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Screening and evaluation of antagonistic bacteria against Rhizoctonia solani

水稻纹枯病菌拮抗细菌的筛选及鉴定



全 文 :水稻纹枯病菌拮抗细菌的筛选及鉴定
陈思宇员 摇 陈志谊员袁圆鄢摇 张荣胜圆
渊员援南京农业大学植物保护学院袁 南京 圆员园园怨缘曰 圆援江苏省农业科学院植物保护研究所袁 南京 圆员园园员源冤
摘要院 为获得对水稻纹枯病有生防效果的拮抗细菌袁从江苏南京尧徐州和常州等地采集的土样中分
离细菌分离物 员怨员源 株袁采用平板对峙法筛选获得 苑园 株对水稻纹枯病菌有较强抑菌活性的分离物袁
其中 员员 株对 缘 种水稻病害病原菌均有抑制作用曰对 员员 株拮抗菌进行田间防效和室内促生试验袁测
定菌株分泌的抑菌物质和促生物质袁并进行种属鉴定遥 结果表明袁拮抗菌对水稻纹枯病的盆栽和田
间小区防效在 源愿援 源员豫和 源猿援 园猿豫以上曰均可产生蛋白酶与嗜铁素袁而不产生几丁质酶袁除 载云鄄员苑源
外其余 员园 个菌株均可产生纤维素酶曰对水稻苗株高和鲜重具有促生作用袁并均可产生赤霉素
渊郧粤猿冤曰除 在云鄄圆苑猿 和 载云鄄员苑源 外的 怨 个菌株可产生吲哚乙酸渊 陨粤粤冤袁且细菌发酵液中 陨粤粤和 郧粤猿 含
量与水稻株高和鲜重的增长率呈正相关遥 结合各菌株形态特征尧生理生化特性和 员远杂 则阅晕粤与 早赠则鄄
月序列分析结果袁鉴定 杂云鄄员愿员 为枯草芽胞杆菌 月葬糟蚤造造怎泽 泽怎遭贼蚤造蚤泽袁载云鄄员苑源 为荧光假单胞菌 孕泽藻怎凿燥鄄
皂燥灶葬泽 枣造怎燥则藻泽糟藻灶泽袁其余 怨 个菌株为解淀粉芽胞杆菌 月援 葬皂赠造燥造蚤择怎藻枣葬糟蚤藻灶泽遥
关键词院 水稻纹枯病菌曰 拮抗细菌曰 筛选曰 防治效果曰 促生作用
杂糟则藻藻灶蚤灶早 葬灶凿 藻增葬造怎葬贼蚤燥灶 燥枣 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬
葬早葬蚤灶泽贼 砸澡蚤扎燥糟贼燥灶蚤葬 泽燥造葬灶蚤
悦澡藻灶 杂蚤赠怎员 摇 悦澡藻灶 在澡蚤赠蚤员袁 圆鄢摇 在澡葬灶早 砸燥灶早泽澡藻灶早圆
渊员援 悦燥造造藻早藻 燥枣 孕造葬灶贼 孕则燥贼藻糟贼蚤燥灶袁 晕葬灶躁蚤灶早 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 晕葬灶躁蚤灶早 圆员园园怨缘袁 允蚤葬灶早泽怎 孕则燥增蚤灶糟藻袁 悦澡蚤灶葬曰 圆援 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻
燥枣 孕造葬灶贼 孕则燥贼藻糟贼蚤燥灶袁 允蚤葬灶早泽怎 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 晕葬灶躁蚤灶早 圆员园园员源袁 允蚤葬灶早泽怎 孕则燥增蚤灶糟藻袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 栽燥 燥遭贼葬蚤灶 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬 枣燥则 遭蚤燥糟燥灶贼则燥造 燥灶 则蚤糟藻 泽澡藻葬贼澡 遭造蚤早澡贼袁 员怨员源 遭葬糟贼藻则蚤葬造 泽贼则葬蚤灶泽 憎藻则藻
蚤泽燥造葬贼藻凿 枣则燥皂 贼澡藻 则蚤糟藻 泽燥蚤造袁 增藻早藻贼葬遭造藻 泽燥蚤造 葬灶凿 燥贼澡藻则 憎蚤造凿 泽燥蚤造 糟燥增藻则藻凿 遭赠 责造葬灶贼泽 蚤灶 晕葬灶躁蚤灶早袁 载怎扎澡燥怎袁 葬灶凿
悦澡葬灶早扎澡燥怎 蚤灶 允蚤葬灶早泽怎 孕则燥增蚤灶糟藻援 杂藻增藻灶贼赠 泽贼则葬蚤灶泽 憎澡蚤糟澡 澡葬凿 泽贼则燥灶早 蚤灶澡蚤遭蚤贼燥则赠 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 葬早葬蚤灶泽贼 砸澡蚤扎燥糟贼燥灶蚤葬
泽燥造葬灶蚤 憎藻则藻 泽糟则藻藻灶藻凿 怎泽蚤灶早 责造葬贼藻 糟燥灶枣则燥灶贼葬贼蚤燥灶 皂藻贼澡燥凿援 耘造藻增藻灶 泽贼则葬蚤灶泽 糟燥怎造凿 蚤灶澡蚤遭蚤贼藻 缘 噪蚤灶凿泽 燥枣 则蚤糟藻 责葬贼澡燥鄄
早藻灶泽 澡葬凿 遭则燥葬凿鄄泽责藻糟贼则怎皂 葬灶贼蚤皂蚤糟则燥遭蚤葬造 藻枣枣藻糟贼泽援 栽澡藻 枣蚤藻造凿 藻枣枣蚤糟葬糟赠 葬灶凿 蚤灶凿燥燥则 早则燥憎贼澡鄄责则燥皂燥贼蚤灶早 贼藻泽贼 燥枣 贼澡藻
员员 泽贼则葬蚤灶泽 憎藻则藻 糟葬则则蚤藻凿 燥怎贼袁 遭葬糟贼藻则蚤燥泽贼葬贼蚤糟 泽怎遭泽贼葬灶糟藻泽 葬灶凿 早则燥憎贼澡鄄责则燥皂燥贼蚤灶早 责则燥凿怎糟贼蚤燥灶泽 憎藻则藻 凿藻贼藻则皂蚤灶藻凿袁
葬灶凿 员员 泽贼则葬蚤灶泽 憎藻则藻 贼葬曾燥灶燥皂蚤糟葬造造赠 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 员员 泽贼则葬蚤灶泽 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬
澡葬凿 早则藻葬贼 藻枣枣藻糟贼泽 燥灶 糟燥灶贼则燥造 燥枣 则蚤糟藻 泽澡藻葬贼澡 遭造蚤早澡贼袁 憎蚤贼澡 贼澡藻 藻枣枣蚤糟葬糟赠 皂燥则藻 贼澡葬灶 源愿援 源员豫 葬灶凿 源猿援 园猿豫 蚤灶 责燥贼
葬灶凿 枣蚤藻造凿 贼则蚤葬造泽袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援 粤造造 燥枣 员员 泽贼则葬蚤灶泽 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬 糟燥怎造凿 责则燥凿怎糟藻 责则燥贼藻葬泽藻 葬灶凿 泽蚤凿鄄
