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作 者 ：李琰  张谦  李海霞  刘婷婷  安新民  张志毅

期 刊 ：西北植物学报 2008年 5期

关键词：毛白杨；NBS型基因；原核表达；蛋白纯化；

Keywords:Populus tomentosa Carr., NBS gene, prokaryotic expression, protein purification,

摘 要 ：为了分析毛白杨NBS型抗病基因PtDRG01(EF157840)编码蛋白的特性,研究构建了该基因的原核表达载体pGEX-Pt01,并导入大肠杆菌XA90,经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE电泳分析证明,该特异蛋白的分子量约为79kD。对原核表达体系以及融合蛋白的表达特性进行优化与分析表明:最佳诱导表达条件为1mmol/L IPTG在37℃下诱导4h,所表达的融合蛋白为胞内分泌的可溶性蛋白。利用谷胱苷肽-琼脂糖亲和层析柱纯化获得了电泳纯级的目标蛋白,为PtDRG01基因编码蛋白的功能鉴定研究奠定了基础。

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