全 文 ：植
BU L L E T IN
物 研
O F BO T A N IC人 L
究
R E S E A R CH
绍 7粉 . 第 4期
V o l
.
7
.
N
e
.
4
l. S T年 1 0月
(灭 t. 19. 宁
A B A 诱导离体红松针叶衰老过程
中叶肉细胞超微结构的变化
郭维明 李国范 吴教肃
T H E CH AN G E O F U LT RA S T RU C T UR E O F
M E SO PH Y LL IC E L L S D U R IN G TH E P RO C E S S
O F SEN E SC EN C E O F EX C ISE D N E ED L E S
O F P! N U S KO RA EI N S! 5 IN D U C ED W ! T H A BA
G u o W
e i
一功 i n g L i G u o 一 f a n w 一1 D u n 一 : it
〔提要〕 A B 人 处理离体针叶 , 使 RN a : 。 活性明显提高 , 针叶变黄加剧以
及叶肉细胞超微结构有序衰老 , 证明 A D八 可以加速红松针叶的衰老 。 作者
以红松 ( P i : u s 左。 , a i e 浮 : `5 s i e b e t Z u e e ) 针叶叶肉细胞各细胞器对衰老
的敏感程度为序 , 将针叶衰老过程划分衰老早期 、 衰老中期及衰老后期 。
针叶衰老的原因 、 机制和过程是生物学研究中的重要 问 题 。 光 照 不
足 、 高温 , 冷冻 、 早涝 、 盐碱 、 缺素 、 污染等逆境均是衰 老 的 外 因 , 而
A B A 的存在则是衰老的重要内因 。 其引起衰老的机制是诱使气孔关闭 , 抑
制 R N A 及蛋白质的合成并 促 进 其分 解 ( T h i m a n n 2 9 5 0〔2 0 〕〔2 ,〕; T h o
m a s和 s t o d d a r t 1 9 5 0〔“ 2 〕) 。 至于衰老的过程 , 特别是从细胞 生 物 学 水
郭维明 . 李国范 : 黑龙江 , 哈尔滨 , 东北林业 大 学 . ( N o rt 卜 E一 t . 。〔 F o r e s t r 了 U n 毛v o r s i t y .
H a r b i n
.
.H il
o . o ji
a n 日)
果软市: 上海 . 中国科学院上海植物生理研究所 ( S卜a n g h a 三 I n s t i t u t。 o f p la o t p h y ` 10 10。了 ,
A
c a
d
e
. i
一
S i
n ic二 S七a 。 。卜。 1.
东 北林业 大学 电峨室 胡晓靳 、 吴芳兰同志参加制 片 . 特此 致谢.
一 1 6 1一
平研究细胞内不同细胞器的衰老表现 , 已有一些报导 (如 B ul et r 1 96 7 〔7〕、
1 9 7 2〔8 ) , W o o l h o u s e 等 1 9 7 5 〔2 5〕 1 9 8 5 ( 2 6〕, 尤瑞麟 1 9 5 5〔 l〕 , G r e g e t s o n
1 9 8 6〔`。 〕等 ) , 只是还多集中于作物 、 蔬菜等草本 , 因此本文用外源 A B A
诱导离体红松的一年生针叶 , 通过观察衰老的连续过程中细胞超微结构的
变化 , R N as e 活性的变化等 , 探讨针叶衰老的规律 , 为林业生产调控生长
发育与衰老提供理论依据。
一 、 材 料 与 方 法
实验用红松二 、 一年生针叶分别采自东北林业大学凉水林 场 及 校 园
内 。 在 25 ℃ 、 自然光照下 , 将二 、 一年生针叶分别直 立 于 10 、 20 p p m
A B A
,
ZO p p m 6一 B A巾 溶液和蒸馏 水 中 , 保 持通 气 良好 , 连 续 培 养
五天 。
R N as
e 活性的测定 : 连续五天取上述培养的二 年 生 针 叶 , 以 10 倍
P H 6
.