藻则燥责澡燥则藻袁 遭怎贼 灶燥贼 责则燥凿怎糟藻 糟澡蚤贼蚤灶葬泽藻袁 葬灶凿 员园 泽贼则葬蚤灶泽 糟燥怎造凿 责则燥凿怎糟藻 糟藻造造怎造燥泽藻 藻曾糟藻责贼 载云鄄员苑源援 栽澡藻 员员
泽贼则葬蚤灶泽 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬 澡葬凿 责则燥皂燥贼蚤灶早 藻枣枣藻糟贼泽 燥灶 则蚤糟藻 泽贼藻皂 造藻灶早贼澡 葬灶凿 枣则藻泽澡 憎藻蚤早澡贼援 粤造造 燥枣 贼澡藻皂 糟燥怎造凿
责则燥凿怎糟藻 郧粤猿袁 怨 泽贼则葬蚤灶泽 糟燥怎造凿 责则燥凿怎糟藻 陨粤粤 藻曾糟藻责贼 在云鄄圆苑猿 葬灶凿 载云鄄员苑源袁 皂藻葬灶憎澡蚤造藻 陨粤粤 葬灶凿 郧粤猿 糟燥灶贼藻灶贼泽蚤灶 贼澡藻 枣藻则皂藻灶贼葬贼蚤燥灶 遭则燥贼澡 憎藻则藻 责燥泽蚤贼蚤增藻造赠 糟燥则则藻造葬贼藻凿 憎蚤贼澡 贼澡藻 早则燥憎贼澡 则葬贼藻 燥枣 泽贼藻皂 造藻灶早贼澡 葬灶凿 枣则藻泽澡 憎藻蚤早澡贼援
月葬泽藻 燥灶 皂燥则责澡燥造燥早蚤糟葬造 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽袁 责澡赠泽蚤糟燥糟澡藻皂蚤糟葬造 责则燥责藻则贼蚤藻泽袁 员远杂 则阅晕粤 葬灶凿 早赠则鄄月 泽藻择怎藻灶糟藻 葬灶葬造赠泽蚤泽
基金项目院 公益性行业渊农业冤科研专项渊圆园员员园猿园园圆鄄猿冤袁江苏省自主创新资金项目渊悦载渊员员冤圆园源缘冤
作者简介院 陈思宇袁女袁员怨愿缘年生袁硕士研究生袁研究方向为植物病害生物防治袁 耘鄄皂葬蚤造院 糟澡藻灶泽蚤赠怎灶燥援 员岳 员远猿援 糟燥皂
鄢通讯作者渊粤怎贼澡燥则 枣燥则 糟燥则则藻泽责燥灶凿藻灶糟藻冤袁 耘鄄皂葬蚤造院 糟澡扎赠岳 躁葬葬泽援 葬糟援 糟灶曰 收稿日期院 圆园员猿 原 园员 原 园苑
第 源园 卷摇 第 猿 期
圆园员猿 年摇 远 月
植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报
粤悦栽粤 孕匀再栽韵孕匀再蕴粤悦陨悦粤 杂陨晕陨悦粤
灾燥造援 源园摇 晕燥援 猿
允怎灶藻 摇 圆园员猿
摇 摇 葬责责则葬蚤泽葬造袁 杂云鄄员愿员 憎葬泽 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 葬泽 月葬糟蚤造造怎泽 泽怎遭贼蚤造蚤泽袁 载云鄄员苑源 憎葬泽 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 葬泽 孕泽藻怎凿燥皂燥灶葬泽 枣造怎燥则藻泽糟藻灶泽袁
燥贼澡藻则 怨 泽贼则葬蚤灶泽 憎藻则藻 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 葬泽 月援 葬皂赠造燥造蚤择怎藻枣葬糟蚤藻灶泽援 栽澡藻泽藻 遭葬糟贼藻则蚤葬造 遭蚤燥糟燥灶贼则燥造 葬早藻灶贼泽 糟燥怎造凿 遭藻 则藻糟燥早鄄
灶蚤扎藻凿 葬泽 则藻泽燥怎则糟藻泽 枣燥则 憎藻造造 遭蚤燥造燥早蚤糟葬造造赠 糟燥灶贼则燥造造蚤灶早 贼澡藻 则蚤糟藻 凿蚤泽藻葬泽藻泽援
运藻赠 憎燥则凿泽院 砸澡蚤扎燥糟贼燥灶蚤葬 泽燥造葬灶蚤曰 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤怎皂曰 泽糟则藻藻灶蚤灶早曰 糟燥灶贼则燥造 藻枣枣蚤糟葬糟赠曰 责则燥皂燥贼蚤灶早 藻枣枣藻糟贼
摇 摇 水稻纹枯病由立枯丝核菌 砸澡蚤扎燥糟贼燥灶蚤葬 泽燥造葬灶蚤 引
起袁广泛分布于世界各产稻区咱员暂 遥 随着矮秆品种和
杂交水稻的大面积推广及栽培措施的变革袁该病发
生面积逐年扩大袁已成为我国华南以及长江中下游
水稻产区的重要病害咱圆 原 猿暂 遥 近年来袁该病对化学药
剂的抗性逐年增强袁药剂用量不断提高袁环境污染问
题越来越突出咱源暂 遥 水稻纹枯病是一种土传病害袁其
病原菌对寄主的寄生专化性不强袁利用有益微生物
进行生物防治既经济有效又无副作用遥 因此袁寻找
防治水稻纹枯病的拮抗微生物具有重要意义咱缘暂 遥
已报道对水稻纹枯病菌有抑制作用的生防菌有
芽胞杆菌 月葬糟蚤造造怎泽 泽责责援 咱远暂 尧土壤放射杆菌 粤早则燥遭葬糟贼藻则蚤鄄
怎皂 则葬凿蚤燥遭葬糟贼藻则咱苑暂 尧假单胞杆菌 孕泽藻怎凿燥皂燥灶葬泽 泽责责援 咱愿暂和
木霉 栽则蚤糟澡燥凿藻则皂葬咱怨暂等遥 其中研究较为深入尧应用较
多的为芽胞杆菌咱远袁 员园暂 袁如张德涛等咱员员暂筛选出芽胞杆
菌 晕月员圆 可抑制水稻纹枯病菌生长袁并可在水稻叶
片上定殖袁对水稻离体叶片和苗期纹枯病表现出良
好的生防能力曰刘永锋等咱员圆暂筛选到的芽胞杆菌 月泽鄄
怨员远袁对水稻纹枯病具有良好的防效袁月泽鄄怨员远 与井冈
霉素复配而成的微生物农药野纹曲宁冶自 员怨怨员 年推
广以来袁对纹枯病的防效稳定在 苑园豫以上遥 此外袁
某些根际有益微生物既能抑制病原菌袁同时还具有
促进植物生长的作用咱员猿暂 遥 因此袁筛选具有抑菌和促
生作用的细菌更有利于植物病害的防治遥
本试验在不同地区采集土壤袁从中分离并筛选
对水稻纹枯病菌有抑制作用的细菌菌株袁测定了菌
株的田间防治效果和对水稻的促生作用袁并对菌株
分泌的抑菌物质和促生物质进行了初步研究袁以期
为水稻病害防治提供生物资源遥
员 材料与方法
员援 员 材料
从江苏农业科学院水稻试验田尧蔬菜试验田袁南
京中山植物园袁茅山林地袁常州水稻田尧油菜田尧梨
园袁宿迁水稻田袁以及徐州水稻田尧番茄田采集植株
根围土壤共 怨员 份遥
