇 磊等院木荷皂甙对稻瘟病菌细胞形态及生理生化指标的影响
图 圆 木荷皂甙酝圆陨郧砸缘 对稻瘟病菌菌丝的作用
云蚤早援 圆 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 泽葬责燥灶蚤灶 酝郧陨砸缘 枣则燥皂 杂糟澡蚤皂葬 泽怎责藻则遭葬 燥灶 澡赠责澡葬藻 燥枣 酝葬早灶葬责燥则贼澡藻 燥则赠扎葬
摇 摇 葬尧遭尧糟 分别为空白对照 圆源尧源愿尧苑圆 澡的正常菌丝曰凿尧藻尧枣 分别为 员远援 源员 滋早 辕 皂蕴 酝圆陨郧砸缘处理 圆源尧源愿尧苑圆 澡的菌丝曰早尧澡尧蚤 分别为 苑远援 员远
滋早 辕 皂蕴 酝圆陨郧砸缘处理 圆源尧源愿尧苑圆 澡的菌丝遥 葬袁 遭袁 糟院 匀赠责澡葬藻 燥枣 贼澡藻 糟燥灶贼则燥造 葬贼 圆源袁 源愿 葬灶凿 苑圆 澡曰 凿袁 藻袁 枣院 澡赠责澡葬藻 贼则藻葬贼藻凿 憎蚤贼澡 酝圆陨郧砸缘灶 燥枣
员远援 源员 滋早 辕 皂蕴 葬贼 圆源袁 源愿 葬灶凿 苑圆 澡曰 早袁 澡袁 蚤院 澡赠责澡葬藻 贼则藻葬贼藻凿 憎蚤贼澡 酝圆陨郧砸缘 燥枣 苑远援 员远 滋早 辕 皂蕴 葬贼 圆源袁 源愿 葬灶凿 苑圆 澡援
图 猿 木荷皂甙酝圆陨郧砸缘 对稻瘟病菌原生质体的作用
云蚤早援 猿 粤糟贼蚤燥灶 燥枣 泽葬责燥灶蚤灶 酝圆陨郧砸缘 枣则燥皂 杂糟澡蚤皂葬 泽怎责藻则遭葬 燥灶 责则燥贼燥责造葬泽贼泽 燥枣 酝葬早灶葬责燥则贼澡藻 燥则赠扎葬藻
摇 摇 葬尧遭尧糟尧凿分别为空白对照 园尧圆尧源尧远 澡的稻瘟病菌原生质体曰藻尧枣尧早尧澡分别为 员远援 源员 滋早 辕 皂蕴 酝圆陨郧砸缘处理 园尧圆尧源尧远 澡的稻瘟病菌原生
质体遥 葬袁 遭袁 糟袁 凿院 孕则燥贼燥责造葬泽贼泽 枣则燥皂 酝援 燥则赠扎葬藻 燥枣 园袁 圆袁 源袁 远 澡 憎蚤贼澡燥怎贼 贼则藻葬贼皂藻灶贼曰 藻袁 枣袁 早袁 澡院 责则燥贼燥责造葬泽贼泽 枣则燥皂 酝援 燥则赠扎葬藻 燥枣 园袁 圆袁 源袁 远 澡 贼则藻葬贼藻凿
憎蚤贼澡 酝圆陨郧砸缘 燥枣 员远援 源员 滋早 辕 皂蕴援
圆援 远 对稻瘟病菌胞壁成分和相关酶的影响
随着培养时间的延长袁对照菌丝培养液中 晕 原
乙酰葡萄糖胺的含量逐渐减小袁而木荷皂甙
酝圆陨郧砸缘 处理菌丝培养液中 晕 原乙酰葡萄糖胺的含
量呈线性增加袁且浓度越高含量增加越快袁呈量效关
系遥 源园 澡时袁处理菌丝培养液中 晕 原乙酰葡萄糖胺
的含量达到对照组含量的 员援 苑 倍以上渊表 圆冤遥 园 耀
员园 澡袁对照菌丝培养液中几丁质酶活性略有增加袁而
木荷皂甙 酝圆陨郧砸缘 处理菌丝培养液中几丁质酶活性
迅速增加曰员园 耀 源园 澡袁除了 圆 倍 耘悦怨园浓度处理在 员园 耀圆园 澡间酶活性增加外袁对照尧耘悦缘园和 耘悦怨园处理均呈下
降趋势袁但每时间段各处理的酶活性均明显高于对
照组渊表 圆冤遥
猿 讨论
本研究结果表明袁木荷皂甙酝圆陨郧砸缘抗稻瘟病