5
、
o
.
o 2 5M N a 止C o 3
·
H C I缓冲液加石英砂研成匀浆 , o℃下 2 0 , o o o X
g 离心 3 0 分 , 上清液即为 RN as e 粗提液 , 以 R N A 为底 物 , C d s 。 ` 为沉
淀剂 , 终止反应后 , 2 6On m 下用 75 1型分光光度计进行比色测定〔“ 〕。
超薄切片制作 : 连续切取上述培养的一年生针 叶 先 端 Zm m 段 , 3%
戊二醛前固定及 1写锹酸后固定后 , 经丙酮系列脱水 、 环氧丙烷过渡 , 用
环氧树脂 6 18 包埋 , 用 L K B一 V 型超薄切片机切片 , 醋酸双氧铀和柠檬
酸铅双重染色 , 于 H一 60 0一 n 型电子显微镜观察并拍照 。
二 、 实 脸 结 .
(一 ) 外派 A B A 处理对 R N a s e 活性的形晌
从图 1 可见 , 水培养对照针叶 R N as e 活力大致保持恒定 , 第三 天 起
略有增加 , 1 0P p二 A BA 连续处理二年生针叶后 , R N a s e 活性明显提 高 ,
两天以后增 1 尤较明显 , 第五天达对照 的 三 倍 多 , 证 明 A BA 导致 了
R N a se 的合成并促进了 R N A 的分解 , 这与 A B A 诱导大麦〔 `” 〕、 小麦〔2 〕、
水稻〔3〕、 紫万年青〔 . 〕等离体叶片 R N as e 活性增加的报导是一致的 。 这一
结果显然与 A BA 处理后膜结构的变化有 关 (见 讨论 ) , M at i le 〔 ’ ” 〕早已
证明液泡相当于溶酶体 , 由于衰老进程中液泡膜及溶酶休膜的消解 破 坏 ,
使 RN as e 被大最释放而加速了 R N A 的水解 。
按五级分类连纷记录 A BA 、 6一 B A 对针叶叶色变化的影响可见表 l 。
表 1 表明 , 针叶的衰老是从基部开始的 , 这与叶片由叶先端开始衰老的报
. 6一BA : 6一书氮基 暇岭
一 1 6 2 一
导 ( L e o p o ld 1 9 5〕〔 , 4飞) 有所不同 。 与对照相比 ,
.1.10.c8.0l衅
￡吐.协闪。,o又州十丫叭`迢盗
0
.
2
牛)天
3问时
2
l划 . A u A ( 一。 `· p 田 )
肉细胞的超微结构 。
连续处理 二年生 针叶 RN ;、 se 的活性
A BA 的减绿效果明显 ,
24 小时后即表现浸润或
基部黄绿 , 五天后针叶
已一半坏死 , 促进衰老
的效果很明显 , 而一 6
B A 作用正相反 , 表现
为保绿 , 即叶绿素的破
坏显著减少 , 与对照相
比 , 叶基出现浸润推迟
近两天 , 明显延缓了衰
老的发生 。
(二 ) AB A 对一年
生针叶先端叶肉细脑超
徽结构的影 晌 :
图版 I 为水培养三
天 ( 1 1 、 , ) 、 四天 ( 1 3 )
和五天 ( I ; ) 针 叶 叶
从 工: 可见 , 叶绿体还保持着完整的双层被膜 及 间 质
衰 1 . A B A 、 6一 B几对针叶叶色变黄的影晌 ’
…ù
一
+份+++
尸甲治荞厌…犷处理、一 _ …
C K
A B人
6一 B人
二 { 三 { 四 } 五
+
十
一 : 全绿 , + : 叶基浸润或现 黄 绿 ,
料 : 叶基现黄 , 升于: 针叶一半变黄、 坏
死 , 洲 : 全针叶坏死 。
片层和基粒片层结构 , 线粒体
正常 , 液泡膜完整 。 I : 为 部 分
核的放大图版 , 可见到清晰的
核膜及开放的核 孔 , RN A 密
