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Isolation, identification and biological characters of Trichoderma asperellum T31

生防棘孢木霉T31菌株的分离筛选及其生物学特性



全 文 :第 源员 卷摇 第 员 期
圆园员源 年 圆 月
植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报
粤悦栽粤 孕匀再栽韵孕匀再蕴粤悦陨悦粤 杂陨晕陨悦粤
灾燥造援 源员摇 晕燥援 员
云藻遭援 摇 圆园员源

基金项目院 国家野十二五冶科技支撑计划渊圆园员圆月粤阅员怨月园源袁圆园员源月粤阅员源月园圆冤袁吉林省发展与改革委员会产业专项渊圆园员猿悦园园员冤袁公益性行
业渊农业冤科研专项渊圆园员员园猿园员远冤袁吉林省玉米产业技术体系岗位科学家渊圆园员圆园猿鄄员冤
作者简介院 李琳袁女袁员怨愿苑年生袁硕士研究生袁研究方向为植物病害生物防治袁 耘鄄皂葬蚤造院 扎澡葬灶早澡葬蚤躁怎灶赃圆猿源岳 员远猿援 糟燥皂
鄢通讯作者渊粤怎贼澡燥则 枣燥则 糟燥则则藻泽责燥灶凿藻灶糟藻冤袁 耘鄄皂葬蚤造院 责葬灶澡燥灶早赠怎岳 躁造怎援 藻凿怎援 糟灶
收稿日期院 圆园员猿 原 园缘 原 圆缘
生防棘孢木霉 栽猿员菌株的分离筛选
及其生物学特性
李摇 琳摇 张雅梅摇 张祥辉摇 刘金亮摇 潘洪玉鄢
渊吉林大学植物科学学院袁 吉林省资源微生物功能研究工程中心袁 长春 员猿园园远圆冤
摘要院 为评价具有生防潜力的棘孢木霉袁采用平板对峙法尧对扣培养法尧圆盘滤膜法从长白山土样
中分离筛选出木霉菌株 栽猿员袁结合形态学及分子生物学分析对其进行种类鉴定袁并采用菌丝生长法
研究了该菌株的生物学特性遥 所分离的菌株 栽猿员 被鉴定为棘孢木霉 栽则蚤糟澡燥凿藻则皂葬 葬泽责藻则藻造造怎皂袁该菌株
对 愿 种靶标菌的抑菌率在 源源援 源怨豫 耀 苑苑援 怨员豫之间袁其中袁对玉米大斑病菌 耘曾泽藻则燥澡蚤造怎皂 贼怎则糟蚤糟怎皂尧核
盘菌 杂糟造藻则燥贼蚤灶蚤葬 泽糟造藻则燥贼蚤燥则怎皂尧腐霉菌 孕赠贼澡蚤怎皂怎澡贼蚤皂怎皂 泽责援及镰刀菌 云怎泽葬则蚤怎皂 泽责援均有较强生长竞争优
势袁对玉米灰斑病菌 酝葬早灶葬责燥则贼澡藻 燥则赠扎葬藻具明显重寄生作用遥 菌株 栽猿员 的最适培养基为 孕阅粤 培养
基袁最适生长温度为 猿园 益尧最适产孢温度为 圆缘 益袁最适 责匀值为 远遥 持续光照可以促进木霉菌孢子
产生袁在灶圆 垣 尧酝灶圆 垣 尧悦葬圆 垣和 酝早圆 垣利于菌丝生长袁但是高浓度的 云藻圆 垣和 悦怎圆 垣抑制菌丝生长袁酝灶圆 垣和
酝早圆 垣可促进产孢遥 此外袁与普通木霉菌相比袁该菌株具有耐寒性及耐盐性遥
关键词院 生防菌曰 分离筛选曰 棘孢木霉曰 生物学特性
陨泽燥造葬贼蚤燥灶袁 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 葬灶凿 遭蚤燥造燥早蚤糟葬造 糟澡葬则葬糟贼藻则泽 燥枣
栽则蚤糟澡燥凿藻则皂葬 葬泽责藻则藻造造怎皂 栽猿员
蕴蚤 蕴蚤灶摇 在澡葬灶早 再葬皂藻蚤摇 在澡葬灶早 载蚤葬灶早澡怎蚤摇 蕴蚤怎 允蚤灶造蚤葬灶早摇 孕葬灶 匀燥灶早赠怎鄢
渊悦燥造造藻早藻 燥枣 晕葬贼怎则葬造 砸藻泽燥怎则糟藻泽 葬灶凿 耘灶增蚤则燥灶皂藻灶贼袁 悦燥造造藻早藻 燥枣 孕造葬灶贼 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 允蚤造蚤灶 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁
