全 文 ：植物病理学报
ＡＣＴＡ ＰＨＹＴＯＰＡＴＨＯＬＯＧＩＣＡ ＳＩＮＩＣＡ　 ４５(４): ３６１￣３６９(２０１５)
收稿日期: ２０１４￣０６￣０６ꎻ 修回日期: ２０１５￣０３￣１４
基金项目: 公益性行业 (农业)科研专项经费资助 ( ２０１００３０６５)ꎻ国家自然科学基金资助项目 ( ３１１００３６６)ꎻ江苏省自然科学基金
(ＢＫ２０１１２７０)ꎻ江苏省农业科技自主创新资金项目[ＣＸ(１２)５００３]
通讯作者: 周益军ꎬ研究员ꎬ主要从事植物病毒研究ꎻＴｅｌ:０２５￣８４３９０３９１ꎬＥ￣ｍａｉｌ:ｙｊｚｈｏｕ＠ ｊａａｓ.ａｃ.ｃｎ
共同第一作者: 张 晖ꎬ女ꎬ硕士研究生ꎬ主要从事粉虱传双生病毒研究ꎻ
季英华ꎬ男ꎬ助理研究员ꎬ主要从事粉虱传双生病毒研究ꎻＴｅｌ:０２５－８４３９０３９４ꎬＥ￣ｍａｉｌ:ｊｉｙｉｎｇｈｕａ＠ ｊａａｓ.ａｃ.ｃｎꎮ
ｄｏｉ:１０.１３９２６ / ｊ.ｃｎｋｉ.ａｐｐｓ.２０１５.０４.００４
江苏朱槿上分离到的木尔坦棉花曲叶病毒
基因组结构特征分析
张 晖１＃ꎬ 季英华２＃ꎬ 吴淑华２ꎬ 赵文浩２ꎬ 周 彤２ꎬ 周益军１ꎬ２∗
( １南京农业大学植物保护学院ꎬ南京 ２１００９５ꎻ ２江苏省农业科学院植物保护研究所ꎬ南京 ２１００１４)
摘要:２０１２年 ５月ꎬ江苏南京朱槿上出现一种新的病毒病害ꎬ病株表现明显的叶片上卷、叶脉肿大、叶背伴有耳突、植株矮缩
等症状ꎮ 根据其症状及介体发生状况ꎬ对其伴随的病毒种类进行研究ꎬ结果发现采集的 ４６ 份典型症状样品体内均可以检
测到粉虱传双生病毒ꎬ对其基因组 ＤＮＡ￣Ａ组分克隆测序后发现其全长 ２ ７３６ ｂｐꎬ编码 ６个 ＯＲＦꎬＢＬＡＳＴ分析显示该病毒与
木尔坦棉花曲叶病毒同源性最高(９９.９％)ꎬ是木尔坦棉花曲叶病毒的一个分离物ꎮ 病样中同时还检测到伴随 ＤＮＡβ卫星分
子ꎬ测序结果显示该卫星全长 １ ３４６ ｂｐꎬ编码 １个 ＯＲＦꎬＢＬＡＳＴ及聚类分析结果显示该 β卫星与木尔坦棉花曲叶病毒 β卫星
同源性最高(９９.７％)ꎬ为木尔坦棉花曲叶病毒 β卫星的一个分离物ꎮ 这是木尔坦棉花曲叶病毒首次在长江流域的报道ꎮ
关键词:木尔坦棉花曲叶病毒ꎻ 朱槿ꎻ β卫星ꎻ 江苏
Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ ｆｒｏｍ Ｈｉｂｉｓｃｕｓ
ｒｏｓａ￣ｓｉｎｅｎｓｉｓ ｉｎ Ｊｉａｎｇｓｕ 　 ＺＨＡＮＧ Ｈｕｉ１ꎬ ＪＩ Ｙｉｎｇ￣ｈｕａ２ꎬ ＷＵ Ｓｈｕ￣ｈｕａ２ꎬ ＺＨＡＯ Ｗｅｎ￣ｈａｏ２ꎬ ＺＨＯＵ
Ｔｏｎｇ２ꎬ ＺＨＯＵ Ｙｉ￣ｊｕｎ２ 　 ( １Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｐｌａｎｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎꎬ Ｎａｎｊｉｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ Ｎａｎｊｉｎｇ ２１００９５ꎬ Ｃｈｉｎａꎻ ２ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ
ｏｆ Ｐｌａｎｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎꎬ Ｊｉａｎｇｓｕ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓꎬ Ｎａｎｊｉｎｇ ２１００１４ꎬ Ｃｈｉｎａ)
Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ａ ｎｅｗ ｖｉｒｕｓ ｄｉｓｅａｓｅ ｏｎ Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｒｏｓａ￣ｓｉｎｅｎｓｉｓ ｗａｓ ｆｏｕｎｄ ｉｎ Ｎａｎｊｉｎｇꎬ Ｊｉａｎｇｓｕ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ ｉｎ ｍａｙ ２０１２.
Ｔｙｐｉｃａｌ ｓｙｍｐｔｏｍｓ ｌｉｋｅ ｌｅａｆ ｃｕｒｌｉｎｇꎬ ｖｅｉｎ ｓｗｅｌｌｉｎｇ ａｎｄ ｅｎａｔｉｏｎｓ ｏｎ ｔｈｅ ｕｎｄｅｒｓｉｄｅｓ ｏｆ ｌｅａｖｅｓ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｏｎ ｔｈｅ
ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｐｌａｎｔｓ. Ｂａｓｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｓｙｍｐｔｏｍ ａｎｄ ｔｈｅ ｖｅｃｔｏｒ ｏｃｃｕｒｒｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｆｉｅｌｄｓꎬ ｔｈｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｖｉｒｕｓ ｗａｓ ｓｔｕｄｉｅｄ ａｎｄ
ａ ｗｈｉｔｅｆｌｙ￣ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄ ｇｅｍｉｎｖｉｒｕｓ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｆｕｌｌ ｌｅｎｇｔｈ ｏｆ ＤＮＡ￣Ａ ｗａｓ ｃｌｏｎｅｄ ａｎｄ ｓｅｑｕｅｎｃｅｄ. Ｔｈｅ
ｇｅｎｏｍｅ ｏｆ ＤＮＡ￣Ａ (２ ７３６ ｂｐ) ｅｎｃｏｄｅｄ ６ ＯＲＦｓ ａｎｄ ｓｈａｒｅｄ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ ｉｄｅｎｔｉｔｙ (９９.９％) ｗｉｔｈ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ
Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓꎬ ｗｈｉｃｈ ｃｏｎｆｉｒｍｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｖｉｒｕｓ ｗａｓ ａｎ ｉｓｏｌａｔｅ ｏｆ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ. Ｂｅｓｉｄｅｓ ＤＮＡ￣Ａꎬ
ａ ＤＮＡβ ｗａｓ ａｌｓｏ ｄｅｔｅｃｔｅｄ. Ｔｈｅ ｇｅｎｏｍｅ ｏｆ ＤＮＡβ (１ ３４６ ｂｐ) ｅｎｃｏｄｅｄ １ ＯＲＦ ａｎｄ ｓｈａｒｅｄ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ ｉｄｅｎｔｉｔｙ
(９９.７％) ｗｉｔｈ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅꎬ ｗｈｉｃｈ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ ｗａｓ ａｎ ｉｓｏｌａｔｅ ｏｆ Ｃｏｔｔｏｎ
ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ. Ｔｏ ｏｕｒ ｋｎｏｗｌｅｄｇｅꎬ ｔｈｉｓ ｉｓ ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ ｒｅｐｏｒｔ ｏｆ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ ｏｃｃｕｒｒｅｄ
ｉｎ Ｙａｎｇｔｚｅ Ｒｉｖｅｒ Ｂａｓｉｎ.