供试水稻纹枯病菌 砸援 泽燥造葬灶蚤尧稻瘟菌 孕赠则蚤糟怎造葬则蚤葬
早则蚤泽藻葬尧水稻白叶枯病菌 载葬灶贼澡燥皂燥灶葬泽 燥则赠扎葬藻 责增援
燥则赠扎葬藻尧水稻细菌性条斑菌 载葬灶贼澡燥皂燥灶葬泽 燥则赠扎葬藻 责增援
燥则赠扎蚤糟燥造葬和稻曲病菌 哉泽贼蚤造葬早蚤灶燥蚤凿藻葬 燥则赠扎葬藻 等菌株均
由江苏省农业科学院植物保护研究所生防组保存遥
供试水稻品种为金刚 猿园渊感病品种冤遥
真菌培养采用 孕阅粤 培养基遥 拮抗细菌筛选采
用 再孕郧粤培养基院酵母膏 缘 早尧胰蛋白胨 缘 早尧葡萄糖 缘
早尧琼脂 圆园 早袁定容至 员 园园园 皂蕴袁责匀 苑援 园遥 细菌培养用
晕粤培养基院酵母膏 员 早尧牛肉膏 猿 早尧蛋白胨 缘 早尧葡萄
糖 员园 早尧琼脂 圆园 早袁定容至 员 园园园 皂蕴袁责匀 苑援 园遥 几丁质
酶检测培养基院晕匀源匀圆孕韵源 员援 园 早尧酝早杂韵源窑苑匀圆韵 园援 圆早尧运悦造 园援 圆 早尧员豫胶体几丁质渊憎 辕 增冤尧琼脂 圆园 早袁定容
至 员 园园园 皂蕴袁责匀 苑援 园曰蛋白酶检测培养基院脱脂奶粉
源园 早尧琼脂 圆园 早袁定容至 源园园 皂蕴袁责匀 苑援 园曰纤维素酶检
测培养基院蛋白胨 员园 早尧酵母粉 员园 早尧梭甲基纤维素钠
员园 早尧晕葬悦造 缘 早尧运匀圆孕韵源 员 早尧琼脂 员愿 早袁定容至 员 园园园皂蕴袁责匀 苑援 园曰嗜铁素检测培养基院悦粤杂 远园援 缘 皂早尧员
皂皂燥造 辕 蕴 云藻悦造猿窑远匀圆韵 员园 皂蕴尧匀阅栽酝粤 苑圆援 怨 皂早尧琼脂圆园 早袁定容至 员 园园园 皂蕴袁责匀 苑援 园遥
液相色谱所用吲哚乙酸渊 蚤灶凿燥造藻鄄猿鄄葬糟藻贼蚤糟 葬糟蚤凿袁
陨粤粤冤与赤霉素渊 早蚤遭遭藻则藻造造蚤灶 猿袁郧粤猿 冤标样购自德国阅则援 耘澡则藻灶泽贼燥则枣藻则公司遥
员援 圆 方法
员援 圆援 员 拮抗细菌的分离与筛选
采用梯度稀释法咱员源 原 员缘暂 袁称取土样 员园 早袁放入 员园园
皂蕴无菌水中袁圆愿 益尧员缘园 则 辕 皂蚤灶 震荡培养 员 澡遥 以连
续稀释法制备 员园 原猿尧员园 原源土壤稀释液袁各吸取 员园园
皂蕴加入再孕郧粤平板并涂布均匀 遥 圆愿 益恒温培养
猿远 耀 源愿 澡袁挑取培养形状不同的单菌落保存遥
采用平板对峙法测定细菌分离物对水稻纹枯病
菌的抑制作用遥 将水稻纹枯病菌 怨 皂皂 菌饼接于
孕阅粤培养基平板中央袁将细菌分离物菌体编号袁并
呈野十冶字涂点于菌饼周围 源 点遥 每处理重复 猿 次遥
圆 凿后观察遥 将细菌分离物对水稻纹枯病的抑制活
性分为较强渊抑菌圈直径 跃圆园 皂皂冤尧中等渊员园援 员 耀 圆园
皂皂冤和较弱渊园援 员 耀 员园 皂皂冤 猿 个等级袁选取抑菌活性
较强的细菌分离物以划线法纯化袁保存备用遥
员援 圆援 圆 拮抗细菌的抑菌活性
选取对水稻纹枯病菌拮抗能力较强的菌株袁分
别测定其对水稻纹枯病菌尧稻瘟菌尧稻曲病菌尧水稻
圆员圆 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源园 卷
细菌性条斑病菌和水稻白叶枯病菌的抑菌活性咱员源暂 遥
摇 摇 对水稻纹枯病菌抑菌活性院将所筛菌株接入
再孕郧培养液震荡培养 圆源 澡遥 将水稻纹枯病菌菌饼接
于 孕阅粤平板袁周围 源 点呈野十冶字放置直径 远 皂皂 灭
菌滤纸片袁滴加细菌菌液 缘 滋蕴袁每处理重复 猿 次遥 以
在滤纸片上滴加 再孕郧 培养液的平板为空白对照遥
待对照长满平板时测量抑菌圈直径并计算抑制率遥
对稻瘟菌抑菌活性院于 孕阅粤 培养基中心接入 怨
皂皂稻瘟病菌菌饼袁圆愿 益恒温培养 猿 凿 后袁在菌落周
围 猿 点放置直径 远 皂皂 灭菌滤纸片袁滴加 缘 滋蕴 细菌
发酵液袁每处理重复 猿 次遥 以在滤纸片上滴加 再孕郧
培养基的平板为空白对照遥 待对照长满平板时测量
抑菌圈直径并计算抑制率遥
对稻曲病菌抑菌活性院在 孕杂培养液中接入新鲜
稻曲病菌菌饼袁于 圆愿 益尧员缘园 则 辕 皂蚤灶震荡培养 缘 耀 苑 凿袁
待稻曲病菌孢子达到 员 伊 员园远 悦云哉 辕 皂蕴 时吸取 圆园园
滋蕴孢子液加入 再孕阅 平板并涂匀遥 猿 点放置灭菌滤
纸片袁滴入细菌菌液 缘 滋蕴袁每处理重复 猿 次遥 以在滤
纸片上滴加 再孕郧 培养液的平板为对照遥 待对照长
满平板时测量抑菌圈直径并计算抑制率遥
对水稻白叶枯病菌和细菌性条斑病菌抑菌活
性院分别将白叶枯病菌尧细菌性条斑病菌接入 晕粤培
养液中袁员缘园 则 辕 皂蚤灶尧圆愿 益摇床内培养 猿远 澡袁 取 圆园园 滋蕴
病原菌菌液于 晕粤 培养基平板并涂布均匀袁猿 点放
入 远 皂皂无菌滤纸片袁 吸取 缘 滋蕴拮抗细菌发酵液于
滤纸片上袁圆愿 益恒温箱内培养遥 设无拮抗细菌处理
为对照袁 每处理重复 猿 次遥 待对照病原菌长满平板
时袁测量抑菌圈直径并计算抑制率遥
对水稻纹枯病菌尧稻瘟菌的抑制率渊豫 冤 越处理
抑菌圈直径 辕 渊对照病原菌生长直径 辕 圆冤 伊 员园园曰对稻
曲病菌尧白叶枯病菌和细菌性条斑病菌的抑制率
渊豫 冤 越处理抑菌圈直径 辕 渊培养皿直径 辕 圆冤 伊 员园园遥
员援 圆援 猿 对水稻纹枯病的防效
圆园员员 年盆栽试验院在直径 猿园 糟皂 的塑料桶中装
入泥土并栽种水稻金刚 猿园遥 每桶栽种 猿 穴袁每穴 圆
株遥 将新活化的拮抗细菌接种于 缘园 皂蕴 晕粤 培养液
中袁圆愿 益尧员缘园 则 辕 皂蚤灶震荡培养 苑圆 澡袁菌含量为 员 伊 员园愿
悦云哉 辕 皂蕴遥 在移栽后 猿园 凿袁即水稻分蘖末期以短火
柴梗嵌入法接种水稻纹枯病菌遥 接种之后即喷洒拮
抗菌菌液袁员 周后再次喷洒遥 每处理重复 猿 次袁以接
种水稻纹枯病菌并喷洒 晕粤液体培养基的水稻植株