悦澡葬灶早糟澡怎灶 员猿园园远圆袁 允蚤造蚤灶 孕则燥增蚤灶糟藻袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 韵灶藻 栽则蚤糟澡燥凿藻则皂葬 泽责援 泽贼则葬蚤灶 灶葬皂藻凿 栽猿员 憎葬泽 蚤泽燥造葬贼藻凿 葬灶凿 泽糟则藻藻灶藻凿 贼澡则燥怎早澡 贼澡藻 泽贼则葬贼藻早蚤藻泽 燥枣
糟燥灶枣则燥灶贼葬贼蚤燥灶 糟怎造贼怎则藻袁 糟怎造贼蚤增葬贼蚤灶早 枣葬糟藻 贼燥 枣葬糟藻袁 葬灶凿 糟怎造贼蚤增葬贼蚤灶早 蚤灶 糟藻造造燥责澡葬灶藻 枣蚤造皂 枣则燥皂 悦澡葬灶早遭葬蚤 酝燥怎灶贼葬蚤灶
泽燥蚤造援 陨贼 憎葬泽 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 遭葬泽藻凿 燥灶 贼澡藻 皂燥则责澡燥造燥早蚤糟葬造 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽 葬灶凿 陨栽杂 泽藻择怎藻灶糟藻 葬灶葬造赠泽蚤泽援 栽澡藻
遭蚤燥造燥早蚤糟葬造 糟澡葬则葬糟贼藻则泽 憎藻则藻 泽贼怎凿蚤藻凿 葬糟糟燥则凿蚤灶早 贼燥 蚤贼泽 糟燥造燥灶赠 早则燥憎贼澡援 栽猿员 憎葬泽 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 葬泽 栽则蚤糟澡燥凿藻则皂葬
葬泽责藻则藻造造怎皂援 栽澡藻 蚤灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 则葬贼藻 燥枣 栽猿员 憎葬泽 则葬灶早藻凿 枣则燥皂 源源援 源怨豫 贼燥 苑苑援 怨员豫 贼燥 藻蚤早澡贼 责葬贼澡燥早藻灶蚤糟 枣怎灶早蚤袁
葬灶凿 贼澡藻 泽贼则葬蚤灶 澡葬凿 泽贼则燥灶早 糟燥皂责藻贼蚤贼蚤增藻 凿燥皂蚤灶葬灶糟藻 葬早葬蚤灶泽贼 耘曾泽藻则燥澡蚤造怎皂 贼怎则糟蚤糟怎皂袁 杂糟造藻则燥贼蚤灶蚤葬 泽糟造藻则燥贼蚤燥则怎皂袁
孕赠贼澡蚤怎皂怎澡贼蚤皂怎皂 葬灶凿 云怎泽葬则蚤怎皂援 栽猿员 澡葬凿 贼澡藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 责葬则葬泽蚤贼蚤糟 藻枣枣藻糟贼 葬早葬蚤灶泽贼 酝葬早灶葬责燥则贼澡藻 燥则赠扎葬藻援 孕阅粤
憎葬泽 贼澡藻 皂燥泽贼 枣葬增燥则葬遭造藻 皂藻凿蚤怎皂 枣燥则 贼澡藻 皂赠糟藻造蚤怎皂 早则燥憎贼澡 葬灶凿 泽责燥则藻泽 责则燥凿怎糟贼蚤燥灶援 栽澡藻 燥责贼蚤皂怎皂 贼藻皂责藻则葬贼怎则藻
燥枣 皂赠糟藻造蚤怎皂 早则燥憎贼澡 憎葬泽 猿园 益袁 葬灶凿 贼澡藻 燥责贼蚤皂怎皂 贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 燥枣 泽责燥则藻泽 责则燥凿怎糟贼蚤燥灶 憎葬泽 圆缘 益 援 栽澡藻
燥责贼蚤皂怎皂 责匀 憎葬泽 远援 陨灶贼藻则藻泽贼蚤灶早造赠袁 糟燥灶贼蚤灶怎燥怎泽 造蚤早澡贼 糟燥怎造凿 责则燥皂燥贼藻 泽责燥则藻泽 责则燥凿怎糟贼蚤燥灶援 在灶圆 垣 袁 酝灶圆 垣 袁 悦葬圆 垣
葬灶凿 酝早圆 垣 糟燥怎造凿 责则燥皂燥贼藻 皂赠糟藻造蚤怎皂 早则燥憎贼澡袁 遭怎贼 云藻圆 垣 葬灶凿 悦怎圆 垣 憎蚤贼澡 澡蚤早澡 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶泽 糟燥怎造凿 蚤灶澡蚤遭蚤贼 贼澡藻
早则燥憎贼澡 燥枣 皂赠糟藻造蚤怎皂援 酝灶圆 垣 葬灶凿 酝早圆 垣 糟燥怎造凿 责则燥皂燥贼藻 泽责燥则藻泽 责则燥凿怎糟贼蚤燥灶 泽造蚤早澡贼造赠援 悦燥皂责葬则藻凿 憎蚤贼澡 贼澡藻