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓꎻ Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｒｏｓａ￣ｓｉｎｅｎｓｉｓꎻ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅꎻ Ｊｉａｎｇｓｕ
中图分类号: Ｓ４３２.４１　 　 　 　 　 文献标识码: Ａ　 　 　 　 　 文章编号: ０４１２￣０９１４(２０１５)０４￣０３６１￣０９
　 　 木尔坦棉花曲叶病毒(Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ
ｖｉｒｕｓꎬ ＣＬＣｕＭｕＶ)是一种重要的粉虱传双生病毒ꎬ
属于双生病毒科(Ｇｅｍｉｎｉｖｉｒｉｄａｅ)菜豆金色花叶病
毒属 ( Ｂｅｇｏｍｏｖｉｒｕｓ) 成员ꎬ是引起棉花曲叶病
　
植物病理学报 ４５卷
(Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ ｄｉｓｅａｓｅꎬ ＣＬＣｕＤ)的重要病原之
一[１~３]ꎮ ＣＬＣｕＭｕＶ最早在巴基斯坦木尔坦地区发
现[３]ꎬ之后该病毒扩散到巴基斯坦其他地区及印
度等地[４]ꎮ 由 ＣＬＣｕＭｕＶ 及其它相关病毒侵染
(或复合侵染)导致的棉花曲叶病在印度及巴基斯
坦等地爆发ꎬ使当地的棉花产业损失惨重ꎮ 仅
１９９２~１９９７年ꎬ该病在巴基斯坦造成 ５０ 亿美元的
经济损失ꎮ 该病的蔓延发生直接威胁印度及东南
亚的棉花生产[２ꎬ３]ꎮ
　 　 ＣＬＣｕＭｕＶ病毒粒体为典型的孪生颗粒状ꎬ大
小(１８ ~ ２０) ｎｍ × ３０ ｎｍꎬ基因组结构为单链环状
ＤＮＡ(ｓｓＤＮＡ)ꎬ含有 ＤＮＡ￣Ａ组分同时伴随一个卫
星分子ꎮ ＤＮＡ￣Ａ组分大小 ２.７ ~ ２.８ ｋｂꎬ含有 ６ 个
ＯＲＦꎬ分别编码 Ｖ１ ( Ｃａｐｓｉｄ ｐｒｏｔｅｉｎꎬ ＣＰ )、 Ｖ２
(Ｍｏｖｅｍｅｎｔ ｐｒｏｔｅｉｎꎬ ＭＰ)、Ｃ１(Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｉｎｉｔｉａｔｏｒ
ｐｒｏｔｅｉｎꎬ Ｒｅｐ)、Ｃ２(Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ ａｃｔｉｖａｔｏｒ ｐｒｏｔｅｉｎꎬ
ＴｒＡＰ)、Ｃ３(Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｉｎｉｔｉａｔｏｒ ｐｒｏｔｅｉｎꎬ Ｒｅｎ)和 Ｃ４
蛋白ꎮ ＤＮＡβ 卫星大小约 １.３ ｋｂꎬ含有 １ 个 ＯＲＦꎬ
编码 βＣ１蛋白ꎮ ＤＮＡβ卫星的复制及传播扩散依
赖 ＤＮＡ￣Ａ组分完成[５ꎬ６]ꎮ
　 　 在我国 ＣＬＣｕＭｕＶ最早于 ２００６年在广东省广
州市首次出现发生危害的报道[７]ꎬ之后陆续蔓延
至广东其他地区及广西[８]、福州[９]等地ꎮ 其危害
寄主包括朱槿[１０]、黄秋葵[１１ꎬ１２]、悬铃花[１３] 及棉
花[１４]等ꎮ
　 　 朱槿(Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｒｏｓａ￣ｓｉｎｅｎｓｉｓ)又称扶桑、大红花
等ꎬ属于锦葵科木槿属(与棉花同科)ꎬ在我国广东、
广西(南宁市花)、海南、福建等地主要作为绿化树木
大面积种植ꎮ 近年随着暖冬等气候变化及设施农业
的发展ꎬ江苏省也将朱槿作为观赏及绿化苗木陆续
栽培ꎮ ２０１２年 ５月ꎬ在南京当地种植的朱槿上发现
典型曲叶病症状ꎬ病株叶片上卷、叶脉肿胀、叶背伴
有耳突ꎮ 本文对其伴随病毒进行了相关研究ꎮ
１　 材料与方法
１.１　 病样采集
　 　 病样于 ２０１２年 ５月采自江苏省南京市发病朱
槿ꎬ样品表现明显的叶片上卷、叶脉肿大、叶背伴有
耳突等症状ꎮ
１.２　 ＤＮＡ提取
　 　 采用碱裂解法提取病样总 ＤＮＡ[１５]ꎬ作为 ＰＣＲ
模板ꎮ
１.３　 粉虱传双生病毒检测
　 　 根据双生病毒基因组间隔区及外壳蛋白保守
序 列 设 计 引 物 ＰＡ ( ５′￣ＴＡＡＴＡＴＴＡＣＣＫＧ￣
ＷＫＧＶＣＣＳＣ￣３′)和 ＰＢ(５′￣ＴＧＧＡＣＹＴＴＲＣＡＷＧＧ￣
ＢＣＣＴＴＣＡＣＡ￣３′) [１６]进行 ＰＣＲ 扩增(Ｒ ＝ Ａ / ＧꎬＷ
＝Ａ / ＴꎬＳ＝Ｇ / ＣꎬＹ＝Ｃ / ＴꎬＫ＝Ｇ / ＴꎬＶ＝Ａ / Ｇ / ＣꎬＢ＝
Ｇ / Ｃ / Ｔ)ꎮ ＰＣＲ反应体系:１０×ＰＣＲ反应缓冲液(含
Ｍｇ２＋)２.５ μＬ、ｄＮＴＰ(１０ ｍｍｏｌ / Ｌ)０.５ μＬ 、５′端引
物(１０ μｍｏｌ / Ｌ)１.５ μＬ、３′端引物(１０ μｍｏｌ / Ｌ)１.５
μＬ、Ｔａｑ酶 ０.５ μＬ、模板 ＤＮＡ １.５ μＬꎬ加双蒸水定
容 ２５ μＬꎮ 扩增条件:９４℃预变性 ５ ｍｉｎꎻ９４℃变性