集在核孔周围 , 待源源运人原
生质 。 而从水培四 天 的 I , 发
现 , 叶绿体膜 、 液泡膜均开始肿
胀 , 部分叶绿体被膜开始消解
破坏 , 核孔开始关闭 , 核孔周
围 R N A 已不如水培前期密集 , 这在水培五天的 1 . 中更为显 著 , I 。还 见
到 , 由于叶绿体被膜部分消解 , 出现了连锁的叶绿体 , 间质片层及基拉片
层肿胀并出现空泡 , 还可见核孔缩小 、 核膜肿胀 。 初期溶酶体 也开 始 出
现 。
图版 n 、 班表明 , A BA ( 20 p p m ) 处理后 , 与上述对照超微结构相比 ,
衰老的速度显著加快 , 经观察比较 , 试将该进程划分为如下三个时期 :
1
。 衰老早期:
一 16 3 一
各细胞器中 , 衰老早期的征兆首先出现在叶绿 体 , 经 A BA 诱导至 48
小时 (图版 n l 、 2 ) , 其双层被膜界线模糊并开始部分消解 , 但 n :中还可
见某些清晰完整的基粒及间质片层结构 , n : 中 , 大多间质及基粒片 层 开
始肿胀 , 尤竺问庸片层对衰老的敏感程度似较基粒更高 。 此时期线拉休仍
保持基本正常的情 , 同时充满稠密的基质 。 液泡膜开始模糊。 1 : 清 晰 可
见正常的胞间连丝 , 说明 A B A 处理两夭 , 细胞间仍维持着正常的代谢联
系 。
从 n :可观察到衰老早期的另一特殊征兆一 一 内质网的变化 , 即 粗 糙
内质网的槽库膨大成囊状 , 出现了具有单层界膜的囊泡结构 (图 版 n : 小
箭头处 ) , 这种结构可能在细胞自溶中起作用 , 参与细胞的解体 , 同时与
形成初级溶酶体也是有关的 。
从 n 3 还观察到衰老早期的另一个特征表现 , 即出现了假质壁分 离现
象 (见 n , ,’. ” 处 ) , 因为质膜从细胞壁处拉开不是因为高渗溶液的存 在 ,
而是衰老初期细胞质牧缩的结果 。 此时期还发现质膜 、 液泡膜 已 开 始模
糊 ( n 卜 : ) 。
这一时期线粒体正常 ( n : 、 3 ) , H ,所见高尔基体槽库平行堆 叠 , 彼
此贴紧 , 两侧正常分布着不少分泌囊泡 , 说明高尔从体 尚在执行着分泌功
能 。
2
. 衰老中期 :
从 A B A 处理三 、 四天的图版 n ; 、 班 :可以观察到这一时期的 特 征 变
化 。 首先是叶绿体老化加剧 ( 1 , ) , 双层被膜大部分消解 , 间质片层和基
粒片层结构也大部分肿胀并且变得模糊不清 , 叶绿休空泡加大 。 另外 , 线
粒休晴明显减少 ( 1 ; ) 。
这个时期的另一特征是核孔已关闭 ( 皿 : ) ,因此核与细胞质物质交 换
的通道不复存在 , R N A 等大分子物质至核外的运输被中断 , 这可能即 是
A BA 促进衰老与蛋白质合成受阻有关的结构证据 。
衰老中期又一表现是 , 从 1 ;发现 , 内质网虽有囱中胀 , 但却有所加 长 ,
表现了哲时的增生 , 主要分布在叶绿体及质膜附近 , 且仍有不少囊泡状结
构存在 , 并已形成初级溶酶体 ( 班 : 星号处 ) 。 此时期内质网的暂时加长 与
B e r j
a k 等 ( 1 9 7 1 ) 〔6〕在劣变种子中的观察是类似的 。
这一阶段高尔基体两侧仍存在许多分泌泡 ( n ; ) , 说明还在执行其功
能 。
3
. 衰老后期 :
从图版 1 1 、 3 、 ` (培养五天 )可观察到衰老后期细胞器多已解体 , 最明显
一 1 6 4 一
的是叶绿体的解 体 , 被膜已 消失破坏 , 基粒与间质片层结构全部混溶 、 解