燥则凿蚤灶葬则赠 泽贼则葬蚤灶泽袁 贼澡藻 栽援 葬泽责藻则藻造造怎皂 糟燥怎造凿 则藻泽蚤泽贼 糟燥造凿 葬灶凿 泽葬造贼援
运藻赠 憎燥则凿泽院 遭蚤燥糟燥灶贼则燥造 泽贼则葬蚤灶曰 蚤泽燥造葬贼蚤燥灶 葬灶凿 泽糟则藻藻灶蚤灶早曰 栽则蚤糟澡燥凿藻则皂葬 葬泽责藻则藻造造怎皂曰 遭蚤燥造燥早蚤糟葬造 糟澡葬则葬糟贼藻则
摇 摇 木霉菌对多种病原微生物引起的病害具有较
好的防治效果咱员暂 袁在生物防治和环境保护等领域具
有巨大的应用前景袁是目前研究最多尧应用最广泛
的生防菌之一咱圆暂 遥 国内外关于利用木霉菌防治植
物病害袁特别是根腐病尧枯萎病尧菌核病和纹枯病等
土传病害的报道很多袁且均取得了良好的防效咱猿暂 遥
目前袁国内对木霉菌的研究主要集中于哈茨木霉
栽则蚤糟澡燥凿藻则皂葬 澡葬则扎蚤葬灶怎皂尧深绿木霉 栽则蚤糟澡燥凿藻则皂葬 葬贼则燥鄄
增蚤则蚤凿藻尧绿色木霉 栽则蚤糟澡燥凿藻则皂葬 增蚤则藻灶泽尧长枝木霉 栽则蚤鄄
糟澡燥凿藻则皂葬 造燥灶早蚤遭则葬糟澡蚤葬贼怎皂尧 黄 绿 木 霉 栽则蚤糟澡燥凿藻则皂葬
葬怎则藻燥增蚤则蚤凿藻和里氏木霉 栽则蚤糟澡燥凿藻则皂葬 则藻藻泽藻蚤 等遥 棘孢
木霉 栽则蚤糟澡燥凿藻则皂葬 葬泽责藻则藻造造怎皂 是 圆园园缘 年我国记录的
木霉菌菌种咱源暂 袁但对其开发利用尚处于起步阶
段咱缘暂 遥 近年来袁棘孢木霉的生防机制引起国内外学
者的广泛关注咱远 原 苑暂 遥 夏伟等咱愿暂分离获得 员 株棘孢木
霉菌株 蕴源袁证实该菌株通过竞争和抗生双重作用可
有效抑制立枯丝核菌菌丝生长遥 悦燥贼曾葬则则藻则葬 等咱怨暂报
道棘孢木霉菌株 栽猿源 能有效防治西红柿枯萎病遥
悦澡藻贼 驭 陨灶遭葬则咱员园暂证实一些木霉菌能够产生 云藻圆 垣螯合
物抑制植物病原菌生长遥 栽燥灶凿躁藻 等咱员员暂发现棘孢木
霉具有防治可可黑荚病的潜力遥
自然条件下袁木霉菌的生长易受光照尧温度尧
责匀尧湿度及化学药剂等环境因子的影响遥 对具有良
好生防潜力的特定菌株进行生物学特性研究袁可明
确其生长和产孢的适宜条件尧生存的极限条件袁以
及在不同基质上的生长和产孢能力遥 长白山是一
座高海拔休眠火山袁其特殊的地理环境使该地区微
生物能在寒冷及高盐的极端环境中生长袁为微生物
在东北地区的应用提供了可能袁因此袁长白山地区
的微生物成为国内外学者研究的热点咱员圆暂 遥 本研究
从长白山土样中分离筛选出一株生防潜力较好的
木霉菌株 栽猿员袁并对其生物学特性进行了研究遥
员 材料与方法
员援 员 材料
供试土样院从吉林省长白山自然生态保护区采
集得到土样 源圆 份袁采用马丁氏鄄孟加拉红培养基进
行木霉菌的分离遥
培养基院分离培养基院马丁氏鄄孟加拉红培养基院
运匀圆孕韵源 缘 早尧酝早杂韵源窑苑匀圆韵 园援 缘 早尧蛋白胨 缘 早尧葡萄糖员园 早尧琼脂 员缘 早尧蒸馏水 员 园园园 皂蕴袁使用前加入 员豫灭
菌孟加拉红水溶液 猿援 猿 皂蕴尧圆园园 皂早 辕 皂蕴 头孢霉素
猿园园 滋蕴遥 生物学特性研究培养基院孕阅粤 培养基曰孕杂粤
培养基曰孕酝粤 培养基曰马丁氏培养基院运匀圆孕韵源 缘 早尧酝早杂韵源窑苑匀圆韵 园援 缘 早尧蛋白胨 缘 早尧葡萄糖 员园 早尧琼脂员缘 早尧蒸馏水 员 园园园 皂蕴曰基本培养基院葡萄糖 圆园 早尧
晕匀源晕韵猿 圆 早尧运圆匀孕韵源 员 早尧酝早杂韵源 园援 缘 早尧琼脂 圆园 早尧蒸
馏水 员 园园园 皂蕴遥
供试病原菌院核盘菌 杂糟造藻则燥贼蚤灶蚤葬 泽糟造藻则燥贼蚤燥则怎皂尧玉
米纹枯病菌 栽澡葬灶葬贼藻责澡燥则怎泽 糟怎糟怎皂藻则蚤泽尧玉米大斑病菌
耘曾泽藻则燥澡蚤造怎皂 贼怎则糟蚤糟怎皂尧 禾谷镰刀菌 云怎泽葬则蚤怎皂 早则葬鄄
皂蚤灶藻葬则怎皂尧玉米灰斑病菌 酝葬早灶葬责燥则贼澡藻 燥则赠扎葬藻尧柑橘炭