４５ ｓꎬ５０℃退火 ４５ ｓꎬ７２℃延伸 １ ｍｉｎꎬ５ 个循环ꎻ
９４℃变性 ４５ ｓꎬ５５℃退火 ４５ ｓꎬ７２℃延伸 １ ｍｉｎꎬ３０
个循环ꎻ７２℃继续延伸 １０ ｍｉｎꎮ
　 　 ＰＣＲ产物经 １％琼脂糖凝胶ꎬ０.５×ＴＡＥ 缓冲液
和 １５０ Ｖ电压下电泳ꎬ０.５ μｇ / ｍＬ 溴化乙锭(ＥＢ)
染色 １５ ｍｉｎ后于凝胶成像系统中观察ꎮ 选取代表
性样品 ＰＣＲ扩增产物(约 ５００ ｂｐ)进行序列测定ꎮ
１.４　 ＤＮＡ￣Ａ组分的克隆
　 　 根据引物 ＰＡ / ＰＢ测定的部分序列ꎬ设计背靠背
特异引物 ＣＬ＿１Ａ＿ＢＦ(５′￣ＡＴＧＴＧＧＧＡＴＣＣＡＴＴＧＴ￣
ＴＡＡＡＣＧＡＡＴＴＴＣＣ￣３′)和 ＣＬ ＿ １Ａ ＿ ＫＲ ( ５′￣ＧＧＧ￣
ＧＴＡＣＣＧＴＴＴＧＡＡＴＴＴＧＡＡＡＣＴＴＡＧＴＧＣＧＣ￣３′) 扩
增 ＤＮＡ￣Ａ 全长ꎬ ＰＣＲ 扩增条件为 ９４℃ 预变性
５ ｍｉｎꎻ９４℃变性 １ ｍｉｎꎬ５７℃退火 １ ｍｉｎꎬ７２℃延伸
３.５ ｍｉｎꎬ３５个循环ꎻ７２℃继续延伸 １０ ｍｉｎꎮ
　 　 ＰＣＲ扩增产物经 １％琼脂糖凝胶电泳ꎬ由 Ａｘｙ￣
ｇｅｎ ＤＮＡ凝胶回收试剂盒分离纯化ꎬ回收产物连
接 ＰＭＤ１８￣Ｔ载体(参照试剂盒使用说明操作)ꎬ热
击法转化大肠杆菌 ＤＨ５αꎬ挑选阳性克隆ꎬ进行序
列测定ꎮ
１.５　 ＤＮＡβ卫星的检测及克隆
　 　 利用引物 β１(５′￣ＧＧＴＡＣＣＡＣＴＡＣＧＣＴＡＣＧ￣
ＣＡＧＣＡＧＣＣ￣３′) 和 β２ ( ５′￣ＧＧＴＡＣＣＴＡＣＣＣＴＣ￣
ＣＣＡＧＧＧＧＴＡＣＡＣ￣３′) [１７]检测样品中是否存在
ＤＮＡβ卫星分子ꎬＰＣＲ 扩增条件为 ９４℃预变性
５ ｍｉｎꎻ９４℃变性 ４５ ｓꎬ６０℃退火 ４５ ｓꎬ７２℃延伸
９０ ｓꎬ３０个循环ꎻ７２℃继续延伸 １０ ｍｉｎꎮ
　 　 ＰＣＲ扩增产物经 １％琼脂糖凝胶电泳后回收
２６３
　
　 ４期 张 晖ꎬ等:江苏朱槿上分离到的木尔坦棉花曲叶病毒基因组结构特征分析
连接 ｐＭＤ１８￣Ｔ 载体ꎬ筛选阳性克隆ꎬ进行序列
测定ꎮ
１.６　 序列测定及分析
　 　 序列测定委托南京金斯瑞生物工程技术服务
有限公司完成ꎬ测序结果利用软件 ＤＮＡＳｔａｒ 进行
拼接及序列同源性分析ꎬ序列多重比对使用
ＣｌｕｓｔａｌＸ软件完成ꎬ聚类分析及进化树构建采用
ＭＥＧＡ５软件的邻接法(Ｎｅｉｇｈｂｏｒ￣ｊｏｉｎｉｎｇ)完成ꎬ进
化树的可信度使用 １ ０００次自导复制验证[１８]ꎮ
２　 结果与分析
２.１　 病样采集及检测结果
　 　 ２０１２年 ５ 月ꎬ江苏南京朱槿上出现一种病毒
病ꎬ染病植株表现明显的叶片边缘上卷ꎬ叶脉肿大ꎬ
叶背面伴有耳突等症状(图 １)ꎮ 该病 ２０１２ 年仅零
星发生ꎬ２０１３ 年调查时发现原发病区种植的朱槿
都表现明显的病害症状ꎬ有些病株甚至出现典型的
矮化症状ꎮ
　 　 该病常伴随烟粉虱发生ꎬ推测与粉虱传双生病
毒有关ꎮ 利用粉虱传双生病毒通用引物( ＰＡ 和
ＰＢ)ꎬ对 ２０１２年采集的 ４６ 份样品进行检测ꎬ结果
显示ꎬ所有样品均检测到阳性条带(约 ５００ ｂｐ)ꎮ
对阳性样品 ＰＣＲ 产物纯化后进行序列测定ꎬ结果
表明分离物之间的同源性非常高ꎬ超过 ９９％ꎬ说明
江苏省朱槿曲叶病可能与粉虱传双生病毒相关ꎮ
２.２　 ＪＳ￣Ｈｉ￣３ ＤＮＡ￣Ａ 组分基因组结构及其聚类
分析
　 　 根据粉虱传双生病毒基因组结构特征ꎬ结合
ＰＡ和 ＰＢ扩增产物测序结果ꎬ设计引物(ＣＬ＿１Ａ＿
ＢＦ和 ＣＬ＿１Ａ＿ＫＲ)扩增 ＤＮＡ￣Ａ组分全长ꎬ选取代
表性分离物 ＪＳ￣Ｈｉ￣３ ＤＮＡ为模板ꎬ利用该引物进行
ＰＣＲ扩增ꎬ扩增到大小约 ２.７ ｋｂ 的特异条带(图
２)ꎬ将该条带回收后连接 ｐＭＤ１８￣Ｔ 载体ꎬＰＣＲ 法
筛选阳性克隆ꎬ测定序列ꎮ
Ｆｉｇ. １　 Ｓｙｍｐｔｏｍｓ ｏｆ ｉｎｆｅｃｔｅｄ Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｒｏｓａ￣ｓｉｎｅｎｓｉｓ (ｒｉｇｈｔ) ｃｏｍｐａｒｅｄ
ｗｉｔｈ ａ ｈｅａｌｔｈｙ ｏｎｅ ( ｌｅｆｔ) ｉｎ Ｎａｎｊｉｎｇꎬ Ｊｉａｎｇｓｕ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ
Ｆｉｇ. ２　 ＰＣＲ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ＤＮＡ￣Ａ ａｎｄ ＤＮＡβ ｆｒｏｍ ＪＳ￣Ｈｉ￣３
Ｍ: ＤＮＡ ＭａｒｋｅｒⅢꎻ ＤＮＡ￣Ａ: ＰＣＲ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｗｉｔｈ ｐｒｉｍｅｒｓ ＣＬ＿１Ａ＿ＢＦ/ ＣＬ＿１Ａ＿ＫＲꎻ ＤＮＡβ: ＰＣＲ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｗｉｔｈ ｐｒｉｍｅｒｓ β１/ β２.