体及破坏 。 图版 1 : 、 3表明液泡膜已消解 , 推测这可能 是 叶 绿 体等 细 胞
器解体的主要原因 , 因为随液泡膜的消解 , 其中水解酶类被大最释放及强
烈作用的结果造成了自溶或自噬现象〔` 〕, 这一现象也有溶酶的体参加 , 从
班 。就可发现因溶酶体破裂对叶绿体等细胞器正进行消解及破坏的情况 。
衰老后期的线粒体被膜大部分破损 , 内部结构模糊 , 不再保持其完整
的结构 , 显然已丧失了功能或功能已严重障碍 ( 班 ; ) 。
不同于衰老中期的另一表现是内质网数量减少 , 大部分消解 、 断裂和
严重破坏 , 剩余的已不具完整结构 ( nI ; ) , 高尔基体也大部分消 解 ( 1 , ) ,
堆叠的囊饱已模糊不清 , 分泌小囊泡消失 , 显然己失去其功能 。
后期的重要特征是质膜的解体 , l : 可看到原生质内容物已渗偏到细胞
壁中 , 此处 电子密度较大无疑提供了证据 。 因此可以认为 , 衰老后期大部
分细胞 器严重解体破坏 , 细胞的死亡以质膜的破裂而告终 。
三 、 讨 论
外 源 人 BA 可 以 加 速 多 种 植 物 叶 片 的 衰 老 , p ar a nj ot h y 和
W
a r e i n g 〔、 6〕 ( 1 9 7 1 ) 已有报导 , 本实验通过 A B A 诱导 T R N a s e 活性 的
明显提高 , 针叶的加速变黄及细胞器的连续老化也证明 , A BA 可以 加 剧
针叶树种叶肉细胞的衰老 。 虽然外源 A B A 诱导的衰老与遗传性控制的衰
老起因不同 , 属于偶然外加因素的作用 , 但可以推河 , 由于 人B A 的 存在
是遗传性控制衰老的重要内因 , 因此外源 A B A诱导衰老的进程应与遗 传
性控制的衰老的进程是一致的 。 这正是本文采用外源 A B A 来研究衰老 过
程的理论依据 。
通过本实验观察 , A BA 促进了 R N as e 活性的提高 , 也诱使了衰老进
程中核孔关闭 , 可以认为分别从生化水平及细胞超微结构水平 提 供 了证
据 , 证明 A BA 诱导针叶衰老也包括促进 R N A 水解及阻碍核酸 、 蛋白质合
成两方面的机制 , 因核孔关闭 , 大址 R N A ( m 一 R N A , t 一 R N A 等 ) 及 核
糖体前身不但不能通过核膜进人细胞质 , 而且可能被核中活跃的 R N as e 所
降解 , 使蛋白质合成受阻而加速衰老。
对针叶衰老过程三时期的划分 , 以不同细胞器对衰老的敏感程度为序
做一归纳 (见下页 ) 。
上述细胞学变化中 , 对衰老最敏感的细胞器首推叶绿体 , 其可见的衰
老信号又以被膜 、 间质片层及基粒片层为序 , 而包括线粒体 、 高 尔 基体 、
内质网等细胞器的衰老却均较叶绿休推迟 , B ul et r 和 5 1二 。 n ( 1 97 2) 〔“ 〕在
一 1 6 5一
叶绿体
《膜开始消解 , 部分片层肿胀 )
假质壁分离
(出现 )
叶绿休 线粒体
衰老的启动
十
内质网
(出现小囊泡 )寺
内质网
(膜损坏 , 大部分片层肿胀 ) (暂时增生 )(膜肿胀峭减少 )
寺
线拉休 、 内质网 、 高尔基体
(解体 )
寺
细胞死亡
高尔基体 初 级 核孔
溶酶体
(忡胀 )
(形成 ) (关闭 )
叶绿体
(全破坏 )
液泡膜 、 溶酶体膜 、 质膜
(破坏 )
黄化叶片的电镜研究中也发现 , 甚至叶绿体严重解体及光合作用下 降 时 ,
线粒体还保持着结构的完整性 。 那么 , 是否叶绿体即为衰老的启动 者呢 ?