疽病菌 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 早造燥糟燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻泽尧人参锈腐病菌
悦赠造蚤灶凿则燥糟葬则责燥灶 凿藻泽贼则怎糟贼葬灶泽尧 尖孢 镰刀 菌 云怎泽葬则蚤怎皂
燥曾赠泽责燥则怎皂尧腐霉菌 孕赠贼澡蚤怎皂怎澡贼蚤皂怎皂 泽责援 以及对照菌
株长枝木霉 栽援 造燥灶早蚤遭则葬糟澡蚤葬贼怎皂袁均由吉林大学植物
科学学院有害生物综合防治实验室提供遥
员援 圆 方法
员援 圆援 员 生防木霉菌的筛选
对峙培养院参照 耘造鄄栽葬则葬遭蚤造赠 等咱员猿暂的方法袁挑取
木霉菌与核盘菌对峙培养相交处菌丝袁置于光学显
微镜下观察袁以只接病原菌作对照袁计算抑菌率遥
抑菌率渊豫 冤 越 渊对照菌落半径 原处理菌落半径冤 辕对
照菌落半径 伊 员园园遥
重寄生作用院于载玻片上制成约 员 皂皂 厚的
孕阅粤培养基膜袁两端分别接种木霉菌和病原菌菌丝
块袁圆愿 益培养 圆源 耀 苑圆 澡袁在光学显微镜下观察并
照相遥
抗生作用院挥发性代谢产物对病原菌的抗生作
用采用对扣培养法咱员源暂 袁病原菌与空白 孕阅粤 平板对
扣培养为对照曰难挥发性代谢产物的抗生作用采用
圆盘滤膜法咱员缘暂 袁以只接种病原菌的 孕阅粤 平板为对
照遥 每处理重复 猿 次袁苑 凿后用十字交叉法测量病原
菌菌落大小袁计算抑菌率遥
员援 圆援 圆 生防木霉菌的鉴定
光学显微镜下观察分生孢子及分生孢子梗形
态遥 木霉菌形态学鉴定参照章初龙和徐同咱员远暂的形
态学描述遥 木霉菌 阅晕粤 提取采用 悦栽粤月 法咱员苑暂 袁对
其 陨栽杂序列进行 孕悦砸扩增袁测定回收产物序列遥 用
酝耘郧粤 源援 园 软件邻接法渊晕藻蚤早澡遭燥则鄄躁燥蚤灶蚤灶早袁晕允冤构建
系统进化树袁确定分类地位遥
员援 圆援 猿 棘孢木霉的生物学特性
于平板渊定量 圆园皂蕴生物学特性培养基冤中央接
种直径 缘 皂皂 棘孢木霉菌饼袁置于 圆愿 益恒温培养遥
缘缘员 期 李摇 琳等院生防棘孢木霉 栽猿员 菌株的分离筛选及其生物学特性
采用 孕阅粤尧孕杂粤尧孕酝粤尧马丁氏和基本培养基曰温度
员缘尧圆园尧圆缘尧猿园 和 猿缘 益下恒温培养曰责匀 分别为 圆尧源尧
远尧愿 和 员园曰全光照尧全黑暗和光照 辕黑暗各 员圆 澡曰等量
云藻杂韵源尧在灶杂韵源尧酝灶杂韵源尧悦葬杂韵源 和 悦怎杂韵源 置换基本培
养基中的 酝早杂韵源袁并设空白对照遥 以上各处理 源愿 澡
后采用十字交叉法测量菌落生长直径作为菌丝生
长状况指标袁苑 凿 后计数分生孢子产量遥 耐寒性渊园尧
圆尧源尧远 和 愿 益下低温胁迫培养冤及耐盐性渊用 晕葬悦造
调节含盐量分别为 圆豫 尧源豫 尧远豫 尧愿豫和 员园豫 冤处理
苑圆 澡后测量菌落生长直径遥 各处理均 猿 次重复遥 分
析时原始数据做如下转换院菌落直径 越测量菌落直
径 原菌饼直径袁孢子数量 越 造早晕袁其中 晕 为用血球计
数器测定的菌落孢子总数遥
员援 猿 数据分析
采用 阅孕杂 增苑援 园缘统计软件进行统计分析袁阅怎灶糟葬灶
氏新复极差法检验处理间差异显著性遥
圆 结果与分析
圆援 员 拮抗木霉菌的筛选结果
圆援 员援 员 对峙培养
从 源圆 份土样中分离尧纯化得到 猿远 株木霉菌菌
株袁编号为 栽员 耀 栽猿远遥 在对峙培养过程中袁对靶标菌
抑制效果最好的是菌株 栽猿员袁对玉米大斑病菌的抑
菌率最大袁为 苑苑援 怨员豫 袁其次是核盘菌尧腐霉菌和镰
刀菌袁对玉米纹枯病菌的抑菌率最低袁为 源源援 源怨豫
渊表 员冤遥 定期观察发现袁木霉菌菌丝能迅速占领生
长空间袁对峙培养 猿 凿 即可观察到对病原菌的拮抗