为空白对照遥 初次喷施 猿园 凿 后测量病斑长度与水
稻株高袁计算防治效果遥 防治效果渊豫 冤 越 渊处理组
病斑长度 辕 水稻株高冤 辕 渊对照病斑长度 辕 水稻株
高冤 伊 员园园遥
圆园员圆 年田间试验院将水泥池划分为 圆援 缘 皂 伊 员 皂
的小区袁栽种水稻金刚 猿园遥 移栽后 猿园 凿接种水稻纹
枯病菌并喷洒生防菌菌液袁每处理重复 猿 个小区袁方
法同盆栽试验遥
员援 圆援 源 拮抗细菌代谢分泌物测定
几丁质酶院在几丁质酶检测平板上放置 远 皂皂
滤纸片袁滴加 员园 滋蕴菌液袁每处理重复 猿 次遥 圆愿 益恒
温培养 猿 耀 苑 凿后观察袁产生几丁质酶的细菌可在培
养基上产生透明圈袁测量圈大小并计算平均值遥
蛋白酶院在蛋白酶检测平板上放置 远 皂皂 滤纸
片袁滴加 缘 滋蕴菌液袁每处理重复 猿 次遥 圆愿 益恒温培
养 圆 凿后观察袁有透明圈产生则表明该菌可产蛋白
水解酶袁测量圈大小并计算平均值遥
纤维素酶院在纤维素酶检测平板上放置 远 皂皂
滤纸片袁滴加 员园 滋蕴菌液袁每处理重复 猿 次遥 圆愿 益恒
温培养 猿 耀 源 凿后袁用 园援 怨豫 晕葬悦造溶液浸泡平板袁每 圆
小时除去 晕葬悦造溶液 员 次袁冲洗并倒入新的 晕葬悦造 溶
液遥 远 澡后观察袁菌落周围有黄色晕圈则此菌可产生
纤维素酶袁测量圈大小并计算平均值遥
嗜铁素院在嗜铁素测定平板上放置 远 皂皂 滤纸
片袁滴加 圆园 滋蕴菌液袁每处理重复 猿 次遥 圆愿 益恒温培
养 员园 凿后观察遥 产生嗜铁素的细菌可在培养基上
出现橘黄色晕圈袁测量圈大小并计算平均值遥
员援 圆援 缘 拮抗细菌的促生作用与促生物质测定
促生作用院将菌株活化后接种到 缘园 皂蕴 晕粤培养
基中袁震荡培养 源愿 澡袁菌含量为 员 伊 员园愿 悦云哉 辕 皂蕴遥 挑
选籽粒饱满的金刚 猿园 种子 员园园 粒袁分别以未稀释菌
液和无菌水稀释 员园园 倍菌液 员园 皂蕴浸泡遥 圆源 澡 后移
除菌液袁无菌水洗净袁置于室温催芽 源愿 澡遥 计算发芽
率并挑选出芽的水稻种子袁栽种到装灭菌土的营养
钵中遥 每钵种 员园 粒袁每处理重复 猿 次遥 以 晕粤 培养
基浸泡的金刚 猿园 种子为空白对照遥 员 周后以稀释
员园 倍的菌液进行灌溉袁猿园 凿 后将稻苗小心拔出袁洗
净泥土袁测量其株高和鲜重遥
促生物质院高效液相色谱渊匀孕蕴悦冤条件咱员缘 原 员苑暂 院
流动相为 悦匀猿悦晕 原 匀圆韵 溶液渊体积比为 猿园 颐 员园园冤袁
用 匀猿孕韵源 调 责匀至 猿援 园遥 检测波长 圆愿园 灶皂袁进样量 缘滋蕴袁检测温度 源园 益袁流速 园援 愿 皂蕴 辕 皂蚤灶遥 将已活化的
拮抗细菌接入晕粤液体培养基中震荡培养过夜袁吸
取 源园园 滋蕴接入 圆园皂蕴 晕粤培养液袁圆愿益尧员缘园 则 辕 皂蚤灶震
荡培养 源愿 澡以上遥 愿 园园园 则 辕 皂蚤灶离心除去菌体遥 上清
猿员圆猿 期 陈思宇等院水稻纹枯病菌拮抗细菌的筛选及鉴定
液用等体积乙酸乙酯萃取猿次遥收集乙酸乙酯袁于
猿缘 益旋转蒸干遥 用 圆 皂蕴流动相溶解袁超声震荡使物
质充分融入流动相袁园援 圆圆 滋皂 滤膜过滤袁作为 匀孕蕴悦
样品测定 郧粤猿 与 陨粤粤含量遥 重复 猿 次袁取各组分面
积平均值遥 精确称量尧配制 员园园 皂早 辕 蕴的 陨粤粤标准工
作溶液袁依次稀释至 苑缘尧缘园尧圆缘 和 员园 皂早 辕 蕴袁测其吸收
峰面积袁制作标准曲线并得出回归方程遥 将 圆园园 皂早 辕
蕴的 郧粤猿 标样溶液依次稀释至 员缘园尧员园园尧缘园 和 圆园皂早 辕 蕴袁制作标准曲线得出回归方程遥 用回归方程计
算样品 陨粤粤与 郧粤猿 含量渊回归方程计算值 辕 员园冤遥
员援 圆援 远 拮抗细菌的鉴定
形态学及生理生化特性院形态学鉴定用 猿豫氢
氧化钾测定细菌革兰氏染色反应曰孔雀绿藏红法染
色袁 在光学显微镜下观察有无芽胞曰晕粤固体和液体
培养基 圆愿 益培养 圆源 澡袁 观察菌落形态咱员愿暂 遥 生理生
化特性鉴定参照叶常见细菌系统鉴定手册曳 咱员怨暂进行遥
员远杂 则阅晕粤与 早赠则鄄月序列分析院基因组 阅晕粤提取
采用常规方法遥 用 员豫琼脂糖凝胶电泳检测 孕悦砸扩
增效果袁用提取的基因组 阅晕粤为模板袁用细菌通用
引物扩增 员远杂 则阅晕粤序列遥 引物序列为院月杂云 渊圆苑枣冤院
缘忆鄄粤郧粤郧栽栽栽郧粤栽悦悦栽郧郧悦栽悦粤郧鄄猿 和 月杂砸 渊员缘源员则冤院
缘忆鄄粤粤郧郧粤郧郧栽郧粤栽悦悦粤郧悦悦郧悦粤鄄猿忆遥 早赠则鄄月 基因片
段扩增引物 早赠则月鄄云院郧粤粤郧栽悦粤栽悦粤栽郧粤悦悦郧栽栽悦栽郧鄄
悦粤再郧悦晕郧郧晕郧郧晕粤粤砸栽栽再郧粤和 早赠则月鄄砸院粤郧悦粤郧郧鄄
郧栽粤悦郧郧粤栽郧栽郧悦郧粤郧悦悦砸栽悦粤粤悦砸栽悦晕郧悦砸栽悦晕郧栽鄄
悦粤栽咱圆园暂 遥 孕悦砸扩增产物由上海生工生物工程技术
服务有限公司进行序列测定遥 并将该菌的 员远杂 则阅鄄
晕粤序列与 早赠则鄄月基因序列在 晕悦月陨核酸数据库采用
月蕴粤杂栽程序进行同源性搜索比对袁 通过软件 悦造怎泽贼鄄
葬造载 员援 愿员 和 酝耘郧粤 源援 员 构建系统进化树遥
员援 猿 数据处理
数据采用 阅孕杂 苑援 园缘 软件进行方差分析袁阅怎灶糟葬灶
氏新复极差法检验差异显著性袁并利用 杂孕杂杂 员苑援 园
软件对菌液中促生物质含量和水稻株高尧鲜重增长
率进行多元线性回归分析遥
圆 结果与分析
圆援 员 拮抗细菌的分离与筛选
从 怨员 份土壤中分离细菌分离物共 员怨员源 株遥 以
水稻纹枯病菌作为病原指示菌袁从中筛选有拮抗作
用的细菌分离物 源苑圆 株袁占总分离物的 圆源援 远远豫 遥
其中拮抗作用较强的细菌分离物有苑园株袁占细菌
分离物总数的猿 援 远远豫 曰拮抗能力中等的菌株员圆愿