源缘源 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源园 卷
图 源 木荷皂甙酝圆陨郧砸缘 处理后稻瘟病菌菌丝培养液电导率的变化
云蚤早援 源 悦澡葬灶早藻 燥枣 糟燥灶凿怎糟贼蚤增蚤贼赠 蚤灶 澡赠责澡葬造 糟怎造贼怎则藻 造蚤择怎蚤凿 燥枣 酝葬早灶葬责燥则贼澡藻 燥则赠扎葬藻 贼则藻葬贼藻凿 憎蚤贼澡 泽葬责燥灶蚤灶 酝圆陨郧砸缘 枣则燥皂 杂糟澡蚤皂葬 泽怎责藻则遭葬
表 员 木荷皂甙酝圆陨郧砸缘 处理不同时间后对稻瘟病菌可溶性蛋白和糖渗漏的影响
栽葬遭造藻 员 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 泽葬责燥灶蚤灶 酝圆陨郧砸缘 枣则燥皂 杂糟澡蚤皂葬 泽怎责藻则遭葬 燥灶 造藻葬噪葬早藻 燥枣 泽燥造怎遭造藻
责则燥贼藻蚤灶泽 葬灶凿 泽怎早葬则泽 枣则燥皂 酝葬早灶葬责燥则贼澡藻 燥则赠扎葬藻 蚤灶 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 贼蚤皂藻泽
浓度渊滋早 辕 皂蕴冤
悦燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶
可溶性蛋白渗漏量 渊滋早 辕 早冤
蕴藻葬噪葬早藻 燥枣 泽燥造怎遭造藻 责则燥贼藻蚤灶泽
园 澡 圆 澡 源 澡 远 澡 愿 澡
可溶性糖渗漏量 渊滋早 辕 早冤
蕴藻葬噪葬早藻 燥枣 泽燥造怎遭造藻 泽怎早葬则泽
园 澡 圆 澡 源 澡 远 澡 愿 澡
悦运 圆园援 远猿 猿缘援 愿园 员猿员援 猿怨 员猿苑援 源远 员猿苑援 源远 猿园援 圆缘 员苑援 远愿 员缘援 源苑 员源援 猿怨 员源援 圆圆
员远援 源员 圆园援 远猿 猿猿员援 猿远 源远愿援 员源 源苑愿援 怨园 源愿远援 缘怨 猿园援 圆缘 员 猿苑怨援 猿员 员 源怨园援 愿苑 员缘圆员援 圆怨 员 缘圆员援 圆怨
苑远援 员远 圆园援 远猿 源源源援 愿缘 源愿怨援 圆源 缘园苑援 远缘 缘员圆援 圆园 猿园援 圆缘 怨怨圆援 员源 员 园园苑援 愿圆 员园园远援 缘猿 员 员员愿援 怨缘
员缘圆援 猿圆 圆园援 远猿 源缘愿援 远猿 源怨猿援 愿猿 缘怨员援 愿员 远园源援 园缘 猿园援 圆缘 员 愿猿源援 远苑 员 怨园缘援 圆源 员怨圆缘援 源园 员 怨缘远援 怨源
表 圆 木荷皂甙酝圆陨郧砸缘 对稻瘟病菌 晕 原乙酰葡萄糖胺含量和几丁质酶活性的影响
栽葬遭造藻 圆 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 泽葬责燥灶蚤灶 酝圆陨郧砸缘 燥灶 藻曾贼则葬糟藻造造怎造葬则 晕鄄葬糟藻贼赠造 早造怎糟燥泽葬皂蚤灶藻 糟燥灶贼藻灶贼 葬灶凿 糟澡蚤贼蚤灶葬泽藻 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 酝葬早灶葬责燥则贼澡藻 燥则赠扎葬藻