作用袁病原菌的生长明显受限袁缘 凿后将病原菌包围袁
使之几乎不再生长遥 木霉菌与核盘菌对峙培养时袁
菌丝相交处形成明显淡黄色拮抗区域袁挑取界面处菌
丝在显微镜下观察发现袁病原菌菌丝断裂袁停止生长遥
表 员 菌株 栽猿员 对病原菌的抑制作用
栽葬遭造藻 员 陨灶澡蚤遭蚤贼燥则赠 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 燥枣 栽猿员 泽贼则葬蚤灶 葬早葬蚤灶泽贼 责葬贼澡燥早藻灶蚤糟 枣怎灶早葬造 泽贼则葬蚤灶泽
病原菌
孕葬贼澡燥早藻灶蚤糟 枣怎灶早怎泽
抑菌率 渊豫 冤
陨灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 则葬贼藻
病原菌
孕葬贼澡燥早藻灶蚤糟 枣怎灶早怎泽
抑菌率 渊豫冤
陨灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 则葬贼藻
核盘菌 杂援 泽糟造藻则燥贼蚤燥则怎皂 苑缘援 猿园 依 员援 源源 葬遭 柑橘炭疽病菌 悦援 早造燥糟燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻泽 缘员援 员愿 依 苑援 园园 凿
玉米大斑病菌 耘援 贼怎则糟蚤糟怎皂 苑苑援 怨员 依 圆援 圆源 葬 禾谷镰刀菌 云援 早则葬皂蚤灶藻葬则怎皂 苑园援 远员 依 园援 怨缘 葬遭糟
玉米纹枯病菌 栽援 糟怎糟怎皂藻则蚤泽 源源援 源怨 依 员援 猿远 凿 尖孢镰刀菌 云援 燥曾赠泽责燥则怎皂 远缘援 怨苑 依 员援 园缘 糟
腐霉菌 孕赠贼澡蚤怎皂怎澡贼蚤皂怎皂 泽责援 苑源援 猿怨 依 猿援 愿员 葬遭糟 人参锈腐病菌 悦援 凿藻泽贼则怎糟贼葬灶泽 缘圆援 猿愿 依 圆援 怨远 凿
摇 摇 表中数据为平均数 依标准误遥 数据后不同字母表示经 阅怎灶糟葬灶氏新复极差法检验在 孕 约 园援 园缘水平差异显著遥 阅葬贼葬 葬则藻 皂藻葬灶 依 杂耘援
阅蚤枣枣藻则藻灶贼 造藻贼贼藻则泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 孕 约 园援 园缘 造藻增藻造 遭赠 阅怎灶糟葬灶爷泽 灶藻憎 皂怎造贼蚤责造藻 则葬灶早藻 贼藻泽贼援
圆援 员援 圆 木霉菌代谢产物对病原菌的抗生作用
木霉菌挥发性代谢产物对核盘菌防效最高袁抑
菌率达 苑缘援 猿园豫 曰镰刀菌次之曰玉米大斑病菌和腐霉
菌较低袁抑菌率分别为 缘源援 远圆豫和 源远援 怨猿豫 曰对柑橘
炭疽病菌尧玉米纹枯病菌尧人参锈腐病菌无明显抗
生作用遥 难挥发性代谢产物对玉米大斑病菌尧腐霉
菌和镰刀菌防效均较好袁对人参锈腐病菌抑菌率最
低袁仅为 猿源援 远苑豫 渊表 圆冤遥 与对照相比袁难挥发性代
谢产物处理玉米大斑病菌后袁处理菌落菌丝生长明
显受到抑制袁菌落生长畸形袁颜色变淡遥
表 圆 菌株 栽猿员 代谢产物对病原菌的抑菌率
栽葬遭造藻 圆 耘枣枣藻糟贼 燥枣 贼澡藻 栽猿员 泽贼则葬蚤灶 葬灶贼蚤遭蚤燥贼蚤糟泽 燥灶 贼澡藻 则葬凿蚤怎泽 燥枣 责葬贼澡燥早藻灶泽
病原菌
孕葬贼澡燥早藻灶蚤糟 枣怎灶早怎泽
挥发性代谢产物
灾燥造葬贼蚤造藻 葬灶贼蚤遭蚤燥贼蚤糟
难挥发性代谢产物
晕燥灶鄄增燥造葬贼蚤造藻 葬灶贼蚤遭蚤燥贼蚤糟
核盘菌 杂援 泽糟造藻则燥贼蚤燥则怎皂 苑缘援 猿园 依 员援 源源 葬 源怨援 园园 依 员援 苑猿 遭
玉米大斑病菌 耘援 贼怎则糟蚤糟怎皂 缘源援 远圆 依 圆援 圆源 糟 远愿援 怨圆 依 员援 圆园 葬
腐霉菌 孕赠贼澡蚤怎皂怎澡贼蚤皂怎皂 泽责援 源远援 怨猿 依 圆援 苑怨 凿 远怨援 员缘 依 圆援 愿员 葬