株袁占远 援 远怨豫 曰 拮抗能力较弱的菌株圆苑源株袁 占
员源援 猿圆豫 遥 从徐州尧常州尧宿迁水稻田的土样中分离
出对水稻纹枯病菌有拮抗能力的细菌分离物较多袁
分别占细菌分离物的 猿圆援 圆园豫 尧猿员援 怨员豫和 猿园援 怨圆豫 曰
而采自茅山尧江苏省农业科学院蔬菜田和常州梨园
的土壤中抑制水稻纹枯病菌的细菌分离物较少袁只
占细菌分离物的 员愿援 怨猿豫 尧员愿援 园园豫和 员远援 猿园豫 遥 说
明在寄主植物的根围土壤中拮抗细菌数量较多遥
圆援 圆 拮抗细菌的抑菌活性
在所筛选的菌株中有 员员 株对 缘 种水稻病害均
有抑制作用袁具有较好的广谱抗菌性遥 员员 株拮抗细
菌在培养基上对水稻纹枯病菌抑制作用较强袁其中
菌株 杂云鄄员愿员 抑制率较高袁为 愿怨援 远猿豫 曰菌株 杂再鄄员源猿
抑制率较低袁为 远愿援 员缘豫遥 菌株 载云鄄员苑源广谱抑菌作用
较强袁对 缘种病原菌的抑制作用均大于 缘园豫渊表 员冤遥
圆援 猿 盆栽和田间小区试验
所筛选的 员员 株拮抗菌对水稻纹枯病均有抑制
作用遥 其中防效较高的为 酝杂鄄源愿袁盆栽和田间防效
分别达到 远员援 愿苑豫和 缘怨援 园源豫 曰较低的为 载云鄄员苑源袁分
别为 源愿援 源员豫和 源猿援 园猿豫 曰除 载云鄄缘员澡 和 载云鄄员苑源 外袁
其余拮抗细菌的盆栽和田间小区防效均大于 缘园豫 遥
次年田间试验与盆栽试验整体趋势一致袁个别菌株
防治能力略有不同袁如 允酝鄄圆圆缘 在盆栽试验中防效在
员员个菌株中排第 圆位袁而在田间试验中最强渊表 圆冤遥
圆援 源 拮抗细菌的代谢分泌物
员员 株拮抗细菌均无几丁质酶活性袁均可产生蛋
白酶和嗜铁素袁除 载云鄄员苑源 外均可分泌纤维素酶遥 其
中 载云鄄缘员 产生的纤维素酶和蛋白酶较多袁水解圈直
径达 猿园援 苑猿 皂皂和 猿员援 怨苑 皂皂袁而产生嗜铁素较少袁水
解圈直径仅为 远援 远园 皂皂曰菌株 载在鄄远猿 产生的纤维素
酶尧蛋白酶与嗜铁素均较多袁水解圈直径分别为
圆怨援 愿猿尧猿员援 猿猿 和 员园援 苑园 皂皂 渊表 猿袁图 员冤遥
圆援 缘 拮抗细菌的促生作用和促生物质测定
用菌株发酵液处理过的水稻苗鲜重和平均株高
均有所增加袁鲜重增加 员愿援 苑愿豫以上袁平均株高增加
员园援 怨园豫以上遥 其中促生作用较明显的菌株为 载云鄄
缘员 和 载在鄄苑袁其发酵液使水稻平均株高分别增长了
员怨援 远猿豫和 圆园援 苑愿豫 袁使鲜重分别增长了 猿缘援 员源豫和
猿圆援 缘苑豫 渊表 源冤遥
以标准溶液质量浓度为横坐标袁以峰面积为纵
坐标制作工作曲线袁得到 陨粤粤浓度回归方程再 越
猿苑援 苑猿愿载 原源源援 愿愿员袁砸圆 越 园援 怨怨怨员曰郧粤猿 浓度回归方程
为 再 越远援 园苑怨载 垣猿援 怨缘苑袁砸圆 越 园援 怨怨怨苑遥 说明 陨粤粤浓度
源员圆 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源园 卷
表 员 拮抗细菌对 缘 种水稻病害病原菌的抑制率
栽葬遭造藻 员 粤灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 贼澡藻 遭葬糟贼藻则蚤葬造 泽贼则葬蚤灶泽 葬早葬蚤灶泽贼 枣蚤增藻 则蚤糟藻 责澡赠贼燥责葬贼澡燥早藻灶泽 豫
菌株
杂贼则葬蚤灶
白叶枯病菌
载援 燥则赠扎葬藻 责增援 燥则赠扎蚤糟燥造葬
稻曲病菌
哉援 燥则赠扎葬藻
稻瘟菌
孕援 早则蚤泽藻葬
细菌性条斑病菌
载援 燥则赠扎葬藻 责增援 燥则赠扎蚤糟燥造葬
纹枯病菌
砸援 泽燥造葬灶蚤
杂云鄄员愿员 源员援 源愿 依 远援 苑员 凿藻 猿缘援 缘远 依 源援 源源 早 源怨援 远员 依 猿援 缘缘 凿藻 远缘援 员怨 依 愿援 怨愿 凿 愿怨援 远猿 依 苑援 愿园 葬
在杂鄄圆苑猿 源猿援 苑园 依 缘援 愿缘 凿 源源援 源源 依 猿援 愿缘 凿 源怨援 远员 依 员援 猿源 凿藻 苑远援 猿园 依 苑援 愿园 葬 愿愿援 员源 依 员园援 园圆 葬遭
允蕴鄄圆员苑 缘远援 猿园 依 怨援 远愿 遭糟 源圆援 怨远 依 缘援 缘怨 凿藻 缘员援 员远 依 员援 猿源 糟凿 苑源援 愿员 依 猿援 猿怨 葬遭 愿圆援 怨远 依 怨援 圆缘 遭糟
载云鄄员苑源 缘园援 猿苑 依 猿援 缘缘 糟 远圆援 圆圆 依 源援 源源 葬 苑苑援 缘圆 依 员源援 怨缘 葬 苑苑援 苑愿 依 缘援 缘怨 葬 愿圆援 愿远 依 缘援 缘怨 遭糟
酝杂鄄源愿 远圆援 圆圆 依 圆援 猿猿 葬遭 源员援 源愿 依 源援 远猿 藻 远远援 远苑 依 员员援 怨猿 遭 源园援 苑源 依 缘援 缘怨 早 愿圆援 圆圆 依 员缘援 缘远 遭糟
允酝鄄圆圆缘 猿怨援 圆远 依 源援 愿源 藻 猿苑援 苑愿 依 远援 远苑 枣 源缘援 苑源 依 员援 猿源 枣 猿圆援 缘怨 依 猿援 猿怨 澡 愿园援 苑源 依 员猿援 园圆 糟
载云鄄缘员 缘源援 愿员 依 圆援 远怨 遭糟 源缘援 员怨 依 苑援 愿园 糟凿 缘猿援 源怨 依 远援 员缘 糟 苑员援 员员 依 源援 源源 糟 愿园援 苑猿 依 苑援 愿园 糟
杂再鄄员猿远 缘园援 猿苑 依 猿援 缘缘 糟 源愿援 愿怨 依 猿援 愿缘 遭糟 源远援 缘员 依 圆援 猿猿 枣 源苑援 源员 依 愿援 源员 藻枣 苑怨援 圆远 依 源援 远猿 糟凿
载在鄄苑 缘员援 愿缘 依 缘援 愿缘 糟 源怨援 远猿 依 圆援 缘苑 遭糟 源愿援 愿源 依 圆援 猿猿 藻 猿圆援 缘怨 依 远援 苑怨 澡 苑怨援 圆园 依 愿援 源员 糟凿
载在鄄远猿 源远援 远苑 依 圆援 猿猿 凿 缘员援 愿缘 依 圆援 缘苑 遭 源怨援 远员 依 员援 猿源 凿藻 猿怨援 圆远 依 员愿援 员园 早 苑苑援 园源 依 员园援 缘园 凿