浓度渊滋早 辕 皂蕴冤
悦燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶
晕 原乙酰葡萄糖胺含量 渊滋早 辕 早冤
悦燥灶贼藻灶贼 燥枣 晕鄄葬糟藻贼赠造 早造怎糟燥泽葬皂蚤灶藻
园 澡 愿 澡 圆源 澡 猿圆 澡 源园 澡
几丁质酶活性 渊哉 辕 早冤
粤糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 糟澡蚤贼蚤灶葬泽藻
园 澡 员园 澡 圆园 澡 猿园 澡 源园 澡
悦运 员远猿援 源缘 员缘怨援 猿园 员缘园援 园员 员圆缘援 怨远 员圆源援 猿苑 园援 员苑圆猿 园援 员苑源圆 园援 员苑园猿 园援 员远猿园 园援 员远圆圆
员远援 源员 员远猿援 源缘 员苑远援 缘缘 员愿怨援 员源 员怨苑援 源远 圆园苑援 源缘 园援 员苑圆猿 园援 圆源远员 园援 圆猿员园 园援 圆园猿员 园援 员怨苑远
苑远援 员远 员远猿援 源缘 员怨猿援 猿远 圆园怨援 员源 圆员源援 员圆 圆圆猿援 远愿 园援 员苑圆猿 园援 圆苑员员 园援 圆远员愿 园援 圆缘员苑 园援 圆员怨愿
员缘圆援 猿圆 员远猿援 源缘 员怨苑援 员圆 圆猿园援 员苑 圆猿猿援 员苑 圆猿远援 员源 园援 员苑圆猿 园援 圆愿园猿 园援 猿园圆圆 园援 圆怨苑员 园援 圆远怨愿
菌的 耘悦缘园为 员远援 源员 滋早 辕 皂蕴袁 耘悦怨园为 苑远援 员远 滋早 辕 皂蕴袁与
生产上常用的富士一号 耘悦缘园 员愿援 员缘 滋早 辕 皂蕴 相当遥酝圆陨郧砸缘 的 耘悦缘园和 耘悦怨园浓度处理稻瘟病菌菌丝 圆源 澡
后袁可导致菌丝断裂尧细胞肿胀曰处理去壁的原生质
体 圆 澡即可导致其变型尧粘连尧破裂袁引起病原菌丝
细胞内含物大量渗漏曰处理 圆 澡 后的可溶性蛋白渗
漏量高出对照 员园 倍袁可溶性总糖渗漏量高出对照
猿园 耀 远园 倍袁且处理液的电导率显著增高遥 这说明木
荷活性皂甙作用稻瘟病菌菌丝后袁引起稻瘟病菌细
胞膜通透性增大尧完整性破坏咱圆园暂 遥
匀怎等咱圆员暂研究了五加属植物的 员缘 种齐墩果烷
型三萜皂甙对含或不含胆甾醇的人工膜的破坏作
用袁猿 位和 圆愿 位同时糖苷化后袁膜上不含胆甾醇就
能渗透曰而仅 猿 位糖苷化则需要膜上含胆甾醇才能
渗透遥 木荷皂甙也属于齐墩果烷型三萜类皂甙袁其
主要成分有 圆员袁圆圆 原二 原 韵 原当归酰基 原 砸员 原玉蕊
醇 原 猿 原 韵 原 茁 原 阅 原吡喃葡萄糖基 原 渊员寅圆冤 原 茁 原
阅 原吡喃半乳糖基 原 渊员寅圆冤 原 咱琢 原 蕴 原吡喃鼠李糖
基 原 渊员寅源冤暂 原 茁 原 阅 原吡喃葡萄糖酸甙等袁该成分
与五加属植物皂甙结构相比袁属于仅在 猿 位存在糖
苷化的皂甙袁因此木荷皂甙对稻瘟病菌菌丝致毒作
用很有可能是借助病菌细胞膜上的胆甾醇而发挥作