禾谷镰刀菌 云援 早则葬皂蚤灶藻葬则怎皂 远源援 苑苑 依 员援 员源 遭 苑园援 员苑 依 猿援 猿圆 葬
尖孢镰刀菌 云援 燥曾赠泽责燥则怎皂 远苑援 猿圆 依 圆援 怨苑 遭 远圆援 猿员 依 猿援 员源 葬
人参锈腐病菌 悦援 凿藻泽贼则怎糟贼葬灶泽 要 猿源援 远苑 依 源援 猿远 糟
柑橘炭疽病菌 悦援 早造燥糟燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻泽 要 要
玉米纹枯病菌 栽援 糟怎糟怎皂藻则蚤泽 要 要
摇 摇 表中数据为平均数 依标准误遥 同列数据后不同字母表示经 阅怎灶糟葬灶氏新复极差法检验在 孕 约 园援 园缘水平差异显著遥 阅葬贼葬 葬则藻 皂藻葬灶 依
杂耘援 阅蚤枣枣藻则藻灶贼 造藻贼贼藻则泽 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 糟燥造怎皂灶 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 孕 约 园援 园缘 造藻增藻造 遭赠 阅怎灶糟葬灶爷泽 灶藻憎 皂怎造贼蚤责造藻 则葬灶早藻 贼藻泽贼援
远缘 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源员 卷
圆援 员援 猿 木霉菌重寄生作用
菌株 栽猿员 对玉米灰斑病菌的重寄生现象比较明
显袁菌丝主要通过螺旋缠绕等方式寄生于病原菌菌
丝袁吸取病原菌菌丝养分袁使其变细袁发生断裂尧消
解渊图 员冤遥
圆援 圆 菌株 栽猿员 的鉴定
圆援 圆援 员 形态学观察
木霉菌株 栽猿员 分生孢子呈圆形或卵形袁大小 圆 耀
源滋皂袁分生孢子梗对生生长袁主分枝呈树状袁瓶梗短袁
基部变细袁中间膨大袁呈安培瓶状袁底部瓶梗较顶部
长渊图 圆冤遥
圆援 圆援 圆 分子生物学鉴定
从系统进化树可以看出袁菌株 栽猿员 与棘孢木霉
序列的同源性较高袁为 怨愿豫 袁结合形态和培养特征
鉴定菌株 栽猿员 为棘孢木霉 栽援 葬泽责藻则藻造造怎皂渊图 猿冤遥
图 员 菌株 栽猿员 对玉米灰斑病菌重寄生作用
云蚤早援 员 栽澡藻 澡赠责藻则责葬则葬泽蚤贼蚤泽皂 燥枣 栽猿员 泽贼则葬蚤灶 葬早葬蚤灶泽贼 酝葬早灶葬责燥则贼澡藻 燥则赠扎葬藻
图 圆 光学显微镜下菌株 栽猿员 的形态学特征
云蚤早援 圆 酝燥则责澡燥造燥早蚤糟 糟澡葬则葬糟贼藻则泽 燥枣 栽猿员 泽贼则葬蚤灶 怎灶凿藻则 造蚤早澡贼 皂蚤糟则燥泽糟燥责藻
摇 摇 葬院分生孢子曰遭院分生孢子梗遥 葬院 悦燥灶蚤凿蚤葬曰 遭院 糟燥灶蚤凿蚤燥责澡燥则藻泽援
圆援 猿 棘孢木霉的生物学特性
培养基院棘孢木霉在 缘 种供试培养基上均可生
长袁孕阅粤培养基是最适生长培养基袁菌丝紧密袁呈辐
射状生长袁培养 源愿 澡 菌丝直径达 远援 猿猿 糟皂袁苑圆 澡 菌丝
即能长满全皿曰其次是 孕杂粤 培养基袁与 孕阅粤 培养基
无显著差异袁菌丝生长较快曰孕酝粤 培养基和马丁氏
培养基次之曰基本培养基最差袁菌丝生长缓慢且稀
疏袁逐渐变黄袁源愿 澡菌丝仅生长 源援 愿猿 糟皂遥 孕阅粤 培养
基上产孢量最大袁高达 猿援 缘园 伊 员园苑 个袁显著高于其它
源 种培养基袁孢子生成速度最快且分布密集曰孕杂粤 培
养基和马丁氏培养基次之袁两者无显著差异曰基本
培养基产孢量最少袁为 圆援 园愿 伊 员园远 个遥
温度院菌株 栽猿员 菌丝适宜生长温度范围为 圆缘 耀
猿园 益袁低于 圆园 益或高于 猿缘 益时袁生长缓慢袁猿园 益为
菌丝最适生长温度袁接种 源愿 澡后菌落直径达 远援 苑苑 糟皂曰
圆缘 益为最适产孢温度袁苑 凿后产孢量达 愿援 愿猿 伊 员园苑 个
渊表 猿冤遥
责匀院菌株 栽猿员 在强酸尧强碱的情况下袁菌丝生长