３６３
　
植物病理学报 ４５卷
　 　 序列测定结果显示ꎬＪＳ￣Ｈｉ￣３ 分离物 ＤＮＡ￣Ａ
(ＪＳ￣Ｈｉ￣３￣Ａ)全长 ２ ７３６ ｂｐꎬ编码 ６ 个 ＯＲＦ 和一个
ＩＲ区ꎬ其中正义链编码 Ｖ１ 及 Ｖ２ 蛋白ꎬ反义链编
码 Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３ 和 Ｃ４ 蛋白ꎬ分别参与病毒的侵染、
复制、移动、传播、致病等过程ꎮ ＩＲ 区含有一个茎
环结构ꎬ其中的保守域 ＴＡＡＴＡＴＴＡＣ 是病毒复制
起始位点ꎮ
　 　 对 ＪＳ￣Ｈｉ￣３￣Ａ 进行 ＢＬＡＳＴ 分析ꎬ结果显示其
与木尔坦棉花曲叶病毒的同源性最高(９９.９％)ꎬ聚
类分析的结果也显示其与木尔坦棉花曲叶病毒聚
类到同一个分支ꎬ并与中国广东、广西分离物的同
源性最高ꎬ共同聚类于一个小分支上ꎬ而与印度、巴
基斯坦分离物同源性要低一些ꎬ分别聚类于不同的
小分支(表 １、图 ３)ꎮ 这些结果显示:江苏朱槿上检
测到的粉虱传双生病毒为木尔坦棉花曲叶病毒ꎬ该
病毒与之前中国广西、广东等地报道的分离物同源
性最高ꎬ而与印度、巴基斯坦等地的分离物同源性较
低ꎬ暗示该病毒可能来源于中国的广东、广西ꎮ
Ｔａｂｌｅ １　 Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ ｏｆ ＪＳ￣Ｈｉ￣３￣Ａ ｗｉｔｈ ｏｔｈｅｒ ｒｅｌａｔｅｄ ｂｅｇｏｍｏｖｉｒｕｓｅｓ
Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ Ｌｅｎｇｔｈ / ｂｐ Ｖｉｒｕｓ Ｈｏｓｔ Ｃｏｕｎｔｒｙ Ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ∗ / ％
ＪＳ￣Ｈｉ￣３￣Ａ ２ ７３６ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｒｏｓａ￣ｓｉｎｅｎｓｉｓ Ｃｈｉｎａ: Ｊｉａｎｇｓｕ
ＧＱ９２４７５６ ２ ７３８ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ Ｇｏｓｓｙｐｉｕｍ ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｃｈｉｎａ: Ｇｕａｎｇｘｉ ９９.９
ＥＦ４６５５３５ ２ ７３７ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ Ｈ. ｒｏｓａ￣ｓｉｎｅｎｓｉｓ Ｃｈｉｎａ: Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ９９.９
ＧＱ５０３１７５ ２ ７３７ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ Ｈ. ｒｏｓａ￣ｓｉｎｅｎｓｉｓ Ｃｈｉｎａ: Ｇｕａｎｇｘｉ ９９.９
ＦＪ７７０３７０ ２ ７３７ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ Ａｂｅｌｍｏｓｃｈｕｓ ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｓ Ｃｈｉｎａ: Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ９９.７
ＧＵ５７４２０８ ２ ７３８ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ Ａ. ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｓ Ｃｈｉｎａ: Ｇｕａｎｇｘｉ ９９.７
Ｘ９８９９５ ２ ７４７ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ Ｇ. ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｐａｋｉｓｔａｎ ９５.８
ＡＪ４９６４６１ ２ ７４７ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ Ｇ. ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｐａｋｉｓｔａｎ:Ｆａｉｓａｌａｂａｄ ９５.８
ＥＵ３８４５７３ ２ ７５７ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ Ｇ. ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｐａｋｉｓｔａｎ: Ｍｕｌｔａｎ ９４.４
ＡＪ００２４５８ ２７５１ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ Ｇ. ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｐａｋｉｓｔａｎ ９６.１
ＡＪ００２４４７ ２ ７５１ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ Ｇ. ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｐａｋｉｓｔａｎ ９６.１
ＡＪ４９６２８７ ２ ７５０ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ Ｇ. ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｐａｋｉｓｔａｎ ９５.４
ＦＪ２１８４８７ ２ ７３９ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ Ｇ. ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｐａｋｉｓｔａｎ ９１.３
ＥＵ３６５６１５ ２ ７３９ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ Ｇｏｓｓｙｐｉｕｍ ｄａｒｗｉｎｉｉ Ｐａｋｉｓｔａｎ ９２.０
ＥＵ３６５６１４ ２ ７３５ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ Ｇ. ｄａｒｗｉｎｉｉ Ｐａｋｉｓｔａｎ ９０.５
ＥＵ３６５６１３ ２ ７４０ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ Ｇ. ｄａｒｗｉｎｉｉ Ｐａｋｉｓｔａｎ ８９.６
ＦＪ２１８４８６ ２ ７３５ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ Ｇ. ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｐａｋｉｓｔａｎ ９１.０
ＡＹ７６５２５６ ２ ７３８ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ Ｇ. ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｉｎｄｉａ: Ｄｅｌｈｉ ９０.３
ＡＹ７６５２５３ ２ ７２５ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ Ｇ. ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｉｎｄｉａ: Ｈｉｓｓａｒꎬ Ｈａｒｙａｎａ ９０.５
ＤＱ１９１１６０ ２ ７５３ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ Ｇ. ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｉｎｄｉａ ８９.３
ＡＪ１３２４３０ ２ ７２２ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ Ｇ. ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｐａｋｉｓｔａｎ ９２.５
ＡＪ００２４５９ ２ ７２５ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ Ａ. ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｓ Ｉｎｄｉａ ９４.３
ＡＹ７６５２５７ ２ ７２５ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ Ｇ. ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｉｎｄｉａ: Ｌｕｄｈｉａｎａꎬ Ｐｕｎｊｏｂ ９１.０
ＡＦ４８０９４０ ２ ６３０ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｒｕｍｐｌｅ ｖｉｒｕｓ Ｇ. ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｍｅｘｉｃｏ: Ｓｏｎｏｒａ ６１.７
ＡＪ００２４５２ ２ ７４４ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ａｌａｂａｄ ｖｉｒｕｓ Ｇ. ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｐａｋｉｓｔａｎ ８０.７
ＡＹ７０５３８０ ２ ７５１ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｂａｎｇａｌｏｒｅ ｖｉｒｕｓ Ｇｏｓｓｙｐｉｕｍ ｂａｒｂａｄｅｎｓｅ Ｉｎｄｉａ ８４.７
ＦＮ５５４５４０ ２ ７６２ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｇｅｚｉｒａ ｖｉｒｕｓ Ａ. ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｓ Ｂｕｒｋｉｎａ Ｆａｓｏ:Ｐｏ ７１.７
ＡＪ４９６２８６ ２ ７５０ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｋｏｋｈｒａｎ ｖｉｒｕｓ Ｇ. ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｐａｋｉｓｔａｎ:Ｆａｉｓａｌａｂａｄ ７８.２
Ｚ４８１８２ ２ ７４９ Ｔｏｍａｔｏ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｂａｎｇａｌｏｒｅ ｖｉｒｕｓ Ｉｎｄｉａｎ ７４.３
Ｙ１５９３４ ２ ７４６ Ｐａｐａｙａ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ ｖｉｒｕｓ Ｉｎｄｉａｎ ７３.６
　 “∗”: Ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ ｗｉｔｈ ＪＳ￣Ｈｉ￣３￣Ａ.