不是的 , 从 A B A 促进衰老的机理来看 , A BA 作用的接合位点 , 即受休蛋
白的定位是在核中 (陆嘉陵〔5〕) , 而引起衰老的原发效应在质膜上 , 即首
先引起质膜 Z et a 电位增加 , 然后细胞衰 老 ( 张 德 颐 和 iP le t〔“ 〕) 。 此 外
A BA 可能是通过在翻译阶段抑制 可 溶 性 R N A 、 r 一 R N A 、 D N A的 合 成
(W a l t
o n 等 , 1 9 7 0〔2`〕)及转录阶段抑制蛋 白质合成 (p e a r s o n 和 W a r e i n g ,
1 96 以 17〕) 而加速衰老的 , 显然这些作用已超出叶绿体的功能范 围 , 因 此
叶绿体并不是细胞衰老的启动者 , 而是衰老被启动后较敏感的细胞器 。
观察表明 , 各细胞器中对衰老较敏感的部位 , 无疑是膜的损伤了 , 以
上提及质膜 Z e at 电位增加是衰老的原发效应即是膜敏感的证明 。 脂质 是
膜的流动镶嵌结构中的重要组成成分 , K o 。 t r a 和 H a r r 。 i g t o n ( 2 9 6。 ) 〔 , 3〕
及 H a r r i n g t o n ( 1 9 7 3 b ) 〔` , 〕均指出 ,脂质的自动氧化是种子老化的原因之
一 , 而且这一自动载化发生于所有细胞中 , 因此 , A BA 处理也可能 加 速
了膜系统脂质的自动氧化而使膜较早表现出了衰老的征兆 , 当然这一论点
还籍要细胞化学等证据的支持 。
J e n s e n ( 1 9 6 5 ) 〔’ 2〕 、 尤瑞麟 ( z , 8 5 ) 〔 , 〕等一些作者〔 2 3〕分别 在棉花 、
小麦珠心细胞的衰退过程中发现 , 内质网可形成多泡体及增生的内质网同
J合环等自噬泡结构 ,且具有强烈的水解酶活性 , 如 酸性磷酸酶 ( S 。 h ul z 等 ,
1 981 〔1 3 ) 等 , 这类酶是与细胞颗粒 、 膜结构及细胞壁结构结 合 的 , 在 衰
老蟆结构的降解及细胞自溶中可起一定作用 。 本文发现的囊泡结构是否可
能是自噬泡尚需进一步证实 。 另外 , 比较图版 n : 、 , , 还发现粗糙内质网多聚
集在叶绿体的周围 , 推测也有可能参加叶绿体被膜等的消解 , 即吞噬分隔
一 1 6 6 一
部分叶绿体 , 内质网小囊泡在衰老进程中的功能 尚应进一步研究 。 至于衰
老中期内质网的可见加长 , B e r 」a k ( 1 9 7 1 ) 〔“ 〕已在劣变的萌发种 子 中 观
察到 , 他认为内质网的暂时肥大是对线粒体损害的一种补偿 。 因为在低氧
分压和缺乏线粒体的 酵母品种中也观察到了内质网的增生 , 因而产生 了间
接的推测 , 即内质网与呼吸代谢有关 。 显然这种增加也可加速衰老 。 对内
质网抵偿作用与衰老的相关也应广泛研究 。
衰老中期核孔的 关闭对加速衰老是至关重要的标志 , 它直接影叭到细
胞代谢活力的下降 。 观察还表明 , 与一些细胞器相比 , 核的衰老征兆咯有
推迟 , A BA 处理 四天 ( 1 , ) 方始见到部分核膜出现模糊 , 核的衰老规 律
还有待进一步探讨。
总之 , 叶肉细胞各细胞器对衰老的敏感程度是不一致的 , 衰老顺序 也
不一致 , 然而本文的归纳可能带有尝试性 , 希望在揭示衰老过程微细结构
的变化规律中展开更加广泛的研究及探讨 。
A B 5 T R A C T
T h e P a P e r r e P o r t e d t h a t A BA
e a n a e e e
l e
r a t e t h e s e n e s e e n e e
·
o f e x e i s e d n e e d l e
s o f P i n u s K o 了a f e 刃5 15 , o n b a s i s o f t h e e v i d e n e e s
t h a t R N
a s e a e t i v i t i e s w e r e i n e r e a s e d d i s t i n e t ly
, t h e y e l l o w i n g
o f n e e d l
e s i n t e n s i f i e d a n d t h e u l t r a s t r u e t u r e s o f m e s o P h y l l e e l l s
一
s e n e s e e d s e q u e n t i a l l y b y t r e a t m e n t o f e x e i s e d n e e d l e s w i t h A BA
。
A
e e o r d i n g t o t h e o r d e r o f t h e d e g r e e o f s e n s i b i l i t y t o s e n e s
-
e e n e e o f d i f f e r e n t o r g a n e l l e s i n m e s o P h y l l
e e l l s o f n e e d l e s o f