用遥 这与皂甙同膜上的胆甾醇结合形成不溶性复合
物袁引起膜孔形成袁细胞渗透的假说相吻合遥
缘缘源缘 期 易摇 磊等院木荷皂甙对稻瘟病菌细胞形态及生理生化指标的影响
摇 摇 耘泽糟葬造葬灶贼藻等咱圆圆暂从四萼商陆 孕澡赠贼燥造葬糟糟葬 贼藻贼则葬皂藻则葬
中分离获得并鉴定出 猿 种齐墩果烷型三萜皂甙
渊责澡赠贼燥造葬糟糟燥泽蚤凿藻泽冤 月尧耘尧云袁其抑制菌丝生长活性受 猿
位糖链上糖基的数量和种类的影响袁即齐墩果酸
渊甙元冤没有抗真菌活性袁随着 猿 位糖链中糖基数增
加而抑菌活性降低遥 木荷皂甙甙元是齐墩果烷袁猿
位含有 员 个由 源 个单糖组成的糖侧链袁通过适度酸
水解脱糖基袁可以增强其抗稻瘟病菌的活性遥 由此
可见袁木荷皂甙与稻瘟病菌细胞膜的作用强弱还与
其分子中糖侧链的糖基组成关系密切遥
除此之外袁本研究还发现木荷皂甙作用于稻瘟
病菌菌丝后袁引起其胞外几丁质酶活性明显增强袁处
理 源园 澡 时的菌丝培养液中 晕 原乙酰葡萄糖胺的含
量是对照含量的 员援 苑 倍以上遥 在菌丝培养液中 晕 原
乙酰葡萄糖胺含量可能保持着一种动态袁即菌丝细
胞增殖快于衰亡时袁其含量减少曰菌丝细胞衰亡快于
增殖或细胞壁的分解大于合成时袁其含量增加遥 因
此袁处理菌丝培养液中 晕 原乙酰葡萄糖胺含量增加袁
说明木荷活性皂甙引起病菌菌丝细胞衰亡快于增
殖袁或菌丝细胞壁的分解大于合成遥 由此可见袁木荷
皂甙对稻瘟病菌的作用不仅仅是作用于细胞膜上袁
而且还诱发几丁质酶活性增强袁促使 晕 原乙酰葡萄
糖胺的脱落袁进一步加速稻瘟病菌菌丝细胞的凋亡遥
而有关木荷皂甙 酝圆陨郧砸缘 引起几丁质酶活性增强的
作用机制还有待进一步探讨遥
参 考 文 献渊砸藻枣藻则藻灶糟藻泽冤
咱员暂 晕燥则皂蚤造藻 阅援 晕藻憎 泽贼则葬贼藻早赠 责则燥皂蚤泽藻泽 造葬泽贼蚤灶早 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 贼燥 葬 则蚤糟藻
责造葬早怎藻援 杂糟蚤藻灶糟藻袁 圆园园怨袁 猿圆缘院 怨圆缘
咱圆暂 云怎噪怎燥噪葬 杂袁 杂葬噪葬 晕袁 运燥早葬 匀袁 藻贼 葬造援 蕴燥泽泽 燥枣 枣怎灶糟贼蚤燥灶 燥枣 葬 责则燥鄄
造蚤灶藻鄄糟燥灶贼葬蚤灶蚤灶早 责则燥贼藻蚤灶 糟燥灶枣藻则泽 凿怎则葬遭造藻 凿蚤泽藻葬泽藻 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 蚤灶
则蚤糟藻援 杂糟蚤藻灶糟藻袁 圆园园怨袁 猿圆缘院 怨怨愿 原 员园园员
咱猿暂 孕葬凿燥增葬灶蚤 蕴袁 悦葬责则蚤 耘袁 孕葬凿燥增葬灶蚤 悦袁 藻贼 葬造援 酝燥灶蚤贼燥则蚤灶早 贼则蚤糟赠糟造葬鄄
扎燥造藻 则藻泽蚤凿怎藻泽 蚤灶 则蚤糟藻 责葬凿凿赠 憎葬贼藻则泽澡藻凿泽援 悦澡藻皂燥泽责澡藻则藻袁 圆园园远袁
远圆院 猿园猿 原 猿员源
咱源暂 袁洁袁杨学辉援 贵州省稻瘟病菌对三环唑和富士一号的敏感
性研究援贵州农业科学袁圆园园猿袁猿员渊远冤院猿苑 原 猿愿