４６３
　
　 ４期 张 晖ꎬ等:江苏朱槿上分离到的木尔坦棉花曲叶病毒基因组结构特征分析
Ｆｉｇ. ３　 Ｔｈｅ ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ ｔｒｅｅ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｆｕｌｌ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ ＤＮＡ￣Ａ
ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ｎｅｉｇｈｂｏｒ￣ｊｏｉｎｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄ ｗｉｔｈ １０００ ｂｏｏｔｓｔｒａｐ ｒｅｐｌｉｃａｔｅｓ
▇: Ｉｓｏｌａｔｅ ｏｆ ＣＬＣｕＭｕＶ ｓｅｑｕｅｎｃｅｄ ｉｎ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙꎻ ＧＨ: Ｇｏｓｓｙｐｉｕｍ ｈｉｒｓｕｔｕｍꎻ
ＧＤ: Ｇｏｓｓｙｐｉｕｍ ｄａｒｗｉｎｉｉꎻ ＨＲ: Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｒｏｓａ￣ｓｉｎｅｎｓｉｓꎻ ＡＥ: Ａｂｅｌｍｏｓｃｈｕｓ ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｓꎻ ＩＮ: Ｉｎｄｉａꎻ
ＰＫ: Ｐａｋｉｓｔａｎꎻ ＣＮ￣ＪＳ: Ｃｈｉｎａ￣Ｊｉａｎｇｓｕꎻ ＣＮ￣ＧＤ: Ｃｈｉｎａ￣Ｇｕａｎｇｄｏｎｇꎻ ＣＮ￣ＧＸ: Ｃｈｉｎａ￣Ｇｕａｎｇｘｉ.
２.３　 ＪＳ￣Ｈｉ￣３伴随 β卫星基因组结构及其聚类分析
　 　 利用 β 卫星引物对 ＪＳ￣Ｈｉ￣３ 分离物中的
ＤＮＡβ卫星分子进行检测ꎬ结果显示ꎬ扩增到一条
１.３ ｋｂ左右的特异条带(图 ２)ꎬ暗示 ＪＳ￣Ｈｉ￣３ 分离
物中也含有 β卫星(ＪＳ￣Ｈｉ￣３￣β)ꎮ 对该卫星分子回
收克隆测序后发现ꎬ其伴随 ＤＮＡβ 卫星分子也具
有环状基因组结构ꎬ全长 １ ３４６ ｂｐꎬ含有 １ 个 ＯＲＦ
(编码 βＣ１)、一个卫星保守区(Ｓａｔｅｌｌｉｔｅ ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ
ｒｅｇｉｏｎꎬ ＳＣＲ)和一个富含 Ａ (Ａ￣ｒｉｃｈ) 区ꎮ 比较
ＪＳ￣Ｈｉ￣３分离物的 ＤＮＡ￣Ａ 组分和 ＤＮＡβ 卫星基因
组序列ꎬ发现二者除了都含有 ＴＡＡＴＡＴＴＡＣ 保守
域外基本没有序列同源性ꎮ
５６３
　
植物病理学报 ４５卷
　 　 对 ＪＳ￣Ｈｉ￣３ 分离物的 ＤＮＡβ 卫星分子进行
ＢＬＡＳＴ分析ꎬ结果显示 ＪＳ￣Ｈｉ￣３￣β与木尔坦棉花曲
叶 β 卫星 ( Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅꎬ
ＣＬＣｕＭｕＢ)的同源性最高ꎬ而将其与其他 β 卫星
聚类分析发现ꎬＪＳ￣Ｈｉ￣３￣β 与 ＣＬＣｕＭｕＢ 聚类到同
一个大分支ꎬ在这个分支中ꎬ ＪＳ￣Ｈｉ￣３￣β 与中国广
东、广西分离物的同源性最近ꎬ共同聚类于一个小
分支ꎬ而与印度、巴基斯坦等分离物的同源性较远ꎬ
分别聚类于不同分支(表 ２、图 ４)ꎮ 这些结果证明
江苏朱槿上分离到的木尔坦棉花曲叶病毒也是一
个伴随有卫星分子的病毒ꎬ其伴随的卫星分子为木
尔坦棉花曲叶病毒 β卫星ꎬ该 β 卫星与中国广东、
广西分离到的 ＣＬＣｕＭｕＢ同源性最高ꎬ暗示该病毒
可能来源于我国广东、广西ꎮ
Ｔａｂｌｅ ２　 Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ ｏｆ ＪＳ￣Ｈｉ￣３￣β ｗｉｔｈ ｏｔｈｅｒ ｒｅｌａｔｅｄ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅｓ
Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ
ｌｅｎｇｔｈ
/ ｂｐ
Ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ Ｈｏｓｔ Ｃｏｕｎｔｒｙ
Ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ∗
/ ％
ＪＳ￣Ｈｉ￣３￣β １ ３４６ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｒｏｓａ￣ｓｉｎｅｎｓｉｓ Ｃｈｉｎａ: Ｊｉａｎｇｓｕ
ＧＱ９０６５８８ １ ３４６ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ Ｇｏｓｓｙｐｉｕｍ ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｃｈｉｎａ: Ｇｕａｎｇｘｉ ９９.６
ＥＦ４６５５３６ １ ３４６ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ Ｈ. ｒｏｓａ￣ｓｉｎｅｎｓｉｓ Ｃｈｉｎａ:Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ９９.７
ＧＱ５０３１７６ １ ３４６ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ Ｈ. ｒｏｓａ￣ｓｉｎｅｎｓｉｓ Ｃｈｉｎａ: Ｇｕａｎｇｘｉ ９９.６
ＦＪ７７０３７１ １ ３４７ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ Ａｂｅｌｍｏｓｃｈｕｓ ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｓ Ｃｈｉｎａ:Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ９９.６
ＧＵ５７４２０７ １ ３４７ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ Ａ. ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｓ Ｃｈｉｎａ: Ｇｕａｎｇｘｉ ９９.７
ＡＭ０８４３８０ １ ３７１ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ Ｇ. ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｐａｋｉｓｔａｎ:Ｖｅｈａｒｉ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ ８８.３
ＡＭ４９０３０９ １ ３７０ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ Ｓｏｌａｎｕｍ ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｕｍ Ｐａｋｉｓｔａｎ:Ｆａｉｓａｌａｂａｄ ８２.９
ＦＪ６０７０４１ １ ３５４ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ Ｇ. ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｐａｋｉｓｔａｎ ８９.１
ＡＭ０８４３７９ １ ３５１ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ Ｇ. ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｐａｋｉｓｔａｎ:Ｖｅｈａｒｉ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ ８９.１
ＡＪ２９２７６９ １ ３５１ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ Ｇ. ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｐａｋｉｓｔａｎ ９０.９
ＥＵ３８４５８０ １ ３５５ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ Ｇｏｓｓｙｐｉｕｍ ｐｕｎｃｔａｔｕｍ Ｐａｋｉｓｔａｎ: Ｍｕｌｔａｎ ９０.１
ＤＱ１９１１６１ １ ３５０ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ Ｇ. ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｉｎｄｉａ: Ｐｕｎｊａｂ ９２.６
ＡＪ３１６０３７ １ ３５３ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ Ｇ. ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｉｎｄｉａ ９２.７
ＡＪ２９８９０３ １ ３４９ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ Ｇ. ｈｉｒｓｕｔｕｍ Ｐａｋｉｓｔａｎ ９２.３
ＡＪ３１６０３９ １ ３０７ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｇｅｚｉｒａ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｅｓｃｕｌｅｎｔｉｓ Ｅｇｙｐｔ ４９.５
ＡＪ９７１４５９ １ ３４８ Ｍａｌｖａｓｔｒｕｍ ｙｅｌｌｏｗ ｖｅｉｎ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ
Ｍａｌｖａｓｔｒｕｍ
ｃｏｒｏｍａｎｄｅｌｉａｎｕｍ
Ｃｈｉｎａ:Ｙｕｎｎａｎ ７９.０
ＡＪ７８６７１２ １ ３５０
Ｍａｌｖａｓｔｒｕｍ ｙｅｌｌｏｗ ｖｅｉｎ
Ｙｕｎｎａｎ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ
Ｍ. ｃｏｒｏｍａｎｄｅｌｉａｎｕｍ Ｃｈｉｎａ:Ｙｕｎｎａｎ ８２.５
ＡＪ３１６０２９ １ ３６１ Ｏｋｒａ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ Ｈ. ｅｓｃｕｌｅｎｔｉｓ Ｐａｋｉｓｔａｎ ６４.９
ＡＭ０４８８３３ １ ３５５ Ｓｉｄａ ｙｅｌｌｏｗ ｍｏｓａｉｃ Ｃｈｉｎａ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ Ｓｉｄａ ａｃｕｔａ Ｃｈｉｎａ ５４.５
ＡＭ２３８６９５ １ ３５５
Ｓｉｅｇｅｓｂｅｃｋｉａ ｙｅｌｌｏｗ
ｖｅｉｎ Ｇｕａｎｇｘｉ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ
Ｓｉｅｇｅｓｂｅｃｋｉａ ｇｌａｂｒｅｓｃｅｎｓ Ｃｈｉｎａ:Ｇｕａｎｇｘｉ ４７.６
ＡＪ３１６０３３ １ ３５６ Ｔｏｂａｃｃｏ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ Ｐａｋｉｓｔａｎ ５２.４
ＡＪ５４２４８９ １ ３８３ Ｔｏｍａｔｏ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｂａｎｇｌａｄｅｓｈ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ Ｓ. ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｕｍ Ｂａｎｇｌａｄｅｓｈ:Ｇａｚｉｐｕｒ ５０.０
ＡＪ３１６０３６ １ ３７４ Ｔｏｍａｔｏ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ Ｓ. ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｕｍ Ｐａｋｉｓｔａｎ ５３.４
ＡＪ７０４６０９ １ ３４３ Ｔｏｍａｔｏ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｃｈｉｎａ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ Ｓ. ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｕｍ Ｃｈｉｎａ:Ｇｕａｎｇｘｉ ５１.６
　 “∗”: Ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ ｗｉｔｈ ＪＳ￣Ｈｉ￣３￣β.