P i n u s K o ,一 i e n s i s , w e d i v i d e t h e P r o e e s s o f s e n e s e e n e e i n t o t h r e e
P e r i o d s : t h e e a r l y s t a g e o f s e n e s e e n e e
, t h e m id d a e s t a g e o f s e
-
n e s e e n e e a n d t h e l a t e s t a g e o f s e n e s e e n e e a n d : u m u p a s f o l l o w s :
S t a r t o f s e n e s e e n e e
咨
C h l o r o p l a s t s ( e n v e l o p e m e m b r a n s d e g r a d e d
,
l a m e l l a s p a r t l y
,
s w o l l e d )
E n d o p l a s m i e s ( v e s i e l e a P P e a r e d )
F a l s e p l a s m o l y s i s ( a p P e r e d )
毒
一 1 6 7 一
Ch lo ro P la s ts (e n ve lo Pe m e m b ra e n s dam ag e d
, a
l
a r g e o f l a 一
m e l l a s s w o l l e d )
M i t o
e h o n d r i a s ( e n v e l o P m e m b r a n e s s w o l l e d
,
N o
. o f e r i s t a .
d e e r e a s e d )
E n d o P l
a s m i e s ( h y P e r P l a s i a t e m p o r a l l y )
G
o l g i o s o m e s (
s w o l l e d )
P r i m a r jr l y s o s o m e s ( f
o r m e d )
N u e l
e a r P o r e s
C h l
o r o P l
a s t s
( e l o s e d )
杏
( d i s i n t e g r a t e d e o m p l e t e ly )
M i t
o e h o n d
r i a s E n d o P l a s m i e s G
o l g i o s o m e : ( d i s i n t e g r a t e d )
入丁e m b r a n e s o f
v a e u o
l
e s
l犷s o s o m e s
d r o t o P l a s m s
( d i
s i n t e g r a t e d )
工
C e l l
s d i e d
参 考 文 献
〔 1 )
〔 2 〕
〔 3 〕
〔 4 〕
〔 5 〕
〔 6 〕
〔 7 〕
〔 8 〕
〔 9 〕
尤瑞麟 : 小 麦珠心细胞衰退过程的超徽结 构研究 . 植物学报 , V习 、 2 7 . N 。 、 1 3 4 5一 3 5 3 ,
1 9 8 5
。
卢敏华 、 徐玛娣 、 沈镇德 、 丁静 : 叶 片衰老和气孔关闭 . 植物生理学 报 , V 。 ! 、 9 , N o . 3 .
6 1一 6 7 . 19 8 3 。
关顶谁、 方 建雄 、 张映城 、 王丽 蓉、 陈律娜 : 脱 落映对离体水稻叶片衰老的效应 . 植 物 生 _
理学报 V o l . 7 N o . 3 . 2 5 5一 2 e 3 , l o a l 。
黄祥辉 : 液泡的细胞学和生理学。 植物生理学通讯 . 4 . 6一 L2 . 19 引 .
张德暇 . 植钧徽 t 作 用的分子机理 . 植物生理学翅讯 , 5 . “ 一 20 , 19 8 3 .
B e
r
aj k
,
P
. ,
W盛11 1 , r , , T . A . , N e , P b r t o l . 70 , 7 5 2一 , 一9 7 一,
B 认t l叶 , R . D . , T h . f i n ` s t t u e t u r a o f s o n e s e i n g e o t y l o d o n s o f e u e u m b e r , J . E x p ·
B
o t
.
1 8
,
5 3 5一 5 4 3 , 1 9 6 7 -
B u t l能 , R . D . , a n d 5 1口 o n , E . W二 U l t r . s 亏r u e t u r a ! a s P e e t s o f s o n “ c e n e e i压
P l
a n t s . A d
丫 . G e r o n 一0 1 . R e s . 3 . 7 3一 2。 , 1 , 7? .