杂再鄄员源猿 远远援 远苑 依 员怨援 园源 葬 缘苑援 苑愿 依 圆援 圆圆 葬遭 缘园援 猿怨 依 圆援 远怨 凿 源缘援 员怨 依 苑援 员源 藻枣 远愿援 员缘 依 圆援 缘苑 藻
摇 摇 注院表中数据为平均数 依标准差遥 同列数据后不同字母表示经 阅怎灶糟葬灶氏新复极差法检验在 孕 约园援 园缘水平差异显著遥 表 圆 耀 猿同遥
晕燥贼藻院 栽澡藻 凿葬贼葬 葬则藻 皂藻葬灶 依 杂阅援 栽澡藻 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 造藻贼贼藻则泽 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 糟燥造怎皂灶 泽澡燥憎 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 孕 约 园援 园缘 造藻增藻造 遭赠 阅怎灶糟葬灶爷泽 灶藻憎 皂怎造贼蚤责造藻
则葬灶早藻 贼藻泽贼郾 栽澡藻 泽葬皂藻 枣燥则 栽葬遭造藻 圆 原 猿郾
表 圆 拮抗细菌对水稻纹枯病的盆栽和田间小区防效
栽葬遭造藻 圆 悦燥灶贼则燥造 藻枣枣藻糟贼 燥枣 员员 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 泽贼则葬蚤灶泽 葬早葬蚤灶泽贼 则蚤糟藻 泽澡藻葬贼澡 遭造蚤早澡贼 蚤灶 责燥贼 葬灶凿 枣蚤藻造凿 贼则蚤葬造泽
菌株摇
杂贼则葬蚤灶摇
盆栽防效渊豫冤
悦燥灶贼则燥造 藻枣枣蚤糟葬糟赠
燥枣 责燥贼 贼则蚤葬造
田间防效渊豫 冤
悦燥灶贼则燥造 藻枣枣蚤糟葬糟赠
燥枣 枣蚤藻造凿 贼则蚤葬造
菌株摇
杂贼则葬蚤灶摇
盆栽防效渊豫 冤
悦燥灶贼则燥造 藻枣枣蚤糟葬糟赠
燥枣 责燥贼 贼则蚤葬造
田间防效渊豫 冤
悦燥灶贼则燥造 藻枣枣蚤糟葬糟赠
燥枣 枣蚤藻造凿 贼则蚤葬造
酝杂鄄源愿 远员援 愿苑 依 员援 圆员 葬 缘怨援 园源 依 源援 猿缘 葬遭 允蕴鄄圆员苑 缘猿援 员缘 依 缘援 圆园 糟凿藻 缘员援 猿园 依 缘援 园圆 凿藻
允酝鄄圆圆缘 远员援 圆圆 依 圆援 源愿 葬遭 远员援 圆远 依 猿援 远苑 葬 在杂鄄圆苑猿 缘圆援 猿员 依 源援 远缘 凿藻 缘园援 员员 依 圆援 园源 藻
杂再鄄员猿远 远园援 苑园 依 员援 缘员 遭 缘愿援 苑怨 依 缘援 员源 葬遭糟 杂云鄄员愿员 缘园援 猿苑 依 缘援 远圆 藻枣 缘园援 猿园 依 猿援 愿猿 藻
杂再鄄员源猿 缘远援 远源 依 员援 愿苑 糟 缘远援 怨猿 依 猿援 员源 葬遭糟凿 载云鄄缘员 源怨援 员缘 依 缘援 园猿 枣 源愿援 园猿 依 员援 怨苑 藻枣
载在鄄苑 缘源援 愿怨 依 员援 员源 糟凿 缘圆援 猿缘 依 源援 圆远 糟凿藻 载云鄄员苑源 源愿援 源员 依 圆援 源苑 枣 源猿援 园猿 依 源援 远圆 枣
载在鄄远猿 缘源援 源源 依 源援 远愿 糟凿藻 缘源援 园员 依 猿援 苑苑 遭糟凿藻
表 猿 拮抗细菌产酶和产嗜铁素活性
栽葬遭造藻 猿 粤糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬造 责则燥凿怎糟藻 藻灶扎赠皂藻 葬灶凿 糟葬责葬糟蚤贼赠 泽蚤凿藻则燥责澡燥则藻
菌株
杂贼则葬蚤灶
水解圈 匀赠凿则燥造赠贼蚤糟 扎燥灶藻渊皂皂冤
几丁质酶
悦澡蚤贼蚤灶葬泽藻
纤维素酶
悦藻造造怎造燥泽藻
蛋白酶
孕则燥贼藻葬泽藻
嗜铁素
杂蚤凿藻则燥责澡燥则藻
菌株
杂贼则葬蚤灶
水解圈 匀赠凿则燥造赠贼蚤糟 扎燥灶藻渊皂皂冤
几丁质酶
悦澡蚤贼蚤灶葬泽藻
纤维素酶
悦藻造造怎造燥泽藻
蛋白酶
孕则燥贼藻葬泽藻
嗜铁素
杂蚤凿藻则燥责澡燥则藻
酝杂鄄源愿 要 员怨援 源猿 依 园援 猿缘 枣 圆圆援 园园 依 园援 圆远 凿 远援 源猿 依 园援 圆员 藻 允蕴鄄圆员苑 要 圆源援 员园 依 园援 源园 凿 圆怨援 园苑 依 员援 园缘 遭 远援 苑园 依 园援 圆员 藻
允酝鄄圆圆缘 要 圆源援 缘苑 依 园援 圆缘 凿 圆圆援 员园 依 园援 源远 凿 远援 愿园 依 园援 园远 藻 在杂鄄圆苑猿 要 猿园援 源园 依 园援 圆远 葬 圆愿援 愿猿 依 园援 园远 遭 愿援 猿苑 依 园援 猿缘 糟
杂再鄄员猿远 要 员怨援 猿猿 依 园援 远缘 枣 圆缘援 缘园 依 园援 源远 糟 怨援 员猿 依 园援 员缘 遭 杂云鄄员愿员 要 圆苑援 猿猿 依 园援 源园 糟 圆缘援 园园 依 园援 圆猿 糟 员园援 源园 依 园援 圆远 葬
杂再鄄员源猿 要 员猿援 源园 依 园援 愿缘 早 圆愿援 怨苑 依 园援 缘员 遭 苑援 远园 依 园援 园远 凿 载云鄄缘员 要 猿园援 苑猿 依 园援 员缘 葬 猿员援 怨苑 依 园援 怨缘 葬 远援 远园 依 园援 园远 藻
载在鄄苑 要 圆园援 愿猿 依 园援 远苑 藻 圆怨援 猿猿 依 园援 圆员 葬遭 远援 源园 依 园援 员圆 藻 载云鄄员苑源 要 要 圆缘援 员园 依 园援 员缘 糟 远援 愿猿 依 园援 圆缘 藻
载在鄄远猿 要 圆怨援 愿猿 依 员援 园源 遭 猿员援 猿猿 依 园援 猿源 葬 员园援 苑园 依 园援 员缘 葬
在 园 耀 员园园 皂早 辕 蕴尧郧粤猿 浓度在 园 耀 圆园园 皂早 辕 蕴范围内与
峰面积呈良好的线性关系遥
匀孕蕴悦分析结果显示袁除菌株 在杂鄄圆苑猿 和 载在鄄员苑源
不产生 陨粤粤外袁其余各菌株均可在 晕粤中产生 陨粤粤曰
员员 株生防菌均可在 晕粤 中产生 郧粤猿遥 依据 陨粤粤 与