６６３
　
　 ４期 张 晖ꎬ等:江苏朱槿上分离到的木尔坦棉花曲叶病毒基因组结构特征分析
Ｆｉｇ. ４　 Ｔｈｅ ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ ｔｒｅｅ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｆｕｌｌ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ ＤＮＡβ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ
ｎｅｉｇｈｂｏｒ￣ｊｏｉｎｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄ ｗｉｔｈ １０００ ｂｏｏｔｓｔｒａｐ ｒｅｐｌｉｃａｔｅｓ
▇: Ｉｓｏｌａｔｅ ｏｆ ＣＬＣｕＭｕＢ ｓｅｑｕｅｎｃｅｄ ｉｎ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙꎻ ＧＨ: Ｇｏｓｓｙｐｉｕｍ ｈｉｒｓｕｔｕｍꎻ ＨＲ: Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｒｏｓａ￣ｓｉｎｅｎｓｉｓꎻ
ＡＥ: Ａｂｅｌｍｏｓｃｈｕｓ ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｓꎻ ＳＬ: Ｓｏｌａｎｕｍ ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｕｍꎻ ＩＮ: ＩｎｄｉａꎻＰＫ: Ｐａｋｉｓｔａｎꎻ
ＣＮ￣ＪＳ: Ｃｈｉｎａ￣Ｊｉａｎｇｓｕꎻ ＣＮ￣ＧＤ: Ｃｈｉｎａ￣Ｇｕａｎｇｄｏｎｇꎻ ＣＮ￣ＧＸ: Ｃｈｉｎａ￣Ｇｕａｎｇｘｉ..
３　 讨论
　 　 本文针对 ２０１２年江苏南京发生的朱槿曲叶病
样进行研究ꎬ根据其症状及危害ꎬ利用分子生物学
手段从中分离到木尔坦棉花曲叶病毒ꎬ该病毒含有
ＤＮＡ￣Ａ组分ꎬ并伴有 ＤＮＡβ 卫星分子(对 ＤＮＡ￣Ｂ
组分及 ＤＮＡ￣１卫星分子也进行了检测ꎬ结果均未
检测到)ꎮ 除南京外ꎬ苏南部分地区的朱瑾也发现
类似症状ꎬ这些结果说明木尔坦棉花曲叶病毒已经
传入江苏省ꎬ这是该病毒在长江流域的首次报道ꎮ
　 　 木尔坦棉花曲叶病毒是棉花曲叶病的重要病
原之一ꎬ该病毒在我国最早于广州发现[７]ꎬ近年主
要在广西、广东、福建等南方地区发生危害ꎬ其主要
危害寄主是朱槿、黄秋葵ꎬ另外锦葵科垂花悬铃花、
红麻、西菲葵、黄蜀葵等作物上也有发生危害报
道[４ꎬ ８ꎬ ９ꎬ １３ꎬ １９ꎬ ２０]ꎮ 棉花是我国重要的经济作物ꎬ在
国民经济中占重要地位ꎮ 该病在棉花上的危害颇
受关注ꎬ２００９年 Ｃａｉ 等[１４]在广西棉花上发现木尔
７６３
　
植物病理学报 ４５卷
坦棉花曲叶病毒ꎮ 生物学接种试验证明烟粉虱可
以传播木尔坦棉花曲叶病毒并导致棉花曲叶
病[８]ꎮ 因此ꎬ该病毒是我国棉花产业巨大的潜在
风险ꎬ生产上应当密切关注ꎮ
　 　 对比木尔坦棉花曲叶病毒江苏分离物与之前
我国报道的广东、广西等分离物发现ꎬ其同源性非
常高(ＤＮＡ￣Ａ>９９.７％ꎻＤＮＡβ>９９.６％)ꎬ而与国外
报道的分离物同源性较低(ＤＮＡ￣Ａ<９６.１％ꎻＤＮＡβ
<９２.７％)ꎬ系统进化树中也呈现类似结果(表 １、图
３ꎻ表 ２、图 ４)ꎮ 这说明江苏省发生的木尔坦棉花曲
叶病毒极有可能来源于我国南方病区ꎮ 由于朱槿
是一种重要的园艺绿化树木ꎬ在我国南方多有种
植ꎮ 调查发现ꎬ有些朱瑾植株是栽种后不久即表现
病害症状ꎬ而有些在栽种后相当长(超过 １ 年ꎬ且
周边之前亦未见发病株)的时间都没有表现症状ꎬ
而近来逐渐表现病状ꎬ这说明该病的传入方式可能
存在多种途径:(１)病毒随朱槿苗木的运输传入
(朱槿苗木在原产地感染后未发病或轻微发病后
随苗木运输传入)ꎬ栽种后发病表现症状ꎬ而后经
烟粉虱传播扩散ꎻ(２)烟粉虱携带病毒随苗木或其
他物品运输传入ꎬ在朱槿上侵染发病ꎮ
　 　 除危害棉花外ꎬ木尔坦棉花曲叶病毒的伴随卫
星还能与番茄黄化曲叶病毒通过假重组的方式ꎬ形
成新的病毒复合物侵染番茄ꎬ导致番茄黄化曲叶
病[２１]ꎮ 近年来由番茄黄化曲叶病毒导致的番茄黄
化曲叶病在江苏等地肆虐危害ꎬ给当地的番茄生产
带来严重损失[２２ꎬ２３]ꎮ 虽然目前尚未见到木尔坦棉
花曲叶病毒及其伴随卫星侵染番茄的报道ꎬ但是木
尔坦棉花曲叶病毒与番茄黄化曲叶病毒都是烟粉
虱传播的双生病毒ꎬ二者有可能通过复合侵染或者
(假)重组(产生新的致病类型)等方式侵染番茄ꎬ
对番茄生产造成新威胁ꎬ生产上应予以重视ꎮ
参考文献
[１] 　 Ｓａｔｔａｒ Ｍ Ｎꎬ Ｋｖａｒｎｈｅｄｅｎ Ａꎬ Ｓａｅｅｄ Ｍꎬ ｅｔ ａｌ. Ｃｏｔｔｏｎ
ｌｅａｆ ｃｕｒｌ ｄｉｓｅａｓｅ－ａｎ ｅｍｅｒｇｉｎｇ ｔｈｒｅａｔ ｔｏ ｃｏｔｔｏｎ ｐｒｏｄｕｃ￣
ｔｉｏｎ ｗｏｒｌｄｗｉｄｅ [ Ｊ ] . Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｖｉｒｏｌｏｇｙꎬ
２０１３ꎬ ９４(４):６９５－７１０.