咱缘暂 霍光华袁詹五根袁陈明辉援 两种茶科植物木荷和油茶抗稻瘟
等病菌的活性援 江西农业大学学报袁圆园园愿袁猿园渊员冤院源愿 原 缘圆
咱远暂 匀怎燥 郧 匀袁 在澡葬灶早 悦 蕴袁 在澡葬灶早 再 允援 杂贼则怎糟贼怎则藻 藻造怎糟蚤凿葬贼蚤燥灶 燥枣 贼憎燥
贼则蚤贼藻则责藻灶燥蚤凿 泽葬责燥灶蚤灶泽 枣则燥皂 造藻葬增藻泽 燥枣 杂糟澡蚤皂葬 泽怎责藻则遭葬 郧葬则凿灶援 藻贼
悦澡葬皂责援 圆园员圆 陨灶贼藻则灶葬贼蚤燥灶葬造 悦燥灶枣藻则藻灶糟藻 燥灶 粤责责造蚤藻凿 月蚤燥贼藻糟澡灶燥造燥鄄
早赠袁 栽蚤葬灶躁蚤灶袁 悦澡蚤灶葬
咱苑暂 月葬则蚤造藻 耘袁 月燥灶葬灶燥皂蚤 郧袁 粤灶贼蚤早灶葬灶蚤 灾袁 藻贼 葬造援 杂葬责燥灶蚤灶泽 枣则燥皂 粤造造蚤鄄
怎皂 皂蚤灶怎贼蚤枣造燥则怎皂 憎蚤贼澡 葬灶贼蚤枣怎灶早葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠援 孕澡赠贼燥糟澡藻皂蚤泽贼则赠袁
圆园园苑袁 远愿院 缘怨远 原 远园猿
咱愿暂 杂贼怎葬则凿燥 酝袁 酝葬则贼蚤灶 砸 杂援 粤灶贼蚤枣怎灶早葬造 责则燥责藻则贼蚤藻泽 燥枣 择怎蚤灶燥葬 渊悦澡藻鄄
皂燥责燥凿蚤怎皂 择怎蚤灶燥葬 宰蚤造造凿冤 葬造噪葬造蚤 贼则藻葬贼藻凿 泽葬责燥灶蚤灶泽 葬早葬蚤灶泽贼 月燥贼则赠贼蚤泽
糟蚤灶藻则藻葬援 陨灶凿怎泽贼则蚤葬造 悦则燥责泽 葬灶凿 孕则燥凿怎糟贼泽袁 圆园园愿袁 圆苑院 圆怨远 原 猿园圆
咱怨暂 孕蚤泽贼藻造造蚤 蕴袁 月藻则贼燥造蚤 粤袁 蕴藻责燥则蚤 耘袁 藻贼 葬造援 粤灶贼蚤皂蚤糟则燥遭蚤葬造 葬灶凿 葬灶贼蚤鄄
枣怎灶早葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 糟则怎凿藻 藻曾贼则葬糟贼泽 葬灶凿 蚤泽燥造葬贼藻凿 泽葬责燥灶蚤灶泽 枣则燥皂 粤泽鄄
贼则葬早葬造怎泽 增藻则则怎糟燥泽怎泽援 云蚤贼燥贼藻则葬责蚤葬袁 圆园园圆袁 苑猿院 猿猿远 原 猿猿怨
咱员园暂 栽燥憎灶泽藻灶凿 月袁 允藻灶灶藻则 匀袁 韵泽遭燥怎则灶 粤援 杂葬责燥灶蚤灶 早造赠糟燥泽赠造葬贼蚤燥灶 蚤灶
糟藻则藻葬造泽援 孕澡赠贼燥糟澡藻皂蚤泽贼则赠 砸藻增蚤藻憎泽袁 圆园园远袁 缘院 员园怨 原 员员源
咱员员暂 郧葬怎贼澡蚤藻则 悦袁 蕴藻早葬怎造贼 允袁 郧蚤则葬则凿鄄蕴葬造葬灶糟藻贼贼藻 运袁 藻贼 葬造援 匀葬藻皂燥造赠贼蚤糟
葬糟贼蚤增蚤贼赠袁 糟赠贼燥贼燥曾蚤糟蚤贼赠 葬灶凿 皂藻皂遭则葬灶藻 糟藻造造 责藻则皂藻葬遭蚤造蚤扎葬贼蚤燥灶 燥枣
泽藻皂蚤鄄泽赠灶贼澡藻贼蚤糟 葬灶凿 灶葬贼怎则葬造 造怎责葬灶藻鄄 葬灶凿 燥造藻葬灶葬灶藻鄄贼赠责藻 泽葬责燥鄄
灶蚤灶泽援 月蚤燥燥则早葬灶蚤糟 葬灶凿 酝藻凿蚤糟蚤灶葬造 悦澡藻皂蚤泽贼则赠袁 圆园园怨袁 员苑院 圆园园圆 原
圆园园愿