严重受阻袁且产孢量较少遥 责匀 远 时菌丝生长最快且
产孢量最大袁源愿 澡菌落直径达 远援 苑园 糟皂袁苑 凿 后产孢量
达 怨援 园园 伊员园苑 个袁说明该菌株生长和产孢喜好偏酸
性的条件渊表 猿冤遥
光照院光照条件对木霉菌菌丝的生长影响不
大袁处理间差异不显著遥 但持续光照对产孢具有显
著促进作用袁产孢量最高可达 怨援 园园 伊 员园苑 个袁与其它
两个处理相比差异显著渊图 源冤遥
微量元素院在灶圆 垣 尧酝灶圆 垣 尧悦葬圆 垣和 酝早圆 垣可促进菌
株 栽猿员 菌丝生长袁但高浓度的 云藻圆 垣和 悦怎圆 垣可抑制菌丝
生长遥 酝灶圆垣和 酝早圆 垣对木霉菌产孢有轻微促进作用袁
在灶圆 垣 尧悦葬圆 垣和悦怎圆垣对分生孢子产生具有抑制作用渊图源冤遥
苑缘员 期 李摇 琳等院生防棘孢木霉 栽猿员 菌株的分离筛选及其生物学特性
图 猿 菌株 栽猿员 系统发育树
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表 猿 温度尧责匀对菌株 栽猿员 菌丝生长和产孢量的影响
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温度 渊益冤
栽藻皂责藻则葬贼怎则藻
菌落直径 渊糟皂冤
悦燥造燥灶赠 凿蚤葬皂藻贼藻则
产孢量对数值
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菌落直径 渊糟皂冤
悦燥造燥灶赠 凿蚤葬皂藻贼藻则
产孢量对数值
悦燥皂皂燥灶 造燥早葬则蚤贼澡皂 燥枣 泽责燥则怎造葬贼蚤燥灶
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圆缘 远援 远园 依 园援 员园 葬 苑援 怨源 依 园援 园远 葬 远 远援 苑园 依 园援 园员 葬 苑援 怨缘 依 园援 园猿 葬
猿园 远援 苑苑 依 园援 员愿 葬 苑援 苑愿 依 园援 园缘 葬遭 愿 远援 员猿 依 园援 园苑 遭 苑援 缘园 依 园援 员远 遭
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摇 摇 表中数据为平均数 依标准误遥 同列数据后不同字母表示经 阅怎灶糟葬灶氏新复极差法检验在 孕 约 园援 园缘水平差异显著遥 阅葬贼葬 葬则藻 皂藻葬灶 依
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摇 摇 耐寒性院菌株 栽猿员 与本实验室分离的长枝木霉
相比袁在耐寒性方面更具优势遥 园 益时菌株 栽猿员 菌
丝能够缓慢生长袁而长枝木霉生长几乎停止遥 愿 益
以下袁棘孢木霉耐低温能力更强遥
耐盐性院含盐量 圆豫 耀 员园豫的高盐条件下袁菌株
栽猿员 仍可缓慢生长袁而长枝木霉 苑圆 澡 后菌丝停止生
长遥 即菌株 栽猿员 可适应高盐环境袁具有一定的耐
盐性遥
猿 讨论
木霉菌对病原菌的拮抗作用主要依靠竞争尧重
寄生和抗生作用等多种协同作用机制产生遥 例如袁
木霉菌缠绕尧贴附病原菌菌丝袁产生重寄生作用曰同
时产生抗生物质袁通过空间竞争和营养竞争抑制周
边微生物的生长遥 另外袁木霉菌产生的挥发性和难
挥发性抗菌次生代谢产物多达几百种咱员愿暂 袁经证实袁
产生抗生作用的物质基础主要是一些难挥发性代
谢产物遥 目前袁国内利用棘孢木霉防治玉米大斑病
菌尧核盘菌的研究较少袁本研究从长白山自然保护
区土样中筛选到棘孢木霉菌株 栽猿员袁并证实其具有
较好生防潜力遥
国内外关于木霉菌生物学特性方面的研究较
多袁本研究分离筛选得到的棘孢木霉菌株 栽猿员 的适
宜培养基尧责匀 和光照条件等基本与前人的报道一
致遥 但纪明山等咱员怨暂报道木霉菌的最优培养基为基