[２] 　 Ｂｒｉｄｄｏｎ Ｒ Ｗ. Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ ｄｉｓｅａｓｅꎬ ａ ｍｕｌｔｉｃｏｍｐｏ￣
ｎｅｎｔ ｂｅｇｏｍｏｖｉｒｕｓ ｃｏｍｐｌｅｘ[Ｊ] . Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｌａｎｔ Ｐａｔｈｏ￣
ｌｏｇｙꎬ ２００３ꎬ ４(６):４２７－４３４.
[３] 　 Ｂｒｉｄｄｏｎ Ｒ Ｗꎬ Ｍａｒｋｈａｍ Ｐ Ｇ. Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ ｖｉｒｕｓ
ｄｉｓｅａｓｅ[Ｊ] . Ｖｉｒｕｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈꎬ ２０００ꎬ ７１(１ － ２):１５１ －
１５９.
[４] 　 Ｈｅ Ｚꎬ Ｓｈｅ Ｘꎬ Ｔａｎｇ Ｙ. Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ
ｉｎｖａｄｉｎｇ Ｃｈｉｎａ ａｎｄ ｉｔｓ ｄａｍａｇｅ ｐｏｔｅｎｔｉａ ( ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ)
[Ｊ] . Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｓａｆｅｔｙ(生物安全学报)ꎬ ２０１２ꎬ ２１
(２):８７－９２.
[５] 　 Ｚｈｏｕ Ｘꎬ Ｌｉｕ Ｙꎬ Ｒｏｂｉｎｓｏｎ Ｄ Ｊꎬ ｅｔ ａｌ. Ｆｏｕｒ ＤＮＡ￣Ａ
ｖａｒｉａｎｔｓ ａｍｏｎｇ Ｐａｋｉｓｔａｎｉ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｏｆ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ
ｖｉｒｕｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ａｆｆｉｎｉｔｉｅｓ ｔｏ ＤＮＡ￣Ａ ｏｆ ｇｅｍｉｎｉｖｉｒｕｓ
ｉｓｏｌａｔｅｓ ｆｒｏｍ ｏｋｒａ [ Ｊ] . Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｖｉｒｏｌｏｇｙꎬ
１９９８ꎬ ７９ (４):９１５－９２３.
[６] 　 Ｍａｎｓｏｏｒ Ｓꎬ Ｂｒｉｄｄｏｎ Ｒ Ｗꎬ Ｂｕｌｌ Ｓ Ｅꎬ ｅｔ ａｌ. Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ
ｃｕｒｌ ｄｉｓｅａｓｅ ｉｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｏｎｏｐａｒｔｉｔｅ
ｂｅｇｏｍｏｖｉｒｕｓｅｓ ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ ｂｙ ｓｉｎｇｌｅ ＤＮＡ ｂｅｔａ [ Ｊ ] .
Ａｒｃｈｉｖｅｓ ｏｆ Ｖｉｒｏｌｏｇｙꎬ ２００３ꎬ １４８(１０):１９６９－１９８６.
[７] 　 Ｍａｏ Ｍꎬ Ｈｅ Ｚꎬ Ｙｕ Ｈꎬ ｅｔ ａｌ. Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａ￣
ｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ ａｎｄ ｉｔｓ ｓａｔｅｌｌｉｔｅ
ＤＮＡ ｔｈａｔ ｉｎｆｅｃｔｓ Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｒｏｓａ￣ｓｉｎｅｎｓｉｓ ( ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ)
[Ｊ] . Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｉｒｏｌｏｇｙ(病毒学报)ꎬ ２００８ꎬ
２４(１):６４－６８.
[８] 　 Ｌｉｎ Ｌꎬ Ｃａｉ Ｊꎬ Ｌｕｏ Ｂꎬ ｅｔ ａｌ. Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ
ａｎｄ ｈｏｓｔ ｒａｎｇｅ ｏｆ ａ ｇｅｍｉｎｉｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｎｇ Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｉｎ
Ｎａｎｎｉｎｇ Ｃｉｔｙ( ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ)[ Ｊ] . Ｐｌａｎｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ(植物
保护) ꎬ ２０１１ꎬ ３７(４):４４－４７.
[９] 　 Ｚｈａｎｇ Ｓꎬ Ｘｉａ Ｘꎬ Ｚｈａｎｇ Ｊꎬ ｅｔ ａｌ. Ａ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ ｄｉｓｅａｓｅ ｏｎ
Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｒｏｓａ￣ｓｉｎｅｎｓｉｓ ｉｎ Ｆｕｚｈｏｕ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ
ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ ( ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ) [ Ｊ] . Ｐｌａｎｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ
(植物保护)ꎬ ２０１３ꎬ ３９(２):１９６－２００.
[１０] Ｔａｎｇ Ｙꎬ Ｌｕ Ｙ. Ｃｏｎｆｉｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｎｇ ａｎｄ
ｃａｕｓｉｎｇ ｔｈｅ Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｒｏｓａ￣ｓｉｎｅｎｓｉｓ ｙｅｌｌｏｗ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ
ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ( ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ) [ Ｊ] . Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ
Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ(广东农业科学)ꎬ ２０１３ꎬ (１０):
８０－８２.
[１１] Ｄｏｎｇ Ｄꎬ Ｚｈｕ Ｙꎬ Ｈｅ Ｚꎬ ｅｔ ａｌ. Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａ￣
ｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ ａｎｄ ｉｔｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ
ｓａｔｅｌｌｉｔｅ ＤＮＡ ｉｎｆｅｃｔｉｎｇ ｏｋｒａ ｉｎ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ( ｉｎ Ｃｈｉ￣
ｎｅｓｅ)[Ｊ] . Ｊｏｕｒｎａｌ Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｃｈｉｎａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ (华南农
业大学学报)ꎬ ２０１２ꎬ ３３(１):３３－３９.
[１２] Ｄｏｎｇ Ｄꎬ Ｈｅ Ｚꎬ Ｃｈａｉ Ｚ. Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｗｈｉｔｅｆｌｙ￣ｔｒａｎｓ￣
ｍｉｔｔｅｄ ｇｅｍｉｎｉｖｉｒｕｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｏｋｒａ ｙｅｌｌｏｗ ｖｅｉｎ
ｌｅａｆ ｃｕｒｌ ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ( ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ)[Ｊ] . Ｐｌａｎｔ
Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ(植物保护)ꎬ ２０１０ꎬ ３６(１):６５－６８.