咱员圆暂 冯华根袁张长伶袁霍光华援 木荷活性成分的分离及其对稻瘟
病菌的室内毒力援江苏农业科学袁圆园员圆袁源园渊源冤院员员源 原 员员苑
咱员猿暂 尹良芬袁八重樫博志援 稻瘟病菌原生质体制备条件优化实
验研究援实验技术与管理袁圆园员员袁圆愿渊源冤院 猿猿 原 猿缘
咱员源暂黄霄袁陈波袁周登博袁等 援 菌株月酝鄄圆源的分离鉴定及对香
蕉枯萎病菌的抑菌活性 援 植物保护学报袁圆园员猿袁源园渊圆冤 院
员圆员 原 员圆苑
咱员缘暂 赵娜袁王海丽袁魏少鹏袁等援 放线菌 悦鄄源员员 发酵液抑菌活性
及活性成分援 植物保护学报袁圆园员猿袁源园渊员冤院苑猿 原 苑苑
咱员远暂 王梅竹袁王和援 细胞壁染色法的改良及真菌细胞壁染色观
察援 贵阳医学院学报袁圆园园源袁圆怨渊缘冤院源远园 原 源远员
咱员苑暂 刘芳袁刁春铃袁宋宝安袁等援 广枯灵对辣椒枯萎病原菌抑制
机制的初步研究援 农药袁圆园园苑袁源远渊圆冤院愿怨 原 怨员
咱员愿暂 魏赛金袁杜亚楠袁李昆太袁等援 稠李链霉菌 允粤哉源圆猿源 代谢产
物对水稻纹枯病菌的作用机制援 植物保护学报袁圆园员圆袁猿怨
渊缘冤院源员员 原 源员苑
咱员怨暂 顾向阳袁胡正嘉援 一种测定土壤几丁质酶活性的方法援 土
壤通报袁员怨怨源袁圆缘渊远冤院圆愿源 原 圆愿缘
咱圆园暂 粤泽澡则葬枣 酝袁 粤造蚤 匝援 砸藻造葬贼蚤增藻 皂藻皂遭则葬灶藻 责藻则皂藻葬遭蚤造蚤贼赠 葬灶凿 葬糟贼蚤增蚤鄄
贼蚤藻泽 燥枣 泽燥皂藻 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼院 藻灶扎赠皂藻泽 葬泽 贼澡藻 噪藻赠 凿藻贼藻则皂蚤灶葬灶贼泽 燥枣
泽葬造贼 贼燥造藻则葬灶糟藻 蚤灶 糟葬灶燥造葬 渊月则葬泽泽蚤糟葬 灶葬责怎泽 蕴援 冤援 耘灶增蚤则燥灶皂藻灶贼葬造
葬灶凿 耘曾责藻则蚤皂藻灶贼葬造 月燥贼葬灶赠袁 圆园园愿袁 远猿院 圆远远 原 圆苑猿
咱圆员 暂 匀怎 酝袁 运燥灶燥噪蚤 运袁 栽葬糟澡蚤遭葬灶葬 运援 悦澡燥造藻泽贼藻则燥造鄄蚤灶凿藻责藻灶凿藻灶贼
皂藻皂遭则葬灶藻 凿蚤泽则怎责贼蚤燥灶 糟葬怎泽藻凿 遭赠 贼则蚤贼藻则责藻灶燥蚤凿 泽葬责燥灶蚤灶泽援 月蚤燥鄄
糟澡蚤皂蚤糟葬 藻贼 月蚤燥责澡赠泽蚤糟葬 粤糟贼葬袁 员怨怨远袁 员圆怨怨院 圆缘圆 原 圆缘愿
咱圆圆暂 耘泽糟葬造葬灶贼藻 粤 酝袁 杂葬灶贼藻糟糟澡蚤葬 悦 月袁 蕴仵责藻扎 杂 晕袁 藻贼 葬造援 陨泽燥造葬贼蚤燥灶
燥枣 葬灶贼蚤枣怎灶早葬造 泽葬责燥灶蚤灶泽 枣则燥皂 孕澡赠贼燥造葬糟糟葬 贼藻贼则葬皂藻则葬袁 葬灶 粤则早藻灶鄄
贼蚤灶藻葬灶 泽责藻糟蚤藻泽 蚤灶 糟则蚤贼蚤糟 则蚤泽噪援 允燥怎则灶葬造 燥枣 耘贼澡灶燥责澡葬则皂葬糟燥造燥早赠袁
圆园园圆袁 愿圆院 圆怨 原 猿源
渊责任编辑院谢小帆冤
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