郧粤猿 的峰面积袁通过回归方程计算出拮抗菌分泌产
生 陨粤粤 与 郧粤猿 的含量袁发现 载云鄄缘员 与 杂云鄄员愿员 产生陨粤粤的量较多袁分别达到 猿援 园源 皂早 辕 蕴 和 圆援 缘苑 皂早 辕 蕴曰
载在鄄苑 和 在杂鄄圆苑猿 产生 郧粤猿 较多袁分别为 怨援 源源皂早 辕 蕴和怨援 苑愿 皂早 辕 蕴渊表 源尧图 圆冤遥
缘员圆猿 期 陈思宇等院水稻纹枯病菌拮抗细菌的筛选及鉴定
图 员 拮抗细菌代谢分泌物水解圈
云蚤早援 员 粤灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬 皂藻贼葬遭燥造蚤糟 泽藻糟则藻贼蚤燥灶泽 责则燥凿怎糟藻 澡赠凿则燥造赠泽蚤泽 糟蚤则糟造藻泽
摇 摇 注院葬院纤维素酶曰遭院蛋白酶曰糟院嗜铁素遥 晕燥贼藻院 葬院 悦藻造造怎造燥泽藻曰 遭院 责则燥贼藻葬泽藻泽曰 糟院 泽蚤凿藻则燥责澡燥则藻泽援
表 源 拮抗细菌对水稻的促生作用
栽葬遭造藻 源 栽澡藻 责则燥皂燥贼蚤燥灶 藻枣枣藻糟贼 燥枣 贼澡藻 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬 燥灶 则蚤糟藻
菌株摇
杂贼则葬蚤灶摇
植株鲜重渊早冤
云则藻泽澡
憎藻蚤早澡贼
鲜重增长率渊豫 冤
云则藻泽澡 憎藻蚤早澡贼
早则燥憎贼澡 则葬贼藻
再员
平均株高渊皂皂冤
粤增藻则葬早藻 责造葬灶贼
澡藻蚤早澡贼
株高增长率渊豫冤
孕造葬灶贼 澡藻蚤早澡贼
早则燥憎贼澡 则葬贼藻
再圆
陨粤粤含量渊皂早 辕 蕴冤
陨粤粤 糟燥灶贼藻灶贼
载员
郧粤猿 含量渊皂早 辕 蕴冤郧粤猿 糟燥灶贼藻灶贼
载圆
载云鄄缘员 猿援 猿猿 依 园援 园远 葬 猿缘援 员源 圆缘援 怨园 依 圆援 圆园 葬遭 员怨援 远猿 猿援 园源 依 园援 园员 葬 苑援 圆怨 依 园援 园员 糟凿
载在鄄苑 猿援 圆苑 依 园援 员猿 葬 猿圆援 缘苑 圆远援 员缘 依 员援 猿愿 葬 圆园援 苑愿 园援 怨苑 依 园援 园园 糟凿 怨援 源源 依 园援 园员 葬
杂云鄄员愿员 猿援 员苑 依 园援 园远 遭 圆愿援 远缘 圆缘援 猿员 依 员援 远远 遭糟 员远援 怨员 圆援 缘苑 依 园援 园园 遭 远援 缘缘 依 园援 园园 藻
酝杂鄄源愿 猿援 员猿 依 园援 园源 遭 圆苑援 园猿 圆源援 怨苑 依 圆援 猿苑 遭糟凿 员缘援 猿猿 园援 愿怨 依 园援 园园 凿 愿援 猿圆 依 园援 园员 遭
允酝鄄圆圆缘 猿援 园苑 依 园援 园苑 遭糟 圆源援 缘怨 圆缘援 园远 依 圆援 猿员 遭糟凿 员缘援 苑缘 圆援 园苑 依 园援 园园 遭 苑援 缘源 依 园援 园园 糟
杂再鄄员源猿 猿援 园源 依 园援 员园 糟 圆猿援 圆源 圆源援 远远 依 员援 怨怨 糟凿 员猿援 怨园 员援 园猿 依 园援 园园 糟 苑援 缘愿 依 园援 园园 糟
载在鄄远猿 猿援 园猿 依 园援 园源 糟 圆圆援 怨苑 圆源援 苑愿 依 员援 远圆 糟凿 员源援 源远 园援 缘园 依 园援 园园 藻 苑援 愿愿 依 园援 园员 糟
杂再鄄员猿远 猿援 园猿 依 园援 园缘 糟 圆圆援 怨苑 圆源援 源缘 依 圆援 员愿 糟凿 员圆援 怨猿 园援 愿缘 依 园援 园园 凿 苑援 远缘 依 园援 园园 糟
在杂鄄圆苑猿 猿援 园园 依 园援 园苑 糟凿 圆员援 远圆 圆源援 圆愿 依 圆援 猿猿 凿 员圆援 员缘 园援 园园 依 园援 园园 枣 怨援 苑愿 依 园援 园员 葬
允蕴鄄圆员苑 圆援 怨苑 依 园援 园缘 糟 圆园援 圆苑 圆源援 员猿 依 员援 缘苑 凿藻 员员援 源缘 园援 苑愿 依 园援 园园 凿 苑援 园猿 依 园援 园园 凿
载云鄄员苑源 圆援 怨猿 依 园援 园猿 糟 员愿援 苑愿 圆源援 园员 依 猿援 园源 藻 员园援 怨园 园援 园园 依 园援 园园 枣 远援 愿员 依 园援 园园 藻
悦运 圆援 源苑 依 园援 园苑 凿 要 圆员援 远缘 依 员援 怨猿 枣 摇 要 园援 园园 依 园援 园园 枣 园援 园园 依 园援 园园 枣
摇 摇 注院 表中数据为平均数 依标准差遥 同列数据后不同字母表示经 阅怎灶糟葬灶氏新复极差法检验在 孕 约 园援 园缘 水平差异显著遥 晕燥贼藻院 栽澡藻
凿葬贼葬 葬则藻 皂藻葬灶 依 杂阅援 栽澡藻 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 造藻贼贼藻则泽 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 糟燥造怎皂灶 泽澡燥憎 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 孕 约园援 园缘 造藻增藻造 遭赠 阅怎灶糟葬灶爷泽 灶藻憎 皂怎造贼蚤责造藻 则葬灶早藻 贼藻泽贼援
摇 摇 以水稻鲜重增长率渊再员 冤和株高增长率渊再圆 冤为
因变量袁以 陨粤粤 含量渊载员 冤和 郧粤猿 含量渊载圆 冤为自变
量袁得到 陨粤粤尧郧粤猿 含量与鲜重增长率的回归方程为
再员 越 源 援 怨猿猿载员 垣 圆 援 苑圆缘载圆 原 员 援 苑园愿渊砸圆 越 园 援 苑圆圆袁云 越员猿援 怨怨园袁孕 越园援 园园圆冤袁陨粤粤尧郧粤猿 含量与平均株高增长
率的回归方程为 再圆 越 圆援 怨远员载员 垣 员援 愿员苑 载圆 原 圆援 远苑怨
渊砸圆 越 园援 远远远袁云 越 员园援 怨苑愿袁孕 越 园援 园园缘冤遥 两个方程的
砸圆 跃 园援 缘袁云 跃 云园援 园缘 越 源援 源远袁孕 约 园援 园员袁说明方程与数
据拟合度较好袁相关性极显著遥 两个方程中袁载员 和