８６３
　
　 ４期 张 晖ꎬ等:江苏朱槿上分离到的木尔坦棉花曲叶病毒基因组结构特征分析
[１３] Ｔａｎｇ Ｙꎬ Ｈｅ Ｚꎬ Ｄｕ Ｚꎬ ｅｔ ａｌ. Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ
ｏｆ ｔｈｅ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｎｇ Ｍａｌｖａｉｓ￣
ｃｕｓ ａｒｂｏｒｅｕｓ ( ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ)[ Ｊ] . Ａｃｔａ Ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａ
Ｓｉｎｉｃａ(植物病理学报)ꎬ ２０１３ꎬ ４３(２):１２０－１２７.
[１４] Ｃａｉ Ｊ Ｈꎬ Ｘｉｅ Ｋꎬ Ｌｉｎ Ｌꎬ ｅｔ ａｌ. Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ
ｖｉｒｕｓ ｎｅｗｌｙ ｒｅｐｏｒｔｅｄ ｔｏ ｂｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ
ｃｕｒｌ ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎ Ｃｈｉｎａ[ Ｊ] . Ｐｌａｎｔ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙꎬ ２０１０ꎬ ５９
(４):７９４－７９５.
[１５] Ｘｉｅ Ｙꎬ Ｚｈｏｕ Ｘꎬ Ｚｈａｎｇ Ｚꎬ ｅｔ ａｌ. Ｔｏｂａｃｃｏ ｃｕｒｌｙ ｓｈｏｏｔ
ｖｉｒｕｓ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｉｎ Ｙｕｎｎａｎ ｉｓ ａ ｄｉｓｔｉｎｃｔ ｓｐｅｃｉｅｓ ｏｆ
Ｂｅｇｏｍｏｖｉｒｕｓ[Ｊ] . Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｂｕｌｌｅｔｉｎꎬ ２００２ꎬ ４７
(３):１９７－２００.
[１６] Ｄｅｎｇ Ｄꎬ ＭｃＧｒａｔｈ Ｐ Ｆꎬ Ｒｏｂｉｎｓｏｎ Ｄ Ｊꎬ ｅｔ ａｌ. Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ
ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｗｈｉｔｅｆｌｙ￣ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄ ｇｅｍｉｎｉｖｉｒｕ￣
ｓｅｓ ｉｎ ｐｌａｎｔｓ ａｎｄ ｖｅｃｔｏｒ ｉｎｓｅｃｔｓ ｂｙ ｔｈｅ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ
ｒｅａｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｄｅｇｅｎｅｒａｔｅ ｐｒｉｍｅｒｓ [ Ｊ ] . Ａｎｎａｌｓ ｏｆ
Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｌｏｇｙꎬ １９９４ꎬ １２５(２):３２７－３３６.
[１７] Ｂｒｉｄｄｏｎ Ｒ Ｗꎬ Ｂｕｌｌ Ｓ Ｅꎬ Ｍａｎｓｏｏｒ Ｓꎬ ｅｔ ａｌ. Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ
ｐｒｉｍｅｒｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ＰＣＲ￣ｍｅｄｉａｔｅｄ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ＤＮＡ
ｂｅｔａ: ａ ｍｏｌｅｃｕｌｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｓｏｍｅ ｍｏｎｏｐａｒｔｉｔｅ
ｂｅｇｏｍｏｖｉｒｕｓｅｓ[ Ｊ] . Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙꎬ ２００２ꎬ
２０(３):３１５－３１８.
[１８] Ｔａｍｕｒａ Ｋꎬ Ｐｅｔｅｒｓｏｎ Ｄꎬ Ｐｅｔｅｒｓｏｎ Ｎꎬ ｅｔ ａｌ. ＭＥＧＡ５:
ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ ｇｅｎｅｔｉｃｓ ａｎａｌｙｓｉｓ ｕｓｉｎｇ ｍａｘｉ￣
ｍｕｍ ｌｉｋｅｌｉｈｏｏｄꎬ ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ ｄｉｓｔａｎｃｅꎬ ａｎｄ ｍａｘｉｍｕｍ
ｐａｒｓｉｍｏｎｙ ｍｅｔｈｏｄｓ [ Ｊ ] . Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ
Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎꎬ ２０１１ꎬ ２８(１０):２７３１－２７３９.
[１９] Ｄｉｎｇ Ｘꎬ Ｚｈａｏ Ｚꎬ Ｌｉ Ｍ. Ａｄｖａｎｃｅｓ ｏｆ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｎ
Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ ｖｉｒｕｓ ( ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ)[ Ｊ] . Ｐｌａｎｔ Ｑｕａｒａｎ￣
ｔｉｎｅ(植物检疫)ꎬ ２０１３ꎬ ２７(１):６８－７２.
[２０] Ｑｉｎｇ Ｌꎬ Ｚｈｏｕ Ｘ. Ａｄｖａｎｃｅｓ ｏｆ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｎ Ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ
ｃｕｒｌ ｄｉｓｅａｓｅ ( ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ) [ Ｊ] . Ａｃｔａ Ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａ
Ｓｉｎｉｃａ(植物病理学报)ꎬ ２００５ꎬ ３５(３):１９３－２００.
[２１] Ｔａｂｅｉｎ Ｓꎬ Ｂｅｈｊａｔｎｉａ Ｓ Ａꎬ Ａｎａｂｅｓｔａｎｉ Ａꎬ ｅｔ ａｌ. Ｗｈｉｔｅ￣
ｆｌｙ￣ｍｅｄｉａｔｅｄ ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｏｔｔｏｎ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ Ｍｕｌｔａｎ ｂｅ￣
ｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ: ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｆｏｒ ｂｅｔａｓａｔｅｌｌｉｔｅ ｅｎｃａｐｓｉｄａｔｉｏｎ ｉｎ
ｃｏａｔ ｐｒｏｔｅｉｎ ｏｆ ｈｅｌｐｅｒ ｂｅｇｏｍｏｖｉｒｕｓｅｓ[ Ｊ] . Ａｒｃｈｉｖｅｓ ｏｆ
Ｖｉｒｏｌｏｇｙꎬ ２０１３ꎬ １５８(１):１９－２６.
[２３] Ｓｕｎ Ｈꎬ Ｊｉ Ｙꎬ Ｘｉｏｎｇ Ｒꎬ ｅｔ ａｌ. Ｔｒｅｎｄ ｏｆ ｗｈｉｔｅｆｌｙ￣ｔｒａｎｓ￣
ｍｉｔｔｅｄ ｇｅｍｉｎｉｖｉｒｕｓ ｏｎ ｔｏｍａｔｏ ｆｒｏｍ Ｊｉａｎｇｓｕ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ ｉｎ
２００８ ( ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ)[Ｊ] . Ｊｉａｎｇｓｕ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ
Ｓｃｉｅｎｃｅ(江苏农业学报)ꎬ ２００９ꎬ ２５(６): １２７８－１２８１.
[２４] Ｊｉ Ｙꎬ Ｘｉｏｎｇ Ｒꎬ Ｃｈｅｎｇ Ｚꎬ ｅｔ ａｌ. Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ
ｔｏｍａｔｏ ｙｅｌｌｏｗ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎ Ｊｉａｎｇｓｕ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ ( ｉｎ
Ｃｈｉｎｅｓｅ)[Ｊ] . Ａｃｔａ Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒａｅ Ｓｉｎｉｃａ(园艺学报)ꎬ
２００８ꎬ ３５(１２):１８１５－１８１８.
责任编辑:于金枝
９６３