本培养基袁而本研究结果表明袁孕阅粤 培养基是菌株
栽猿员 最适生长及产孢培养基遥 微量元素试验结果表
明袁在灶圆 垣 尧酝灶圆 垣 尧悦葬圆 垣和 酝早圆 垣可促进菌株 栽猿员 菌丝
生长袁这与纪明山等咱员怨暂 尧柯仿钢等咱圆园暂的研究结果基
本一致袁但与朱茂山等咱圆员暂的 在灶 和 酝灶 不利于菌丝
生长和产孢袁而 悦葬尧酝早尧悦怎 促进菌丝生长和产孢的
试验结果略有差异遥 另外袁本研究还发现 酝灶圆 垣 和
愿缘 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源员 卷
图 源 不同光照条件渊葬冤和微量元素渊遭冤对 栽猿员 菌株生长及产孢的影响
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酝早圆 垣对棘孢木霉菌株 栽猿员 产孢有轻微促进作用袁而
在灶圆 垣 尧悦葬圆 垣 尧悦怎圆 垣可抑制分生孢子的产生袁这与前人
的研究略有差异咱圆圆暂 遥
本研究发现袁棘孢木霉菌株 栽猿员 在寒冷环境中
菌丝生长速度较普通菌株快袁在东北较为寒冷的气
候条件下仍可保持活性袁这可能与本研究所用菌株
分离自极端生态环境的长白山自然保护区土样有
关遥 长白山地区海拔高尧生态系统比较完整尧植物
和微生物种类繁多袁生境的特殊性决定了分离自该
地区的木霉菌在生物学特性等方面存在特异性遥
高盐条件下袁普通木霉菌生长减缓甚至不生长袁而
菌株 栽猿员 能够缓慢生长袁表明该菌株具有一定的耐
盐性遥 有研究报道袁在含盐等逆境条件下具有活性
的木霉菌可产生大量代谢产物尧水溶性蛋白质及氨
基酸袁可提高木霉菌的生防潜力咱圆猿暂 遥 低温尧盐渍化
等逆境条件对拮抗木霉菌生防效果的影响存在许
多复杂的因素袁仍需进一步研究遥 本研究对分离筛
选得到的棘孢木霉菌株 栽猿员 的生物学特性进行了研
究袁不仅可以摸索出当地木霉菌菌株生长和产孢的
最适条件袁同时也可为木霉菌在东北地区的推广应用
提供依据遥
参 考 文 献渊砸藻枣藻则藻灶糟藻泽冤
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菌的拮抗作用机制和温室防治试验援 植物保护学报袁 圆园园源袁
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怨缘员 期 李摇 琳等院生防棘孢木霉 栽猿员 菌株的分离筛选及其生物学特性
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咱员怨暂 纪明山袁 李博强袁 陈捷袁 等援 绿色木霉 栽砸鄄愿菌株的生物学
特性研究援 沈阳农业大学学报袁 圆园园源袁 猿缘渊猿冤院 员怨缘 原 员怨怨
咱圆园暂 柯仿钢袁 黄思良袁 付岗袁 等援 西贡蕉枯萎病生防木霉菌株
早扎鄄圆的鉴定及生物学特性研究援 西南农业学报袁 圆园员园袁 圆猿
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咱圆员暂 朱茂山袁 关天舒袁 蔡大旺袁 等援 生防木霉菌 栽源员 菌株生物
学特性研究援 沈阳农业大学学报袁 圆园园愿袁 猿怨渊员冤院 员怨 原 圆猿
咱圆圆暂 王斌袁 粤造蚤 运 月袁刘金亮袁等援 长枝木霉 栽陨悦悦鉴定及其生物
学特性研究援 中国农学通报袁 圆园员员袁 圆苑渊缘冤院 猿猿愿 原 猿源缘
咱圆猿暂 林振亚袁 马佳袁 陈捷袁 等援 盐分对生防木霉菌株 杂匀圆猿园猿的
影响援 上海交通大学学报渊农业科学版冤袁 圆园员圆袁 猿园渊缘冤院
缘员 原 缘源
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