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作 者 ：杨凤萍  王宏芝  陈绪清  张立全  张晓东

期 刊 ：西北植物学报 2008年 2期

关键词：PVX病毒载体；瞬时表达；融合HBsAg基因；烟草；

Keywords:potato virus X vector, transient expression, recombinant HBsAg gene, Nicotiana benthamiana,

摘 要 ：利用马铃薯PVX病毒载体构建了外源人工融合乙肝表面抗原HBsAg基因的表达载体,在烟草中利用农杆菌介导进行瞬时表达,以快速鉴定外源基因瞬时表达的状况以及重组蛋白的免疫活性。利用PCR技术从含有人工融合HBsAg基因的表达载体中分别扩增出LP PreS1 PreS2 S、PreS1 PreS2 S、PreS2 S序列,将其分别与PVX病毒载体pgR106连接,构建成PVX-LP、PVX-S1和PVX-S2等3个转化载体,并将此载体导入农杆菌菌株GV3101中用于侵染烟草植株叶片。感染植株经RT-PCR、RNA Dot blotting和HBsAg蛋白的ELISA检测显示,3个人工融合的HBsAg基因均可在植物体内得到转录,翻译成具有活性的蛋白。结果表明,外源融合HB-sAg基因经过植物病毒载体瞬时表达系统可以在植物系统中正常转录和翻译。

Abstract:To investigate the expression of foreign fusion gene of hepatitis B surface antigen and the activation of the translated protein,three different fusion HBsAg genes,LP PreS1 PreS2 S,PreS1 PreS2 S and PreS2 S,were cloned into a potato virus X(PVX) expressio

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