D
七
l oe
,
P二 s . e b 户r , J . A . , C o n tor l o f r j bD n u e l e a s e a n d a c i d P h o s p b a t a s e d u r i n 宁
一 16 8 一
、丈 o :〕 G reg s o e r。 , E . L二 L . aT i z , T五e o f f e e r a b s c i s i e a e i d o n t h o u l t r a 、 t r u e t u r , o f
B
a r l e了 a l o uot
n e e e
l ls
,
B o t
.
G a z
.
yo l
.
1 45
,
N o
.
1 1一 5 , 10 5 6 .
〔 1 1〕 H a r r in g t o n , J . F二 S e e d S e i . o n d T e e h n l (一 2 ) , 峨5 3一 ` 6 1 . x 9 7 3 b .
·
( 1 2〕 Je n s e n , W . A . , T h e c o m p o 一i t io n a n d u lt ar t r . c t u馆 o f t il e n u e e l l u s 10 e o t t o n ,
J
.
U l t r as t r u c t
.
R e s
,
5 2
, 2 38一 2 56 , l o 6 5 b .
〔1 3〕 K o o s t m . P . T . , H a r r ig t o n . J . F . , P to e . I n t . S e e d T o s t . sA s 二 34 . 5 2。一 3屯。 ,
19 6 9
。
〔x一〕 以o p o l d , A . C . , 。 t 一 1. P l a n t P n y s io l . 34 , 5 70一 5 7 5 , 一。 5 9 .
〔1 5〕 M a t i l e , P . H二 B lo c h e瓜 . J . , 1 1 1 , Z e一 、。6 5 .〔 16 〕 P a r a n jo t h l . K . a n d W a r 忆i n g , P . F二 T五e e f f e e t o f 一 b一c is ie . e id . K i n e t i o a n d
s 一 f l u o r o u ar e i l o n r ib o n u e l e ie a c i d a n d P r o t e i o s y n t h e s is i n s e . e s e i o g r a d is h
J
e a
f d i s c .
,
P Ja n t a
,
9 ,
, ! 12一】19 , 19 7 1 .
: 〔一7〕 P e a r s o 。 , J . A二 P . F . W aer i。。 , N a t u r e . 2 2 1 , 6 7 2一 1 9 69 .
( 一s 〕 S e h u l z , F二 a n d W . A . J e n s e n , rP e 一 fe r t让i z a t i o . o v u l e d。丫 e lo pm e n t 10 C a p s。 [l a .
u
l t
r a s t ur
c t u r e . n d . lt r a e y t o e h e m ie a l i o e a l五z a t io o o f . e i d P h o s P h a t a s e i n t h . m e i-
o e y t e
,
P r o t o p l a s m a
.
107
,
2 7一 4 5 . 1 , s 一
( 1。 〕 S r i v a s t a 丫 a . B . 1. 5二 A e e e l o r a t i o n o f 一 e n e s e o n c e a n d o f t n e i n o r e a s e o f e l、 r o -
m a t in a s s o e ia t e d n u e l
e a , e s in e x e i s
e
d b
a r l e y b y
a b s e三, in I t a n J i t s r e 甲e r , a l b y
K i n e t i n
,
B i o e h o m
.
B i
o p h y
s
.
A
e t a
,
196
. 5 3 4一 5 3 6 , 1 9 6 8 .
〔2 0 〕 T h i m a n n , K . V . e t a l . P r o c . N a t l . A亡 a d , S e i . D . 5 . A . 丁7 ( ` ) , : o s c一 Z e厂3 .
19 8 0
.
〔2 一〕 T h i m a n n , K . V . S e n e s c e n e e i n P l a n t s . C RC , rP e s s , 一。3 0 .
〔 2 2 〕 T h o m a s , H . , S 七o dd a r t , J . L . , L e a f s e o ces e n e e , A n n
.
R e ,
.
p l
a n t Ph y s io l , 3 1
.
8 3一 1 1 1 . 19 8 0 .〔2 3 〕 U n z . l . 。 , J . M . a n d p . L . H e a le y , D e , e r o p m e n t , s t r : 。 t o r , a n d o e u r e o e , 《 , f
s e e r e t o gt t r i e h o m e s o f P五a r b i t i s . P r o t o p l a s m a , 80 , 2 5 5一艺0 3 . 1 0 74 .
( 2 `〕 W a l t o n . D . C二 G . 5 . s o o f i a n d E . s o n dh e im e r , P la n t P h了5 10 1. 45 . 3 7一 一。 7 0 .