载圆 系数均为正值袁且 载员 的系数大于 载圆 的系数袁说
明菌液中 陨粤粤 和 郧粤猿 对水稻株高和鲜重均有促生
作用袁且 陨粤粤的促生作用大于 郧粤猿遥
圆援 远 拮抗细菌的鉴定
圆援 远援 员 形态学与生理生化特性
载云鄄员苑源 菌落为圆形尧边缘整齐袁表面湿润袁呈灰
白色尧半透明袁不产生芽胞袁为革兰氏阴性菌袁柠檬酸
利用尧甲基红试验尧接触酶反应为阳性袁可水解酪素袁
能使明胶液化和还原硝酸袁需氧生长袁具有耐盐性和
耐酸性袁可在 责匀 缘援 苑 和 苑豫的 晕葬悦造 的环境中生长袁
不能水解淀粉袁灾孕 试验为阴性袁与叶常用细菌学鉴
定手册曳中假单胞菌 孕泽藻怎凿燥皂燥灶葬泽 的特性一致遥 其
余拮抗菌的菌落为近圆形或不规则形袁菌落边缘不
规则呈锯齿状袁菌苔较厚袁乳白色袁表面粗糙尧干燥尧
不透明袁中间有褶皱突起袁菌体杆状袁培养 圆 凿 菌落
直径 员 耀 圆 糟皂袁液体静置培养时形成易裂的薄膜状
菌膜袁染色可见椭圆形芽胞袁为革兰氏阳性菌袁柠檬
酸利用尧甲基红试验尧接触酶和 灾孕 试验为阳性袁可
还原硝酸尧使明胶液化尧水解淀粉和酪素袁需氧生长袁
具有耐酸性和耐盐性袁可在 责匀 缘援 苑 和 苑豫的 晕葬悦造
的环境中生长袁均与叶常用细菌学鉴定手册曳中芽胞
远员圆 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源园 卷
图 圆 匀孕蕴悦检测标准样渊葬冤和 杂云鄄员愿员 发酵液渊遭冤中的 陨粤粤与 郧粤猿 图谱
云蚤早援 圆 匀孕蕴悦 凿藻贼藻糟贼蚤燥灶 陨粤粤 葬灶凿 郧粤猿 皂葬责 燥枣 泽贼葬灶凿葬则凿 泽葬皂责造藻 渊葬冤 葬灶凿 杂云鄄员愿员 枣藻则皂藻灶贼葬贼蚤燥灶 遭则燥贼澡 渊遭冤
杆菌 月葬糟蚤造造怎泽 泽责责援的特性一致遥
圆援 远援 圆 员远杂 则阅晕粤与 早赠则鄄月序列分析
分析结果显示袁菌株载云鄄员苑源与荧光假单胞菌
孕泽藻怎凿燥皂燥灶葬泽 枣造怎燥则藻泽糟藻灶泽 孕枣 园鄄员 的同源性达 怨怨豫 渊图
猿冤曰菌株 杂云鄄员愿员 与枯草芽胞杆菌 月葬糟蚤造造怎泽 泽怎遭贼蚤造蚤泽
悦孕园园圆源远愿 同源性达 怨苑豫 曰其余 怨 个菌株均与解淀粉
芽胞杆菌 月葬糟蚤造造怎泽 葬皂赠造燥造蚤择怎藻枣葬糟蚤藻灶泽 同源性较高渊图
源冤遥 因此袁鉴定菌株 载云鄄员苑源 为荧光假单胞菌 孕援 枣造怎鄄
燥则藻泽糟藻灶泽袁菌株 杂云鄄员愿员 为枯草芽胞杆菌 月援 泽怎遭贼蚤造蚤泽袁其
余 怨 个菌株为解淀粉芽胞杆菌 月援 葬皂赠造燥造蚤择怎藻枣葬糟蚤藻灶泽遥
图 猿 载云鄄员苑源 的 员远杂 则阅晕粤的系统发育树
云蚤早援 猿 孕澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟 贼则藻藻 燥枣 贼澡藻 员远杂 则阅晕粤 则藻早蚤燥灶 燥枣 载云鄄员苑源
图 源 芽胞杆菌的 早赠则鄄月系统发育树
云蚤早援 源 孕澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟 贼则藻藻 燥枣 贼澡藻 早赠则鄄月 则藻早蚤燥灶 燥枣 月葬糟蚤造造怎泽 泽责责援
苑员圆猿 期 陈思宇等院水稻纹枯病菌拮抗细菌的筛选及鉴定
猿 讨论
高效拮抗菌常常在室内平板试验中效果明显袁
而在盆栽和田间效果不稳定咱圆园暂 遥 本试验从不同地
区土壤中筛选出 员员 株对水稻纹枯病菌有较强抑制
作用且抑菌谱较广的拮抗细菌袁连续两年进行室外
防效试验袁这 员员 株拮抗细菌在盆栽试验和田间小区
试验中对水稻纹枯病均有较好的防治效果遥 圆园员圆
年的大田试验中袁除 允酝鄄圆圆缘 防效高于 圆园员员 年盆栽
试验外袁其余菌株防效均低于盆栽试验遥 这可能与
田间植株密度较大利于水稻纹枯病发病有关遥
几丁质酶尧蛋白酶尧纤维素酶和嗜铁素都是抗菌
相关物质遥 其中几丁质是真菌细胞壁的重要组分遥
所筛选的 员员 株细菌中都不产生几丁质酶袁说明这些
细菌通过其它机制抑制病原菌生长袁其定殖性尧脂肽
类抑菌物质的产生等特性还有待进一步研究遥
在植物病害生物防治中袁 应考虑把防病作用与
促生作用有机地结合起来遥 有研究表明袁植物根围
促生菌可通过产生嗜铁素尧诱导系统抗性尧分泌激素
等机制促进植物生长发育咱圆员暂 袁其中产生 陨粤粤尧郧粤猿
等激素类物质是细菌促进植物生长的重要方式之
一咱圆圆暂 遥 本试验中 员员 株拮抗细菌对水稻幼苗的株高
和鲜重有较好的促生作用袁均产生 郧粤猿袁有 怨 株可产
生 陨粤粤袁且 陨粤粤与 郧粤猿 含量与水稻株高和鲜重的增
长率呈正相关袁与预期结果相符遥
黄新琦等咱圆员暂筛选到 猿 株对土传黄瓜立枯病有
抑制作用并可促进黄瓜苗生长的菌株袁其中 圆 株为
芽胞杆菌遥 王闵霞等咱圆猿暂筛选到 缘 株对稻瘟病菌有
较强拮抗效果的生防菌袁全部为芽胞杆菌遥 本试验
所筛选的 员员 株生防菌中袁有 员园 株为芽胞杆菌属遥
芽胞杆菌占大多数袁可能有 圆 个原因院一是芽胞杆菌
是植物和土壤微生态中的优势生物种群袁在自然界
中分布广泛且抗逆性强袁容易分离培养曰二是土壤中
分离拮抗菌所用 再孕郧粤 为本实验室配制袁特别适合
芽胞杆菌的生长遥 本试验所筛得的拮抗细菌控病促
生效果均显著袁表明其在水稻病害的生物防治中具
有良好的应用前景遥
参 考 文 献渊砸藻枣藻则藻灶糟藻泽冤
咱员暂 陈敏袁唐晓慧援 芽孢杆菌 阅则贼鄄员员防治水稻纹枯病研究援 西南
农业学报袁圆园园远袁员怨渊员冤院缘猿 原 缘苑
咱圆暂 蕴藻藻 云 晕袁 砸怎泽澡 酝 悦援 砸蚤糟藻 泽澡藻葬贼澡 遭造蚤早澡贼院 粤 皂葬躁燥则 则蚤糟藻 凿蚤泽藻葬泽藻援
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