〔2 5〕 W o o lh o u s e . H . W . eS 此 s e e n e e p r o e o s s e 、 i n t h e l i fe e y e le o f f l o 钾 e r i n g p la n t s ,
B io , c i e n e e
,
2吕, 2 5一 3一, 1 9 78 .
、工Z e 〕 Wo l h o u s一 H . W二 a n d Jo n k in s , G . I二 P五y s io l o g i e a l r e s p o n se s , m e t a b o l i。
e 卜a n g e s a n d r e g u l a t io n d u r in o le a f s e n e s e e n e e , I n T h e G or 甘 th a n d F u n e t i o n in g o f
从一作 5 . e d . J . D a le a n d F . L . M il*h o r伴 . C . U . P二 C a m b r i dg . ` 4。一 4 , 7一 9 5 3 .
s e n e , e e n e e o f r h
0 0 0
l
e a f s e e t i o n
,
P l
a n t P h y s i o l
.
46
, s o e一 3 1 1 , l o 7 o a .
,一 一~ - . 、 , , , . . .
一 1 6 9 一
.版 说 明
缩写符号 : CW ,细胞壁 , P , 叶绿体 , M , 线拉体 , E r , 内质网 , G , 高尔基体 , N ,
细胞核 , N p , 核孔 , N e , 核膜 , L , 溶酶休 , V , 液泡 , iP , 胞 间 连 丝卜
P m
, 质膜 。
图版 1 : 水培养不同时间的一年生针叶叶肉细胞的超徽结构
1
. 水培养三天 , 完整的叶绿休双层被膜及片层结构 , 两种形态的正常线 拉 体 , 液
泡膜正常 , x 30 , 。。。。 2 . 水培养三天 , 部分核的放大图版 , 核膜清晰 , 核 孔 正常
开放 , RN A 密集在核孔周围 , x 45 , 。0。。 3 . 水培养四天 , 叶绿体片层肿胀 , 被膜
部分消解 , 液泡膜也部分肿胀 , 核孔开始关闭 , x Z`。。。。 4 . 水培养五天 , 叶绿体
部分被膜消解 , 并出现连锁的叶绿休 , 叶绿休内出现空泡 , 核孔缩小 , 核 膜肿 胀 ,
初级溶酶体出现 。
图版 1 : 20 p p m A B A 处理二 、 三天一年生针叶叶肉细胞的超微结构
1
.
A B入 培养二天 , 叶绿体被膜界线模糊 , 开始部分消解 , 某些类衰体片层 结 构 ·
完整。 液泡 , 高 水基体均正常 , 并可见胞间连丝 , x 3。 , 0 00 。 2 . A B A 培养二天 ,
问质及基粒片层人多开始肿胀 , 浪泡膜开始模栩 , 线 拉体 睛 正 常 , x 4 5 ,。。。。 3一
A B A 培养两天 , 粗糙内质网膨大形成许多小班泡 (箭头处即溶酶体 ) , 假质壁分离
现象出现 , 并可见界线模糊的质膜 、 液泡膜。 x 30 , 。。。。 4 . A B A 培养三天 , 叶绿
体类襄体片层结构与被膜肿胀加剧 , 内质网出现暂时加长 , 线粒体 、 高尔基体仍保
持正常。 x 3 0 , 0 0 0
图版 ] 1 : Zo p p 川 A B A 处理四 、 五天一年生针叶叶肉细胞的超微结构
1
.
A B人 培养四 天 , 核孔关闭 , 初级溶酶体出现 , 叶绿体内空泡 加 大 , x 2 2 , 0。。
2
. 人 B A 培养五天 , 口一卜绿体被膜解体 、 液泡腆、 质膜破裂原生质内容物渗偏 到 细
胞壁 , x 30 , 0。。。 3 . A B A 培养五天 , 高尔基休大部分消解 , 堆叠襄胞肿胀不 清 ,
两侧分泌小襄泡消失 , x 35 , 。。。。 4 . 人 B A 培养五天 , 线拉体被膜消 解 , 内部结万
构摸糊 , 内质网断裂破坏 , 右上方是一已解休的叶绿体 x 34 , 。。.0
17 0